氯霉素处理对急性缺氧大鼠脑线粒体氧化呼吸功能变化研究

目的通过观察氯霉素处理大鼠急性缺氧暴露后脑线粒体呼吸功能和细胞色素氧化酶(COX)活性变化,了解线粒体基因组表达在缺氧引起线粒体呼吸功能改变中的作用.方法以成年雄性Wistar大鼠建立氯霉素药物处理及高原缺氧模型.应用差速离心法提取脑皮质线粒体,Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能,及细胞色素C氧化酶(COX)的活性.结果①急性缺氧24 h后大鼠脑线粒体Ⅲ态呼吸(ST3)、呼吸控制率(RCR)显著降低,呼吸Ⅳ态(ST4)较对照组显著升高;②氯霉素处理加缺氧组大鼠脑线粒体ST3较对照组显著降低,ST4较对照组、单纯缺氧、氯霉素组比较均显著降低,RCR与对照组比较显著降低,但高于单纯缺氧、氯霉素组;③单纯缺氧、氯霉素处理组脑组织COX活性显著降低,而氯霉素处理加缺氧组较单纯缺氧组COX活性从正常组的65.7%恢复至86.5%.结论①线粒体蛋白合成的抑制可导致线粒体氧化功能障碍,提示线粒体基因组的完整表达在其呼吸功能发挥中的重要作用;②氯霉素处理对缺氧造成的线粒体功能障碍具有保护作用.     

缺氧复合氯霉素处理对大鼠脑皮质线粒体氧化呼吸功能及COX活性的影响

目的观察大鼠经不同时间低压缺氧并复合线粒体蛋白翻译特异抑制剂氯霉素(CAP)处理后,脑组织线粒体呼吸功能和COX活性的变化以及CAP处理对缺氧过程中线粒体氧化呼吸功能的影响.方法成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、单纯药物处理组和缺氧复合药物处理组,后者为模拟海拔5 000 m高原连续低压缺氧暴露1、5、15 d和30d,分别于动物处死前7 d按100 mg/kg体质量,腹腔注射0.5?P.高速离心密度梯度法分离大鼠脑皮质线粒体,Clark氧电极法测定线粒体呼吸活性,极谱法测量COX活性.结果与对照组相比,单纯CAP处理大鼠脑线粒体ST3、RCR、OPR及COX活性显著降低;复合缺氧后则线粒体呼吸功能及COX活性明显改善,且随缺氧时间的延长而基本恢复到平原对照组水平.结论缺氧可以改善氯霉素处理大鼠脑皮质COX活性及线粒体的氧化呼吸功能,提高氧化磷酸化效率,其改善程度具有时间依赖性,随缺氧时间的延长而逐渐恢复.     

Effects of Isophenphos-I on the respiratory function of rat liver mitochondria

Summary The effects of insecticide Isophenphos-I on respiration of rat liver mitochondria were studied. It was found that Isophenphos-I inhibited the respiration of mitochondria both in vivo and in vitro, and reduced the activities of glutamate dehydrogenase, succinate dehydrogenase, succinatecytochrome C reductase and Mg⁺⁺-ATPase in vitro. The effects of the insecticide on the permeability and lipid peroxidation of the mitochondrial membrane were also investigated in vitro in order to explore the possible mechanism of the respiratory inhibition of mitochondria by the insecticide.     

低压缺氧大鼠脑线粒体内腺苷酸含量及能荷的变化

目的　对比研究急性和慢性缺氧暴露后脑线粒体内的能量储备和ATP生成能力 ,探讨急性缺氧致脑功能障碍和慢性缺氧适应的能量代谢机制。方法　Wistar大鼠分为对照组、急性缺氧组和慢性缺氧组。后两组分别于模拟海拔40 0 0m高原低压舱内连续缺氧暴露 3d和 3 0d ,每天 2 3 5h。缺氧组和对照组动物分别在模拟高原条件和平原条件断头处死 ,取脑组织分离线粒体。高压液相色谱分离并测量线粒体内腺苷酸库 (pool)含量 ,并计算能荷 ;以琥珀酸为氧化底物检测线粒体的ATP生成速率。结果　急性和慢性低压缺氧暴露后大鼠脑线粒体内的总腺苷酸库变化不明显 (P >0 0 5 ) ,但慢性缺氧组高于急性组 (P <0 0 5 ) ;线粒体内的ATP含量在急性和慢性缺氧时分别降低 65 1%和 3 3 5 %,慢性缺氧可部分恢复 ,但仍低于对照组 (P <0 0 5 ) ;ATP在总腺苷酸库中所占比例在急、慢性缺氧时分别是对照的 41 5 %和 42 5 %;急、慢性缺氧对线粒体内能荷均无显著影响 (P >0 0 5 ) ;急性缺氧可使以琥珀酸为底物的线粒体ATP生成速率降低 41 8%,而慢性缺氧则与对照组无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　急性缺氧暴露可显著降低脑线粒体内的能量储备 ,而线粒体ATP生成能力降低是其原因之一 ;慢性缺氧暴露则可使其能量储备部分恢复 ,提示“线粒     

不同营养支持对烧伤大鼠肠上皮细胞线粒体呼吸功能的影响

目的　研究不同营养支持途径对烧伤大鼠肠上皮细胞线粒体呼吸功能的影响。方法　采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,随机分成伤前对照 (C) ,静脉营养 (PN)及肠道营养 (EN)组。EN和PN组给予相同的营养液 ,每天 73 5kJ/kg ,糖、脂肪、蛋白供热比为 :5 4 5∶3 1 5∶14 ,其中糖占 15 3 %(w/v) ,卡氮比为 183∶1。分离肠上皮细胞线粒体 ,观察烧伤后线粒体呼吸控制率 (RCR)、磷氧比 (P/O)、肠道氧摄取率 (Oext)及肠粘膜血流量 (IMBF)的变化。结果　烧伤后无论PN还是EN组线粒体RCR、P/O、IMBF和Oext均显著降低。两组相比 ,EN组上述指标均明显高于PN组。相关分析显示 ,IMBF同RCR、Oext和P/O呈显著正相关 (r1 =0 89,P <0 0 1;r2 =0 88,P <0 0 1;r3 =0 96,P <0 0 1)。结论　严重烧伤后肠粘膜血流量下降 ,肠道氧摄取率降低 ,肠上皮细胞线粒体呼吸功能受损 ,氧化磷酸化失偶联。肠道营养能改善肠道血供 ,增加氧摄取率 ,减轻肠上皮细胞线粒体呼吸功能受抑程度 ,提高氧化磷酸化水平     

缺氧复合运动大鼠心肌线粒体功能的变化

目的 观察缺氧及缺氧复合运动条件下大鼠心肌线粒体功能的变化.方法 将Wistar大鼠分为4组:平原对照组、缺氧组、平原运动组和缺氧复合运动组.缺氧复合运动组大鼠持续暴露于模拟海拔5 000 m高原5周,每天降至4 000 m 的高原进行游泳运动1 h(6 d/周),运动结束后回升至5 000 m;缺氧组大鼠同时在低压舱内相同海拔高度饲养,但不进行游泳运动;平原运动组和平原对照组在舱外同时饲养,其中平原运动组每天进行游泳运动1 h(6 d/周).在末次运动结束后24 h处死大鼠,分离心室肌提取线粒体.用clark氧电极法测定线粒体呼吸功能.结果 与单纯缺氧组比较,缺氧复合运动后心肌线粒体ST3、ST4显著增加,呼吸控制率降低;各组线粒体膜电位无显著改变;与平原对照组比较缺氧组大鼠心肌线粒体ATP合成酶α亚基表达显著下降;与单纯缺氧组比较,缺氧复合运动组线粒体ATP合成酶α亚基表达显著增加.结论 结果表明缺氧复合运动可改善心肌线粒体3态呼吸,ATP合成酶α亚基表达增加.提示缺氧复合运动后心肌ATP产生效率增加,有氧氧化代谢增强.     

安体舒通对慢性低氧高二氧化碳大鼠右心室肌胶原的作用

观察安体舒通对慢性低氧高二氧化碳大鼠右心室肌间质胶原的影响,探讨醛固酮在心肌间质增生中的意义。方法：用放免法测定血浆醛固酮,改良Ｂｅｒｇｍａｎ法测定右心室肌组织羟脯氨酸以表示胶原的浓度。结果慢性低氧四周和八周大鼠的血浆醛固酮水平、心肌组织胶原含量与右心室重量明显升高;     

急性高原缺氧大鼠肺组织损伤及其机制研究

【目的】通过建立低压缺氧模型,模拟急性高原缺氧损伤,观察不同缺氧时间点大鼠肺组织损伤情况。【方法】选取清洁级雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、缺氧6、12及24 h组。利用数控低压缺氧舱,建立急性高原缺氧损伤模型,通过HE染色观察大鼠肺组织形态学改变,利用干湿比重法检测肺组织含水量,采用生化手段检测血清乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)及过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,应用Western blotting技术检测肺组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)1/4的表达情况。【结果】HE染色:正常对照组可见多边形或圆形薄壁囊泡,边界清楚,肺泡上皮细胞间为薄壁肺泡隔,隔内可见毛细血管断面,各低压缺氧组肺泡上皮细胞明显肿大,肺泡壁增厚,肺间隔内毛细血管扩张;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺含水量显著升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠血清LDH活性显著升高(P<0.01),CAT活性显著下降(P<0.05或P<0.01);与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺组织中AQP1/4蛋白表达量均明显升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高。【结论】急性高原缺氧可造成实验大鼠肺水肿,且损伤程度与缺氧时间密切相关,其机制可能为上调水通道蛋白(AQP)1/4的表达所致。     

缺氧预处理后急性低氧对大鼠血压及心率的影响

目的探讨经缺氧预处理(HPC)后,急性低氧对大鼠血压和HR的影响。方法以健康大白鼠50只,随机分为空白组、含氧12.5%对照组、8.5%对照组、12.5%实验组和8.5%实验组。对照组分别在含氧12.5%和8.5%的氮氧混合气体下急性低氧5min和10min时记录血压和HR,并且10min时鼠尾取血测Hb含量;实验组进行7天缺氧预处理后同时用同样的方法测相同指标。结果以12.5%氮氧混合气体进行急性低氧的实验组5min时舒张压明显高于对照组(P<0.01或0.05);以8.5%氮氧混合气体进行急性低氧的实验组5min和10min时的收缩压明显高于对照组(P<0.01),5min时的舒张压明显高于对照组(P<0.01或0.05);经过HPC后大鼠的Hb含量明显升高(P<0.01或0.05)。结论经HPC后,机体Hb含量升高;急性低氧时实验组与对照组比较收缩压和舒张压有明显变化。     

合贝爽减轻缺氧所致血管内皮细胞线粒体膜电位变化

目的 观察缺氧对人大血管内皮细胞线粒体膜电位的影响以及合贝爽的保护作用. 方法 将培养的血管内皮细胞分为3组:对照组,单纯缺氧组和缺氧加合贝爽组.应用激光扫描共聚焦显微镜定量测量各组血管内皮细胞线粒体膜电位值. 结果 3组血管内皮细胞线粒体膜电位(荧光强度)分别为36.578±1.147,28.142±1.124,33.756±1.124.①与对照组相比,单纯缺氧组的线粒体膜电位水平显著降低(P<0.01).②与单纯缺氧组相比,合贝爽加缺氧组内皮细胞线粒体膜电位水平有显著升高(P<0.01),接近对照组测定值(P>0.05). 结论 缺氧引起血管内皮细胞线粒体膜电位降低;合贝爽可减轻缺氧损伤所致的线粒体膜电位的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用.     

缺氧对大鼠血液流变学特性的影响

目的 探讨急、慢性缺氧对大鼠血液流变学特性的影响。方法 采用低压舱模拟缺氧模型,测定缺氧时大鼠血液流变学指标以及血气的变化。结果 慢性缺氧血液流变特性较对照组和急性缺氧组明显障碍,表现为全血黏度明显增高,红细胞变形性下降、聚焦性增强,压积明显增大。结论 缺氧可显著影响血液流变学特性,其重要原因在于红细胞数量的显著增多和红细胞流变性的显著变化。     

缺氧条件下梭曼中毒对大鼠脑M受体的影响

目的 探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性和毒蕈碱性乙酰胆碱（Ｍ）受体变化规律。方法 以ＤＴＮＢ法和受体放射性配基结合法检测大鼠皮层、海马及纹状体ＡＣｈＥ活性和Ｍ受体密度及亲和力。结果 缺氧使大鼠脑组织ＡＣｈＥ活性不同程度升高,缺氧２４ｈ海马和纹状体Ｍ受体 分别增加１０．４％和２５．３％,Ｍ受体的亲和力分别增加５５．６％和３０．３％。单纯梭曼中毒和缺氧复合梭曼中毒均显著     

山茱萸环烯醚萜苷对脑缺血再灌注大鼠线粒体损伤的影响

目的 研究山茱萸环烯醚萜苷（cornel iridoid glycoside,CIG）对大脑中动脉梗阻（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型大鼠大脑皮质线粒体损伤的作用,探讨CIG对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法 采用线栓法制备大鼠MCAO模型,缺血2 h后复灌,采用数字表法将大鼠随机分为5组：假手术组,模型组,CIG低、高剂量（60、120 mg/kg）给药组,阳性对照药银杏叶片组,于复灌6 h后开始灌胃给药,每日1次,连续给药7 d。采用神经功能缺损症状评分（Modified Neurological Severity Scores,mNSS）评价各组大鼠神经功能情况,透射电镜观察损伤侧皮质部位线粒体超微结构,Western blotting法检测线粒体功能相关的蛋白NIX、Beclin1、DRP1、OPA1和PGC-1α的表达。结果 脑缺血再灌注损伤7 d后,模型组大鼠mNSS评分较假手术组大鼠显著增高,而与模型组相比,各给药组大鼠的mNSS评分明显降低。透射电镜结果显示模型组大鼠皮质线粒体损伤严重,CIG给药能明显改善线粒体结构变化。Western blotting检测结果显示,缺血再灌注损伤可显著抑制大鼠皮质组织中NIX、Beclin1、DRP1、OPA1和PGC-1α蛋白的表达,而CIG给药后均能显著改善这些蛋白的异常表达。结论 CIG通过激活线粒体自噬,促进线粒体分裂融合,增加线粒体生物合成等过程,减轻线粒体损伤,进而保护神经元,发挥较好的抗脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。     

低氧培养对小鼠胚胎成纤维细胞生长和线粒体分布及功能的影响

目的 研究低氧培养条件对小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)的生长和线粒体分布及功能的影响.方法 将MEFs分为20％氧浓度的常氧培养组和5％氧浓度的低氧培养组连续培养,每24小时采用台盼蓝染色对MEFs活细胞计数;MitoTracker Green对细胞线粒体染色并在激光共聚焦显微镜下观察;腺苷三磷酸(ATP)试剂盒检测ATP合成.结果 对数生长期低氧培养组活细胞数高于常氧培养组,差异有统计学意义(P＜0.05);并且低氧培养组细胞内线粒体核周分布型比例高于常氧培养组,差异有统计学意义(P＜0.05);同时两组细胞内ATP水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低氧培养条件影响线粒体在MEFs细胞内的分布和能量的合成,对细胞生长的促进作用高于常氧培养.     

The effect of protein kinase C on voltage-gated potassium channel in pulmonary artery smooth muscle cells from rats exposed to chronic hypoxia

Background Chronic hypoxia can cause pulmonary hypertension and pulmonary heart disease with high mortality.The signal transduction pathway of protein kinase C (PKC) plays an important role in chronic pulmonary hypertension. So it is necessary to investigate the effect of PKC on voltage-gated potassium (K+) channels in pulmonary artery smooth muscle cells of rats exposed to chronic hypoxia.Methods Male Wistar rats were randomly divided into a control group (group A) and a chronic hypoxia group (group B). Group B received hypoxia ［oxygen concentration （10±1）%］ eight hours per day for four consecutive weeks. Single pulmonary artery smooth muscle cells were obtained using an acute enzyme separation method. Conventional whole cell patch clamp technique was used to record resting membrane potential, membrane capacitance and voltage-gated K+ currents. The changes in voltage-gated K+ currents before and after applying paramethoxyamphetamine (PMA) (500 nmol/L), an agonist of PKC, and PMA plus carbohydrate mixture of glucose, fructose and xylitol (GFX) (30 nmol/L), an inhibitor of PKC, were compared between the two groups.Results The resting membrane potential in group B was significantly lower than that of group A: －(29.0±4.8) mV (n=18) vs －(42.5±4.6) mV (n=35) (P&lt;0.01). But there was no change in membrane capacitance between the two groups: (17.9±4.6) pF (n=40) vs (19.7±5.8) pF (n=31) (P&gt;0.05). The voltage-gated K+ currents were significantly inhibited by PMA in group A, and this effect was reversed by GFX. However, the voltage-gated K+ currents in group B were not affected by PMA.Conclusions The resting membrane potential and voltage-gated K+ currents in pulmonary artery smooth muscle cells from rats exposed to chronic hypoxia decreased significantly. It seems that PKC has different effects on the voltage-gated K+ currents of pulmonary artery smooth muscle cells under different conditions.     

急性低压缺氧对大鼠海马CA1区nNOS表达的影响

目的：研究急性低压缺氧对大鼠海马CA1区nNOS表达的影响。方法：用免疫组化ABC法检测在低压舱模拟升空6．5km停留1h和2h后，大鼠海马CA1区内nNOS的表达的变化，并通过计算机图像分析系统进行定量分析。结果：缺氧2h组的nNOS阳性反应细胞面数密度（numerical density on area,NA)和积分光密度值（IOD）均显低于缺氧1h组的和对照组（P＜0．01）；缺氧1h组的NA与对照组无显差异（P＞0．05），但其IOD值显低于对照组（P＜0．01）。结论：急性缺氧条件下，大鼠海马CA1区nNOS表达下降。     

急性缺氧对大鼠肠系膜微循环白细胞流变学行为的影响

目的：研究急性缺氧对大鼠肠系膜微循环白细胞流变学行为的影响。方法：运用活体显微镜结合计算机图像分析系统观察分析急性缺氧大鼠肠系膜微循环中白细胞的流变行为。结果：常氧状态下肠系膜微静脉中有少量白细胞粘附，部分白细胞沿管壁滚动，滚动速度较快，白细胞与内皮细胞接触时间（TLECT）短，急性缺氧后白细胞粘附数显著增加，白细胞沿壁滚动大量增多，滚动速度明显减慢，TLECT显著延长（P＜0．05）。结论：急性缺氧严重影响微循环中白细胞的流变学行为，TLECT显著延长，反映了白细胞与内皮细胞相互作用程度加重，这可能是急性缺氧引起内皮损伤的重要机制。     

心得力对心肌病大鼠心功能及衰竭心肌线粒体的作用

目的:研究心得力(Xindly)对阿霉素(ADR)心肌病大鼠心功能及衰竭心肌线粒体的影响,部分探讨其治疗心肌病的分子机制.方法:SD大鼠50只随机分为正常组,ADR心肌病心衰模型组(含安慰剂组,达爽组和心得力 达爽组).药物干预4 wk后用Hp Sonos 2500型多功能超声检查仪无创检测各组大鼠心脏射血分数(EF),左心室舒张末内径(LVDD),左心室收缩末内径(LVDS);用透射电镜(H-600)及医学图像分析软件计量心肌线粒体面积(Area),线粒体积分光密度(IOD),线粒体周长(Margination),线粒体直径(Diameter),线粒体平均面积(Per Area).结果:①心得力 达爽组心功能较安慰剂组改善,左室收缩末内径较达爽组改善(P＜0.05).②心得力 达爽组心肌细胞线粒体Per Area,Margination,IOD均好于安慰剂组与达爽组(P＜0.05).结论:心得力 达爽治疗心肌病有疗效.     

Effects of hypoxic preconditioning on myocardial mitochondrial energy metabolism during acute hypoxia in rats

Theprotectivemechanismofischedricpreconditioning(lP)hasbeendeeplyandextensivelystudiedsinceMuchfoundthecapacityoflPtodecreasem}'ocanlialdamageresultingfrom.-isch.rnia:"'.Recently,ShizakudareportedtLhathyPOxicpreconditioning(HP)coulddecreaseischethecmyocaklialdamageinrepeatedattacksofeoronmparterialoclussionindogs=':.Theresistancetoh}poxjawasincreasedaftersufferingfromashort-termofh}poxiain.t,:4].However,itislittleknowntogetherHPcanimprovem}'ocardialenergymechlisminhgutierats.ThisstUdywasd…     

鼠早产和低氧浓度对胆红素神经毒性的增强作用

目的探讨早产、氧浓度异常对胆红素的神经细胞毒性的影响及其可能的发生机制。方法 7 d龄新生足月和早产大鼠各36只,完全随机分为常氧+生理盐水组、常氧+胆红素组、低氧+生理盐水组、低氧+胆红素组、高氧+生理盐水组、高氧+胆红素组。常氧+生理盐水组,经小脑延髓池注射0.02 ml生理盐水;常氧+胆红素组,经小脑延髓池注射胆红素20μg/g;低氧+生理盐水组,在氧浓度8%的密闭箱中暴露3 h,经小脑延髓池注射0.02 ml生理盐水;高氧+生理盐水组,在氧浓度95%的密闭箱中暴露3 h,经小脑延髓池注射0.02 ml生理盐水;低氧+胆红素组,氧浓度8%的密闭箱中暴露3 h后经小脑延髓池注射胆红素20μg/g;高氧+胆红素组,氧浓度95%的密闭箱中暴露3 h后经小脑延髓池注射胆红素20μg/g。各组均于24 h断头取脑。HE染色及TUNEL显示海马神经细胞凋亡,免疫组织化学染色法检测iNOS和TNF-α表达。结果①注射胆红素的大鼠均出现俯伏、转圈、四肢颤动、翻滚、活动减少等异常神经行为,早产组最明显。②HE染色观察胆红素+低氧组海马神经细胞坏死、凋亡最明显。③TUNEL显示,早产胆红素组海马神经细胞凋亡数(30.17±3.76)较足月组(23.33±4.89)明显升高(P<0.05);足月和早产低氧+胆红素组的海马神经细胞凋亡率[分别为(27.67±3.01)和(34.33±3.01)]较胆红素组[分别为(23.33±4.89)和(30.17±3.76)]明显升高(P<0.05),而高氧+胆红素组海马神经细胞凋亡率与胆红素组相似。④早产胆红素组海马神经细胞TNF-α释放(0.425±0.014)较足月组(0.388±0.020)显著增多(P<0.05),两组iNOS表达水平相似;低氧+胆红素组海马神经细胞TNF-α和iNOS表达[(0.437±0.024)和(0.440±0.001)]较胆红素组[(0.253±0.010)和(0.388±0.020)]显著增加(P<0.05);高氧+胆红素组海马神经细胞TNF-α释放(0.416±0.011)显著增多(P<0.05),iNOS表达无明显升高。结论胆红素可诱导TNF-α等炎症因子释放增多;低氧、早产增加TNF-α和/或iNOS等炎症因子的释放和表达,增强胆红素的神经毒性。减少围产期窒息、早产,控制炎症因子释放,对防治胆红素脑病有重要意义。