NMBzA对人胎儿食管上皮组织中多种抑癌基因作用的研究

流行病学研究表明，食管癌与环境中亚硝胺致癌物有密切关系。为了从分子水平阐明亚硝胺致癌物诱发食管癌癌变机制，作者应用ＰＣＲ扩增分析发现甲基苄基亚硝胺（ＮＭＢｚＡ）诱发的人胎儿食管癌组织有抑癌基因Ｒｂ、ｐ５３、ＡＰＣ和ＭＣＣ损失。ＮＭＢｚＡ处理２４小时和３周的人胎儿童管上皮细胞中未发现这些基因的缺失；但ＰＣＲ直接测序分析发现ＮＭＢｚＡ体外处理３周的人胎儿食管上皮组织在ｐ５３、Ｒｂ和ＭＣＣ基因突变。以上     

食管癌p53、PCNA表达与局部体液免疫的关系

目的：对８０例食管浸润癌组织中的局部体液免疫即ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ产生细胞及Ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ进行检测,以探索局部体液免疫对抑癌基因突变及细胞增殖活性的影响。方法：采用直接免疫荧光染色法和Ｓ－Ｐ免疫组化染色法。结果：ＩｇＧ产生细胞与Ｐ５３蛋白,ＰＣＮＡ的表达呈负相关;ＩｇＧ阳性而Ｐ５３、ＰＣＮＡ阴性的病例,淋巴结转移及浸润的程度显著降低,ＩｇＡ、ＩｇＭ与Ｐ５３突变及ＰＣＮＡ的表达无关。结论：Ｉ     

胃粘膜异型增生上皮p53蛋白和PCNA的表达意义

 目的 探讨胃粘膜中－重度异型增生组织 ｐ５３蛋白和 ＰＣＮＡ的表达意义。方法 应 用免疫组化 ＳＡＢＣ法对 ７９例常规胃镜活检的胃粘膜中－重度异型增生组织行 ｐ５３蛋白和 ＰＣＮＡ 同步检测并进行了 ５年随访。结果 胃粘膜中增生重度异型增生组织 ｐ５３蛋白阳性表达者５年癌 检出率明显高于ｐ５３蛋白阴性表达者。ＰＣＮＡⅢ～Ⅳ级者癌检出率明显高于Ⅰ～Ⅱ级者。ｐ５３蛋 白阳性并 ＰＣＮＡⅢ～Ⅳ级者，其癌检出率最高。结论 ｐ５３蛋白和 ＰＣＮＡ是预测胃粘膜中－重度异 型增生生物学持性有价值的指标。     

食管癌组织多种肿瘤抑制基因微卫星多态位点的杂合丢失和不稳定

目的：研究ｐ５３,ｐ１６,Ｒｂ,ＤＣＣ,ＡＰＣ等多种已知抑癌基因在食管癌组织中的缺失及与临床病理的关系。方法：采用ＰＣＲ银染技术,检测高发区３６例配对的食管癌标本１４个微卫星ＤＮＡ多态位点的杂合丢失和不稳定性。结果：分别与ｐ５３,ｐ１６及Ｒｂ连锁的Ｄ１７Ｓ２６１,Ｄ９２Ｓ１６２,Ｄ９２Ｓ１７１,ＩＦＮＡ和Ｄ１３Ｓ１７０均有高频率的杂合丢失;两个以上的位点异常者占８６％,ｐＴＮＭⅢ期患者微卫星ＤＮＡ     

食管癌Rb基因启动子甲基化状态和甲基苄基亚硝胺对其影响的研究

目的分析Ｒｂ基因表达异常原因,研究Ｒｂ基因启动子甲基化状态和甲基苄基亚硝胺（ＮＭＢｚＡ）对Ｒｂ基因启动子的影响。方法采用限制性核酸内切酶酶切和ＰＣＲ扩增方法。结果３３．３％的食管癌组织Ｒｂ基因启动子存在ＭｓｐⅠ型高甲基化,４０．０％的食管癌组织Ｒｂ基因启动子存在ＨｐａⅡ型高甲基化。１例标本存在ＭｓｐⅠ和ＨｐａⅡ两种类型的高甲基化。恒河猴１次灌喂３０ｍｇ／ｋｇＮＭＢｚＡ后１,２,３天,其食管上皮Ｒｂ基因启动子ＨｐａⅡ、ＭｓｐⅠ类型甲基化逐渐增强;第５天其Ｒｂ基因启动子ＨｐａⅡ、ＭｓｐⅠ类型甲基化程度明显下降。结论食管癌组织中Ｒｂ基因表达异常可能与启动子高甲基化有关,ＮＭＢｚＡ通过启动子甲基化对Ｒｂ基因调控产生影响。     

食管鳞癌自发细胞凋亡和核增殖抗原p53关系的研究

目的通过对食管鳞癌组织中凋亡细胞的原位观察和核增殖抗原（ＰＣＮＡ）的表达状态的研究,探讨不同增殖情况的食管鳞癌组织细胞凋亡情况,同时研究ｐ５３基因的突变和ｐ５３蛋白的表达对食管鳞癌组织细胞凋亡的影响。方法３０例术前未经任何治疗的食管鳞癌手术标本,分别进行凋亡细胞的原位检测（ＴＵＮＥＬ）、ＰＣＮＡ、ｐ５３蛋白的免疫组化染色和ｐ５３基因５,６,７,８外显子ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测。结果不同增殖能力的癌组织中,细胞凋亡的程度差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。ｐ５３基因突变组中,增殖程度高与增殖程度低者之间癌细胞凋亡的程度差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。ｐ５３基因突变组与非突变组、ｐ５３蛋白表达阳性组与非阳性组癌细胞凋亡的程度差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论食管鳞癌组织中,细胞增殖活跃则自发性凋亡也相应增多     

C-erbB-2、p53和PCNA对乳腺浸润性癌预后价值的Cox回归分析

目的 探讨癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２产物、抑癌基因ｐ５３突变型蛋白的过度以及增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡ－ＬＩ）与乳腺浸润性癌临床病理指标的联系及其预后价值。方法 随机收集７９例临床随访资料齐备的病人,用免疫组化ＡＢＣ法检测其ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达情况,用Ｃｏｘ回归分析其预后意义。结果 ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３过度表达的阳性率分别为３１．７％和４８．１％。ＰＣＡＮ－ＬＩ中位数为１７．６％。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ｐ５３过度表达之间以及其与ＰＣＮＡ－ＬＩ、肿瘤大小、组织学分级、腋淋巴结状态等指标间均无明确的相互关联。ＰＣＮＡ－ＬＩ与这分级呈正相关,但高ＰＣＮＡ－ＬＩ与不良预后无显关联。Ｃｏｘ回归分析显示,腋淋巴结、ｃ－ｅｒｂＢｔ ｐ５３过度表达等３项指标反映不良预后,危险度分别是３．３０６、１．４１９     

亚硝胺对人食管上皮中癌基因的作用

用甲基苄基亚硝胺（ＮＭＢｚＡ）诱导胎儿食管上皮（ＨＦＥ）组织，通过Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交和免疫组织化学分析发现：ＭＮＢｚＡ诱导２４小时的ＨＦＥ中即有ＥＧＦｒ基因的扩增和高表达；随着诱导时间的延长，在ＮＭＢｚＡ诱导１周和３周的ＨＦＥ中分别发现ｃ－ｍｙｃ和ｉｎｔ－２基因的扩增，组织学观察可发现这些组织中有局部乳头状增生；在ＮＭＢｚＡ诱导的胎儿食管上皮癌中发现Ｒｂ基因的完全丢失及Ｐ５３基因的部分丢失和高表达     

人肝细胞癌及癌旁组织中p53蛋白和PCNA的表达

应用免疫组化方法检测了７３例肝细胞癌及癌旁组织中ｐ５３蛋白的表达，７０例肝细胞癌及癌旁组织中ＰＣＮＡ的表达。结果ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ在肝细胞癌中阳性表达率显著高于癌旁组织，且与肝细胞癌分化程度密切相关。癌旁组织中，ｐ５３蛋白表达仅见于增生结节中，肝硬化组织均为阴性；增生结节中ＰＣＮＡ阳性表达显著高于肝硬化组织。提示ｐ５３基因突变是肝细胞癌的频发事件，在肝细胞癌的发生发展中起重要作用；增生结节细胞的增殖活性增强，是肝细胞癌的癌前病变。作者还讨论了ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ表达间的关系     

人食管癌中癌基因与预后

人食管癌中癌基因与预后祝淑钗食管癌的发生可能与癌基因ｃｅｒｂＢ、ｃｍｙｃ、ｉｎｔ２、ｈｓｔ１、ｃｙｃｌｉｎＤ１的扩增和抑癌基因ｐ５３、Ｒｂ、ＡＰＣ／ＭＣＣ纯合子的丢失、突变有关系。近两年的研究显示，ｃｙｃｌｉｎＤ１基因扩增和相关蛋白的过度表达...     

大肠癌组织p53、PCNA表达与临床病理及预后的关系

目的：探讨突变型ｐ５３ 蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 在结直肠癌细胞中的表达情况与临床病理及预后的关系。方法：用ＬＳＡＢ 免疫组化方法检测１７２ 例癌组织中的ｐ５３ 蛋白、ＰＣＮＡ 的表达情况,用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ 回归分析ｐ５３ 表达的相关因素,Ｃｏｘ 模型分析ｐ５３ 、ＰＣＮＡ 表达对预后的的影响。结果：ｐ５３ 、ＰＣＮＡ 阳性率分别为４３－６ ％ （７５／１７２） 、９１－３ ％ （１５７／１７２） 。ｐ５３ 表达与临床病理因素无关,ｐ５３ 阳性预后比阴性差,ｐ５３ 阳性常伴有ＰＣＮＡ 过度表达,但ＰＣＮＡ 高表达,预后有好的趋势。结论：结直肠癌ｐ５３ 突变的癌细胞多呈高增殖状态,ｐ５３ 阳性、ＰＣＮＡ 中、低强度表达是预后差的生物学指标。ＰＣＮＡ 高表达,是癌细胞处于高增殖状态、对化疗敏感的标志,对该类病人给予辅助化疗可望提高根治术疗效。     

人乳头瘤病毒感染和p53基因突变与宫颈癌的关系

目的：探讨人乳头瘤病毒１６ 和１８ 型及抑癌基因ｐ５３ 突变对宫颈的致癌作用以及 Ｈ Ｐ Ｖ 感染与ｐ５３ 基因突变的相关性。方法：采用聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 技术和限制性酶切片段多态性分析（ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ） 技术对３４ 例原发性宫颈癌组织及３０ 例正常宫颈组织 Ｈ Ｐ Ｖ１６ ,１８ 型 Ｄ Ｎ Ａ 及抑癌基因ｐ５３ 的突变进行了检测。结果： Ｈ Ｐ Ｖ１６ ,１８ Ｄ Ｎ Ａ 在宫颈癌的总阳性率为６４７ ％ （２２／３４） ,正常宫颈组织只有６７ ％ 阳性,８例宫颈癌组织出现ｐ５３ 基因第６ 外显子突变,其中２ 例为 Ｈ Ｐ Ｖ１６ Ｄ Ｎ Ａ 阳性、１ 例 Ｈ Ｐ Ｖ１８ Ｄ Ｎ Ａ 阳性。结论：宫颈癌的发病与 Ｈ Ｐ Ｖ 感染及ｐ５３ 基因突变有关,宫颈癌组织中ｐ５３ 基因突变与 Ｈ Ｐ Ｖ 感染无关。     

乙型肝炎病毒X基因与肝癌p53突变蛋白的表达

应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）对２３例肝癌和癌旁组织中ｐ５３突变蛋白进行检测，同时对其中ＨＢＶＸｍＲＮＡ进行原位杂交（ＤＮＡ－ｍＲＮＡ）检测。结果发现，９例肝癌及其癌旁组织中ｐ５３突变蛋白和ＨＢＶＸｍＲＮＡ均为阳性，１１例均为阴性，另３例仅ＨＢＶＸｍＲＮＡ阳性，χ２检验显示ｐ５３突变蛋白与ＨＢＶＸｍＲＮＡ之间有明显相关关系（Ｐ＝０．０００２７），提示ｐ５３基因突变与ＨＢＶＸ基因整合表达有关，ｐ５３基因突变可能是ＨＢＶ致肝癌作用机制之一。     

MAL基因在人食管癌中表达显著下调

研究ＭＡＬ基因在人食管癌中的表达下调状况。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了ＭＡＬ基因在４１对配对的食管癌组织和相应癌旁食管粘膜中的表达;应用ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ方法分析了ＭＡＬ基因在３个食管癌细胞系ＥＣ１０９、ＥＣ８７１２和ＥＣ９７０６中的存在及其表达。     

结直肠肿瘤p~（53）蛋白表达与细胞增殖

应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测６９例结直肠癌，１１例腺瘤，３０例癌旁粘膜及１５例正常粘膜的Ｐ￣５３蛋白表达及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ），结果显示：ｐ￣５３蛋白表达的结直肠癌细胞增殖指数高，腺瘤ＰＣＮＡ阳性细胞多集中于细胞增殖区，与ｐ￣５３蛋白阳性表达区相仿；癌旁粘膜增殖指数与严ｐ￣５３表达无关。这表明：ｐ￣５３蛋白表达与结直肠肿瘤细胞增殖及腺瘤恶性转化有关。     

食管癌和贲门癌组织中P53基因突变的研究

应用核酸杂交、ＰＣＲ扩增、直接测序等分子生物学技术，分析了林县原发性食管癌和贲门癌及其癌旁组织中抑癌基因Ｐ５３人子结构改变。用Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交法分析的３５例食管鳞癌和２７例组织中，有１例Ｐ５３基因缺失，１例重排结构性改变，占７．４％。上述食管鳞癌标本，用ＰＣＲ直接测序，发现５０％９１５／３０）的食管鳞癌有Ｐ５３基因的的５－９外显子和相应内含突变。４５％（５／１１）食管癌旁组织中有Ｐ５３基因突变。     

原发性肝细胞癌组织中乙肝病毒整合与p53基因突变关系研究

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法检测１５例原发性肝细胞癌及癌旁组织乙肝病毒（ＨＢＶ）存在状态，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（Ｐｏｌｙ－ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）银染技术研究其ｐ５３基因突变。结果癌组织中１３例（８６．７％）有ＨＢＶＤＮＡ整合，同时３例伴游离ＨＢＶＤＮＡ；癌旁４例（２６．７％）有ＨＢＶＤＮＡ整合，而游离的ＨＢＶＤＮＡ却有６例。癌组织中ｐ５３基因变异８例（５３．３％），１例位于第５外显子，各有２例位于第６、第７外显子，３例位于第８外显子，癌旁组织未见ｐ５３基因异常，ｐ５３基因异常的癌组织中均有ＨＢＶＤＮＡ整合。研究结果表明，ＨＢＶＤＮＡ整合与ｐ５３基因突变密切相关，ＨＢＶＤＮＡ可能通过整合基因组后导致抑癌基因突变失去抑癌作用而引发肝癌。     

肺癌组织中p53、c-erbB-2、PCNA和DNA量的表达特点及其意义

肺癌组织中ｐ５３、ｃｅｒｂＢ２、ＰＣＮＡ和ＤＮＡ量的表达特点及其意义陈寿松熊敏赫丽肖同浩张意平我们应用免疫组化方法对原发性肺癌（ＰＰＣ）组织中ｐ５３、ｃｅｒｂＢ２和ＰＣＮＡ进行检测以及ＤＮＡ原位定量测定，探讨其在ＰＰＣ中的表达特点及与预后的关...     

C—erbB—2,PCNA和组织蛋白酶D在食管癌中的表达意义

目的 研究Ｃ－erbＢ－２、ＰＣＮＡ和组织蛋白酶Ｄ（Ｃath-Ｄ）表达与食管癌分级、浸润、转移和预后的关系。方法 应用微波－ＳＰ免疫组化法，检测６５例食管鳞状细胞癌组织中Ｃ－erbＢ－２、ＰＣＮＡ和Ｃath-Ｄ表达水平。结果 在食管癌中Ｃ－erbＢ－２、ＰＣＮＡ和Ｃath-Ｄ表达阳性率分别为５０．８％、６９．２％和６４．６％。Ｃ－erbＢ－２ 、ＰＣＮＡ和Ｃath－Ｄ表达均与肿瘤分级、浸润、淋巴结转移和预后相关。结论 Ｃ－erb     

p53f、p16蛋白及增残细胞核抗原与胃癌生物学行为的关系

目的 探讨ｐ５３、ｐ１６蛋白及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）异常表达与胃癌生物学行为的关系。方法 应用免疫组化ＡＢＣ法,对９５例胃癌进行ｐ５３、ｐ１６蛋白表达产物和ＰＣＮＡ进行检测。结果 胃癌组织中ｐ５３、ｐ１６、ＰＣＮＡ阳性率分别为４９．５％（４７／９５）、２０．０％（１９／９５）、７８．９％（７５／９５）。ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ在进展期胃癌（５３．５％、８２．６％）淋巴结阳性胃癌（５９．３％、８６．４％）表达率均高于早期胃癌（１１．１％、４４．４％）和淋巴结阴性胃癌（３３．３％、６６．７％）（Ｐ〈０．０５）。ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ在累及浆膜胃癌的表达率高于局限粘膜及粘膜下层胃癌（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。ＰＣＮＡ异常表达与胃癌组织学分型有关（Ｐ〈０．０５）。ｐ１６蛋白表达与胃癌大多数生物行为为无明显关系。但其在