miR-181a调控海马神经元突触生长在癫痫发生中的作用及机制

目的探讨miR-181a调控海马神经元突触生长在癫痫发生中的作用及机制。方法从出生24 h内的SD大鼠分离海马神经元进行原代培养,将miR-181a-mimic、miR-181a-inhibitor及scramble miRNA转染到神经元细胞内,未转染组作为对照组,各组细胞培养24 h后,免疫荧光检测突触的长度及数目;将后续实验分为对照组、无镁组及无镁+miR-181a-mimic组,脱氧核苷酸转移酶介导三磷酸脱氧乌苷-生物素刻痕末端标记法(TUNEL)检测阳性细胞率;乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞毒性;根据标准曲线计算培养液中的NAD~+含量;Western印迹检测蛋白激酶B(Akt)和糖原合酶激酶(GSK3β)磷酸化蛋白及总蛋白的表达。结果 miR-181a-mimic组海马神经元细胞突触的长度及分支数均显著低于对照组,而miR-181a-inhibitor组海马神经元细胞突触的长度及分支数均显著高于对照组(P<0.01)。scramble miRNA不影响突触的生长;无镁+miR-181a-mimic组在1 h和24 h的阳性细胞率均显著低于无镁组(P<0.01)。无镁24 h组和无镁+miR-181a-mimic组细胞漏出率均显著高于对照组,NAD~+含量显著低于对照组(P<0.01),而无镁+miR-181a-mimic组细胞漏出率显著低于无镁24 h组,NAD~+含量显著高于无镁24 h组(P<0.01);无镁24 h组Akt和GSK3β磷酸化蛋白表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05),无镁+miR-181a-mimic组Akt和GSK3β磷酸化蛋白表达显著高于对照组及无镁24 h组(P<0.01);Akt和GSK3β总蛋白表达在三组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-181a影响海马神经元突触生长,并通过调控PI3K/Akt/GSK3β信号通路降低神经元细胞的凋亡及细胞漏出率,提高NAD~+含量对癫痫起保护作用。     

miRNA181a在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨miR-181a基因表达与肝细胞癌发生发展以及肿瘤病理学特征之间的关系。方法提取30例肝细胞癌组织及癌旁组织和10例肝血管瘤患者的肝脏组织的总RNA,用Real time-PCR法检测miR-181a在上述组织中的表达情况。结果肝细胞癌组织中miR-181a表达与癌旁组织相比差异无统计学意义(P>0.05);与正常肝脏组织相比,miR-181a在肝细胞癌组织中的表达水平显著低于正常对照组织,差异有统计学意义(P<0.01);miR-181a表达下调与肝细胞癌分化程度、临床分期和合并肝硬化明显相关(P<0.05),与肝细胞癌的大小、血AFP浓度、HBV感染均无明显相关性(P>0.05)。结论 miR-181a表达下调参与肝细胞癌的发生发展过程,miR-181a异常表达与肝细胞癌的肿瘤分化程度、临床分期和合并肝硬化相关。     

慢性乙型肝炎和肝硬化患者血浆miR-181a水平变化*

目的 探讨慢性HBV感染者血浆微小RNA(miRNA)-181a的变化。方法 采用实时荧光定量PCR法检测20例乙型肝炎病毒携带者（ASC）、20例慢性乙型肝炎（CHB）患者、20乙型肝炎肝硬化（LC）患者和20例健康人血浆miR-181a水平,常规检测血清HBV DNA。结果 NC组、ASC组和LC组血浆miR-181a水平分别为（1.01±0.03）、（0.97±0.02）、（0.91±0.02）,而CHB组患者为（0.74±0.03）,显著低于前三组（P<0.001）;ASC组和LC组血清HBV DNA（3.86±2.89）lg copies/ml和（2.47±3.26）lg copies/ml,而CHB组患者为（8.96±1.63）lg copies/ml（P<0.001）;CHB患者血浆miR-181a水平与HBV DNA水平呈负相关（r=0.76,P<0.001）,ASC组和LC组血浆miR-181a水平与HBV DNA水平无显著相关性。结论 CHB患者血浆miR-181a水平降低,其意义还需要进一步探讨。     

miRNA-181a在非酒精性脂肪性肝病中的作用及其机制

目的:探讨miRNA-181a（miR-181a）对非酒精性脂肪性肝病的影响及其可能的机制。方法:使用棕榈酸处理HepG2细胞构建非酒精性脂肪性肝病细胞模型,检测细胞内miR-181a的表达及脂质沉积。用转化生长因子-β处理细胞检测其对miR-181a表达的影响。通过调控HepG2细胞miR-181a的表达水平,分别检...     

缺血性脑卒中病人血清miR-181a表达水平与认知功能障碍的关系

目的 探讨缺血性脑卒中病人血清miR-181a表达水平及其与认知功能障碍的关系。方法 纳入2018年1月—2019年3月新乡医学院第一附属医院168例缺血性脑卒中病人作为研究对象,治疗后采用中文版简易智能精神状态检查量表(MMSE)评估缺血性脑卒中病人否存在认知功能障碍,根据是否发生认知功能障碍分为认知功能障碍组(73例)和非认知功能障碍组(95例),其中认知功能障碍组根据严重程度分为轻度认知功能障碍组、中度认知功能障碍组和重度认知功能障碍组3个亚组。于清晨空腹抽取所有研究对象外周静脉血5 mL,并采用定量聚合酶链式反应(PCR)法检测血清中miR-181a表达水平,血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S-100β表达水平采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测。比较组间miR-181a、NSE、S-100β表达水平及MMSE评分,相关性分析采用Pearson分析,miR-181a表达水平诊断缺血性脑卒中后认知功能障碍采用受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果 与非认知功能障碍组相比,认知功能障碍组血清miR-181a、NSE和S-100β表达水平均明显升高,而MMSE评分明显降低,差...     

miR-146a在肝脏疾病中的作用

微RNA(miRNA)最早于1993年在秀丽线虫杆菌中被发现,是一类大小为18~25 nt的单链非编码RNA,广泛存在于真核生物及单核生物的细胞核内。随着研究的不断深入,发现miRNA对多种生物学过程有重要的调控作用,如细胞的有丝分裂、分化、增殖、凋亡,个体的生长发育等,其控制着体内约1/3蛋白基因的表达。miR-146a是miRNA家族的一员,近年来细胞及分子生物学研究发现其与肝脏疾病的发生发展有关。该文就miR-146a在肝脏疾病发生发展中的作用作一综述,以期提供潜在的诊断和治疗靶点,并为肝脏疾病研究提供思路。     

脑梗死患者血清miR-181c、miR-128b表达水平及其与90天预后的相关性

目的探讨脑梗死患者血清微小RNA(miRNA)miR-181c、miR-128b表达水平及其与90天预后的相关性,为miRNA在脑梗死诊断和治疗上提供参考意义。方法选取128例脑梗死患者以及同期108例健康体检者作为研究对象,分别作为研究组和对照组。比较两组研究对象的miR-181c和miR-128b表达水平,并分析miR-181c、miR-128b表达水平与疾病严重程度的相关性以及脑梗死相关危险因素;根据90天随访的预后情况分为预后良好组和预后不良组,并对影响90天预后的相关因素进行单因素和Logistic回归分析,探讨影响疾病发生及预后的独立影响因素。结果研究组吸烟、高血脂、高血压、糖尿病以及心房颤动比例明显高于对照组(P0.05),研究组患者miR-181c、miR-128b表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05),Logistic回归分析结果显示糖尿病、miR-181c、miR-128b表达水平是脑梗死的独立危险因素(P0.05);Spearman相关性分析显示急性脑梗死患者病情严重程度与血清miR-181c和miR-128b水平呈正相关(r=0.867,P=0.005;r=0.885,P=0.002);预后不良组患者发生高血压、糖尿病、心房颤动的比例和入院时NIHSS评分以及血清miR-181c、miR-128b水平均显著高于预后良好组(P0.05),Logistic回归分析结果显示入院时NIHSS评分及血清miR-181c、miR-128b水平均与脑梗死患者90天预后存在密切相关性(P0.05)。结论脑梗死患者血清miR-181c、miR-128b表达水平显著高于健康人群,糖尿病、miR-181c、miR-128b表达水平是脑梗死的危险因素(P0.05),miR-181c、miR-128b表达水平与患者脑梗死严重程度存在显著正相关,且两者表达水平以及NIHSS评分均与急性脑梗死患者90天预后存在密切联系。     

转化生长因子-β1促进miR-181a表达诱导肝星状细胞-T6细胞活化

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对miR-181a表达的影响,以及miR-181a对体外培养的肝星状细胞(HSC)-T6细胞的作用。方法 TGF-β1处理HSC-T6细胞后,检测miR-181a和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。miR-181amimics转染HSC-T6细胞后,Western印迹检测α-SMA和Ⅰ型胶原a2链(collagenⅠa2,ColⅠA2)蛋白表达,CCK-8计数法检测细胞增殖。结果 TGF-β1处理组细胞中miR-181a和miR-181b表达量较对照组细胞明显升高,miR-181a转染组细胞中α-SMA和ColIA2表达量明显高于对照组细胞,miR-181a对HSC-T6增殖无明显影响。结论在HSC-T6中,TGF-β1促进miR-181a表达,miR-181a可促进HSC-T6细胞活化和分泌胶原,进一步明确了TGF-β1促进HSC-T6活化的机制。     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中miR-181a和SIRT1的表达关系及意义

目的探讨白内障晶状体上皮细胞微小RNA-181a(miR-181a)与沉默信息调节因子(SIRT)1的表达关系,研究其在年龄相关性白内障患者的诊治及病情评估方面的临床意义。方法选取诊断为年龄相关性白内障患者62例为白内障组,另选取同期近视矫正手术患者42例为对照组,利用RT q-PCR法,检测两组晶状体上皮细胞miR-181a与SIRT1表达水平;Pearson法测定miR-181a与SIRT1相关性;利用Lipofectamine 2000转染miR-181a模拟物和抑制剂,调节人晶状体上皮细胞miR-181a表达水平,RT q-PCR法检测SIRT1表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测晶状体上皮细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱氨酸(GSH)、谷胱氨酸过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果与对照组相比,白内障组miR-181a表达水平显著升高,SIRT1表达水平显著降低(P<0.05);Pearson相关分析显示,miR-181a和SIRT1呈负相关关系(r=-0.719,P<0.05);miR-181a模拟物组SIRT1表达水平显著低于模拟物阳性对照组(P<0.05),miR-181a抑制剂组,SIRT1表达水平显著高于抑制剂阴性对照组(P<0.05);白内障组SOD、GSH、GSH-Px水平明显低于正常组(P<0.05),MDA水平明显高于正常组(P<0.05);miR-181a表达水平与SOD、GSH、GSH-Px因子呈负相关关系(r=-0.702,-0.739,-0.776),与MDA水平呈正相关关系(r=0.679);SIRT1表达水平与SOD、GSH、GSH-Px呈正相关关系(r=0.699,0.743,0.763),与MDA水平呈负相关关系(r=-0.684)。结论白内障晶状体上皮细胞中miR-181a高表达,SIRT1低表达,miR-181a可调控人晶状体上皮细胞中SIRT1表达;SIRT1低表达可促使晶状体上皮细胞凋亡,从而影响或导致了年龄相关性白内障的发病。     

外周血miR-10a和miR-29a水平对早期脓毒症急诊患者预后有预测作用

目的：探讨外周血miR-10a、miR-29a水平对早期脓毒症急诊患者预后的预测作用。方法：收集早期脓毒症急诊患者94例为观察组，选取同期82例健康体检者为对照组。其中观察组根据病情严重程度分为轻、中、重度3组。比较2组外周血miR-10a和miR-29a的表达水平，以及观察组不同预后患者治疗前miR-10a和miR-29a的表达水平。分析外周血miR-10a、miR-29a表达水平及miR-10a联合miR-29a检测对早期脓毒症急诊患者预后的预测价值。结果：观察组外周血miR-10a和miR-29a表达水平高于对照组（P均<0.05）；观察组病情严重程度不同患者外周血miR-10a和miR-29a表达水平中，与轻度组比较，中度组和重度组患者表达水平升高，而重度组患者又显著高于中度组（P均<0.05）；治疗1个月后，预后不良者18例，预后良好者治疗前外周血miR-10a和miR-29a的表达水平低于预后不良者（P均<0.05）；miR-10a、miR-29a表达水平的最佳截断点分别为2.74和1.39，miR-10a、miR-29a两者联合检测的灵敏度、特异度和曲线下面积（AUC）均高于单独检测，分别为83.33%、85.53%和0.895。结论：早期脓毒症急诊患者外周血miR-10a、miR-29a表达水平均升高，可反应患者病情严重程度，两者联合检测预测早期脓毒症急诊患者的预后效能较高。     

血清微小RNA-92a、微小RNA-34a、微小RNA-181c水平对急性脑梗死诊断及预后评估有重要价值

目的：探究血清微小RNA-92a(miR-92a)、miR-34a、miR-181c诊断急性脑梗死(ACI)的价值，并分析各指标评估患者预后的临床意义。方法：选取ACI患者80例为研究组，另选取同期健康体检者80例为对照组。比较2组血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平，并比较研究组不同病情患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平，分析各指标与神经功能缺损程度、梗死体积的相关性，及对ACI的诊断价值，分析各指标对预后的评估价值。结果：研究组血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平高于对照组(P均<0.05);重度、中度和轻度神经功能缺损患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平依次降低(P均<0.05);梗死体积>10 cm³、5～10 cm³、<5 cm³患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平依次降低(P均<0.05);ACI患者血清miR-92a、miR-34a、miR-181c水平与美国国立卫...     

狗脊多糖通过miR-181c调控IL-1β介导的骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡

目的 探讨狗脊多糖(CBPS)通过调节miR-181c表达调控软骨细胞增殖和凋亡的潜在机制.方法 以白细胞介素(IL)-1β联合CBPS干预软骨细胞,qRT-PCR、噻唑蓝(MTT)和流式细胞仪检测细胞中miR-181c表达及细胞增殖和凋亡.检测过表达miR-181c联合IL-1β处理对细胞增殖和凋亡的影响.采用MTT...     

血浆miR-181a-5p可评估急性脑梗死的病情及预后

摘要 目的：探讨急性脑梗死（ACI）患者血浆中微小RNA(miR)-181a-5p的表达水平及临床价值。方法：收集148例ACI患者（ACI组）的临床资料，根据美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分将其分为：轻度72例、中度35例、重度41例。ACI患者发病4.5h内用阿替普酶静脉溶栓治疗。根据出院后第90天的预后情况，将患者分为预后良好组（102例）和预后不良组（46例）。另选取同期健康体检者100例为对照组。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测血浆miR-181a-5p表达水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆中凋亡分子B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase-1）表达水平。相关性检验用Pearson分析；用Logistic多因素回归分析影响预后的因素；绘制受试者工作特征（ROC）曲线，分析血浆miR-181a-5p预测预后的价值，计算曲线下面积（AUC）、灵敏度及特异性。结果：与对照组比较，ACI组血浆miR-181a-5p和caspase-1表达水平较高，而Bcl-2表达水平较低（P均＜0.05）。miR-181a-5p与caspase-1呈正相关（r=0.176，P=0.032），与Bcl-2呈负相关（r=-0.209，P=0.011）。轻度、中度和重度ACI患者血浆miR-181a-5p表达水平分别为（1.35±0.32）、（1.79±0.20）、（2.34±0.59），经单因素方差分析，组间比较差异有统计学意义（F=32.001，P＜0.001），病情越重，血浆miR-181a-5p表达水平越高。与预后良好组比较，预后不良组年龄更大，入院时NIHSS评分、血浆miR-181a-5p和caspase-1水平较高，而Bcl-2水平较低（P均＜0.05）。多因素分析显示，年龄、入院时NIHSS评分及血浆miR-181a-5p水平是ACI患者预后不良的独立影响因素（OR=1.532、1.832、3.111，P均＜0.05）。血浆miR-181a-5p预测不良预后的AUC为0.856（95%CI：0.815~0.886，P＜0.01），灵敏度为89.56%，特异性为70.12%。结论：ACI患者血浆中miR-181a-5p表达水平明显升高，对ACI病情和预后的早期评估有一定价值。     

miR-34a在心血管疾病中的作用及机制研究进展

微小RNA(miR)是心血管疾病发生发展的重要调控因子。其中,miR-34a因广泛参与心血管疾病的病理生理过程成为目前研究热点。在冠状动脉粥样硬化性心脏病等心血管疾病中均存在miR-34a的异常表达。本文就miR-34a对心血管疾病的作用及其机制研究进展进行综述,为寻求心血管疾病标志物及治疗靶点提供新思路。     

miR-130a/b在消化系统疾病中的研究进展

自1993年在线虫中首次发现微小RNA(microRNA,miRNA)之后,人们对其的发生、功能、作用方式等认识逐渐完善,随着方法学的进步及实验仪器的完善,其研究热度逐步提升。miR-130家族在肿瘤方面研究甚广,但尚未在消化系统疾病方面做出详细回顾,本文旨在以作用靶点及通路为重点阐述miR-130家族在消化系统疾病中的作用。     

miR-30a对缺血再灌注损伤大鼠心肌组织的保护作用及机制

目的:研究miR-30a对缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及其机制。方法:SD大鼠, 32只随机分为假手术组、模型组、Ad-control组、Ad-miR-30a组,每组各8只。除假手术组外,各组大鼠均通过结扎左冠状动脉45 min后恢复血流的方法制备心肌缺血再灌注模型,其中Ad-control组和Ad-miR-30a组分别转染Ad-control腺病毒空白载体和Ad-miR-30a腺病毒。采用qRT-PCR法检测各组大鼠心肌组织中miR-30a的相对表达量。UCG法检测左心室舒张末压(LVEDP)左心室内压峰值(LVSP),左心室压力上升和下降最大变化速率(±dp/dt_(max))等指标,评价miR-30a对大鼠心功能的影响。通过原位细胞凋亡(TUNEL)法检测各组大鼠心肌细胞的凋亡情况。蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织中Cleaved caspase-3、Caspase-3、 Bax、Bcl-2等蛋白的表达变化。结果:与假手术组相比较,模型组和Ad-control组大鼠miR-30a的相对表达量明显降低(P0.05),Ad-miR-30a组miR-30a的相对表达量显著提高(P0.01)。miR-30a的过表达能显著上调因为缺血再灌注损伤而下降的LVSP,±dp/dt_(max)值(P0.05),同时明显下调LVDEP值(P0.05),显著降低心肌细胞凋亡率(P0.05),显著降低心肌组织中的Cleaved caspase-3/Caspase-3、 Bax/Bcl-2的蛋白表达水平的比值(P0.01)。结论:miR-30a通过抑制心肌细胞凋亡显著改善缺血再灌注损伤,有可能成为缺血性心血管疾病的新治疗靶点。     

神经调节蛋白在脑缺血中的保护作用

神经调节蛋白能调节胶质细胞的生长和分化以及小脑颗粒细胞沿胶质细胞的迁移,参与突触的形成,抑制脑缺血再灌注损伤诱导的神经元凋亡、胶质反应和炎症反应,诱导有关神经营养因子的表达,具有神经保护作用。     

miR-181a-5p调控LIF的表达调节胰腺腺泡细胞凋亡的分子机制

背景急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)发病迅速,并发全身感染,因此早期的高效治疗对控制病情起到关键作用.微小RNA(microRNA, miRNA)在AP中的作用机制及临床应用的研究成为近几年的热点.其在AP发生发展及转归中的作用有助于为AP的诊断和治疗提供新思路.目的探讨miR-181a-5p对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞AR42J凋亡的影响及机制.方法运用ELISA法检测雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞中AMY、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;将Cerulein+anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、Cerulein+anti-miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p)、Cerulein+si-con组(转染si-con)、Cerulein+si-白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)组(转染si-LIF),均用脂质体法转染至AR42J细胞,再用15 nmol/L的雨蛙素处理8h;流式细胞术法检测各组细胞的凋亡; qRT-PCR检测各组细胞中miR-181a-5p mRNA和LIF mRNA的表达; Western blot检测各组细胞中LIF、caspase-3的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性.结果与对照组相比,雨蛙素处理8 h是AMY、TNF-α和IL-6的含量均升高的时间点,且细胞凋亡率显著降低(P 0.05);与Control组相比,Cerulein组AR42J细胞中miR-181a-5p mRNA表达显著下调, LIF mRNA和蛋白表达显著上调(P0.05);过表达miR-181a-5p、敲减LIF均可抑制雨蛙素诱导的AR42J细胞凋亡的促进作用; miR-181a-5p可抑制野生型LIF细胞的荧光活性,且可负向调控LIF的蛋白表达.结论 miR-181a-5p可抑制雨蛙素诱导的AR42J细胞的凋亡,其机制可能与靶向LIF有关,将可为AP的治疗提供新方向.     

炎症性肠病患者血清miR-181a-5p和miR-126表达水平及其与肠道菌群相关性的研究

目的 探讨miR-181a-5p、miR-126在炎症性肠病(IBD)患者血清中的表达及其与肠道菌群的相关性.方法 收集2016年10月至2018年12月保定市第二医院收治的100例活动期IBD患者作为研究组,根据IBD类型分为溃疡性肠炎(UC)组(60例)和克罗恩病(CD)组(40例),另选择同期在本院体检的50名健...