曲美他嗪对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响

目的探讨曲美他嗪对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3表达的影响。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和实验组各15只。对照组进行模拟手术,模型组和实验组采用肾上腹主动脉缩窄法建立心力衰竭大鼠模型。实验组给予曲美他嗪10 mg·kg~(-1)·d~(-1)持续灌胃28 d。测量3组左室舒张末压力(LVEDP)、左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax);检查3组心肌细胞凋亡比例、Caspase-3及细胞色素C蛋白表达水平。结果实验组LVEDP显著高于对照组(P<0.05),而显著低于模型组(P<0.05);实验组±dp/dtmax显著高于模型组(P<0.05),而显著低于对照组(P<0.05);对照组、实验组和模型组心肌细胞凋亡指数(AI)分别为(1.87±0.32)%,(22.52±5.29)%和(39.71±12.58)%,实验组心肌细胞凋亡比例、Caspase-3、细胞色素C蛋白表达明显低于模型组(P<0.05),而显著高于对照组(P<0.05);结论曲美他嗪可通过抑制心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Caspase-3、细胞色素C蛋白表达来改善心脏功能。     

曲美他嗪与雷米普利对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的影响

目的探讨曲美他嗪与雷米普利单用及联合应用对慢性心力衰竭大鼠左心室心肌细胞凋亡情况以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达水平的影响。方法雄性Wistar大鼠50只随机分为假手术组、模型组、曲美他嗪组、雷米普利组和联合用药组(曲美他嗪+雷米普利),每组10只。采用肾上腹主动脉缩窄法制作慢性心力衰竭模型,观察各组左心室舒张末压、左心室压力最大上升及下降速率(±dp/dtmax);TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数;SP免疫组织化学法检测各组大鼠左心室心肌Caspase-3水平的表达,RT-PCR测定Caspase-3mRNA水平。结果与模型组比较,曲美他嗪组、雷米普利组和联合用药组左心室舒张末压、心肌凋亡指数明显降低,±dp/dtmax明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),Caspase-3蛋白及mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义[(0.14±0.01、0.14±0.02和0.08±0.02)vs(0.22±0.02),(0.54±0.02、0.54±0.02和0.32±0.02)vs(0.91±0.02),P<0.01]。结论曲美他嗪与雷米普利单用及联合应用均可有效改善心功能、抑制心肌细胞凋亡,联合用药的疗效优于单独用药。     

雷米普利对慢性心力衰竭大鼠肾脏细胞凋亡、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3及细胞色素C的影响

目的观察雷米普利对慢性心力衰竭大鼠肾脏细胞凋亡、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3和细胞色素C的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法平均分组,正常对照组10只,余均采用肾上腹主动脉缩窄法建立CHF大鼠模型,将建模成功的20只随机均分为模型组和雷米普利组,分别采取苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠肾脏细胞的形态结构,原位末端标记法(TUNEL)测定肾脏细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾脏组织中caspase-3及细胞色素C mRNA的表达;Western印迹法检测肾脏组织caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白含量。结果与正常对照组相比,模型组肾脏组织凋亡指数(AI)显著增高,caspase-3和细胞色素C mRNA及蛋白表达明显增加(P0.01);与模型组相比,雷米普利组肾脏组织AI显著减少,caspase-3和细胞色素C mRNA及蛋白表达量均显著降低(P0.01)。结论雷米普利能够降低CHF大鼠肾脏组织凋亡率,减少肾组织中caspase-3和细胞色素C mRNA及蛋白表达,其抑制肾脏细胞凋亡的作用可能是改善肾功能的作用机制。     

福辛普利对实验性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和Fas、Fas配体基因表达的影响

目的:探讨实验性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和心肌组织Fas、Fas配体(FasL)蛋白及其信使核糖核酸(mRNA)表达的变化及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)干预的影响及意义.方法:将30只健康Wistar大鼠,随机分为假手术组(n=10)、慢性心力衰竭组(n=10)和福辛普利组(n=10).通过缩窄Wistar大鼠腹主动脉建立慢性心力衰竭模型,以福辛普利进行干预,对照观察血流动力学、心肌细胞凋亡、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达的变化.结果:与假手术组相比,慢性心力衰竭组左心室舒张末压、心率显著升高(P＜0.01);收缩压、舒张压、平均压、左心室收缩压、左心室内压最大收缩率、左心室内压最大舒张率显著降低(P＜0.01).福辛普利组舒张压、左心室收缩压、左心室舒张末压、心率显著低于慢性心力衰竭组(P＜0.01),左心室内压最大收缩率、左心室内压最大舒张率显著高于慢性心力衰竭组(P＜0.01).慢性心力衰竭组心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达水平显著高于假手术组(P＜0.05),福辛普利组心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达水平显著低于慢性心力衰竭组(P＜0.05).结论:慢性心力衰竭的发生、发展过程中有心肌细胞凋亡的变化及Fas/FasL系统的参与;心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达水平增高,福辛普利长期干预慢性心力衰竭,能够降低细胞凋亡及Fas、FasL基因的表达,可能与其减少Fas/FasL系统介导的细胞凋亡的发生、改善心肌功能有关.     

慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡与心功能的关系及福辛普利和氯沙坦的干预作用

目的:探讨心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡与心功能的关系及福辛普利和氯沙坦的干预作用。方法:雌性SD大鼠行左前降支结扎术致急性心肌梗死,术后4周行多普勒超声心动图检测,成功制作慢性心力衰竭(左心室射血分数≤0．45)大鼠36只,随机分成:福辛普利组(50 mg／kg·d,n=12);氯沙坦组(30 mg／kg·d,n=12);生理盐水组(1 mL／d,n=12)。另设假手术组(n=8)不结扎冠状动脉。治疗8周后,再次行超声心动图检测。原位末端标记法(TUNEL)和脱氧核糖核酸(DNA)梯形谱(DNA ladder)检测心肌细胞凋亡。结果:3组心力衰竭大鼠DNA电泳均显示凋亡特征性DNA ladder。与假手术组比较,生理盐水组各项心功能指标显著下降,凋亡指数显著升高(P<0．05)。与生理盐水组比较,福辛普利组和氯沙坦组各项心功能指标显著改善,福辛普利组(P<0．05)和氯沙坦组(P<0．05)凋亡指数显著降低。左心室射血分数与临近梗塞区心肌凋亡细胞数量之间呈负相关关系(r=-0．754,P<0．001)。结论:心肌细胞凋亡与心力衰竭时心功能不断恶化相关。福辛普利和氯沙坦能抑制心肌细胞凋亡并改善左心室收缩功能。     

同型半胱氨酸硫内酯诱导半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12途径对内皮细胞凋亡的影响

目的探讨同型半胱氨酸硫内酯(HTL)是否通过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)12凋亡途径影响内皮细胞生长。方法体外培养内皮细胞ECV304,先将0、50、100和200μmol/L的HTL干预细胞24h,MTT法检测细胞增殖抑制率;随后以200μmol/L的HTL干预0h、3h、16h和24h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,再以200μmol/L HTL刺激细胞为观察组(3、16和24h),不加HTL刺激的细胞为对照组,2组分别采用免疫组织化学染色和Western Blot法检测Caspase-12、Caspase-3和Bcl-2蛋白表达情况。结果 100和200μmol/L的HTL作用细胞24h,细胞活性分别为0.76±0.01、0.73±0.01;200μmol/L HTL对细胞的抑制作用具有时间依赖性,与0h比较,3、16和24h的细胞活性下降明显(0.87±0.04、0.83±0.04、0.78±0.01 vs 0.90±0.07,P<0.01)。与对照组比较,观察组Caspase-12蛋白、Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01);Bcl-2蛋白先增高后降低(P<0.01)。结论 Caspase-12途径参与HTL致细胞凋亡的过程,Bcl-2也参与其调控。     

重构型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达载体诱导人肺腺癌细胞凋亡的意义

目的构建天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达载体,观察Caspase3表达载体对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法应用基因重组方法,建立重构型Caspase3基因的真核表达系统pcDNA3.1revCaspase3质粒和野生型pcDNA3.1Caspase3质粒。将实验细胞分为3组转染pcDNA3.1revCaspase3质粒组,转染pcDNA3.1Caspase3质粒组,转染pcDNA3.1质粒空白对照组。前2组用Caspase3抑制剂DEVDfmk干预。应用Caspase3酶活性分析、流式细胞仪及甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测A549细胞Caspase3酶活性变化及细胞凋亡和增殖情况。结果(1)pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组的A549细胞Caspase3酶活性分别是(11.87±0.92)%、(5.34±0.38)%(t=16.02,P<0.01);用Caspase3抑制剂DEVDfmk干预后,pcDNA3.1revCaspase3质粒组酶活性为(7.04±0.48)%,仍明显高于野生型pcDNA3.1Caspase3质粒组的(4.51±0.20)%(t=11.86,P<0.01)。(2)流式细胞分析结果显示,pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组和pcDNA3.1质粒组的A549细胞凋亡率分别是(20.1±3.5)%、(7.8±2.8)%、(1.4±0.3)%,3组差异有统计学意义(F=44.01,P<0.01)。(3)MTT比色检测显示pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组和pcDNA3.1质粒组的A549细胞生存率分别是(35.7±1.1)%、(72.8±2.9)%、(85.4±4.8)%,转染pcDNA3.1revCaspase3质粒组生存率明显低于其他两组(F=375.07,P<0.01)。结论pcDNA3.1revCaspase3在A549细胞内有较强的自身活化能力,对Caspase3抑制剂抵抗作用较强,可明显诱导A549细胞凋亡并抑制A549细胞生长。     

福辛普利联合普伐他汀对慢性心力衰竭患者心功能及血清细胞因子的影响

目的观察福辛普利联合普伐他汀对慢性心力衰竭患者心功能及血清细胞因子的影响。方法将84例慢性稳定型心力衰竭患者随机分为观察组和对照组,各42例。对照组在常规治疗的基础上加用福辛普利;观察组在常规治疗的基础上加用福辛普利联合普伐他汀治疗,疗程均为2个月。比较两组治疗前后左心室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVD)、血脂水平、血清白介素6(IL-6)、白介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果治疗前两组上述各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组LVD低于对照组,LVEF高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组IL-6、TNF-α低于对照组,IL-4高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论福辛普利联合普伐他汀较单一使用福辛普利能更好地改善CHF患者的心功能,其机制可能与两者联用能更好地抑制机体炎症反应、降低血脂水平、抑制心室重构有关。     

复方丹参滴丸及其与福辛普利联用对高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨复方丹参滴丸(DSP)及其与福辛普利联用对自发性高血压大鼠(SHRs)心肌细胞凋亡的影响.方法将48只8周龄雄性SHRs随机分为6组:DSP小剂量组、DSP大剂量组、福辛普利组、DSP小剂量与福辛普利联用组、DSP大剂量与福辛普利联用组、SHRs对照组.6组分别干预8周后测大鼠尾动脉收缩压;SHRs左心室细胞凋亡率及凋亡相关基因蛋白表达;电镜下心肌组织超微结构.结果与对照组比较DSP可明显降低心肌细胞凋亡率(P<0.01或P<0.05),并与福辛普利联用时可进一步提高后者的抗左室肥厚与心肌细胞凋亡效应(P<0.01或P<0.05).结论 DSP及其与福辛普利联用可改善SHRs左室心肌细胞凋亡.     

尼可地尔调控半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3对猪冠状动脉微栓塞后心肌凋亡的影响

目的探讨尼可地尔调控半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)对猪冠状动脉微栓塞(CME)后心肌凋亡的影响。方法选择12周龄健康小型猪15只,随机分为假手术组、CME组、尼可地尔组,每组5只。模型建立后12 h采用心脏超声检测心功能,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,Western blot检测活化caspase-3表达水平。结果与假手术组比较,CME组左心室舒张末期内径(LVEDD)明显升高,CME组和尼可地尔组LVEF、左心室短轴缩短率(LVFS)及心输出量(CO)明显降低(P 0. 05);与CME组比较,尼可地尔组LVEF、LVFS及CO明显升高,LVEDD明显降低(P 0. 05)。与假手术组比较,CME组肌钙蛋白Ⅰ明显升高[(0. 325±0. 128) ng/ml vs (0. 058±0. 028)ng/ml,P 0. 05];与CME组比较,尼可地尔组肌钙蛋白Ⅰ明显降低[(0. 156±0. 089) ng/ml vs (0. 325±0. 128) ng/ml,P 0. 05]。与假手术组比较,CME组心肌细胞凋亡指数和活化caspase-3表达明显升高(P 0. 05);与CME组比较,尼可地尔组心肌细胞凋亡指数和活化caspase-3表达明显降低(P 0. 05)。结论尼可地尔能够通过调控caspase-3降低猪CME后心肌凋亡。     

福辛普利对慢性心力衰竭血清白细胞介素-6的影响

目的　探讨老年慢性心力衰竭 (CHF)患者血清白细胞介素 6(IL 6)的变化及福辛普利对其影响。　方法 　采用双抗体夹心ELISA法检测 3 1例老年CHF患者及 18例健康者血清IL 6水平 ,并将老年CHF患者分为常规治疗组 ( 14例 )和常规治疗 福辛普利治疗组 ( 17例 )共观察 3周。　 结果　①老年CHF患者血清IL 6水平显著高于对照组 (P <0 0 1) ,且与左室射血分数 (LVEF)呈负相关 (r =-0 5 5 ,P <0 0 5 ) ;②经 3周治疗后福辛普利组患者IL 6水平明显降低 (P <0 0 5 ) ,且伴有心率明显下降 (P <0 0 5 )和LVEF明显增高 (P <0 0 5 )。　 结论 　老年CHF患者存在IL 6水平明显增高 ,并与左室收缩功能呈负相关 ,福辛普利可降低血清IL 6水平有益于老年CHF患者心功能改善。     

Caspase-3在慢性心力衰竭大鼠心肌重塑中动态表达及意义

目的 探讨慢性心力衰竭大鼠心肌内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达及意义.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为四组,假手术组、心力衰竭1 d组、7 d组、14 d组各10只.以缩窄大鼠腹主动脉,造成左心室压力负荷,制备慢性心力衰竭大鼠模型.观察和比较成模后1 d、7 d、14 d及假手术组左心室肌重量指数,Masson染色后对比心肌胶原含量,免疫组化法测定心肌中caspase-3蛋白表达水平.结果 腹主动脉缩窄术后各组大鼠均发生左室重塑和纤维化,左心室肌重量指数、胶原含量及caspase-3蛋白表达均明显高于假手术组;caspase-3于正常心肌内表达较少,而在心力衰竭后心肌内表达则明显增多,且随着心力衰竭程度的加重而表达增多.结论 caspase-3可能参与了大鼠压力负荷性心肌重塑的发生和发展,其水平的高低与慢性心力衰竭的严重程度密切相关.     

慢性氯化钴处理对Caspase-3凋亡基因在糖尿病大鼠心肌梗死区表达的影响

目的:探讨慢性氯化钴处理对GK糖尿病大鼠血糖及心肌细胞凋亡的影响。方法:应用体重200~250g的雄性GK糖尿病大鼠及其对照雄性Wistar大鼠,制作大鼠在体心梗模型,制作前测量血糖,手术成功后大鼠被分为六组:Wistar假手术组、Wistar心梗组、Wistar心梗+氯化钴组、GK假手术组、GK心梗组和GK心梗+氯化钴组,每组至少存活6只。3周后,测量血糖,剪取心脏,检测缺血坏死区Caspase-3凋亡基因的表达。结果:(1)术后3周,与GK假手术组及心梗组相比,GK心梗+氯化钴处理组血糖降低[(27.73±2.58)mmol/L、(27.87±3.18)mmol/L比(16.3±2.15)mmol/L],P均<0.05;(2)与GK心梗组相比,GK心梗+氯化钴处理组Caspase-3光密度值[(0.84±0.03)比(0.70±0.03)]及mRNA表达[(0.64±0.03)比(0.52±0.03)]显著减少,P均<0.05;(3)Wistar心梗组和Wistar心梗+氯化钴组血糖、Caspase-3光密度值及mRNA表达未见明显差异(P均>0.05)。结论:慢性氯化钴处理可降低GK糖尿病大鼠血糖,减少Caspase-3凋亡基因在缺血坏死区的表达。     

Caspase-3在慢性心力衰竭大鼠心肌重塑中动态表达及意义

目的探讨慢性心力衰竭大鼠心肌内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）表达及意义。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为四组,假手术组、心力衰竭1d组、7d组、14d组各10只。以缩窄大鼠腹主动脉,造成左心室压力负荷,制备慢性心力衰竭大鼠模型。观察和比较成模后1d、7d、14d及假手术组左心室肌重量指数,Masson染色后对比心肌胶原含量,免疫组化法测定心肌中caspase-3蛋白表达水平。结果腹主动脉缩窄术后各组大鼠均发生左室重塑和纤维化,左心室肌重量指数、胶原含量及caspase-3蛋白表达均明显高于假手术组;caspase-3于正常心肌内表达较少,而在心力衰竭后心肌内表达则明显增多,且随着心力衰竭程度的加重而表达增多。结论caspase-3可能参与了大鼠压力负荷性心肌重塑的发生和发展,其水平的高低与慢性心力衰竭的严重程度密切相关。     

咪达普利与福辛普利对糖尿病大鼠心肌超微结构的影响

目的 用咪达普利(达爽)及福辛普利(蒙诺)两种血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对实验性糖尿病大鼠进行早期干预,观察两药在改善糖尿病大鼠心肌超微结构方面的作用.方法 用链脲佐菌素对30只SD大鼠进行腹腔注射,建立实验性糖尿病大鼠模型.将建模成功的动物随机分为糖尿病组(9只),咪达普利干预组(9只),福辛普利干预组(10只),另外取10只SD大鼠作为正常对照组.10 w后,观察各组大鼠心肌的超微结构.结果 糖尿病组大鼠的心肌肌原纤维走行紊乱,肌节破坏断裂,长短不一,肌丝灶性溶解、消失;闰盘排列有断裂现象,线粒体肿胀变形、嵴稀疏、排列紊乱,结构不清.心肌内微血管基底膜增厚,间质胶原纤维增生.咪达普利治疗组与福辛普利治疗组心肌超微结构均有所改善,福辛普利效果更佳.结论 咪达普利和福辛普利均可延缓实验性糖尿病大鼠心肌超微结构的病理性改变,后者优于前者.     

慢性心力衰竭患者血清E选择素的变化及福辛普利对其影响

目的 :探讨慢性心力衰竭 (心衰 )患者血清E选择素的变化及福辛普利 (fosinopril)对其影响。方法 :采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法检测 40例慢性心衰患者及 2 0例对照组血清E选择素水平。并将慢性心衰患者分为常规治疗组 (19例 )和福辛普利组 (2 1例 ) ,共观察 3周。结果 :①慢性心衰患者血清E选择素水平显著高于对照组 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1)。②常规治疗组和福辛普利组患者经治疗后较治疗前血清E选择素水平和心脏结构均无明显变化 ,但福辛普利组患者经治疗后较治疗前心率明显下降 ,左心室射血分数 (LVEF)明显增高 ,均有显著性差异 (P均 <0 0 5 )。结论 :慢性心衰患者存在血清E选择素水平增高 ,但血清E选择素水平与左心室收缩功能和心脏结构无关。福辛普利治疗可改善心功能 ,但不影响血清E选择素水平     

曲美他嗪干预对心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体超微结构、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白、细胞色素C蛋白表达的影响

目的:探讨曲美他嗪干预对心力衰竭(心衰)大鼠左心室心肌细胞线粒体超微结构、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白和细胞色素C蛋白表达的影响。方法:雄性wistar大鼠30只随机分为假手术组、心衰模型组、曲美他嗪组,每组10只。除假手术组外,其余两组大鼠采用肾上腹主动脉缩窄法建立慢性心衰模型,其中曲美他嗪组大鼠给予曲美他嗪10 mg/(kg·d)灌胃4 w。观察各组左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升及下降速率(±dp/dtmax);苏木素伊红(HE)染色法观察大鼠心肌细胞形态结构;透射电镜观察心肌细胞线粒体超微结构;原位缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡指数(AI);SP免疫组织化学法检测各组大鼠左心室心肌细胞caspase-3蛋白、细胞色素C蛋白的表达。结果:与假手术组比较,心衰模型组大鼠心肌细胞线粒体形态发生明显改变,排列紊乱,空泡变性,LVEDP显著升高(P<0.01),±dp/dtmax明显降低(P<0.01),心肌细胞凋亡指数、caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与心衰模型组相比,曲美他嗪组大鼠心肌细胞线粒体形态变化明显改善,LVEDP明显下降(P<0.01),±dp/dtmax显著升高(P<0.01),心肌细胞凋亡指数、caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:曲美他嗪可有效改善心功能,抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与保护心肌细胞线粒体功能有关。     

半胱天冬氨酸蛋白酶-12小干扰RNA对小鼠肝细胞凋亡的阻抑

目的观察小鼠半胱天冬氨酸蛋白酶-12（caspase-12）基因特异性小干扰RNA（siRNA）构建的表达载体pRNAT-casp12对caspase-12基因的抑制及其对内质网应激介导的小鼠肝细胞凋亡的影响。方法以小鼠肝细胞株Hepa1-6为靶细胞，利用脂质体与重组质粒pRNAT-casp-2共转染，分别在转染24、48和72h后收集细胞，采用实时荧光定量PCR分析和Western印迹检测caspase-12的表达；利用毒胡萝b素（TG）诱导细胞，建立内质网应激介导的细胞凋亡模型，通过DNA梯带凝胶电泳检测，选出适合的诱导时间；TG诱导已转染了pRNAT—casp12的干扰组细胞后，以空质粒转染组为对照，利用Western印迹检测caspase-12蛋白表达水平的变化，通过DNA梯带凝胶电泳、流式细胞仪、Hoechst33258染色等方法检测细胞凋亡，观察caspase-12siRNA对细胞凋亡的影响。结果pRNAT—casp12转染细胞24、48和72h后，caspase-12mRNA的水平分别下降了45．6％、72．5％和59．5％；caspase-12蛋白表达下降了17．1％、37．3％和60．1％；2μmol／L TG处理细胞30h后，成功诱导细胞凋亡；与对照组相比，干扰组细胞经TG诱导后，caspase-12蛋白表达水平下降了54．6％，流式细胞仪检测发现早期调亡率下调了51．4％（P〈0．01）。结论小鼠caspase-12siRNA对Hepa1—6细胞caspase-12基因的表达具有显著的抑制作用，能够明显阻抑内质网应激介导的凋亡，有望发展成为新一代抗凋亡药物。     

强心合剂对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的：阐述强心合剂治疗充血性心力衰竭大鼠可能的作用机制。方法：建立腹主动脉缩窄所致后负荷过重的模型。实验疗程结束后，分别用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数。RT—PCR法检测心肌细胞凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA的表达，同时测量CHF大鼠左室重量指数(LVMI)，并分别以地高辛、卡托普利作为对照组进行比较。结果：强心合剂可降低左室重量指数(LVMI)。能调控心肌细胞凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA表达，即促进Bcl-2mRNA表达，抑制Bax mRNA表达，明显抑制心肌细胞凋亡(心肌细胞凋亡指数显著下降)。其疗效与卡托普利组相当，且与地高辛对照组比较无统计学意义。结论：强心合剂可能通过调控凋亡基因而抑制心肌细胞凋亡，从而延缓或部分逆转心脏重构的发生、发展。     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3在炎症性肠病中的差异表达

目的 研究血浆半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine-aspartic acid protease-3,caspase-3)与炎症性肠病患者临床疾病活动性的相关性及对疾病的诊断价值.方法 对克罗恩病患者、溃疡性结肠炎患者和正常对照者血浆中caspase-3的表达情况应用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行分析.进一步分析血浆caspase-3浓度与内镜下疾病活动性的相关性.通过受试者工作特征曲线(receiver-operating characteristic,ROC)观察炎症性肠病患者中血浆caspase-3水平的潜在临床及科研价值.数据处理使用GraphPad Prism 5.结果 克罗恩病患者血浆caspase-3水平显著高于正常对照组(P=0.0022),但溃疡性结肠炎患者血浆caspase-3水平与对照组无显著差异(P=0.6377).easpase-3表达水平在区分克罗恩病患者和溃疡性结肠炎患者中诊断价值较低(AUC=0.6339,P=0.0039).克罗恩病患者血浆caspase-3水平与内镜下疾病活动性无显著相关性(r=-0.089,P=0.5172).结论 克罗恩病患者血浆caspase-3表达水平增高,与溃疡性结肠炎及正常对照者存在差异.