用免疫组化法检测肾母细胞瘤过度表达基因蛋白在大鼠中枢神经系统的分布

为探讨肾母细胞瘤过度表达基因（ＮＯＶ）在中枢神经系统发育和分化过程中的作用，用免疫组织化学ＡＢＣ方法辅以微波抗原修复技术研究ＮＯＶ原癌基因蛋白的分布和定位。结果发现，ＮＯＶ蛋白在成年大鼠的中枢神经系统中有较为广泛的存在，其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑的部分核团、脑桥及脊髓前角。结果提示：ＮＯＶ基因在中枢神经系统的功能活动中可能起重要作用。有关研究正在深入进行中     

芳香化酶mRNA在小鼠脑内的表达及其分布

目的 研究芳香化酶ｍ（ＲＮＡ（ａｒｏｍａｔａｓｅ ｍＲＮＡ）在小鼠脑内的基因表达。方法 原位杂交组织化学和ＰＮＡ斑点杂交。结果 （１）斑点杂交结果显示,脑内芳香化酶ｍＲＮＡ在小鼠Ｅ１６－Ｐ３００整个发育过程中均有表达,表达高峰在生后６ｄ左右,成年后降至最低;（２）脑内芳香化酶ｍＲＮＡ主要定位于神经元;（３）芳香化酶ｍＲＮＡ在脑内的表达,阳性区域主要分布于大脑皮层,丘脑、下丘脑及边缘系统。其中,皮质锥体细胞层、内侧视前区、隔内侧核、海马各区锥体层、杏仁核群、扣带皮质、梨状前皮质及杏仁周皮质等部位阳性信号较强;中等强度的阳性信号见于丘脑腹内、外侧核,丘脑外侧背核、下丘脑室旁核、室周核等处。结论 以上结果进一步证明脑内芳香化酶的表达与脑发育存在一定的相关性,芳香化酶ｍＲＮＡ的表达部位与文献报道酶的活性分布基本一致;海     

大鼠斜角带核垂直支(VDB)的传入联系

用HRP法研究了VDB的传入联系。结果表明VDB的背、腹侧部均接受下列结构的传入:斜角带核水平支、内侧隔核、扣带皮质、梨状皮质、内嗅皮质、海马、下丘脑外侧核、下丘脑后核、乳头体上核、杏仁内侧核、杏仁皮质核、杏仁基底核内侧及外侧部、室周核、中央灰质腹外侧部、中缝背核、中缝正中核、脚间核、臂旁背侧核、被盖腹侧区及蓝斑。此外,VDB背侧部还接受杏仁外侧核后部、被盖背核的腹侧部及外侧部、嗅前核、未定带及连接核的投射。偶见屏状核投射到VDB背侧部;VDB腹侧部还接受外侧缰核内侧部及杏仁前区的少量投射。     

神经特异性转录因子DAT1 mRNA在大鼠中枢神经系统的定位

目的 观察神经特异性转录因子(DAT1)在大鼠中枢神经系统中的定位。方法 原位杂交组织化学染色。结果 在大鼠中枢神经系统中，DAT1 mRNA阳性反应产物主要位于胞质和突起内，DAT1 mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓。强阳性信号主要出现于嗅球、梨状皮质、纹状皮质、内嗅皮质、海马CA1区、齿状回、丘脑后外侧核、红核、被盖背侧核、延髓中央网状核、三叉神经运动核、舌下神经核、迷走神经核、楔束外核、疑核等部位；中等强度着色主要分布于大脑皮质Ⅱ～Ⅵ层、海马CA2区和CA3区、杏仁核、苍白球、内侧膝状体、外侧膝状体、视上核、未定带、弓状核、室旁核、黑质、中脑网状核、脑桥网状核、巨细胞网状核、外侧网状核、斜方体内侧核、前庭神经核、蜗神经背核、楔束核、中缝背核；在隔核、乳头体前核、上丘浅灰质层、下丘中央核、下丘外侧核、中央灰质、三叉神经中脑核、三叉脊束核、孤束核、下橄榄核、中央上核、小脑顶核、小脑间置核、小脑外侧核、脊髓灰质及丘脑的大部分核团可见弱的阳性细胞。结论 DAT1广泛分布于大鼠中枢神经系统内，其分布与多巴胺能神经分布密切相关，提示该基因对大鼠中枢神经系统活动，尤其是多巴胺能神经递质活动具有重要的调节功能。     

大鼠视前内侧区的传入性神经纤维联系,HRP,EB,NY法研究

本文应用轴突逆行运输HRP、EB、NY研究大鼠视前内侧区的传入性神经纤维联系。所用三种示踪剂结果基本一致。结果为:在外侧隔核、外侧嗅束核、杏仁内侧核、下丘脑外侧区、下丘脑腹内侧核和乳头体前腹核内观察到密集的标记细胞。在杏仁皮质核、杏仁中央核、下丘脑室旁核、下丘脑后核、弓状核、乳头体上核、丘脑腹核尾侧部、未定带、腹侧被盖区、脚间核、中缝正中核和背核内观察到较多标记细胞。在中脑中央灰质腹侧部、兰斑核、外侧臂旁核及海马腹下角内观察到少数标记细胞。     

大鼠间脑和皮质下端脑到前额叶皮质的传入投射——WGA-HRP法研究

本研究将 WGA-HRP 注射于25只大鼠前额叶皮质的前扣带回背部、前边缘区及岛叶无颗粒皮质背部,观察其间脑和皮质下端脑的传入联系。间脑的传入主要来自丘脑背内侧核,并有一定的局部定位。此外,丘脑的板内核群(中央外侧核、旁中央核、中央内侧核及束旁核)、腹侧核群(腹外侧核、腹内侧核、腹前核及腹后核)、中线核群(菱形核、连合核、带旁核及室旁核)、前内侧核、外侧缰核、后核及外侧核亦有到前额叶皮质的传入投射,且投射到前额叶皮质不同部位的数量不同。丘脑下部的传入主要来自外侧区、外侧视前区、尾侧大细胞核及乳头体上核,少量传入也可见于丘脑下部后区、背内侧核、腹内侧核及未定带。皮质下端脑的传入主要来自苍白球,其次为斜角带核、隔核、杏仁核及屏状核。在隔核中,除内侧隔核外还观察到外侧隔核,繖隔核及三角隔核亦投射到前额叶皮质。杏仁核中除杏仁外侧核、杏仁基底核外侧部及内侧部外,还观察到杏仁内侧核及杏仁皮质核亦有少量到前额叶皮质的传入。     

猫背海马和齿状回的传入纤维来源——HRP法研究

本文借助脑立体定位仪,在11只猫背海马和齿状回,分内、中及外侧三个区域内注入HRP,在以下主要部位见到酶标细胞:中缝背核、中央上核、兰斑核;丘脑前背核、丘脑前腹核、丘脑前内侧核、丘脑背内侧核、丘脑连合核、下丘脑外侧核、下丘脑内侧核、下丘脑后核、乳头上间质核、缰核及外侧膝状体核;内侧隔核、斜角带核及旁海马回。     

孤束核内生长抑素mRNA分布的原位杂交组化研究

用原位杂交法对孤束核尾侧部内生长抑素ｍＲＮＡ（ＳＯＭｍＲＶＡ）的分布进行了研究。ＳＯＭｍＲＮＡ位于不同平面孤束核内的神经元胞体和近端树突中，从ＳＯＭｍＲＮＡ阳性神经元一般为中小型细胞，呈圆形或椭圆形，分布于孤束核的内侧亚核、背侧亚核、背外侧亚核、连合亚核、中间亚核、腹侧亚枝和腹外侧亚核，其中以最后区上段及其吻侧平面的孤束核的内侧亚核、连合亚核、背侧亚核和背外侧亚核最为多见。结果提示ＳＯＭｍＲＮＡ阳性神经元在该核尾侧部各亚核内的广泛分布可能与该核参与对血压、心血管、呼吸、胃肠道等内脏活动的中枢控制有密切关系。生长抑素作为一种神经调制物可能在上述孤束核参与的植物性神经复杂整合功能中起着重要的作用。     

大鼠胃肠道伤害性刺激引起的中枢神经系统c-fos表达

本文应用Fos免疫组织化学(ABC法)对大鼠胃肠道伤害性刺激后中枢神经系统内的c-fos表达进行了观察,结果表明:(1)多数核团或部位的c-fos表达于伤害性刺激后的30min开始,2h达高峰,4h后逐渐降低,12h基本恢复正常。(2)Fos免疫反应阳性神经元呈双侧性分布,定位于胸髓(Rexed Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅹ层)、孤束核、延髓腹外侧区、臂旁外侧核、脑桥室周灰质、中脑导水管周围灰质、楔形核、中缝背核、下丘、丘脑(中线核团、背内侧核、腹后内侧核小细胞部)、外侧缰核、内侧膝状体大细胞部、下丘脑(背内侧核、腹内侧核、室周核等)、中央杏仁核、终纹床核、伏核、外侧隔核、梨状区皮质等。本文对以上部位的c-fos表达规律及其意义进行了初步探讨。     

大鼠间脑到前额叶皮质的传入投射——FG逆行追踪法

目的:探讨间脑中神经核向前额叶中央外侧区的投射.方法:用荧光金(FG)逆行追踪法对15只Wistar大鼠进行研究.结果:大鼠前额叶中央外侧区接受同侧丘脑前内侧核,丘脑前腹核;丘脑腹内侧核,丘脑腹外侧核,丘脑腹后内侧核,丘脑腹后外侧核;丘脑内侧背核中间部、外侧部、内侧部,丘脑外侧背核;丘脑后核,丘脑外侧后核;丘脑板内核的中央内侧核,中央旁核,中央外侧核,丘脑束旁核;丘脑中线核的丘脑带旁核,丘脑菱形核,丘脑连结核,丘脑室旁核;丘脑网状核,膝上核;下丘脑的室旁核,室周核,下丘脑后区,下丘脑外侧区,乳头体上核,乳头体内侧核.下丘脑外侧大细胞核,外侧视前区,内侧视前区及丘脑底部中的未定带,Forel区,丘脑底核的投射纤维.结论:前额叶中央外侧区接受广泛的间脑核团的投射,并存在着局部定位的关系.     

胚胎不同器官的细胞连接蛋白基因表达研究

目的 探索胚胎不同分化阶段、不同器官中细胞连接蛋白基因的表达规律及其与细胞分化的关系。方法 采用Ｃｏｎｎｅｘｉｎ系列基因探针,通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法,对不同胎龄的不同胚胎器官中Ｃｘ基因表达状态进行了研究。结果 （１）胚肿期肝、胃、肺、肾等器官中Ｃｘ３１、Ｃｘ４６、Ｃｘ３１．１不表达。（２）胚胎不同发育阶段连接蛋白基因呈不同表达状态。如Ｃｘ２６、Ｃｘ４３在３个月胎龄的肝脏中高度表达、Ｃｘ３２从第     

脑红蛋白mRNA在大鼠脑内的定位

目的：了解脑红蛋白（NGB）mRNA在大鼠脑内的定位。方法：用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学技术观察了NGBmRNA在成年大鼠脑中 的正常分布。结果：NGBmRNA在成年大鼠脑中有非常广泛的表达，其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑、下丘脑、嗅球及小脑等。NGBmRNA阳性物质定位于神经元的细胞质。结论：NGBmRNA在大鼠脑中有非常广泛的表达，提示NGB基因在中枢神经系统的功能活动中可能起重要作用。     

中枢神经大麻素受体分布的细胞类型研究

目的研究不同脑区大麻素CB1、CB2受体分布的细胞类型,探索大麻素受体在中枢神经系统中的可能作用。方法运用免疫荧光单标、双标的方法研究2种大麻素受体在成年大鼠不同脑区、不同类型细胞中的表达分布情况。结果成年大鼠不同脑区的神经元中有CB1、CB2受体的表达,海马、大脑皮层、脑干以及小脑的浦肯野细胞层的神经元有较高表达,且2种大麻素受体的表达差异较小,基底神经节区有中等表达,而胼胝体区未发现有神经元表达。少突胶质细胞及星型胶质细胞中发现CB1、CB2受体的表达。结论大麻素受体CB1、CB2在中枢神经系统多种类型的细胞中均有分布,可能通过多种途径参与神经系统功能调节。     

ISL-1在大鼠海马分布的免疫组织化学研究

islet－1基因是同源框基因LIM家族的一员。LIM同源框基因在中枢神经系统中的作用引起了人们越来越多的关注。本文作者等采用免疫组织化学ABC法研究了同源框基因islet－1的表达产物（ISL－1）在大鼠海马中的分布，结果表明ISL－1广泛分布于成年大鼠海马各区的神经元内。鉴于同源框基因的表达产物主要为参与基因的表达调控，提示该基因与成年大鼠海马神经元的基因表达调控有着密切的关系。     

Cellular pattern of type-I insulin-like growth factor receptor gene expression during maturation of the rat brain: comparison with insulin-like growth factors I and II.

Insulin-like growth factors have a number of potent trophic effects on cultured neural tissue and most if not all of these effects appear to be mediated by the type-I insulin-like growth factor receptor. In order to establish the identity of cell types expressing this receptor in the rat central nervous system during development and maturity, we have used in situ hybridization to map sites of type-I insulin-like growth factor receptor mRNA synthesis in the developing and adult rat brain. In order to identify possible local sources of peptide ligands for this receptor, we have also mapped the sites of insulin-like growth factors I and II mRNA synthesis in parallel brain sections. From early development onward, there is a uniform and stable pattern of type-I insulin-like growth factor receptor gene expression in all neuroepithelial cell lineages, in which regional variations reflect primarily differences in cell density. In addition to this generalized pattern, during late postnatal development, high levels of type-I insulin-like growth factor receptor gene expression are found in specific sets of sensory and cerebellar projection neurons in conjunction with abundant insulin-like growth factor-I gene expression in these same neurons. While insulin-like growth factor-I expression is confined to the principal neurons in each system, receptor mRNA is also found in local interneurons. In the cerebral cortex and hippocampal formation, type-I insulin-like growth factor receptor mRNA and insulin-like growth factor-I are concentrated in different cell populations: receptor mRNA is abundant in pyramidal cells in Ammon's horn, in granule cells in the dentate gyrus, and in pyramidal cells in lamina VI of the cerebral cortex. Insulin-like growth factor-I mRNA is found in isolated medium- to large-sized cells which are rather irregularly distributed throughout the hippocampus and isocortex. In the hypothalamus, receptor mRNA is concentrated in the suprachiasmatic nucleus but is in low abundance elsewhere, including the median eminence, while insulin-like growth factor-I mRNA is not detected in this region at all. Type-I insulin-like growth factor receptor and insulin-like growth factor-II mRNAs are both abundant in choroid plexus, meninges and vascular sheaths from early development to maturity, but insulin-like growth factor-II mRNA is not detected in cells of neuroepithelial origin at any stage of development. This study provides evidence for two fundamentally different patterns of gene expression for the brain type-I insulin-like growth factor receptor.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)