Staurosporine对甲状腺癌SW579细胞的促凋亡作用

【目的】研究星形孢菌素促进人甲状腺癌细胞SW579凋亡的作用,从而为肿瘤治疗寻找新的方向。【方法】MTT法检测ST对SW579细胞增殖的抑制作用。流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡情况。用Hochest33258及MDC染色方法分别检测细胞的凋亡及自噬发生情况。Western blotting用于检测相关蛋白的表达情况。【结果】通过MTT检测发现staurosporine对SW579增殖的抑制呈浓度和时间依赖性。流式细胞术检测发现staurosporine对SW579细胞具有G0~G1期阻滞。【结论】Staurosporine能够诱导对SW579细胞凋亡从而抑制肿瘤细胞的增殖。     

下调CXCR4基因对甲状腺癌细胞SW579增殖和侵袭能力的影响

目的 探讨下调CXCR4基因对甲状腺癌细胞SW579体外增殖和侵袭能力的影响及可能的机制.方法 用脂质体2000将CXCR4-siRNA瞬时转染SW579细胞(RNAi组),同时设立阴参组(只用脂质体而不用siRNA)和空白组(细胞不做任何处理).通过MTT增殖实验和侵袭实验研究CXCR4对细胞增殖和侵袭能力的影响;采用Western blot方法检测RNA干扰后ERK和AKT的磷酸化水平.结果 CXCR4表达水平下调后SW579细胞体外增殖能力减弱,增殖抑制率为32.2%.RNAi组侵袭的细胞数为13.8±1.48个,与空白组和阴参组比较显著减少(P<0.01).Western blot结果显示RNA干扰后总AKT和磷酸化AKT水平均下降,以磷酸化AKT下降最为显著,而ERK表达水平无明显变化.结论 通过RNA干扰下调CXCR4的表达能够显著抑制SW579细胞的增殖和侵袭能力;CXCR4对SW579细胞增殖和侵袭的影响可能是通过调节PI3K/AKT信号通路实现的.     

紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移的影响

目的探讨紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移的影响。方法在DMEM培养液(含15%胎牛血清)中加入细胞,在37℃、5%CO2培养箱中培养,到80%左右融合后分为试验组、空白对照组(只含DMEM培养基),试验组又分为3μmol/L紫杉醇组(紫杉醇组)、30μmol/L顺铂组(顺铂组)、3μmol/L紫杉醇+30μmol/L顺铂联合用药组(联合用药组),MTT法检测细胞相对活力,流式细胞数检测细胞周期,细胞迁移试验,细胞侵袭试验,Western blot法检测相关蛋白表达,然后统计分析各组细胞活力、细胞周期、细胞迁移、侵袭能力、AKT信号通路、细胞周期相关蛋白、细胞MMP表达。结果联合用药组细胞活力、细胞周期S、G2、细胞迁移、细胞侵袭能力均显著低于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05),细胞周期G1显著高于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05)。顺铂组、紫杉醇组细胞活力、细胞周期S、G2、细胞迁移、细胞侵袭能力均显著低于空白对照组(P0.05),细胞周期G1均显著高于空白对照组(P0.05)。联合用药组PTEN/GADPH、P27/GADPH表达均显著高于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05),P-AKT/AKT、CyclinD1/GADPH、MMP-2/GADPH、MMP-9/GADPH表达均显著低于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05)。顺铂组、紫杉醇组PTEN/GADPH、P27/GADPH表达均显著高于空白对照组(P0.05),P-AKT/AKT、CyclinD1/GADPH、MMP-2/GADPH、MMP-9/GADPH表达均显著低于空白对照组(P0.05)。结论紫杉醇联合顺铂能够显著抑制甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移。     

姜黄素对急性髓性白血病细胞HL-60增殖和凋亡的影响

为了探讨姜黄素对白血病细胞的杀灭能力, 运用细胞培养、流式细胞仪和末端ＴｄＴ酶标记技术系统研究其药理作用和方式。结果发现, 姜黄素能选择性抑制急性髓性白血病细胞ＨＬ－６０ 的增殖, 呈时间与剂量依赖曲线, 姜黄素体外抑制ＨＬ－６０ 细胞２４ ｈ 达到最大峰值。亚Ｇ１ 凋亡峰出现在１２ ｈ 后,并随时间延长而逐步增加,２４ ｈ 可达３４．４％ 。用末端ＴｄＴ酶标记法进一步证实凋亡的细胞数在同一时相可达到４１％ 。结果提示： 姜黄素有明确的抗白血病细胞增殖的能力, 其作用机理是诱导细胞凋亡, 体外浓度和作用时间可作为其进一步临床运用的参考。     

姜黄素对人结肠癌细胞SW480增殖周期及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度姜黄素在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响，同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果姜黄素可在G0／G1期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖，使S期细胞比率降低；在一定范围内，姜黄素的浓度越高、作用时间越长，对肿瘤细胞生长的抑制作用越强，凋亡率也越高。结论姜黄素能抑制人结肠癌细胞SW480细胞生长，并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

姜黄素对前列腺癌PC3细胞的增殖和凋亡的研究

目的:从细胞水平观察探讨姜黄素对前列腺癌PC3细胞的抗肿瘤作用,为临床前列腺癌的有效治疗提供相应的理论依据.方法:利用MTT比色法检测姜黄素对PC3细胞的抑制作用,并计算IC50;流式PI单染法检测细胞周期;流式AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率.结果:姜黄素能明显抑制PC3细胞增殖,并呈剂量依赖关系;使细胞增殖阻滞S期;姜黄素对PC3细胞作用72h后的凋亡率随剂量增加而加大.结论:姜黄素显著抑制pC3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,具有一定的抗前列腺癌作用.     

姜黄素通过调控miR-152对甲状腺癌细胞TPC-1增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的:探讨姜黄素对甲状腺癌细胞TPC-1增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法:将体外培养的TPC-1细胞,分为NC组(细胞常规培养)、低剂量组(25 μmol/L姜黄素作用细胞24 h)、高剂量组(50 μmol/L姜黄素作用细胞24h)、anti-miR-152组(转染miR-152抑制剂)、anti-miR...     

姜黄素对肾癌ACHN细胞增殖与凋亡的影响及作用机制

目的 研究姜黄素对肾癌ACHN细胞增殖与凋亡的影响,并探讨其中的作用机制。方法不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L)姜黄素作用于ACHN细胞不同时间(12、24、48 h)后,利用CCK-8检测细胞增殖活性的改变;应用Annexin-V/PI双标染色后上流式细胞仪检测细胞凋亡变化;Real-time PCR测定Notch1基因表达量的变化;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3和Notch蛋白表达情况。结果CCK-8结果表明,姜黄素作用后ACHN细胞增殖速度减慢（P<0.05）,且抑制作用呈时间及浓度依赖性;流式检测结果显示姜黄素作用后ACHN细胞凋亡增加（P<0.05）;Real-time PCR检测结果显示Notch1基因表达增加,且表达量呈时间及浓度依赖性(P<0.05);Western blot检测发现随着姜黄素浓度的增加,Bcl-2蛋白表达下降,Bax、Caspase-3、Notch1蛋白表达增加。结论姜黄素能够抑制肾癌ACHN细胞的增殖并诱导其凋亡,其过程可能通过调节Notch1基因的表达,抑制抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达,促进凋亡因子Bax蛋白表达,从而激活促凋亡因子Caspase-3,继而引发凋亡反应。     

BRAF干扰对甲状腺癌SW579细胞系的影响

目的:研究BRAF干扰对甲状腺癌SW579细胞系的影响.方法:设计合成了2对siRNA干扰序列,脂质体转染进入甲状腺癌SW579细胞,采用RT-PCR检测干扰的效果.对干扰成功的细胞系,检测细胞增殖、细胞周期和丝裂原活化蛋白/细胞外信号调节激酶(mitogen-activated protein signa1-regulated kinase/extracellular signal-regulated kinase,MEK/ERK)信号通路相关蛋白的变化.结果:2种siRNA转染甲状腺癌SW579细胞系后,显著地抑制了BRAF mRNA及蛋白水平的表达(P＜0.01),SW579的生长增殖受到抑制,细胞周期发生改变,G1/S期增加,同时,MEK/ERK信号通路的激活受到抑制.结论:干扰BRAF可能通过失活MEK/ERK信号通路而抑制SW579细胞系的生长和增殖.     

姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对体外培养人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法:选用人卵巢癌细胞株HO-8910进行体外培养至对数生长期,以0~80μmol/L姜黄素(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)分别处理HO-8910细胞24、48、72h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验测定细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测不同浓度药物对细胞凋亡率的影响;免疫组化法检测PCNA在细胞中的表达,评价细胞的增殖状态。结果:姜黄素对HO-8910细胞增殖抑制率随药物浓度增加及作用时间延长有升高趋势,呈时间剂量依赖性。姜黄素作用24h随浓度的升高PCNA阳性表达逐渐降低。流式细胞仪分析证实随着浓度的升高细胞凋亡率和膜受损率均提高。结论:姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910的生长有显著的抑制作用,并能诱导其凋亡。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖和凋亡的影响

目的：探讨姜黄素(cureumin)对体外培养人卵巢癌细胞株HO-8910细胞增殖、细胞周期调控及细胞凋亡的影响.方法：选用人卵巢癌细胞株HO-8910进行体外培养,以1．25—20μg/ml姜黄素分别处理HO-8910细胞6-24h,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡和细胞周期,SABC免疫组化检测细胞凋亡相关蛋白Fas、Fas-L、Bcl-2及Bax的表达。结果：姜黄素对HO-8910生长有抑制作用,并呈剂量时间依赖性。流式细胞仪分析证实姜黄素能使HO-8910细胞积聚在S和G2／M期,并出现亚二倍体凋亡峰。Fas、Fas-L、Bcl-2表达均上调,Bax加药前后均为阳性。结论：姜黄素对人卵巢癌细胞株H0．8910的增殖具有显著的抑制作用;Fas、Fas-L、Bcl-2的表达上调可能参与了诱导细胞凋亡。     

姜黄素对体外人脐静脉血管内皮细胞增殖及凋亡作用的实验研究

血管生成在肿瘤的发生、侵袭和转移的各个过程中均具有重要的作用.目前,由动、植物的天然成分中筛选肿瘤血管生成抑制剂已成为国内外抗肿瘤研究的一个热点问题[1,2].研究表明,姜黄素(Cur)不但有着广泛的抗炎、抗氧化和降血脂等多种生物学活性,而且具有抗血管生成作用[3,4].     

姜黄素对急性髓性白血病细胞HL—60增殖和凋亡的影响

为了探讨姜黄素对白血病细胞的杀灭能力,运用细胞培养,流式细胞仪和末端ＴｄＴ酶标记技术系统研究其药理作用和方式。结果表明,姜黄素能选择性抑制急性髓性白血病细胞ＨＬ－６０的增殖,呈时间与剂量依赖曲线,姜黄素体外抑制ＨＬ－６０细胞２４ｈ达到最大峰值。亚Ｇ１凋亡峰出现在１２ｈ后,并随时间延长而逐步增加,２４ｈ可达３４．４％。用末端ＴｄＴ酶标记法进一步证实凋亡的同一时相可达到４１％。结果提示：姜黄素有明确的     

PDCD4对甲状腺癌SW579细胞调亡及成瘤能力的影响

目的 研究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)诱导的对甲状腺癌SW579细胞凋亡效应及抑制成瘤能力的可能作用机制.方法 将对数生长期的细胞分为两组,观察组先予以PDCD4凋亡相关基因Bax的刺激14 h进行细胞的收集,然后加入tPA刺激细胞进行收集.对照组未加PDCD4凋亡相关基因Bax的刺激和tPA刺激.应用AnnexinV/PI和API等标记,Cyclins/DNA双标流式细胞仪检测甲状腺癌SW579细胞的凋亡及周期特异性,运用RT-PCR的方法检查Caspase-3、Caspase-9活化情况.结果 处于静止期的外周血对PDCD4凋亡诱导不敏感,而G1期PDCD4诱导甲状腺癌SW579细胞出现了明显的细胞凋亡.PDCD4诱导的细胞凋亡主要是在细胞周期的G1期发生.观察组的Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达值分别为(1.12±0.56)、(1.10±0.29),显著高于对照组的(0.82±0.31)、(0.72±0.26),差异有统计学意义(P<0.05).结论 PDCD4诱导的细胞凋亡与甲状腺癌SW579细胞的细胞周期相关,存在G1期细胞周期阻滞的周期特异性,且此过程中发生了Caspase活化,参与细胞凋亡及可能抑制细胞成瘤能力.     

姜黄素对甲状腺癌细胞增殖与迁移能力的影响

目的 观察姜黄素对甲状腺癌细胞SW579侵袭力影响,并探讨姜黄素抗癌的作用机制.方法 甲状腺鳞癌SW579细胞株经5～20 μmol/L的不同浓度姜黄素作用48 h后,MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR方法检测细胞CD147及p21 mRNA的表达.结果 伴随姜黄素作用浓度的升高,SW579细胞的生长呈显著抑制状态,呈剂量、时间依赖性.肿瘤细胞生长滞留在G1期,CD147mRNA表达水平均显著下调,而p21 mRNA表达水平均显著上调,呈剂量、时间依赖性.结论 姜黄素能有效抑制甲状腺癌细胞的增殖,并且可能通过下调CD147的表达抑制肿瘤细胞的迁移.     

海水浸泡对表皮细胞凋亡和增殖的影响

目的：探讨海水浸泡对裸鼠表皮角质细胞凋亡和增殖的影响及其意义。方法：24只雄性裸鼠随机分为4组,应用光镜、原位末端标记和免疫组化技术,研究海水浸泡后裸鼠表皮角质细胞凋亡和增殖的变化规律。结果：海水浸泡后,裸鼠表皮基底层和颗粒层角质细胞发生凋亡,表现为细胞体积变小,细胞核固缩深染,细胞质浓缩,嗜酸性增强,还可见核碎裂、溶解;原位末端标记显示,对照组仅见基底层极少数阳性细胞,海水浸泡6和12 h,表皮各层见大量散在的阳性细胞,与对照组相比有显著差异（P〈0.01）;Ki-67和细胞周期蛋白D1免疫组化结果显示,对照组裸鼠仅基底层见少数细胞核呈弱阳性。海水浸泡3和6 h,Ki-67基底层阳性细胞轻度增加（P〉0.05）,海水浸泡12 h,基底层和颗粒层可见阳性细胞明显增加（P〈0.01）;细胞周期蛋白D1表达增加在海水浸泡6和12 h组均有显著差异（P〈0.05或P〈0.01）。上述改变均与浸泡时间呈正相关。结论：长时间海水浸泡可导致表皮角质细胞的凋亡和增殖,两者共同参与了海水浸泡对皮肤损伤的病理生理过程。     

姜黄素抑制人膀胱癌BIU87细胞的增殖并诱导其调亡

目的探讨姜黄素对人膀胱癌BIU87细胞增殖及凋亡的影响。方法以BIU87膀胱癌细胞为研究对象,分别经终浓度为10、50、100、250及500 mol/L的姜黄素作用12、24、36、48及72h后,观察细胞的形态变化,并用MTT法、TUNEL染色及流式细胞仪技术评估姜黄素对BIU87细胞增殖及细胞凋亡的影响。结果姜黄素能有效抑制BIU87细胞的增殖,作用48h后的IC50值为134.8 mol/L,且呈浓度和作用时间依赖性;同时对各浓度组药物处理后的BIU87细胞进行检测,显示100 mol/L药物组细胞的凋亡率显著的高于对照组（〈0.01）,且随着时间的延长,凋亡率逐渐增加。结论姜黄素能抑制人膀胱癌BIU87细胞的增殖并诱导其凋亡。     

姜黄素对人QBC939细胞生长抑制与凋亡的影响

目的 :研究姜黄素 (Curcumin)对人胆管癌细胞系QBC939的生长抑制与促凋亡作用。方法 :采用MTT法检测姜黄素对胆管癌细胞的抑制作用 ;相差显微镜 ,电镜下观察细胞形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳测定DNALadder ;流式细胞术分析DNA含量。结果 :1,2 ,4 ,8,和 16mg·L-1姜黄素均能抑制人胆管癌细胞QBC939的生长 ,且抑制率具有浓度和时间依赖性 ,IC50 为 5 6mg·L-1。 8mg·L-1姜黄素作用后 ,QBC939细胞出现典型的凋亡形态特征 ,DNALadder出现 ,并检测到亚二倍体凋亡峰。结论 :Curcumin能有效地抑制QBC939细胞生长并促进其凋亡。     

姜黄素对SW872细胞增殖及分化的影响

目的探讨姜黄素对SW872前脂肪细胞增殖、分化的影响。方法体外培养SW872脂肪细胞,采用0.6 mmol/L油酸诱导SW872前脂肪细胞分化,MTT法检测不同浓度姜黄素对SW872前脂肪细胞增殖活力的影响;油红O染色观察前脂肪细胞内脂肪的聚积情况。结果低浓度姜黄素对SW872前脂肪细胞没有明显作用;当姜黄素浓度>20μmol/L时,细胞生长速度减缓,细胞增殖受抑制。同时,姜黄素处理细胞24 h,可抑制前脂肪细胞的分化,呈剂量-效应关系。结论姜黄素对SW872前脂肪细胞具有抑制生长和分化的功能。     

姜黄素对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养条件下,用姜黄素处理Jurkat细胞12h后,MTT法检测细胞的生存率和IC50值;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞学检测细胞凋亡率。结果:体外培养条件下,姜黄素对Jurkat细胞的增殖有明显抑制作用,呈剂量依赖性,IC50值为31μmol/L。激光共聚焦扫描显微镜观察,随着姜黄素浓度的增加,Jurkat细胞凋亡增多。流式细胞学分析表明,低浓度姜黄素使Jurkat细胞发生早期凋亡,高浓度姜黄素使Jurkat细胞出现晚期凋亡。结论:姜黄素明显抑制Jurkat细胞增殖,同时诱导Jurkat细胞发生凋亡。