联合应用全反式维甲酸和化疗药物对肺腺癌细胞株A549细胞的作用

目的观察以不同方式联合应用分化诱导剂全反式维甲酸和化疗药物对肺腺癌细胞株A549细胞的作用,为临床诱导分化治疗肺癌提供实验基础。方法以1×10-6mol/L的全反式维甲酸作用于培养的肺腺癌细胞株A549细胞,1、2、3、5d后检测几种常用化疗药物对细胞的杀伤作用。同时观察同时加入1×10-6mol/L的全反式维甲酸和化疗药物对肺腺癌细胞株A549细胞的杀伤作用。结果同时应用全反式维甲酸和化疗药物时,对肺腺癌细胞株A549细胞的杀伤作用与单用化疗药物时差异无统计学意义。全反式维甲酸作用2d和3d时,化疗药物对肺腺癌细胞株A549细胞的杀伤作用强于全反式维甲酸作用前;全反式维甲酸作用5d时,化疗药物对肺腺癌细胞株A549细胞的作用较全反式维甲酸作用前强,但比3d时下降。结论先用全反式维甲酸作用后可增强肺腺癌细胞株A549细胞对化疗药物的敏感性,此作用与全反式维甲酸作用时间有关。不同联合用药方法的效果不同。     

全反式维A酸对肺腺癌H1299细胞放射敏感性研究

目的:探讨全反式维A酸(ATRA)对肺腺癌细胞株H1299放射敏感性影响及其分子机制.方法:MTT法检测ATRA对H1299细胞存活率的影响;平板克隆形成实验检测H1299细胞的放射敏感性;流式细胞术检测细胞周期;Western blotting检测survivin与NF-κB的蛋白表达情况.结果:不同浓度ATRA对H...     

全反式维甲酸诱导对乳腺癌细胞放射敏感性影响的研究

目的 探讨不同浓度全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)分化诱导对乳腺癌细胞的放射敏感性影响.方法 MTT法检测细胞体外增殖能力,电镜形态学的观察,流式细胞仪进行细胞周期分析.结果 全反式维甲酸分化诱导乳腺癌A431细胞株,细胞增殖能力下降,凋亡增加,更多的细胞被阻止于G1/G0期,放射敏感性增强.结论 全反式维甲酸分化诱导能增强乳腺癌A431细胞株放射治疗敏感性,并与浓度成量效关系.     

丁酸、全反式维甲酸对肺腺癌细胞株A549体外增殖的影响

目的观察丁酸(BA)、全反式维甲酸(ATRA)单用及联合应用对肺腺癌细胞株A549体外增殖的影响.方法采用绘制细胞生长曲线法、MTT比色法.结果经BA、ATRA处理后A549细胞生长曲线趋于平坦,细胞增殖速度、倍增时间降低,72h、120h生长抑制率显著增高,并呈剂量依赖性,其中BA和ATRA联合处理作用后72h、120h生长抑制率分别为(72.77±2.54)%、(84.03±1.58)%,较等浓度单药BA、ATRA显著增强.结论 BA对肺腺癌A549细胞具有与ATRA相近的增殖抑制作用,BA和ATRA联合应用具有良好的协同增效作用.     

苦参素对人肺腺癌 A549细胞放射敏感性的影响及其机制

目的:观察苦参素联合放射线照射对人肺腺癌A549细胞增殖率以及DNA依赖性蛋白酶(DNA dependent protein kinase,DNA-PK)的两类结构亚基DNA-PKcs及Ku80 mRNA表达的影响。方法:根据不同的处理条件,将A549细胞分为对照组,单纯照射组,单纯药物组,药物联合照射组。通过CCK-8法检测细胞增殖率,并应用实时荧光定量PCR技术检测DNA-PKcs及Ku80 mRNA的相对表达水平。结果:苦参素明显抑制A549细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性(P<0.05),其24 h和48 h的半数抑制浓度(IC50)值分别为3.2 g/L和2.4 g/L。单纯照射组随着照射时间的延长和放射线剂量的增加,细胞增殖率明显下降(P<0.05);药物联合照射组细胞随着照射时间的延长,细胞增殖率也随之明显下降(P<0.05);在同一时间点,药物联合照射组细胞增殖率下降比单纯照射组更为明显(P<0.05)。此外,在单纯照射组中,A549细胞DNA-PKcs及Ku80 mRNA的相对表达水平随着照射时间的延长和放射线剂量的增加而增高(P<0.01);较对照组而言,单纯药物组DNA-PKcs及Ku80 mRNA的相对表达水平明显下调(P<0.01);与对应的单纯照射组比较,药物联合照射组DNA-PKcs及Ku80 mRNA相对表达水平明显下调(P<0.01)。结论:苦参素对肿瘤细胞具有放射线增敏作用。辐射可明显增加肺癌细胞DNA-PKcs及Ku80 mRNA的相对表达水平,苦参素对A549细胞的放射线增敏效应至少部分是与抑制DNA-PKcs及Ku80 mRNA的表达,从而抑制DNA损伤修复有关。     

全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的诱导作用

目的研究全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法在培养液体系中加入不同浓度的全反式维甲酸(ATRA)进行不同时间长度的诱导,以MTT法,流式细胞术,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果1~50μmol/LATRA均能抑制骨肉瘤细胞增殖。5、10、50μmol/L ATRA作用细胞4 d后的凋亡率分别为(12.46±2.37)%、(18.36±1.32)%(、27.15±2.17)%,与对照组[(4.09±1.18)%]比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。ATRA浓度越高,抑制作用越明显,呈明显的剂量依赖效应。50μmol/L ATRA作用细胞1、2、34、d后的凋亡率分别为(7.35±1.28)%、(10.72±1.68)%、(17.65±2.14)%(、27.15±2.17)%,与对照组[(4.09±1.18)%]比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。ATRA作用时间越长,抑制作用也越明显,呈明显的时间依赖效应。结论ATRA能够诱导人骨肉瘤细胞发生凋亡,呈时间和剂量依赖效应。     

全反式维甲酸对人肝细胞癌细胞生长的影响

研究全反式维甲酸对人肝细胞癌细胞ＢＥＬ７４０４细胞生长的影响。方法藉ＭＴＴ法观察ＡＴＲＡ对ＢＥＬ７４０４细胞的生长及其对人表皮生长因子刺激的反应性的影响。结论ＡＴＲＡ可能藉降低细胞对表皮生长因子刺激的反应性抑制人肝细胞癌细胞的增殖。     

全反式维甲酸对人牙周膜细胞向成骨分化的影响

目的检测全反式维甲酸(AT-RA)对人牙周膜细胞(hPDLCs)向成骨分化的影响。方法原代培养hPDLCs,用噻唑盐(MTT)方法检测AT-RA作用于细胞hPDLCs及对其增殖的影响,用酶动力方法检测对其碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,用茜素红染色方法检测对其形成钙盐沉积的影响。结果 AT-RA不影响hPDLCs的增殖活性,但能增强hPDLCs的ALP活性,并明显促进钙盐沉积。结论 AT-RA可以促进hPDLCs向成骨分化。     

全反式维甲酸诱导A549细胞凋亡机制的初步探讨

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法MTT法观察ATRA对肺癌细胞株A549的生长抑制作用,流式细胞仪观察ATRA诱导A549细胞凋亡作用和对细胞周期的影响,Western Blot分析凋亡相关蛋白表达。结果ATRA抑制A549的增殖呈剂量依赖性;ATRA可诱导A549细胞凋亡,凋亡过程伴随caspase-3、caspase-9表达增加,而Bcl-2、Bcl-Xs/LP的表达无明显变化。结论ATRA可明显抑制A549细胞的增殖,可通过上调caspase-9、caspase-3的表达促进A549细胞凋亡。     

全反式维甲酸和苯乙酸钠联合对人肝癌细胞的诱导分化作用

目的　探讨全反式维甲酸 (ATRA)和苯乙酸钠 (Na-PA)两者对人肝癌细胞联合作用 .方法　应用台盼蓝染色、MTT法、流式细胞仪、甲胎蛋白测定等方法检测 ATRA和Na PA两者联合对人肝癌细胞的诱导分化作用 .结果　 10μmol· L- 1 ATRA,2 .5 mmol· L- 1 Na PA及两者联合作用 ,可抑制人肝癌细胞株 SMMC- 772 1细胞的生长 ,使细胞恶性表型向正常转化 ,其联合作用组 7d抑制率达 6 6 .5 % ,并能明显降低甲胎蛋白的分泌量 4 9.2 % ,使细胞周期 G0 / G1 期延长5 8.7% ,S期下降 35 .8% (P<0 .0 5 ) ,影响 DNA合成 ,最终产生抑制增殖诱导细胞分化的作用 .结论　 ATRA,Na PA及两者联合应用均可抑制 SMMC- 772 1细胞生长 ,诱导细胞分化 ,ATRA和 Na PA联合对人肝癌细胞的诱导分化有协同作用 .     

CpG-ODN对肺癌A549细胞化疗的协同作用

目的 研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)对肺癌A549细胞化疗的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 将肺癌A549细胞分为空白对照组、DDP组、CpG-ODN组、DDP+CpG-ODN组、CpG-ODN+DDP组。采用CCK-8比色法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RT-PCR检测TLR9 mRNA的表达,Western印迹法检测TLR9信号通路中MyD88、AP-1的表达。结果 TLR9激活CpG ODN后,能显著提高细胞的增殖能力(P<0.05);CpG-ODN与CpG-ODN+DDP两组细胞生长无明显差异(P>0.05);CpG-ODN+DDP组细胞凋亡率较DDP组低(P<0.05),DDP+CpG-ODN组细胞凋亡率较DDP组明显升高(P<0.05);DDP+CpG-ODN组TLR9 mRNA较DDP组明显升高(P<0.05);DDP+CpG组AP-1蛋白表达上调(P<0.05)。结论 CpG-ODN激活TLR9信号通路后,可协同DDP促进细胞凋亡,提高顺铂化疗的敏感性。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与放射敏感性的相关性

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌(NSCLC)放射敏感性的相关性及可能机制.方法 选取EGFR基因突变的NSCLC细胞株PC-9、H1975和EGFR野生型NSCLC细胞株A549.克隆成型实验检测放射敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测凋亡蛋白和修复蛋白表达.结果 PC-9、H1975细胞放射敏感性明显高于A549细胞,4Gy照射下克隆存活率分别为10.0％、5.5％和44.3％;4 Gy照射后48 h PC-9和H1975细胞凋亡率显著高于A549细胞,分别为18.300％、17.533％和11.733％.A549细胞发生G0/G1期阻滞显著高于PC-9、H1975细胞,4Gy照射后48 h G0/G1期细胞分别为74.480％、70.293％和57.016％.A549细胞在4Gy照射后促凋亡蛋白Bax表达缺失,凋亡蛋白Caspase-3、抗凋亡蛋白Bcl-2、修复蛋白DNA-PKcs在24 h仍有表达.而PC-9、H1975细胞在4Gy照射后Bax、Caspase-3表达增多,Bcl-2不表达,DNA-PKcs表达减少.结论 EGFR 19外显子缺失突变细胞PC-9和21外显子点突变细胞H1975,相对EGFR野生型细胞A549对放射线敏感,其机制与细胞周期G0/G1期阻滞、Bax表达增多、DNA-PKcs、Bcl-2表达降低有关.     

全反式维甲酸对PC12细胞AchE和ChAT活性的影响

目的观察不同浓度全反式维甲酸(RA)诱导PC12细胞呈现拟胆碱能神经元表型，以及不同RA浓度对PC12细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法利用1～50μmol／L浓度RA诱导PC12细胞，MTT法、流式细胞仪、TUNEL法、分光光度法和放射酶学法检测细胞生长曲线和细胞生长周期的变化、细胞凋亡情况、乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活性变化。结果①1，5，10，20μmol／L浓度RA均明显增加ChAT活性，以10μmol／L浓度时ChAT活性最高，超过该浓度后chAT活性呈下降趋势。RA对AchE活性无明显诱导作用。②当浓度大于10μmol／L后RA诱导PC12细胞凋亡的作用明显增强。③1～50μmol／L浓度RA均能抑制PC12细胞增殖，RA浓度越高，抑制作用越明显，呈明显的剂量依赖效应。④RA对细胞周期的抑制作用主要表现于G→1S期。结论RA具有诱导PC12细胞呈现拟胆碱能神经元表型的作用，10μmol／L是最佳诱导浓度。     

ATRA对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其机制研究

目的探讨全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,ATRA）对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其可能的分子机制。方法ATRA处理人肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况并运用MTT法检测其生长抑制情况,流式细胞仪进行细胞周期分析,Western blot检测CDK4、Rb、p-ERK1/2蛋白的表达,荧光定量PCR法检测CyclinD1mRNA水平。结果ATRA具有抑制A549细胞增殖、使细胞周期阻滞于G0/G1期,并下调p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平的作用。结论ATRA可能通过下调A549细胞p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平,使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而影响其DNA的合成,抑制其恶性增殖。     

亚硒酸钠、维甲酸对肺癌细胞浓度效应关系的比较

目的:探讨亚硒酸钠、全反式维甲酸及二者联合对肺癌浓度效应关系的异同.方法:MTT法检测吸光度,流式细胞仪检测细胞周期.结果:药物作用24～96h,处理组吸光度改变显著,20μmol/L亚硒酸钠与全反式维甲酸组存在显著差异;药物作用48h,各处理组细胞周期随浓度增加变化明显,S期比例增加伴有G0/G1期增多或减少,G2 M期逐渐减少.结论:较低浓度组倾向于肿瘤细胞被诱导分化,较高浓度组倾向于肿瘤被阻滞于S期.20μmol/L亚硒酸钠与全反式维甲酸组的吸光度差异显著,其作用机制可能有所不同.     

短程全反式维甲酸对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨短程全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测ATRA对LoVo细胞的生长抑制率并筛选合适的药物用量,流式细胞仪检测ATRA诱导的肿瘤细胞周期和凋亡率变化。结果选择1.0μmol·L-1ATRA作为进一步实验的工作浓度。1.0μmol·L-1ATRA作用12 h后G1期细胞开始增多,48 h后G1期细胞明显增多并伴S期、G2/M期细胞减少(P<0.05)。1.0μmol·L-1ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率的组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论短程1.0μmol·L-1ATRA主要通过阻滞LoVo细胞于G1期并诱导其细胞发生早期凋亡,可明显抑制肿瘤细胞的增殖。