LHRHa靶向紫杉醇脂质体的制备及体外抗肿瘤作用

目的：制备促黄体激素释放激素类似物（Luteinizing hormone releasing hormone analogues,LHRHa)靶向紫杉醇脂质体（Paclitaxel liposomes,PTX-Lipo）,研究其在体外增强紫杉醇（Paclitaxel,PTX）对卵巢癌A2780/DDP细胞的抑制作用。方法：采用薄膜超声法制备PTX-Lipo与LHRHa靶向紫杉醇脂质体（LHRHa-Paclitaxel liposomes,LHRHa-PTX-Lipo）,用透射电镜考察脂质体形态;高效液相色谱法测定2种PTX-Lipo的包封率;激光共聚焦法通过卵巢癌A2780/DDP细胞对4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑荧光素的摄取检测来反映细胞对NBD-Lipo与NBD-LHRHa-Lipo的摄取情况;MTT法及细胞克隆形成实验检测LHRHa-PTX-Lipo体外对卵巢癌细胞的生长抑制情况。-结果：制备LHRHa-PTX-Lipo的平均粒径123.4 nm,包封率在90%以上;A2780/DDP细胞对NBD-LHRHa-Lipo组的荧光摄取明显高于NBD-Lipo组;LHRHa-PTX-Lipo对A2780/DDP细胞的生长及克隆形成抑制明显高于PTX组及PTX-Lipo组（P＜0.05）。结论：采用薄膜超声法制备的LHRHa-PTX-Lipo可使药物在靶部位聚集,增强药物对卵巢癌细胞的抑制作用。     

生物素化壳聚糖微球用于体外肿瘤靶向治疗

生物素－亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早瘤早期诊断、治疗研究的热点，将包封有ＴＮＦα的壳聚糖微球生物素化，以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统，采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明：生物素化壳聚糖微球对体外培养的肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１有显著的抑制作用（抑制率为６０．８％，Ｐ〈０．０１）。     

壳聚糖包覆异甘草素脂质体的构建及体外抗肿瘤效果

目的 构建壳聚糖(CS)包覆异甘草素脂质体(ISL-Lip),对其性质进行表征,并对其对肝癌细胞HepG2的体外抗肿瘤效果和细胞摄取情况进行研究。方法 采用乙醇注入法制备ISL-Lip,并利用CS与脂质体(Lip)间的静电吸附和氢键作用制备壳聚糖包覆异甘草素脂质体(CS-ISL-Lip)。利用透射电镜观察ISL-Lip和CS-ISL-Lip的形貌,利用纳米粒度仪测定ISL-Lip和CS-ISL-Lip的粒径分布和表面电位。采用紫外分光光度法建立ISP的标准曲线,结合超滤法检测ISL-Lip和CS-ISL-Lip的包封率,透析法研究ISL-Lip和CS-ISL-Lip的体外药物释放情况。对CS-ISL-Lip进行荧光标记,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪研究肝癌细胞HepG2对CS-ISL-Lip的体外细胞摄取情况。利用MTT法研究CS-ISL-Lip对HepG2细胞的细胞毒性,考察其体外抗肿瘤效果。结果 ISL-Lip和CS-ISL-Lip均呈球形,分散性良好。CS对ISL-Lip进行表面包覆后其平均粒径由(138.4±0.4)nm增加为(147.8±1.6)nm,表面电位由(-12....     

紫杉醇脂质体与传统紫杉醇联合卡铂治疗卵巢癌的疗效及不良反应的对比分析

目的 对比分析紫杉醇脂质体与传统紫杉醇联合卡铂治疗卵巢癌的疗效及不良反应。 方法 将92例晚期卵巢癌患者按照随机数字表法分为研究组和对照组,每组46例。研究组采用紫杉醇脂质体联合卡铂进行化疗;对照组采用传统紫杉醇联合卡铂进行化疗。对比2组治疗后临床疗效及治疗过程中不良反应发生情况。 结果 研究组总有效率为76.09%,对照组为69.57%,2组疗效对比差异无统计学意义(P>0.05);2组白细胞减少、血小板降低、血红蛋白减少、肾功能异常、腹泻、脱发、厌食的发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05);研究组肌肉关节痛(4.35%)、呼吸困难(2.17%)、恶心呕吐(13.04%)、面部潮红(13.04%)、周围神经毒性(8.70%)、皮疹(4.35%)的发生率显著低于对照组(21.74%、15.22%、34.78%、36.96%、28.26%、19.57%),差异有统计学意义(χ2=6.133、4.929、5.974、7.015、5.845、5.060,P<0.05)。 结论 紫杉醇脂质体与传统紫杉醇联合卡铂治疗卵巢癌的疗效相当,但紫杉醇脂质体的不良反应发生率显著低于传统紫杉醇。      

生物素化壳聚糖微球用于体外肿瘤靶向治疗

生物素 -亲和素介导的肿瘤靶向治疗是近几年来肿瘤早期诊断、治疗研究的热点。将包封有 TNFα的壳聚糖微球生物素化 ,以生物素化无唾液酸胎球蛋白为导向系统 ,采用“三步法”研究了微球体外抗肿瘤毒性实验。结果表明 :生物素化壳聚糖微球对体外培养的肝癌细胞 SMMC- 772 1有显著的抑制作用 (抑制率为 6 0 .8% ,P<0 .0 1)。     

半乳糖配体介导多烯紫杉醇脂质体靶向性研究

目的:研究经半乳糖配体修饰后的多烯紫杉醇脂质体(docetaxel liposomes modified with galactose ligand,Gal-DOC-L)在小鼠体内的组织分布,探讨Gal-DOC-L对肝脏的靶向作用?方法:采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定各组织中多烯紫杉醇的药物浓度,以多烯紫杉醇普通脂质体(docetaxel liposomes,DOC-L)为对比,分别采用相对摄取率re?峰浓度比Ce和靶向效率te作为评价参数,对Gal-DOC-L的肝靶向性进行评价?结果:DOC-L和Gal-DOC-L的re分别为2.80和4.34,Ce分别为1.67和2.38,te分别为28.44%和38.91%?结论:药物经脂质体包封后对肝脏具有一定的靶向效应,而半乳糖配体的引入可进一步提高脂质体对肝脏的靶向性?     

多肽修饰脂质体靶向药物递送系统研究进展

目的 介绍近年来多肽修饰脂质体靶向药物递送系统的研究进展。方法 查阅和归纳总结近几年相关文献。结果 阐述了精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽、丙氨酸-脯氨酸-精氨酸-脯氨酸-甘氨酸(APRPG)多肽、细胞穿透肽(CPP)、血管活性肠肽(VIP)等修饰脂质体的研究进展。多肽修饰的包载药物的脂质体可以增加药物在体内的选择性，减少药物毒副作用，提高药物治疗指数。结论 多肽分子是机体内一类重要的生物活性物质，将其作为导向物以配体-受体特异性结合的方式应用于靶向药物递送系统，具有良好的研究价值和应用前景。     

白蛋白结合型紫杉醇与紫杉醇脂质体联合奈达铂化疗对复发性卵巢癌的效果比较

目的:比较白蛋白结合型紫杉醇与紫杉醇脂质体联合奈达铂化疗对复发性卵巢癌的效果。方法:选取82例复发性卵巢癌患者为研究对象,按照随机数字表法将患者分成观察组及对照组各41例。观察组给予白蛋白结合型紫杉醇联合奈达铂治疗,对照组给予紫杉醇脂质体与奈达铂治疗,比较两组治疗效果。结果:治疗后,观察组完全缓解率43.9%,高于对照组的17.1%;观察组生命质量(KPS)评分为(75.48±2.13)分,高于对照组的(68.46±2.21)分;观察组不良反应发生率为26.84%(11/41),低于对照组的56.09%(23/41);组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:白蛋白结合型紫杉醇联合奈达铂治疗复发性卵巢癌的效果优于紫杉醇脂质体联合奈达铂治疗。     

靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性

目的 制备具有靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,并对其进行表征,再进一步考察其体外抗肿瘤活性.方法 合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯并用红外光谱和质谱进行表征,采用薄膜分散法制备靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,用透射电镜、激光粒度仪、高速离心法分别测定脂质体的形状、粒径、电位、包封率,MTT法考察脂质体对肿瘤细胞的抑制作用.结果 经红外光谱及质谱分析证实,成功合成了靶向材料叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯;制备的靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体在透射电镜视野中粒径大小均一,约160 nm,Zeta电位约4.0 mV,包封率达90%以上;体外细胞毒性显示,叶酸修饰的蟾酥提取物长循环脂质体的IC50值为0.46μg/mL,普通长循环脂质体的IC50值为0.76μg/mL.结论 成功合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯靶向材料并构建了靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,可靶向性抑制肿瘤细胞生长.     

促性腺激素释放激素类似物在卵巢癌治疗中的应用

卵巢癌是性激素依赖性肿瘤,促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)类似物除了通过下丘脑-垂体-性腺轴间接抑制卵巢癌细胞外,还通过癌细胞上GnRH受体介导,直接抑制癌细胞的增殖、诱导凋亡等.此外,运用GnRH类似物对细胞的靶效应,将其作为载体载上细胞毒性药物,可以提高细胞毒性药物的功效、降低毒副作用.因此GnRH类似物的内分泌治疗为晚期及复发性卵巢癌提供了一种有价值的治疗措施.     

阿拉瑞林和曲普瑞林在促超排卵短方案中的应用效果

目的：论证国产促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a）阿拉瑞林在体外受精和胚胎移植促超排卵短方案中的临床疗效。方法：将进行体外受精和胚胎移植周期中应用促超排卵短方案的病人随机分2组：曲普瑞林组27例，阿拉瑞林组12例。分析比较2组使用促性腺激素（Gn）量、取得卵子数、子宫内膜厚度、优质胚胎率和妊娠率。结果：2组平均Gn用量、取得卵子数、子宫内膜厚度、优质胚胎率和妊娠率无显著性差异。结论：阿拉瑞林与曲普瑞林在促排卵短方案中的临床疗效基本相似。     

异位内膜GnRH受体表达与GnRHa疗效的研究

目的 探讨子宫内膜异位症（EMS）患者在位子宫内膜和异位子宫内膜组织中促性腺激素释放激素受体（GnRH-R）的表达情况及其临床意义。方法 采用免疫组化法检测40例正常子宫内膜组织及126例EMS患者在位子宫内膜和卵巢异位子宫内膜组织中GnRH-R的表达，同时对每位EMS患者术后应用3个月促性腺激素释放激素类似物（GnRHa），观察其卵巢内膜异位囊肿的复发情况。结果 在位内膜100．00％表达GnRH-R，异位内膜组织有62．38％的GnRH-R表达，且EMS患者在位内膜组织GnRH-R的表达率明显高于异位内膜组织（P〈0．01）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期EMS患者异位内膜组织GnRH-R的表达率分别为84．6％、61．8％、37．5％，差异有显著性意义（X^2=13．43，P〈0．05）；GnRH-R阳性者的卵巢内膜异位囊肿的复发率（3．95％）低于GnRH-R阴性者（18．0％）（X^2=6．84，P〈0．05）。结论 异位内膜GnRH-R表达的缺失有可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关；通过测定异位内膜GnRH受体的表达，有可能为临床EMS患者的治疗及疗效预测提供一定的参考依据。     

载紫杉醇缓释微球的制备及其体外抑瘤效果的观察

目的 应用乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载紫杉醇(PTX) PLGA微球,探讨其理化性质及其体外抑瘤效果.方法 采用双乳剂挥发法制备PTX-PLGA微球,扫描电镜及光学显微镜观察其外观形态,测定微球径线.高效液相色谱法评价PTX-PLGA微球载药率及其包封率.培养卵巢癌SKOV3细胞株,并设空白对照组、生理盐水组、PLGA微球悬液组、紫杉醇注射液组和PTX-PLGA微球悬液组,应用MTT法检测不同处理组在不同时间细胞的生长抑制情况,倒置显微镜下观察肿瘤细胞凋亡形态.结果 PTX-PLGA微球大小均匀,表面光滑无粘连,平均直径为(2.00±0.19) μm,载药率约为5.68％,包封率为81.10％.给药72 h后药物浓度为1×105 mol/L时,PTX-PLGA组的卵巢癌细胞增殖明显受到抑制(P＜0.05).结论 本法制备的PTX-PLGA微球性质稳定,对卵巢癌细胞的抑制作用具有一定缓释效果.     

载多烯紫杉醇的转铁蛋白修饰脂质体的制备及其体外抗脑胶质瘤的作用

目的以鼠脑胶质瘤细胞c6和鼠脑内皮细胞bEnd．3为模型,研究载多烯紫杉醇（DOC）的转铁蛋白（TF）修饰脂质体（DOC—TF—LP）的体外抗肿瘤作用。方法采用薄膜分散法制备普通脂质体（LP）,后插入法制备TF修饰LP（TF—LP）。荧光定量实验观察c6细胞和bEnd．3细胞对TF＋LP和LP的摄取。MTT实验检测不同LP对肿瘤细胞的增殖抑制作用。构建c6细胞肿瘤球模型,观察不同LP对肿瘤球的穿透能力以及对肿瘤球体积的增长抑制能力。结果脑胶质瘤c6细胞对TF—LP的摄取效率是LP的3．2倍（P〈0．05）;脑内皮细胞bEnd．3对TF—Lp的摄取效率是LP的2．6倍（P〈0．05）。DOC—TF—LP对肿瘤细胞的增殖抑制作用显著大于DOC—LP和DOC游离溶液（P〈0．05）。载香豆素一6的TF—LP与肿瘤球共孵育4h后,TF—LP的荧光强度强于LP。DOC游离溶液、DOC—LP和DOC—TF—LP分别使肿瘤体积减小到原体积的80％、65％和38％。结论与DOC和DOC—LP相比,DOC—TF—LP能够更加有效地被脑内皮细胞和肿瘤细胞摄取,抑制肿瘤细胞增殖及肿瘤球生长,具有更强的抗肿瘤作用。     

聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒基因载体的制备及相关性质的体外研究

目的优选制备可载带质粒DNA的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(PBCA-NPs)的工艺条件,并研究其体外生物学特性.方法选用乳化聚合法制备PBCA-NPs,采用正交实验法,以激光粒度分析仪及原子力显微镜(AFM)综合分析实验结果来确定最优化的制备条件.用阳离子表面活性剂十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)对纳米粒进行表面修饰后连接质粒DNA,并分析PBCA-NPs及CTAB修饰的PBCA-NPs的细胞毒性效应、DNA装载效率、PBCA-NPs-DNA抗超声破坏和抗DNaseI的降解作用及其在体外的基因转染能力.结果激光粒度分析仪及原子力显微镜结果表明,PBCA-NPs粒形圆整,大小均匀,平均粒径106nm.琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计测定DNA装载量达93%.该纳米粒能显著提高质粒DNA抵抗核酸酶降解和超声波剪切的能力.细胞转染实验表明,该纳米粒传递质粒DNA进入HepG2和3T3细胞的效率较高.结论利用该制备工艺生产出的具备良好生物学特性的PBCA-NPs是基因转运和基因治疗中极具应用潜力的非病毒载体.     

替加氟磁性长循环热敏脂质体的制备及在大鼠体内的药代动力学研究

目的 研究替加氟磁性长循环热敏脂质体的制备、药动学规律和靶向性.方法 采用反相蒸发超声法制备替加氟磁性长循环热敏脂质体,采用高效液相色谱仪等检测替加氟在大鼠体内各组织中的药物浓度.结果 替加氟磁性长循环热敏脂质体平均粒径为126nm左右,具有强磁性和超顺磁性.磁控并加热的替加氟磁性长循环热敏脂质体组的肝内8 h药时曲线下面积是游离药物组的17.45倍,是替加氟长循环脂质体组的3.9倍;其肝外组织血浆、肾器官中比游离组低.其肝靶向效率达到73.9%.替加氟长循环脂质体组半衰期比替加氟游离药物组明显延长.结论 替加氟磁性长循环热敏脂质体显著增加药物在肝脏的分布,降低了药物的肾毒性.