维吾尔族成人急性髓系白血病（非急性早幼粒细胞白血病）骨髓肾母细胞瘤基因1和转录因子ETS-1表达与预后的关系

目的 检测维吾尔族成人急性髓系白血病（非急性早幼粒细胞白血病）[AML（非M3）]病人骨髓肾母细胞瘤基因1(WT1)和转录因子ETS-1表达水平，并探讨二者与AML（非M3）预后的关系。方法 选取2015年6月至2018年10月喀什地区第一人民医院血液科收住的105例维吾尔族初诊AML（非M3）病人为观察组。选取同期于该院100例健康体检者为对照组A，及在该院治疗的100例汉族初诊AML（非M3）病人为对照组B。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测病人骨髓WT1基因和转录因子ETS-1的表达水平；多因素logistic回归分析AML的影响因素；采用Kaplan-Meier法描述生存曲线。结果 观察组和对照组B白细胞计数明显高于对照组A(P<0.05)，血小板计数及血红蛋白明显低于对照组A(P<0.05)；观察组和对照组B病人白细胞计数、血小板计数、血红蛋白比较，差异无统计学意义（P>0.05）。观察组骨髓WT1、ETS-1表达水平分别为0.83±0.15、0.92(0.22,1.23)，明显高于对照组B的0.35±0.14、0.48(0.24,1....     

WT1基因在骨髓增生异常综合征中的表达及与疗效的关系

目的 明确不同分型及预后分层的骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndrome,MDS)患者WT1基因水平的表达及疗效的关系。方法 采用实时荧光定量PCR方法检测MDS患者的WT1基因表达水平,分析不同MDS类型与预后分层之间WT1表达水平,同时分析其与疗效关系。结果 MDS-SLD及MLD组WT1表达水平较低,与对照组无显著差异(P>0.05),而MDS-EB-1及EB-2组WT1表达水平较对照组及SLD及MLD组显著升高(P<0.05)。按IPSS-R积分系统进行预后分层,极低危组、低危组与中危组的WT1表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而高危组及极高危组的MDS患者WT1表达水平显著高于其它组(P<0.05)。MDS-EB患者治疗后,WT1表达水平显著下降。结论 WT1基因表达水平与MDS患者的疾病进展相关,其水平的变化在患者的疗效与预后的评估具有参考意义。     

Wilms瘤基因在白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤中的表达研究

目的 探讨Wilms瘤基因(WT1)在白血病、淋巴瘤及多发性骨髓瘤患者中的表达差异及其临床意义。方法 选取77例白血病、29例多发性骨髓瘤和30例淋巴瘤患者进行研究,采用荧光定量PCR技术检测三组骨髓中WT1基因的表达水平并进行比较分析。结果 白血病患者的WT1基因水平(0.105±0.019)显著的高于多发性骨髓瘤患者(0.027±0.008)和淋巴瘤患者(0.026±0.010)且差异有统计学意义(P<0.05),多发性骨髓瘤患者和淋巴瘤患者的WT1基因表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,白血病患者的WT1基因水平(0.062±0.016)显著的低于初诊的白血病患者(0.157±0.012)且差异有统计学意义(P<0.05),治疗后的多发性骨髓瘤患者和淋巴瘤患者与初诊的多发性骨髓瘤患者和淋巴瘤患者的WT1基因表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 WT1在白血病患者表达水平较淋巴瘤、多发性骨髓瘤患者呈显著的升高,同时治疗后白血病患者的WT1基因表达水平较初诊白血病患者呈显著降低。     

WT1基因在白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤中的表达研究

【】 目的 探讨Wilms瘤基因(WT1)在白血病、淋巴瘤及多发性骨髓瘤患者中的表达差异及其临床意义。方法 选取本院2011年1月～2015年1月血液内科收集的77例白血病、29例多发性骨髓瘤和30例淋巴瘤患者进行研究,采用荧光定量PCR技术检测三组骨髓中WT1基因的表达水平并进行比较分析。结果 白血病患者的WT1基因水平显著的高于多发性骨髓瘤患者和淋巴瘤患者且差异具有统计学意义(P<0.05),多发性骨髓瘤患者和淋巴瘤患者的WT1基因表达水平差异不具有统计学意义(P>0.05)。治疗后,白血病患者的WT1基因水平显著的低于初诊的白血病患者且差异具有统计学意义(P<0.05),治疗后的多发性骨髓瘤患者和淋巴瘤患者与初诊的多发性骨髓瘤患者和淋巴瘤患者的WT1基因表达水平差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论 WT1在白血病患者表达水平较淋巴瘤、多发性骨髓瘤患者呈显著的高,同时治疗后白血病患者的WT1基因表达水平较初诊白血病患者显著的降低。     

DLK1及c-FLIP基因在AML中的表达

目的 探讨急性髓细胞白血病(AML)患者c-FLIPL、c-FLIPS及DLKl基因的表达水平及临床意义.方法 应用逆转录-PCR半定量检测8例AML(AML组)及3例非恶性血液病患者(对照组)骨髓单个核细胞中c-FLIPL、c-FLIPS及DLKl mRNA的表达水平.结果 AML组患者DLKl mRNA、c-FLIPL mRNA、c-FLIPS mRNA表达均明显高于对照组(P＜0.05),且AML各FAB亚型间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DLKl、c-FLIPL及c-FLIPS基因在AML患者中表达异常增高,可能在白血病细胞逃脱凋亡、无限增殖中发挥作用.     

WT1基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义

目的:探讨WT1基因在急性白血病(AL)患者中的表达情况及其临床意义.方法:采用实时定量RT-PCR方法动态检测60例初治AL患者WT1基因的表达,评估AL患者的缓解率、复发率及完全缓解后微小残留病(MRD)检测.结果:初治AML各亚型中M3基因表达阳性率最高,为82.4%,其WT1基因中位表达水平最高,达1579.6,显著高于其他亚型,差异有统计学意义(P<0.05);AL患者中,WT1基因表达阳性组CR率显著低于阴性组,阳性组缓解后半年内复发率显著高于阴性组,差异均有统计学意义(均P<0.05),初治组、复发组及未缓解组AL患者WT1基因中位表达水平明显高于完全缓解组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:WT1基因在AL患者骨髓细胞中表达水平可作为临床评估疾病的发生、发展、判断预后及检测MRD的指标.     

荧光定量PCR检测WT_1基因在白血病中的表达

目的 :建立荧光定量 RT- PCR检测 WT1 基因的方法 ,探讨 WT1 基因在各类白血病中的表达。方法 :RT-PCR分别扩增 K5 6 2细胞 WT1 基因及β- actin基因 ,凝胶切割并回收、纯化 ,经紫外分光光度计定量后作为标准模板。采用荧光定量 RT- PCR方法检测 80例白血病患者骨髓或外周血及 10例正常人外周血中 WT1 基因表达。结果 :白血病患者组 (4 9例 AML、18例 AL L、7例 HAL、6例 CML )与正常人外周血 WT1 基因表达有显著差异 ,髓系表达高于淋巴系 ,M5显著低表达。结论 :荧光定量 RT- PCR方法检测 WT1 基因灵敏性高、特异性好。与正常人外周血比较 ,WT1 在各类型白血病中呈高度表达     

DJ-1基因在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的 探讨DJ-1基因在非急性早幼粒细胞白血病(APL)的急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中的表达、临床特征和其对预后的影响.方法 收集135例患者骨髓标本,采用实时荧光定量PCR检测DJ-1表达水平,分析其与临床特征及预后的相关性.结果 在mRNA水平上,初治组与复发难治组的DJ-1表达水平明显高于正常对照组及缓解组(P<0.01);初治组与复发难治组的DJ-1表达水平无明显差异(P>0.05);缓解组DJ-1表达水平与对照组差异不明显(P>0.05);初治组中DJ-1的水平与白细胞计数高低有关(P<0.01),而与患者的年龄、性别、贫血程度、血小板计数高低、幼稚细胞高低、FAB分型、WHO分型无统计学差异(P>0.05).结论 DJ-1基因在初治及复发难治非APL的AML患者中存在高表达,缓解组表达下降,且初诊患者中DJ-1的表达与患者白细胞高低有相关性.     

急性髓系白血病NPM1基因突变与临床特点的关系

目的:研究伴有核仁磷酸蛋白(NPM1)基因突变急性髓系白血病患者的临床特点。方法:采用PCR-毛细管电泳法对67例初发急性髓系白血病(AML)患者进行NPM1基因突变检测。结果:NPM1突变阳性占所有AML患者的10.4%,占核型正常AML的26.1%。7例NPM1突变阳性和60例NPM1突变阴性患者相比,初发时血小板(54×109/L和27.5×109/L,P<0.01)、AML-M5比例(57.1%和23.3%,P<0.01)、染色体核型正常比例(85.7%和2 8.3%,P<0.01)、CD34阳性比例(28.6%和63.3%,P<0.01)、伴有特殊融合基因患者的比例(0和48.3%,P<0.01)、伴有FLT3-ITD突变阳性患者的比例(28.6%和8.3%,P<0.01)等指标差异均有统计学意义。而在初发时中位年龄、性别比例、白细胞数、骨髓原始细胞比例和完全缓解率方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对发病时血小板计数不低和核型正常AML患者检测NPM1基因突变,有利于预后评估和指导治疗。     

急性髓系白血病中SLC39A1表达及其临床意义

目的通过分析SLC39A1基因在急性髓系白血病(AML)中的表达及其临床意义,揭示SLC39A1促进AML发生发展的作用。方法 应用GEO数据库(GSE30029)分析90例AML患者和31例健康对照者骨髓细胞SLC39A1基因的表达水平;应用TCGA数据库中172例含随访信息的AML患者病历资料,分析SLC39A1基因表达对预后的影响。结果 健康对照组中SLC39A1的中位表达水平为455.1,AML患者中SLC39A1的中位表达水平为585.5,SLC39A1在AML患者中表达上调,差异有统计学意义(P<0.001)。ROC曲线评价结果显示,当截断值为560.7时,诊断AML的敏感度和特异度分别为60.0%和90.3%。SLC39A1高表达组年龄和白细胞数量高于低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05);SLC39A1高表达组FAB分型中M4和M5组比率高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.001)。SLC39A1高表达组患者的总生存期显著短于SLC39A1低表达组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SLC39A1高表达是AML患者中常见的分子...     

鼻咽癌组织中钙黏蛋白和MMP-2的表达

目的探讨上皮型钙黏蛋白(E-Cad)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在鼻咽癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化检测E-Cad与MMP-2蛋白在鼻咽癌组织标本52例(A组)和正常鼻咽部黏膜标本20例(B组)的表达;A组再分为有淋巴结转移组(A1组,41例)和无淋巴结转移组(A2组,11例)。结果 A组E-Cad表达率明显低于B组(55.8%vs.85.0%)(P<0.01);A1组E-Cad表达率明显低于A2组(53.7%vs 63.6%)(P<0.05)。A组MMP-2表达率为73.08%,而B组仅少数上皮细胞表达MMP-2(P<0.01);A1组MMP-2表达率明显高于A2组(85.4%vs 27.3%)(P<0.01)。MMP-2与E-Cad表达呈负相关(r=-0.412,P<0.01)。结论鼻咽癌组织低表达E-Cad,高表达MMP-2;其表达差异也明显存在于有、无淋巴结转移的鼻咽癌组织中。     

肝细胞肝癌中Notch1蛋白和ADAM17蛋白的表达及其临床意义

目的探讨Notch1蛋白和ADAM 17蛋白在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及临床病理学意义。方法采用免疫组织化学ENVISION法检测Notch1和ADAM 17蛋白在78例HCC组织和10例癌旁正常肝组织标本中的表达,并分析其与临床病理参数的相关性。结果 HCC组织Notch1的表达率为66.67%(52/78),明显高于癌旁组织的20.00(2/10)(P<0.05);HCC组ADAM17表达率为87.18%(68/78),明显高于癌旁组织的10.00(1/10)(P<0.01)。Notch1和ADAM17阳性表达与HCC大小、TNM分期、有无转移及生存时间相关。结论 Notch1和ADAM17蛋白可能协同参与了HCC的发生发展和转移,并可以作HCC预后判断的指标。     

程序性死亡配体 1在儿童急性髓系白血病中的表达及对耐药的影响

目的研究程序性死亡配体 1(PD-L1)在儿童初治急性髓系白血病( AML)中的表达及对白血病细胞耐药的影响。方法收集 2020年 1月至 2021年 1月郑州大学附属儿童医院血液肿瘤科收治的初诊 40例 AML病儿骨髓标本,收集同期进行骨髓检查正常病儿的骨髓标本 18例作为正常对照组,比较两组骨髓中 PD-L1的表达量,并分析初治 AML病儿 PD-L1的表达量与其临床特征之间的关系;慢病毒构建 PD-L1过表达、干扰 PD-L1表达的 AML细胞,细胞活力检测试剂盒( CCK8)检测细胞增殖能力,并计算细胞对柔红霉素的药物敏感性;凋亡实验检测经柔红霉素诱导的细胞凋亡水平。结果与正常对照组 0.887± 0.064相比,初治儿童 AML病儿骨髓单个核细胞 PD-L1的表达量 2.927±0.271显著增高( t=7.34,P<0.001);根据一个疗程诱导化疗是否达完全缓解( CR)将初治 AML病儿一个疗程达 CR者定义为 CR组,将未达 CR者定义为 NR组,相较于 CR组的 2.346± 0.190,NR组 PD-L1基因的表,达量 5.249±0.662显著增高( t=4.22,P=0.003);病儿不同发病年龄,性别,法、美、英( FAB)分型,白细胞计数,预后分层间 PD-L1基因相对表达量比较均差异无统计学意义( P>0.05)而 1个疗程诱导化疗是否达 CR与 PD-L1基因相对表达量差异有统计学意义( P=0.018);过表达 PD-L1的 Molm-13细胞对柔红霉,素具有更高的 IC50值,更低的凋亡率;干扰 PD-L1表达的 THP1细胞对柔红霉素具有更低的 IC50值,更高的凋亡率。结论 PD-L1在初治 AML病儿中表达增高,且 PD-L1的高表达与 1个疗程诱导治疗是否达 CR显著相关; PD-L1可以促进 AML细胞增殖、抑制凋亡,从而导致化疗耐药。     

Fascin在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其临床意义

目的检测fascin蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义。方法选取卵巢浆液性囊腺瘤17例,卵巢交界性浆液性囊腺瘤22例,卵巢浆液性囊腺癌43例,以18例正常卵巢组织做为对照。制成组织芯片,用免疫组织化学EnVision二步法检测Fascin和Ki-67蛋白的表达,并与临床病理参数进行统计学分析。结果 Fascin表达在浆液性囊腺癌(81.4%)和交界性浆液性囊腺瘤(40.9%)中明显高于正常卵巢组织(0/18)和卵巢浆液性囊腺瘤(11.8%)(P<0.01),浆液性囊腺癌组高于交界性浆液性囊腺瘤组(P<0.01);卵巢浆液性囊腺癌中Fascin表达与病理分级、淋巴结转移情况相关(P<0.01)。Fascin低表达组的中位5年生存时间明显长于高表达组(36个月vs.23个月)(P<0.05)。卵巢浆液性囊腺癌中fascin与Ki-67的表达正相关(P<0.01)。结论 Fascin在卵巢浆液性囊腺癌的早期诊断、分级及预后判断中可能具有重要参考价值,也有望成为一个卵巢浆液性囊腺癌的治疗靶点。Fascin在卵巢浆液性囊腺癌中的表达与Ki-67具有相关性。     

急性髓细胞白血病FLT3-ITD基因的表达及临床意义

目的 通过对初诊急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者进行FLT3 -ITD基因突变检测,探讨FLT3-ITD基因突变与AML临床特征的相关性,为AML的临床分层治疗、分子靶向治疗及预后判断提供理论依据.方法 采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCB)检测60例初治AML患者和10例对照组患者骨髓FLT3-ITD基因突变.结果 60例初治AML患者突变阳性率为25.0％( 15/60),10例对照组患者骨髓均未检测到该突变;依据法美英协作组(FAB)分型标准备亚型FLT3 -ITD突变率不同,其中以M3、M5型突变率较高;60例初治AML中,28例老年AML组与32例非老年AML组FLT3-ITD基因表达水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05);FLT3-ITD阳性组患者具有外周血白细胞数、骨髓白血病细胞比例高的临床特点,并且FLT3-ITD阳性组化疗后完全缓解率(CR)低于FLT3-ITD阴性组(P＜0.05).结论 FLT3-ITD基因突变在AML患者中存在一定的突变率,且多见于M3、M5型患者,FLT3-ITD阳性患者具有外周血白细胞数、骨髓白血病细胞比例高,CR低的临床特点.     

髓系白血病患者骨髓单个核细胞β-连环蛋白mRNA的表达

目的观察急慢性髓系白血病患者骨髓单个核细胞β-连环蛋白的表达及其意义。方法 41例髓系白血病患者,其中25例急性髓系白血病（AML）,16例慢性髓系白血病（CML）。同时选择18例非恶性血液病患者作为对照。肝素抗凝骨髓2 ml,Ficoll液分离骨髓单个核细胞,荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测β-连环蛋白的表达。结果β-连环蛋白在AML组表达量明显高于CML组及对照组（P〈0.01）;CML组表达量高于对照组表达量,差异有统计学意义（P〈0.05）;CML组4例急变患者的β-连环蛋白表达量也较高。β-连环蛋白表达量与患者年龄、性别无关;与骨髓原始细胞含量有关,含量≥30%的患者β-连环蛋白表达量较高。结论β-连环蛋白在AML和CML急变的患者骨髓单个核细胞中异常高表达,Wnt/β-连环蛋白通路在AML和CML急变病例中异常激活可能与白血病细胞的异常增殖有关。     

Trop-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨肿瘤相关钙信号转导蛋白2(Trop-2)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测70例NSCLC手术标本、13例癌旁组织及32例肺部良性病变组织中Trop-2的表达,分析其表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。结果 Trop-2在NSCLC组织中的阳性表达率明显高于正常肺组织及良性病变组织(40.0%vs.9.38%和8.33%)(P<0.01);Trop-2的阳性表达率随着TNM分期的升高而升高(P<0.05);Trop-2在有淋巴结转移者阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05)。Trop-2的阳性表达与患者年龄、性别、吸烟情况、病理类型、分化程度无关(P>0.05)。结论 Trop-2在NSCLC中有较高的表达率。其表达与淋巴结转移及TNM分期有关。     

脑星形细胞瘤中PTEN和VEGF蛋白的表达及其相关性

目的探讨PTEN基因及血管内皮生长因子(VEGF)在脑星形细胞瘤中表达及其相关性。方法采用SP免疫组化法检测PTEN和VEGF在65例脑星形细胞瘤组织(A组)和10例正常脑组织(B组)中的表达。结果 A组PTEN表达阳性率为49.2%,明显低于B组的100%(P<0.01);A组VEGF表达阳性率为64.6%,B组无阳性表达。与低恶性度组比较,高恶性度组的PTEN低,而VEGF表达明显增高(P<0.05)。在脑星形细胞瘤组织中,PTEN与VEGF蛋白的表达呈负相关(r=-0.980,P<0.05)。结论 PTEN及VEGF均与脑星形细胞瘤发生及恶性程度密切相关;检测两者表达情况可为脑星形细胞瘤的临床诊治及预后判断提供依据。     

HDAC3在结肠癌组织中的表达及其临床病理相关性

目的探讨人结肠癌组织中组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)表达与临床病理特性的相关性。方法应用实时荧光定量PCR法和Western blot分别检测30例人结肠癌(A组)及其癌旁组织(B组)中HDAC3 mRNA和蛋白表达;另取5例正常结肠组织作为对照(C组)。用免疫组织化学方法检测高、中、低分化(各30例)结肠癌术后组织中HDAC3的表达水平。分析其表达与结肠癌临床病理学指标的关系。结果 A组HDAC3mRNA表达高于B组(5.91±3.70vs.3.22±2.63)(P<0.01)。A组HDAC3蛋白表达明显高于B、C组(0.90±0.16vs.0.28±0.15、0.06±0.01)(P<0.05)。90例结肠癌组织中HDAC3蛋白表达阳性率为78%,HDAC3表达强度与患者年龄、TNM分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 HDAC3高表达可能是结肠癌的特征之一,在结肠癌的侵袭力及淋巴结转移中起一定的作用。HDAC3可能成为诊断和判断预后的指标之一。     

Smad6信号干扰对MSCs骨向分化中Smad5及Smurf1基因表达的影响

目的研究在骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导的骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化中Smad6信号干扰对Smad5、Smurf1基因表达的影响。方法培养小鼠骨髓MSCs,并分为3组:A组为对照细胞;B组细胞用携带绿色荧光蛋白(GFP)的空白载体病毒转染+BMP-2骨向诱导;C组细胞用Smad6重组RNA干扰载体转染+BMP-2诱导。结果病毒转染后GFP在MSCs中有效表达,病毒转染效率接近100%。与A组比较,BMP-2诱导24h显著提高了B组Smurf1 mRNA水平(P<0.01);而Smad6信号干扰在两个时间点则进一步提高了C组Smurf1 mRNA水平,并显著高于B组(P<0.01)。C组磷酸化的Smad5(pSmad5)和Smurf1水平在两个时间点也显著高于B组(P<0.01),而Smad5蛋白水平则未受影响。结论在BMP-2诱导的MSCs骨向分化中,Smad6 RNA干扰可促进Smad5磷酸化,并引起Smurf1基因表达代偿性增高。