小檗胺抑制兔Tenon囊和滤过道内成纤维细胞增殖的实验研究

目的:研究钙调素拮抗剂小檗胺(berbamine,BER)对兔Tenon囊成纤维细胞和兔小梁切除术后滤过道内成纤维细胞增殖的抑制作用。方法:体外培养兔Tenon囊成纤维细胞,经不同浓度BER处理不同时间后,细胞计数Kit8(CCK8)法检测BER对兔Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测其凋亡率及细胞周期的变化。HE染色检测BER对兔小梁切除术后滤过道内成纤维细胞增殖的抑制作用。结果:兔Tenon囊成纤维细胞经不同浓度BER处理不同时间后细胞增殖受到抑制,并呈时间剂量依赖性。流式细胞仪检测发现BER处理后兔Tenon囊成纤维细胞呈现G1期阻滞,细胞凋亡率明显增加,20mg/LBER处理9h,细胞凋亡率从0.64%增加到31.86%。HE染色显示BER显著抑制兔小梁切除术后滤过道内成纤维细胞的增殖。结论:小檗胺在体内外均能抑制成纤维细胞的增殖,其可能是通过诱导细胞凋亡方式抑制兔Tenon囊和滤过道内成纤维细胞的增殖。     

秋水仙碱对人眼Tenon囊成纤维细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究秋水仙碱对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞(human Tenon's capsule fibroblasts,HTCFs)增殖及凋亡的影响.方法 体外培养HTCFs,并对传代培养的细胞进行鉴定;采用MTS法检测不同浓度的秋水仙碱对HTCFs增殖的抑制作用;以Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测秋水仙碱对细胞凋亡的影响;使用蛋白质印迹法检测秋水仙碱对凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、Caspase-9、Caspase-3及active-Caspase-3表达的影响.结果 MTS检测显示秋水仙碱对HTCFs具有明显抑制作用,并呈剂量及时间依赖性.流式细胞术检测发现秋水仙碱作用48 h可诱导HTCFs发生剂量依赖性凋亡,与对照组相比,5μmol·L-1、10 μmol·L-1、20μmol·L-1的秋水仙碱作用HTCFs的凋亡率分别为(18.37±4.26)％、(33.80±5.02)％及(52.00±2.00)％,差异具有统计学意义(F=91.59,P＜0.00l).蛋白质印迹法检测结果显示,秋水仙碱可诱导细胞内凋亡关键蛋白Caspase-3及PARP的活化.结论 秋水仙碱可以明显抑制HTCFs的体外增殖,其机制可能与线粒体凋亡途径的激活而诱导细胞发生凋亡相关.     

黄芩素对人眼球筋膜囊成纤维细胞增生的影响

目的探讨黄芩素对人眼球筋膜囊成纤维细胞（human Tenon’s capsule fibroblasts，HTCFs）增生的抑制作用。方法采用MTT法检测黄芩素对体外培养的HTCFs增生的影响，并计算细胞生长抑制率为50％时黄苓素的药物浓度，用免疫组织化学法分析观察黄芩素对HTCFs增殖细胞核抗原表达的影响，流式细胞仪检测黄芩素对HTCFs细胞周期的影响。结果黄芩素可以抑制体外培养的HTCFs增生，且抑制能力与药物剂量成正比。50％细胞生长抑制率时的药物浓度为23．70μmol · L^-1。当黄芩素浓度≥30μmol · L^-1时能剂量依赖性地抑制细胞对增殖细胞核抗原的表达（P〈0．01）。流式细胞仪检测黄芩素可以将HTCFs的细胞周期阻滞在G0／G1期，以作用后48h最为显著。黄芩素还可以诱导HTCFs凋亡，以作用后12h的凋亡峰值最高（10．6％），且坏死细胞碎片较对照组显著增多。结论黄芩素既可以抑制HTCFs的增生，又可以诱导它的凋亡。黄芩素有望成为翼状胬肉和青光眼术后抗增生药物。     

精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸肽对人Tenon囊成纤维细胞的贴壁抑制试验观察

目的：研究精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸（Arg-Gly-Asp-Ser，RGDS）肽对人Tenon囊成纤维细胞与纤维连接蛋白（FN）粘附、增殖的影响。方法：在传代培养的人Tenon囊成纤维细胞中加入不同浓度的RGDS（1、0.1、0.001g/L），用未贴壁细胞记数法及MTT法测定RGDS肽对人Tenon囊成纤维细胞粘附、增殖的影响。结果：RGDS肽能抑制成纤维细胞在FN上的粘附，呈浓度效应特点，能抑制成纤维细胞的增殖，呈浓度及时间效应特点。结论：在细胞水平上证实RGDS肽可阻止人Tenon囊成纤维细胞对FN的粘附和增殖，具有避免青光眼滤过术后瘢痕化形成的应用前景。     

正常晶状体及年龄相关性白内障晶状体的超微结构观察

目的：探讨正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体的超微结构变化。

方法：采用飞利浦208型透射电镜及日本产JSM-6380LV扫描电镜对3例正常的透明晶状体及5例行白内障囊外摘出的囊膜及晶状体核进行超微结构观察,并进行比较。

结果：透射电镜下白内障上皮细胞与正常组晶状体上皮细胞相比出现大量的异性核,染色质凝集,线粒体肿胀,减少,呈现空泡化; 白内障晶状体核区纤维细胞界限不明显,出现明显溶解、坏死改变。扫描电镜下白内障晶状体皮质纤维细胞失去光滑,晶状体核区纤维细胞表面因挤压而变形,细胞间的连接出现变化。

结论：白内障晶状体中上皮细胞及纤维细胞均发生了超微结构改变,这些变化可能是晶状体混浊的原因之一。     

碱性成纤维细胞生长因子受体抗体对人晶状体上皮细胞超微结构的影响

目的:为研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)及其受体抗体对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)超微结构的影响。方法:采用透射电镜观察正常HLECs及bFGF作用后及受体抗体阻断bFGF在HLECs作用的超微结构变化。结果:正常HLECs胞内较多的线粒体、粗面内质网和游离核糖体及少量微丝结构,核膜完整,染色质均匀。bFGF作用后表现为细胞膜完整,膜局部突起较多,线粒体和游离核糖体明显增多,基质较致密,细胞核附近有较多微丝结构,核膜完整,染色质均匀,核仁增大。bFGF受体抗体阻断作用后表现为细胞突起消失、细胞膜明显破坏,大量线粒体空化,嵴消失,基质减少,呈云雾状退化,内质网明显减少至消失,核膜破坏明显,有的细胞结构不清,趋于死亡。结论:bFGF对HLECs的促增殖作用可被FGF受体抗体所阻断。     

Bevacizumab对人Tenon囊成纤维细胞迁移抑制作用的研究

目的：观察bevacizumab对人Tenon囊成纤维细胞迁移能力的影响,探讨青光眼术后滤过泡瘢痕化的对策。方法：采用从陕西省人民医院中心实验室细胞库中取出冻存的人Tenon囊成纤维细胞,采用细胞复苏法,遵循无菌原则,进行常规培养。创伤划痕试验：待细胞融合度达到80%时在单层细胞表面划出一条无细胞的刮除带,空白对照组加入不含血清的DMEM培养液,bevacizumab处理组加入 bevacizumab 浓度为1 mg/mL 不含血清的DMEM培养液,分时段(0,24,48,72h)观察并测量划痕宽度。结果：人Tenon囊成纤维传代细胞显微镜下观察呈长梭形,细胞核位于细胞的中部,核较大,胞浆丰富,生长时呈漩涡状排列走形,增殖能力强,符合成纤维细胞的一般形态。冻存和复苏后细胞的形态结构和生物学特点维持不变。细胞划痕试验显示：0h时,两组细胞划痕初始宽度相等;24 h 时两组细胞迁移距离基本一致;48 h 时bevacizumab处理组细胞迁移距离明显小于空白对照组;72 h时空白对照组划痕基本愈合, bevacizumab处理组细胞迁移距离较48 h无明显变化,且细胞死亡数目较多。结论：利用细胞复苏法可成功培养形态结构和生物学特性稳定的传代人Tenon囊成纤维细胞,为实验研究奠定细胞学基础。成纤维细胞本身具有较强的迁移能力,外源性bevacizumab作用可以明显抑制细胞的迁移,作用时间过长时,会造成细胞的过多死亡。抗新生血管药物对成纤维细胞的迁徙具有一定的抑制作用,未来很有可能成为眼科临床抗击青光眼术后滤过泡瘢痕化的重要手段。     

人眼Tenon's囊成纤维细胞原代培养的研究

目的探讨体外培养原代人眼Tenon’s囊成纤维细胞的方法及其生长特性,为抗纤维化研究提供靶细胞模型。方法取翼状胬肉及斜视手术患者的Tenon’s囊组织,用组织块法培养原代成纤维细胞。用免疫荧光方法鉴定细胞。对细胞进行传代、冻存和复苏的观察。对复苏后的细胞行MTT法检测其活力并绘制生长曲线。结果人眼Tenon’s囊成纤维细胞可以在体外用组织块方法培养出来,呈典型的长梭形。免疫荧光鉴定细胞波形蛋白染色阳性。细胞多次传代后依然生长迅速,3 d即可长满瓶底。复苏后细胞2~6 d处生长对数期,增殖能力良好。结论人眼Tenon’s囊成纤维细胞体外生长状态良好,可以液氮冻存,复苏后细胞活力较强,可以用于抗纤维化增生的基础研究。     

胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段晶状体超微结构的改变

目的:观察胰岛素抵抗(IR)大鼠血糖正常阶段的晶状体超微结构改变方法:高糖高脂饲料(2H)和高糖高脂高盐(3H)饲料喂养SD大鼠4mo,复制IR模型,普通饲料喂养的SD大鼠为正常对照,透射和扫描电镜观察晶状体结构。结果:透射电镜下观察,2H组,晶状体纤维细胞线粒体肿胀,嵴消失,空泡化,细胞质有脂肪沉积。3H组,细胞间隙变宽,有脂肪沉积,缝隙连接结构破坏。扫描电镜下观察,2H组和3H组浅层皮质纤维细胞体积增大,形状、排列紊乱,大范围融合;深层皮质纤维细胞表面不规则;细胞之间的间隙均明显扩大。结论:胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段晶状体已经有超微结构的病理改变。     

过氧化氢对体外培养的兔晶体上皮细胞凋亡的诱导

目的研究H2O2诱导兔晶体上皮细胞凋亡.方法采用终浓度250μmol/LH2O2处理兔晶体上皮细胞,分别用TUNEL法、流式细胞仪和透射电镜检测H2O2处理后的兔晶体上皮细胞.结果用H2O2处理后的兔晶体上皮细胞,TUNEL法可见胞核呈棕褐色着染,苏木素不能复染;流式细胞仪检测到约9.6×105细胞出现亚二倍体峰,二倍体峰几近消失;透射电镜下细胞膜完整,但表面微绒毛消失,细胞质浓缩,胞浆内细胞器结构不清晰,并见大量大小不等的空泡,核质比例增大,胞核呈圆形,核膜双层结构不清,呈光滑状,核内染色质聚集成块,部分染色质边集.结论终浓度250μmol/LH2O2可以诱导兔晶体上皮细胞发生凋亡.     

Treatment of retinal detachment of the course of retinopathy of prematurity

Cryo- and laser therapy of stage 3 have reduced, but not eliminated the occurrence of retinal detachment in stages 4a, 4b and 5 of ROP. In this disease the treatment of these stages is still the greatest challenge to the ophthalmologist. Therefore, the aim of this paper is to present our up-to-date possibilities of treatment of different kinds of retinal detachments in ROP, including segmental scleral buckling, encircling scleral buckling, scleral resection, vitrectomy and its modifications in ROP. Guidelines of surgery of retinal detachment in active stage 4 and 5 of retinopathy of prematurity have been described.     

Analysis of some of the possible neonatal risk factors of development of retinopathy of prematurity

PURPOSE: The aim of the study was to evaluate some of the possible risk factors for retinopathy of prematurity (ROP) treated with laser photocoagulation or cryocoagulation. MATERIAL AND METHODS: The study comprised 71 preterm infants with ROP needing treatment and 118 prematures without ROP or with ROP requiring no treatment, as a control group. All infants were born with gestational age < or = 32 weeks and birth weight < or = 1500g. The perinatal variables, including some of clinical data, the length of mechanical ventilation as well as continous positive airway pressure (CPAP), duration of total parenteral nutrition and some of laboratory data were analyzed, to evaluate their correlation with the development of ROP. RESULTS: Gestational age before 28 weeks (OR = 5.11), episodes of convulsiones (OR = 2.15), mechanical ventilation for more than 20 days (OR = 5.86) and > 30 days (OR = 7.47), CPAP for more than 5 days (OR = 4.15) and > 10 days (OR = 2.84), total parenteral nutrition for more than 10 days (OR = 7.84) and > 20 days (OR = 9.02) and elevated peak of alanine aminotransferase (AIAT) levels (OR = 3.17) were significant risk factors for ROP requiring treatment. CONCLUSIONS: The opthalmic examination for retinopathy of prematurity requiring laser photocoagulation or cryocoagulation should be obligatory for prematures born < or = 32 weeks of gestational age, with birth weight < or = 1500 g.The frequency of the consecutive ophthalmic examinations depends on the severity of prematurity and on the presence and intensification of the risk factors for ROP.     

角膜曲率的分析

目的：探讨我国人角膜曲率半径的正常值及不同性别、不同年龄的角膜曲率半径差异。方法：对10998只眼的角膜曲率进行检测，并按男、女10岁一组进行统计分析。结果：（1）K1为7.65mm,K2为7.71mm，平均K值为7.67mm。较眼科学正常值K:7.77mm短0.1mm。（2）K的平均值男性较女性的长0.1155mm。且女性各年龄段角膜曲率半径均男性的有不同程度的减短。（3）男女均随年龄的增长，角膜曲率半径大致呈递减趋势，即：角膜曲率半径与年龄成反比关系。（４）男女K1,K2之比，均随年龄增长而增长，即K1逐渐增长而增长，即　K1值逐渐增长，K2逐渐减短。结论：本文测定的角膜曲率较眼科文献中的提供的正常值短0.1mm，并且存在着年龄、性别上的差异。     

艾滋病眼部并发症的资料分析

目的:通过调查分析,了解艾滋病眼部并发症的临床表现、治疗及预后。方法:收集赞比亚卡布韦总医院眼科2008-08/2009-08就诊患者。结果:艾滋病眼部并发症症状重,病程长,致盲率高。结论:充分认识、掌握艾滋病眼部并发症的临床表现,提高艾滋病的检出率,早发现、早治疗,提高艾滋病患者的生活质量。同时应强调预防是降低艾滋病发生率的关键。