慢性乙型肝炎和肝硬化患者血浆miR-181a水平变化*

目的 探讨慢性HBV感染者血浆微小RNA(miRNA)-181a的变化。方法 采用实时荧光定量PCR法检测20例乙型肝炎病毒携带者（ASC）、20例慢性乙型肝炎（CHB）患者、20乙型肝炎肝硬化（LC）患者和20例健康人血浆miR-181a水平,常规检测血清HBV DNA。结果 NC组、ASC组和LC组血浆miR-181a水平分别为（1.01±0.03）、（0.97±0.02）、（0.91±0.02）,而CHB组患者为（0.74±0.03）,显著低于前三组（P<0.001）;ASC组和LC组血清HBV DNA（3.86±2.89）lg copies/ml和（2.47±3.26）lg copies/ml,而CHB组患者为（8.96±1.63）lg copies/ml（P<0.001）;CHB患者血浆miR-181a水平与HBV DNA水平呈负相关（r=0.76,P<0.001）,ASC组和LC组血浆miR-181a水平与HBV DNA水平无显著相关性。结论 CHB患者血浆miR-181a水平降低,其意义还需要进一步探讨。     

慢性HBV感染者外周血白细胞GRP78、CHOP和XBP1 mRNA水平变化

目的探讨慢性HBV感染者外周血白细胞内质网应激相关基因糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和X盒结合蛋白l(XBP1)m RNA水平及其与临床指标的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术检测40例正常人(NC)、43例慢性无症状HBV携带者(ASC)、47例慢性乙型肝炎(CHB)、41例乙型肝炎肝硬化(LC)和35例乙型肝炎相关肝细胞癌(HCC)患者外周血白细胞GRP78、CHOP和XBP1 m RNA水平,分析其与病毒学和生化学指标的相关性。结果 ASC、CHB、LC和HCC患者外周血白细胞GRP78 m RNA水平和XBP1 m RNA水平分别为(0.58±0.53)和(0.76±0.57)、(0.59±0.67)和(0.50±0.64)、(1.07±1.09)和(1.44±1.00)和(1.17±1.69)和(0.90±1.33),均显著高于健康人[分别为(0.01±0.61)和(0.01±0.97),P0.01和P0.05];在HBs Ag1500IU/ml、1500~20000IU/ml和20000IU/ml组患者,GRP78 m RNA水平分别为(0.48±0.59)、(0.76±0.56)和(0.74±0.56),三组间差异有统计学意义(P0.05);HBV DNA水平为1×103~105copies/ml组XBP1 m RNA水平为(0.86±1.13),显著低于HBV DNA1×105copies/ml组[(1.44±1.31),P0.05];在不同转氨酶水平间、HBe Ag阳性与阴性组间和胆红素正常与升高组间,以上三种基因m RNA水平差异均无统计学意义(P0.05)。结论内质网应激可能与慢性HBV感染后的疾病进展相关。     

慢性乙型肝炎病毒感染者血清MIF、IL-17和IL-10水平变化

目的探讨HBV感染者外周血巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、IL-17和IL-10水平变化的临床意义。方法收集60例慢性无症状HBV携带者、60例慢性乙型肝炎患者、60例乙型肝炎肝硬化患者、60例肝癌患者和50例健康对照者空腹血清,采用ELISA法检测血清MIF、IL-17和IL-10水平;采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量;采用全自动生化分析仪检测血清肝功能指标。结果与健康对照组[(1.9±1.4)ng/ml]比,ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血MIF水平均显著升高[分别为(5.7±2.8)ng/ml、(10.5±4.1)ng/ml、(17.7±7.4)ng/ml、(19.8±9.9)ng/ml,P0.01],其中HCC组最高,ASC组最低;与健康对照组[(4.4±2.2)ng/ml]比,ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-17水平均显著升高[分别为(8.6±4.3)ng/ml、(20.7±6.6)ng/ml、(23.4±15.1)ng/ml、(16.0±8.7)ng/ml,P0.01或P0.05],其中LC组最高,ASC组最低;与健康对照组[(12.9±4.6)ng/ml]比,ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-10水平均显著升高[分别为(237.2±72.9)ng/ml、(184.68±59.0)ng/ml、(356.6±150.8)ng/ml、(287.9±88.8)ng/ml,P0.01],其中LC组最高,CHB组最低。结论 MIF、IL-17和IL-10在慢性HBV感染过程中可能起重要作用,检测血清细胞因子水平可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。     

IFNL4和IL-28B基因多态性检测评估慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗应答价值分析

目的探讨检测血干扰素λ4(IFNL4)和白介素-28B(IL-28B)基因多态性对慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗后应答的评估价值。方法 2015年3月～2017年3月收治的CHB患者140例,均接受聚乙二醇干扰素α-2a治疗12个月。应用市售试剂盒检测外周血IFNL4和IL-28B基因多态性。结果在治疗结束时,在140例CHB患者中,108例(77.1%)获得应答,32例(22.9%)无应答;应答组IL-28Brsrs8099917位点基因TT型占比为88.9%,显著高于无应答组的68.8%(P0.05);应答组血清ALLT、AST和HBV DNA水平分别为(35.4±3.2) U/L、(38.6±2.1) U/L和(3.8±2.1) lg copies/ml,均显著低于无应答组的(61.5±4.8) U/L、(73.5±3.0) U/L和(5.2±3.1)lg copies/ml (P0.05);125例IFNL4 TT/TT型患者血清ALT、AST和HBV DNA水平分别为(47.1±2.5) U/L、(49.1±1.6) U/L和(4.5±1.2) lg copies/ml,与15例TT/△G型患者的(48.0±2.1) U/L、(59.4±1.5) U/L和(4.7±1.3)lg copies/ml比,无显著性差异(P0.05);118例IL-28B TT型患者血清ALT、AST和HBV DNA水平分别为(36.4±2.1) U/L、(38.9±2.7) U/L和(4.0±1.7) lg copies/ml,显著低于22例TG型患者[分别为(59.0±1.4) U/L、(72.1±1.1) U/L和(6.0±2.1) lg copies/ml(P0.05)。结论 CHB患者IFNL4rs368234815位点基因以TT/TT型和IL-28Brs8099917位点基因以TT型居多,检测IFNL4基因多态性可能对预测抗病毒疗效无明显指导意义,而检测IL-28B基因多态性可能对抗病毒疗效有一定的预测价值。     

慢性HBV感染者外周血ATF6水平检测及其临床意义

目的了解慢性HBV感染者外周血活化转录因子6(ATF6)水平,探究其与临床指标的关系。方法选取2016年3月-2019年2月在昆山市第一人民医院就诊的慢性无症状HBV携带者(ASC)、慢性乙型肝炎(CHB)及乙型肝炎肝硬化(LC)患者各20例,收集同期20例体检健康者作为正常对照(NC)。应用实时荧光定量PCR技术检测NC、ASC、CHB及LC组外周血白细胞ATF6 mRNA水平,分析其与临床指标的关系;采用ELISA法检测NC及CHB组血清ATF6蛋白水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验; 2组间比较采用独立样本t检验。结果 ASC、CHB及LC组患者的外周血白细胞ATF6 mRNA水平分别为1. 99±0. 70、2. 12±0. 75、1. 97±0. 85,均明显高于NC组(0. 71±0. 26)(P值均0. 05)。ATF6 mRNA表达水平在不同HBsAg水平、HBV DNA定量、转氨酶水平、HBeAg定性及TBil水平各分组间差异均无统计学意义(P值均0. 05)。CHB组血清ATF6蛋白水平明显高于NC组[(7. 66±1. 94) ng/ml vs(3. 29±0. 30) ng/ml,t=-9. 971,P 0. 001]。结论ATF6在慢性HBV感染者外周血中有着更高的表达,其可能参与慢性HBV感染病程。     

慢性HBV感染者血清IL-15和IL-16水平与HBV DNA载量的关系及临床意义探讨

目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用聚合酶链反应法检测HBV DNA载量。结果随着患者病情加重,血清IL-15和IL-16水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值,分别是(222.89±96.95)ng/ml和(109.77±11.96)ng/ml,显著高于其他各组(P0.01);与健康人比,各种HBV感染者血清细胞因子水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);在CHB患者,外周血HBV DNA高载量组IL-15和IL-16水平最高,分别是(86.67±15.92)ng/ml和(41.64±7.30)ng/ml,显著高于低载量组(P0.05)。结论 IL-15和IL-16可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程。     

慢性HBV基因型C型感染者临床特征分析

目的:在了解延安地区乙型肝炎病毒基因型分布特征的基础上,进一步探讨延安地区HBV基因型C型感染者的临床分型与病毒学和生化学指标的特征.方法:随机选取HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者122例(病史均超过12 mo),在可检出基因型121例患者中,慢性无症状HBV携带者(ASC)58例,慢性乙型肝炎(CHB)46例,肝硬化(LC)17例,采用乙型肝炎病毒核酸扩增荧光定量检测HBV DNA载量;时间分辩荧光免疫分析(TRFIA)技术定量检测乙肝血清标志物,微板核酸杂交-ELISA法测定HBV基因型.结果:在121例可检出基因型的患者中,C型116例(95.87%-95%CI:92.32%-99.42%).C基因型感染者中:ASC组HBV DNA载量、HBeAg定量明显高于CHB组及LC组(t=3.94、4.75,P=0.000,0.000;t=4.82、3.94,P=0.000,0.001):ASC组HBeAb定量、ALT水平明显低于CHB组及LC组(t=3.71、12.09,P=0.000、0.000;t=12.44、7.81.P=0.000、0.000).CHB组与LC组HBV DNA载量、HBeAg定量、ALT水平明没有明显差异(P=0.38,0.58,0.047);ASC组、CHB组、LC组年龄之间比较差异明显(t=5.07、9.72、4.99,P=0.000、0.000、0.000),ASC组年龄最低;CHB组、LC组男性比例明显高于ASC级(X2=9.37,5.18,P=0.002,0.023).结论:HBV基因型C型是延安地区慢性HBV感染者优势株:C型感染者ASC组、CHB组、LC组间分析结果基本符合慢性HBV感染者临床自然史转归特征.     

阿德福韦酯联合苦参素治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎临床疗效观察

目的：探讨阿德福韦酯（ADV）联合苦参素治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）患者的临床疗效及安全性。方法将80例确诊为HBeAg阳性的CHB患者随机分为对照组和治疗组,对照组40例使用ADV治疗,治疗组40例使用ADV联合苦参素治疗,两组均治疗12 m;在治疗3、6、9、12 m后,观察临床表现、血生化、血清HBV DNA载量、HBV血清学标志物变化及不良反应。结果在治疗6、9和12 m时,治疗组患者血清HBV DNA载量为（3.97±1.15） lg copies/ml、（3.38±1.24） lg copies/ml和（3.09±1.19）lg copies/ml,均显著低于对照组水平[（4.61±1.32）lg copies/ml、（4.17±1.12） lg copies/ml和（3.81±1.26）lg copies/ml,P＆lt;0.05];在3、6、9 m两组患者血清ALT水平无显著性差异,但均低于治疗前水平,在12 m时治疗组ALT为（30.1±15.4） U/L,显著低于对照组患者[（39.9±14.5）U/L,P＆lt;0.05];在治疗3 m时,两组间血清HBV DNA转阴率和ALT复常率无统计学差异,但在治疗6、9、12 m时,治疗组患者血清HBV DNA转阴率为55.0%、65.0%和77.5%,显著高于对照组[32.5%、42.5%和57.5%,P＜0.05）];在治疗9和12 m时,治疗组患者ALT复常率为82.5%和92.5%,显著高于对照组水平[60.0%和75.0%,P＜0.05];在治疗12 m时,治疗组血清HBeAg阴转率及HBeAg血清学转换率分别为47.5%和42.5%,显著高于对照组[25.0%和20.0%,P＜0.05];两组治疗期间未出现严重的不良反应。结论 ADV联合苦参素治疗HBeAg阳性CHB患者临床疗效和安全性好。     

血清乙型肝炎病毒DNA定量在慢性乙型肝炎病毒感染的临床意义

目的:测定慢性HBV感染不同状态时血清HBV-DNA水平,阐明其在判断病情和指导治疗中的价值。方法:共90例慢性HBV感染患者接受研究,共中HBeAg阳性无症状携带者(ASC)15例,HBeAg阳性慢性肝炎(CHB)17例,HBeAg阴性CHB14例,HBeAg阴性ASC16例;另有28例HBeAg阳性CHB接受干扰素治疗。血清HBV-DNA浓度测定应用AG-9600Amplisensor荧光PCR定量系统,测定范围定为10~(3.00-9.50)copies/ml。结果:血清HBV-DNA在HBeAg阳性ASC病例最高,达10~(8.46±0.71)copies/ml,其次依次为HBeAg阳性CHB(10~(7.24±0.54) cooies/ml)、HBeAg阴性CHB(10~(6.04±0.69) copies/ml),HBeAg阴性ASC者最低,为10~(3.80±0.71)copies/ml。4组病例相互之间差异在统计学上均有显著意义(P<0.01)。28例BHeAg阳性CHB患者接受干扰素治疗,治疗结束时呈完全应答(CR)者13例,无应答(NR)15例。对13例CR患者继续随访6个月,其中4例血清ALT再升高(复燃)。血清HBV-DNA水平在治疗前,CR不伴ALT复燃组HBV-DNA为10~(3.44±0.43)copies/ml,明显低于CR伴ALT复燃组(10~(6.84±0.51))(P<0.01)和NR组(10~(7.18±0.66))(P<0.01)。结论:测定血清HBV-DNA水平有助于鉴别慢性HBV感染的不同状态;在HBeAg阳性CHB病例,干扰素治疗结束时,检测HBV-DNA水平对于判断疗效有指导价值,HBV-DNA低于104copies/ml往往能取得持久疗效。     

黄芩苷胶囊联合恩替卡韦降低慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒前基因组RNA水平的探索性研究

目的明确黄芩苷胶囊联合恩替卡韦(entecavir,ETV)对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)前基因组RNA(pregenomic ribonucleic acid,pg RNA)水平的影响。方法选取2018年1月至2020年12月于首都医科大学附属北京地坛医院、吉林省肝胆病医院、开封市传染病医院及兰州市第二人民医院等就诊的79例初治CHB患者为研究对象进行队列研究,黄芩苷胶囊组(56例)采用ETV联合黄芩苷胶囊治疗,对照组(23例)仅采用ETV治疗。收集患者基线人口学(年龄、性别)、病毒学[乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B virus e antigen,HBe Ag)阳性、HBV DNA、HBV pgRNA]、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、肝硬化及肝脏弹性检查(liver stiffness measurement,LSM)值等指标,治疗4周与12周时各随访1次。比较两组患者治疗4周和12周HBV DNA及pgRNA下降情况。采用多因素Logistic回归分析治疗12周HBV pgRNA下降≥1×lg拷贝/ml的影响因素。结果黄芩苷胶囊组和对照组患者年龄、性别、肝硬化患者比例、HBeAg阳性患者比例、基线HBV DNA载量、基线HBV pgRNA水平等差异无统计学意义(P均 0.05)。治疗4周后,黄芩苷胶囊组和对照组患者HBV DNA下降水平差异无统计学意义[(2.88±1.21)lg IU/ml vs(2.70±1.41)lg IU/ml,t=0.551,P=0.583],pg RNA下降≥1×lg拷贝/ml患者比例差异无统计学意义[28.1%(16/56)vs 8.7%(2/23);χ~2=3.661,P=0.056]。黄芩苷胶囊组与对照组分别有50例与19例患者随访至12周,两组患者HBV DNA下降水平差异均无统计学意义[(3.86±1.30)lg IU/ml vs(3.25±1.58)lg IU/ml;t=1.548,P=0.126],黄芩苷胶囊组HBV pgRNA下降≥1×lg拷贝/ml患者比例显著高于对照组[54.0%(27/50)vs 26.3%(5/19),χ~2=4.243,P=0.039]。多因素Logistic回归分析表明基线ALT水平(OR=1.368,95%CI:1.073～1.743,P=0.011)和联合黄芩苷胶囊治疗(OR=4.247,95%CI:1.090～16.545,P=0.037)是影响患者12周HBV pgRNA下降≥1×lg拷贝/ml的独立预测因素。结论本研究的初步证据提示在ETV抗病毒治疗基础上联合黄芩苷胶囊可进一步降低CHB患者HBV pgRNA水平。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Galectin-3基因水平对聚乙二醇干扰素α治疗应答的影响*

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)半乳糖凝集素-3(galectin-3)表达水平对干扰素治疗应答的影响。方法 2016年12月～2019年12月我院收治的CHB患者106例,CHB患者均给予聚乙二醇干扰素α-2a治疗48周,随访24周。分离PBMCs,采用PCR和Western blot法检测PBMCs Galectin-3表达水平。结果 在治疗24 w,本组CHB患者应答27例(22.6%),在治疗48 w,应答44例(67.0%);入组时,24 w应答组血清AST、ALT和HBV DNA水平【分别为(122.8±98.2)U/L、(108.1±51.1)U/L和(6.3±0.6)lg copies/ml】,与48 w应答组【分别为(124.2±94.7)U/L、(113.1±47.3)U/L和(6.5±0.8)lg copies/ml】或与未应答组【分别为(121.9±97.4)U/L、(96.1±56.4)U/L和(6.8±0.9)lg copies/ml】比,差异无显著性统计学意义(P>0.05);治疗24 w应答组外周血单个核细胞Galectin-3 mRNA相对水平为(3.0±0.5),蛋白相对表达量为(1.4±0.2),均显著高于治疗48 w应答组【分别为(1.8±0.4)和(0.9±0.1),P<0.05】或未应答组【分别为(1.1±0.2)和(0.8±0.1),P<0.05】。结论 外周血单个核细胞Galectin-3水平与接受α-干扰素治疗的CHB患者应答密切相关,可以根据检测的结果预判治疗效果,值得临床进一步验证。     

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎过程中应答不佳的相关因素分析

目的探讨阿德福韦酯治疗初治慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)过程中应答不佳的相关因素。方法收集2011-01~2014-01应用阿德福韦酯治疗80例CHB患者的临床资料,其中HBeAg阳性患者46例,HBeAg阴性患者34例,分析阿德福韦酯治疗CHB应答不佳的相关因素。结果 HBeAg阳性CHB患者中,治疗前HBV DNA载量、HBs Ag定量、体重指数是完全应答与否的影响因素(P0.05)。HBeAg阴性CHB患者中,治疗前HBV DNA载量、体重指数是完全应答与否的影响因素(P0.05)。HBeAg阳性时,rt A181V和rt N236T位点变异率≥5%时易引起应答不佳(P0.05)。HBeAg阴性时,rt N236T≥5%时易引起应答不佳(P0.05),rt A181V5%与应答不佳无关(P0.05)。HBeAg阳性组治疗4周时,HBV DNA下降幅度对应答没有明显影响(P0.05)。治疗12周、24周时,HBV DNA下降幅度在低于(1.326±0.907)log10copies/ml、(1.279±1.156)log10copies/ml时容易出现应答不佳(P0.05)。HBeAg阴性组治疗4周时,HBV DNA下降幅度对应答没有明显影响(P0.05)。治疗12周、24周时,HBV DNA下降幅度在低于(0.983±0.706)log10copies/ml、(1.178±0.736)log10copies/ml时容易出现应答不佳(P0.05)。而未发现谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的变化幅度对应答有影响(P0.05)。结论患者的基线资料及治疗过程中HBV DNA下降幅度是阿德福韦酯治疗CHB出现应答不佳的影响因素,应根据患者的基本情况制定个体化的治疗方案,以降低应答不佳现象的发生率。     

乙型肝炎病毒总DNA、共价闭合环状DNA和HBsAg在各种慢性乙型肝炎病毒感染者中的定量检测

目的 定量检测慢性乙型肝炎(CHB)、乙型肝炎肝硬化(LC)、肝细胞癌(HCC)患者HBV总DNA(tDNA)、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)和HBsAg,并探讨其特点.方法 荧光定量PCR检测21例CHB、23例LC和25例HCC患者外周血和肝组织标本HBV tDNA、HBVcccDNA,化学发光法定量检测外周血HBsAg.正态数据采用ANOVA分析和t检验,相关性分析采用Pearson检验,非正态数据采用秩和检验.结果 在CHB、LC和HCC患者中,外周血HBVtDNA分别为(5.38±2.08)、(4.96±1.65)和(4.18±0.91)lg拷贝/mL,肝组织HBV tDNA分别为(7.18±1.91)、(6.51±1.87)和(5.87±1.47)lg拷贝/μg,肝组织HBV cccDNA分别为(3.53±2.03)、(2.63±2.13)和(0.58±1.40)lg拷贝/μg,外周血H BsAg分别为(3.30±0.65)、(3.12±0.52)和(2.60±1.03)lg IU/mL,CHB与HCC患者比较,差异均有统计学意义(t=2.446,P=0.013;t=2.562,P=0.014;t=5.799,P＜0.01;t=2.709,P=0.003),LC与HCC患者肝组织HBVcccDNA及HBsAg定量比较,差异有统计学意义(t=-3.894,P＜0.01;t=-2.237,P=0.023).外周血均未检出HBV cccDNA.HBsAg定量与外周血HBV tDNA(r=-0.290,P=0.016)、肝组织HBV tDNA(r=0.372,P=0.002)及肝组织HBV cccDNA(r=0.378,P=0.001)均有关.结论 HBV tDNA、HBV cccDNA、HBsAg在CHB、LC、HCC患者呈逐渐降低趋势,HBsAg定量与外周血HBV tDNA、肝组织HBV tDNA及肝组织HBV cccDNA有关.     

外周血γδT细胞在评估Peg-IFNα-2a治疗慢性乙型肝炎效果中的应用价值

目的探讨外周血γδT细胞对聚乙二醇干扰素(Peg-IFN)α-2a治疗慢性乙型肝炎(CHB)疗效的评估价值。方法回顾性分析我院106例CHB患者的临床资料,所有患者均接受Peg-IFNα-2a治疗,根据疗效分为病毒学应答组、病毒学未应答组。比较两组外周血γδT细胞、HBV DNA水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血γδT细胞对CHB疗效的评估价值。结果在106例CHB患者中,有85例病毒学应答,总病毒学应答率为80.19%。病毒学应答组治疗后的外周血γδT细胞为(2.39±0.62)%,显著低于病毒学无应答组的(5.58±0.91)%(P0.05)。病毒学应答组治疗后的HBV DNA为(3.32±0.73)lg拷贝/mL,显著低于病毒学无应答组的(6.41±0.99)lg拷贝/mL(P0.05)。外周血γδT细胞评估CHB疗效的曲线下面积为0.653。结论 Peg-IFNα-2a治疗后病毒学应答的CHB患者外周血γδT细胞水平下降,且其表达水平与HBV DNA呈正相关。     

乙型肝炎病毒感染不同状态下血清病毒反转录酶区准种特点及其临床意义

目的 研究HBV感染不同状态下血清病毒反转录酶(RT)区准种特点和临床意义.方法 50例未接受抗病毒治疗的HBV感染者分为慢性HBV携带者(ASC)组10例、慢性乙型肝炎(CHB)组30例和乙型肝炎肝硬化(LC)组10例.收集患者外周血血清,抽提HBV DNA,PCR扩增RT区基因组后克隆、测序.每例患者获得15～30个序列,进行HBV RT区的准种异质性分析及相关基因突变统计等生物信息学分析.多均数比较采用方差分析,中位数比较采用非参数检验分析,非计量资料比较采用x2检验.结果 总共测序1221个克隆,其中ASC组152个,CHB组780个,LC组289个.3组间基因型构成差异无统计学意义.准种复杂度为LC组＞CHB组＞ASC组,3组间差异有统计学意义(F=33.400,P＜0.05).准种离散度为LC组＞CHB组＞ASC组,LC组与CHB组及ASC组均差异有统计学意义(F=18.070,P＜0.05),CHB组与ASC组间差异无统计学意义.结论 慢性HBV感染过程中,免疫清除期比免疫耐受期具有更宽的HBV变异谱系,随着病程的延长和病情加重,HBV的准种趋向复杂.     

恩替卡韦与阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者近期疗效和不良反应比较研究

目的 比较恩替卡韦（ETV）与阿德福韦酯（ADV）治疗慢性乙型肝炎（CHB）患者的近期疗效与安全性。方法 2014年3月~2016年3月我院收治的CHB患者80例,接受ETV治疗40例,接受ADV治疗40例。观察72 w疗效。结果 在治疗4 w、12 w、48 w和72 w末,ETV组患者血清HBV DNA水平分别为（5.02±0.62） lg copies/ml、（4.10±0.45） lg copies/ml、（3.20±0.34） lg copies/ml和（1.45±0.32） lg copies/ml,均显著低于ADV组【（5.98±0.75） lg copies/ml、（5.08±0.54） lg copies/ml、（4.02±0.41） lg copies/ml和（2.76±0.43） lg copies/ml,P<0.05】;在治疗12 w、48 w和72 w末,ETV组血清ALT水平分别为（71.3±30.4） U/L、（45.2±23.4） U/L和（40.4±17.2） U/L,均显著低于ADV组【（101.7±34.2） U/L、（65.7±30.4） U/L和（61.2±22.3）U/L,P<0.05】;两组均未发生严重的不良反应。结论 在治疗CHB患者过程中,ETV和ADV均具有一定的效果,但在降低血清HBV DNA和ALT水平方面,ETV更具优势。     

血清乙型肝炎病毒前基因组RNA水平对核苷(酸)类似物初治的慢性乙型肝炎患者疗效预测价值*

目的 探讨应用血清乙型肝炎病毒前基因组RNA(HBV pgRNA)水平预测核苷(酸)类似物初治的慢性乙型肝炎(CHB)患者疗效的价值。方法 2015年8月～2019年12月我院诊治的初始治疗的CHB患者107例,接受恩替卡韦、替诺福韦或替比夫定治疗观察48 w。采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV pgRNA,采用ELISA法检测血清HBsAg和HBeAg。应用Logistic回归分析影响疗效的因素,应用MedCalc1 5.1统计学软件绘制ROC,计算曲线下面积(AUC)评价血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物治疗的疗效。结果 在治疗48周末,27例(25.2%)患者不应答,另80例(74.8%)患者获得完全应答或部分应答;(完全或部分)应答组血清HBV DNA载量为(6.1±1.0)lg copies/mL,显著低于不应答组【(7.2±1.2) lg copies/mL,P<0.05】,外周血CD4^＋/CD8^＋比值为(0.7±0.2),显著高于不应答组【(0.6±0.1),P<0.05】,血清HBeAg阳性率为41.3%,显著低于不应答组(70.4%,P<0.05),血清HBV pgRNA水平为(5.3±0.8)lg copies/mL,显著低于不应答组【(6.5±1.1)lg copies/mL,P<0.05】;Logistic回归分析显示,基线HBV DNA载量、HBeAg状态和血清HBV pgRNA水平均为影响核苷(酸)类似物治疗的CHB患者疗效的因素(OR=2.793、OR=3.827、OR=4.035,P均<0.05);经ROC分析显示,血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物治疗CHB患者不应答的最佳截断点为5.89 lgcopies/mL,AUC值为0.865(95%CI:0.816～0.905),其预测的灵敏度为74.1%(20/27),特异度为88.8%(71/80)。结论 监测血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物初治的CHB患者的疗效有一定的临床应用价值,如果检测结果稳定,不失为一种临床决策的参考依据。     

巨噬细胞外泌体抑制HBV DNA复制

目的探讨巨噬细胞(macrophage,M?)外泌体抑制HBV DNA复制的机制及与慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)肝损伤的相关性。方法体外分离鉴定M?外泌体,并将其与Hep G2.2.15细胞共培养,利用实时定量PCR检测共培养后HBV DNA复制的变化,分别分析M?及其上清外泌体中微小RNA(micro RNA,mi RNA)-638的表达;同时入组CHB免疫活化(immune activation,IA)期、低(非)复制(inactive carrier,IC)期患者,并以同期健康者作为对照组,通过实时定量PCR检测血清外泌体中mi RNA-638的表达,并与肝损伤、HBV DNA载量进行相关性分析。结果 M?外泌体可以抑制HBV DNA复制;M?及其上清外泌体中mi RNA-638高表达;CHB患者IA期mi RNA-638的表达水平低于IC期;CHB患者血清外泌体中mi RNA-638的表达水平与ALT、AST和HBV DNA水平呈负相关。结论 M?外泌体可以抑制HBV DNA复制,外泌体中mi RNA-638的表达水平与肝脏炎性损伤和病毒复制密切相关,M?外泌体相关mi RNA可能是潜在的抑制HBV复制、减轻肝脏炎症的靶点。     

影响聚乙二醇干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎患者疗效的多因素分析

目的探讨应用α-干扰素治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清干扰素-γ诱导蛋白-10(IP-10)、I型干扰素受体(IFNAR)和辅助性T细胞17(Th-17)水平变化及其对治疗应答的影响。方法 2015年6月～2017年12月我科收治的105例CHB患者,采用聚乙二醇化干扰素α-2b治疗48周。采用RT-PCR法检测血清HBV DNA载量,采用双抗体夹心法检测血清干扰素-γ诱导蛋白-10(IP-10),采用RT-PCR法测定外周血单个核细胞α/β干扰素受体(IFNAR-α、IFNAR-β)、辅助性T细胞17(IL-17A)和IL-17F。采用多因素Logistic回归分析影响聚乙二醇化干扰素α-2b治疗CHB患者应答的影响因素。结果在治疗结束时,在105例CHB患者中获得完全应答56例(53.3%),未获得完全应答49例;单因素分析显示获得完全应答与未获得完全应答患者血小板、白蛋白、总胆红素、凝血酶原时间、IFNAR-α和IFNAR-β差异无统计学意义(P0.05),应答组基线白细胞计数、血清丙氨酸氨基转移酶、HBV DNA、HBs Ag、IP-10、IL-17A和、IL-17F水平分别为(5.6±1.7)×109/L、(108.6±9.5) U/L、(5.4±0.8) lg copies/ml、(4.6±0.9) lg IU/ml、(324.5±86.9) pg/ml、(3.2±0.6)平均荧光强度(MFI)、(3.1±0.5) MFI,与未应答组的(6.4±1.9)×109/L、(82.5±10.0)U/L、(6.1±0.9) lg copies/ml、(5.8±1.1) lg IU/ml、(381.4±79.6) pg/ml、(3.8±0.7) MFI、(3.6±0.7) MFI比,差异显著(P0.05);多因素Logistic回归分析显示,血清HBV DNA、HBs Ag、IP-10、IL-17A和IL-17F水平是影响α-干扰素治疗CHB患者应答的因素(P0.05)。结论除常识性认识到的血清HBV DNA和HBs Ag水平外,本研究发现检测血清IP-10和Th-17水平有助于对CHB患者在α-干扰素治疗后应答反应的预测,或许能为临床做出治疗决定有裨益。     

替比夫定对HBV高载量孕妇母婴传播阻断的疗效及安全性:一项随机对照研究

目的评价妊娠早期给予替比夫定口服对乙型肝炎病毒(HBV)高载量孕妇母婴垂直传播的阻断疗效和安全性。方法采用随机对照试验设计方案,将80例HBV高载量孕妇随机分为试验组和对照组,每组40例。试验组受试者在孕12周口服替比夫定600 mg,1次/d,服药至产后12周,同时给予复方甘草酸苷保肝治疗;对照组受试者只接受复方甘草酸苷保肝治疗。两组新生儿在出生后均接种乙型肝炎免疫球蛋白200 IU和乙肝疫苗20μg。比较两组孕妇受试者在分娩即刻和分娩后12 w血清HBV DNA水平。评估两组新生儿在出生时和6月龄时血清HBs Ag和HBV DNA阳性率,并比较两组新生儿胎龄、身长、头围、体质量和Apgar评分。同时,密切观察两组孕妇在服药期间的不良反应发生情况。结果分娩即刻和分娩后12 w,试验组受试者血清HBV DNA水平为(3.58±0.56)lg copies/ml和(2.98±0.32)lg copies/ml,显著低于对照组的(7.93±0.47)lg copies/ml和7.46±0.43)lg copies/ml(P0.01);新生儿出生时,试验组HBs Ag和HBV DNA阳性率分别为5.0%和2.5%,显著低于对照组的20.0%和17.5%(P0.05);两组新生儿出生时胎龄(P=0.64)、身长(P=0.44)、头围(P=0.93)、体质量(P=0.46)、Apgar评分(P=0.45)均无明显差异。结论乙型肝炎病毒高载量孕妇在孕12周开始应用替比夫定预防性抗病毒治疗可显著降低孕妇血清HBV DNA水平,降低新生儿HBV感染率,且未见孕妇和新生儿有不良反应。