甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织AMPK信号通路的影响*

目的 研究甘草酸二铵脂质配位体（DGLL）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法 以高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,在造模成功后分别给予DGLL或多烯磷脂酰胆碱（PPC）灌胃16周。采用免疫组化法检测肝组织磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白激酶α（P-AMPKα）蛋白表达,采用Real-time PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-1）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）、酰基辅酶A氧化酶（ACO）、肝脏型脂肪酸结合蛋白（L-FABP）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）mRNA。结果 DGLL组血清瘦素为（3.87±0.38）ng/ml,显著低于模型组【（4.68±0.39）ng/ml,P<0.01】或PPC组【（4.55±0.24）ng/ml,P<0.01】;DGLL组脂联素为（12.27±0.64）μg/ml,显著高于模型组【（10.46±0.28）μg/ml,P<0.01】,但与PPC组【（12.13±0.56）μg/ml,P>0.05】比,无统计学差异;DGLL组大鼠肝组织P-AMPKα蛋白阳性表达面积为（8.38±3.27）%,显著高于模型组【（1.81±0.90）%,P<0.01】或PPC组【（5.50±0.73）%,P<0.05】;DGLL组肝组织PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平分别为（1.07±0.14、0.91±0.05、1.61±0.54）,显著高于模型组【分别为（0.26±0.12、0.14±0.01、0.10±0.03,P<0.05】,但ACO mRNA水平（0.23±0.09）与模型组比,无统计学差异【（0.24±0.02）,P>0.05】;PPC组PPAR-γ和CPT-1 mRNA水平分别为（0.65±0.16）和（0.22±0.05）,显著低于DGLL组（P<0.05）,而GLUT-4和ACO mRNA水平（1.32±0.12和0.14±0.05）与DGLL组比,无统计学差异（P>0.05）;DGLL组肝组织ACC mRNA水平为（1.67±0.23）,显著低于模型组【（3.31±0.02）,P<0.05】或PPC组【（2.69±0.14）,P<0.05】;DGLL组L-FABP mRNA水平为（1.06±0.04）,显著低于模型组【（1.26±0.02）,P<0.05】,而与PPC组【（1.06±0.09）,P>0.05】比,无统计学差异。结论 DGLL能降低NAFLD大鼠血脂、血糖、胰岛素、HOMA-IR、瘦素水平,升高脂联素,并增加肝组织P-AMPKα蛋白表达,上调PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平、下调L-FABP和ACC mRNA水平,这些作用可能与其激活AMPK通路和改善NAFLD糖脂代谢紊乱有关。     

扶脾柔肝方对肝纤维化大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体-γ与转化生长因子-β1表达的影响

目的研究扶脾柔肝方(FRF)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ与转化生长因子(TGF)-β1表达的影响及机制。方法 80只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、扶正化瘀组、FRF大、中、小剂量组,采用四氯化碳加上乙醇复制大鼠HF模型,造模10 w成功后,给予对应药物干预,每日1次,连续4 w,正常对照组、模型组给予生理盐水。检测血清肝纤维化指标,采用苏木素-伊红(HE)染色观察HF程度,免疫组化法观察肝组织PPAR-γ的表达,q RTPCR、Western印迹方法检测肝组织PPAR-γ、TGF-β1 m RNA和蛋白表达水平。结果模型组的HF分期较其余组明显升高(P 0. 01),模型组大鼠肝纤维化指标较其余各组均明显升高(P0. 01),模型组肝组织PPAR-γm RNA和蛋白表达明显下调(P0. 01),TGF-β1表达明显升高(P0. 01);与模型组比较,各药物干预组肝组织PPAR-γm RNA和蛋白表达上调,TGF-β1 m RNA和蛋白表达下调,其中FRF大剂量组差异有统计学意义(P0. 01)。结论 FRF上调HF肝组织PPAR-γm RNA和蛋白表达水平,下调TGF-β1表达,可能是其抗HF作用机制之一。     

胆管细胞癌细胞CD147表达及其临床意义

目的探讨CD147在肝胆管结石并发胆管细胞癌(ICC)组织的表达及其临床意义。方法收集肝胆管结石并发ICC标本30例、对应的癌旁肝组织标本30例和正常肝标本10例。采用q RT-PCR法检测组织CD147m RNA水平,采用免疫组化法检测CD147蛋白的表达;采用Western-Blotting法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和9(MMP-9)蛋白的表达;采用肯德尔(Kendall)等级相关分析CD147 m RNA、CD147、MMP-2和MMP-9表达的相关性。结果经q RT-PCR检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147m RNA水平为(3.67±1.88),显著高于癌旁组织【(1.52±0.57),P0.01】和正常肝组织【(1.05±0.32),P0.01】,癌旁组织高于正常肝组织(P0.01);5 cm ICC组织CD147 m RNA相对水平(2.73±0.97)显著高于5 cm肿瘤组织【(1.03±0.32),P0.01】,有淋巴转移(2.68±0.74)组织显著高于无转移组织【(1.07±0.44),P0.01】,肿瘤分化程度低组织(2.71±0.86)显著高于中高分化组织【(1.06±0.42),P0.01】;不同年龄和性别患者ICC组织CD147 m RNA水平无显著性差异(P0.05);经免疫组化检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147蛋白表达相对水平为(27.95±4.90),显著高于癌旁组织【(13.34±9.59),P0.01】和正常肝组织【(2.18±0.66),P0.01】,而癌旁组织高于正常肝组织(P0.01);ICC组织MMP2表达量为(1.06±0.13),显著高于癌旁组织【(0.20±0.03),P0.01】和正常肝组织【(0.15±0.02),P0.01】,而癌旁组织MMP2表达量显著高于正常肝组织(P0.01);肝胆管结石并发ICC组织MMP9表达量为(0.93±0.12),显著高于癌旁组织【(0.17±0.03),P0.01】和正常肝组织【(0.15±0.03),P0.01】,而癌旁组织MMP9表达量显著高于正常肝组织(P0.01);在ICC组织中,CD147m RNA水平与MMP2蛋白表达呈正相关(r=0.457,P0.05);CD147m RNA水平与MMP9蛋白表达也呈正相关(r=0.428,P0.05);CD147蛋白与MMP2蛋白表达呈正相关(r=0.543,P0.05),CD147蛋白与MMP9蛋白表达也呈正相关(r=0.517,P=0.05)。结论 CD147 m RNA、CD147、MMP2、MMP9均在肝胆管结石并发ICC组织中表达增强,CD147的表达可能促进了MMP2和MMP9的表达上调,它们可能共同参与了胆管癌的发生和发展过程。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠内生性乙醇和肝组织乙醇代谢相关酶的变化

目的观察高脂饮食和高果糖饮食对大鼠肝脏病理、内生性乙醇、乙醇代谢酶的影响。方法将SD大鼠18只随机分为正常组(n=6),予以普通饲料喂养,高果糖组(n=6)接受普通饲料和含20%果糖水喂养,高脂组(n=6)接受高脂饲料喂养。造模16 w后,取肝组织进行非酒精性脂肪性肝病活动性评分(NAS);采用Biovison试剂盒检测门静脉血乙醇水平;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织乙醇脱氢酶(ADH1)和乙醛脱氢酶(ALDH2)m RNA水平;采用Western blot法测定肝组织ADH1和ALDH2蛋白表达水平;使用乙醇脱氢酶活性试剂盒测定肝组织匀浆乙醇脱氢酶活性。结果在16 w末,高果糖组大鼠肝组织表现为脂肪变性,高脂组大鼠肝组织主要表现为NASH;高脂组大鼠NAS评分为5.40±0.32,显著高于对照组【(1.10±0.25),P0.05】和高果糖组【(2.94±0.40),P0.05】;高脂组大鼠血清内生性乙醇水平【(1.30±0.15)nmol/μL】显著高于正常组【(1.00±0.10)nmol/μL,P0.05)】和高果糖组【(1.04±0.23)nmol/μL,P0.05)】;高脂组大鼠ADH1 m RNA水平显著高于正常组((1.30倍,P0.05)和高果糖组(1.36倍,P0.05);高脂组大鼠ALDH2m RNA水平显著高于正常组(1.55倍,P0.05)和高果糖组(1.44倍,P0.05);高脂组大鼠ADH1蛋白表达显著高于正常组(2.56倍,P0.05)和高果糖组(2.52倍,P0.05);高脂组大鼠ALDH2蛋白表达显著高于正常组(1.41倍,P0.05)和高果糖组(1.57倍,P0.05);高脂组大鼠肝脏乙醇脱氢酶活性为(175±28)μ/L,显著高于正常组【(72±13)μ/L,P0.05)】和高果糖组【(78±9)μ/L,P0.05)】。结论高脂饮食造模大鼠内生性乙醇浓度显著升高,乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶蛋白水平升高,乙醇脱氢酶活性显著升高。     

茵陈四苓颗粒对胆汁淤积性肝炎大鼠肝功能损害的改善作用及其机制研究*

目的 探讨茵陈四苓颗粒对胆汁淤积性肝炎大鼠肝功能损害的改善作用及可能的机制。方法 将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和茵陈四苓颗粒干预组,采用α-异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃法制备胆汁淤积性肝炎大鼠模型。采用RT-PCR法检测肝组织白介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)、超氧化物歧化酶(SOD)和法尼酯X受体(FXR)mRNA水平。结果 茵陈四苓颗粒干预组动物血清ALP和GGT水平分别为(254.3±16.4)U/L和(14.3±5.8)U/L,显著低于模型组【分别为(625.8±36.5)U/L和(26.7±7.9)U/L,P＜0.05】;血清IL-17、IFN-γ和丙二醛水平分别为(162.2±16.4)pg/ml、(28.9±6.2)pg/ml和(19.2±3.8)U/ml,显著低于模型组【分别为(223.4±18.8)pg/ml、(39.3±9.8)pg/ml、(28.6±2.4)U/ml,P＜0.05】,而血清SOD水平为(324.1±33.5)U/ml,显著高于模型组【(250.8±25.4)U/ml,P＜0.05】;茵陈四苓颗粒干预组肝组织IL-17和IFN-γ mRNA水平为(2.1±0.3)和(17.3±3.5),显著低于模型组【分别为(3.4±0.5)和(34.5±7.2),P＜0.05】,而SOD和FXR mRNA水平为(0.8±0.4)和(2.2±0.5),显著高于模型组【分别为(0.3±0.2)和(1.5±1.1),P＜0.05】。结论 茵陈四苓颗粒能明显改善胆汁淤积性肝炎大鼠肝组织损伤,其机制可能与调控IL-17、IFN-γ和MDA等因子水平,降低炎症反应和提高抗氧化能力有关。     

胆管细胞癌组织S100A6 mRNA及其蛋白表达变化

目的检测胆管癌组织S100A6 m RNA及其蛋白表达的变化。方法在40例胆管癌患者和40例胆道良性疾病,分别取胆管癌组织、癌旁组织和肝组织,检测S100A6 m RNA及其蛋白表达变化,采用ELISA法测定血清S100A6水平。应用单因素和多因素非条件Logistic回归分析造成胆管癌患者血清S100A6高水平的危险因素。结果在40例癌旁组织和肝组织中,S100A6蛋白分别阳性8例(20%)和12例(30%),显著低于肝内胆管癌组织的26例(65%,P0.05);癌旁组织和肝组织S100A6 m RNA相对水平分别为(0.92±0.33)和(1.12±0.46),显著低于肝内胆管癌组织的【(1.93±0.57),P0.05】;癌旁组织和肝组织S100A6蛋白相对表达量分别为(0.56±0.16)和(0.85±0.46),显著低于肝内胆管癌组织的【(1.63±0.51),P0.05】;肝内胆管癌患者血清S100A6水平为(2456.85±128.31)pg/ml,显著高于对照组的(2234.26±116.35)pg/ml(P0.05);S100A6与CEA、CRP、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度呈正相关(P0.05);多因素Logistic回归分析显示,肿瘤浸润深、淋巴结转移、TNM分期和细胞分化差是造成肿瘤患者血清S100A6高水平的危险因素(P0.05)。结论血清S100A6高水平的意义还有待于进一步研究。     

聚乙二醇干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和血清细胞因子水平变化

目的研究聚乙二醇干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和血清细胞因子水平的变化。方法 2014年1月~2016年1月我院收治的184例慢性乙型肝炎患者,92例接受聚乙二醇干扰素α-2b联合恩替卡韦治疗48 w,另92例只接受恩替卡韦治疗。使用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群,采用放射免疫法检测血清IL-6、INF-ɑ、IL-4,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-17、TGF-β1和HBV标记物,采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA、核转录因子RORγt、Foxp3、IL-17mRNA。结果在停药随访24 w,联合组与恩替卡韦组血清HBV DNA阴转率分别为86.96%和84.78%(P0.05);联合组血清HBeAg阴转率为28.89%(13/45),与恩替卡韦组的15.22%(7/46)比,无显著性差异(P0.05);联合组血清ALT水平为(34.6±11.6)U/L,显著低于恩替卡韦组【(64.6±20.5)U/L,P0.05】;联合组外周血CD3~+、CD4~+细胞和CD4~+/CD8~+比值分别为(75.6±14.5)%、(42.7±10.3)%和(1.4±0.6),显著高于恩替卡韦组【(66.8±14.4)%、(36.7±8.5)%和(1.0±0.5),P0.05】,CD8+细胞百分比为(29.3±7.3)%,显著低于恩替卡韦组【(34.8±8.5)%,P0.05】,两组NK细胞百分比比较无显著性差异(P0.05);治疗前两组血清IL-6、IL-17、IL-4、INF-ɑ、TGF-β1水平比较无显著性差异(P0.05),治疗后联合组血清IL-6水平为(6.8±1.2)pg/ml,显著高于恩替卡韦组【(3.5±0.8)pg/ml,P0.05】,IL-17水平为(0.7±0.3)pg/ml,显著低于恩替卡韦组【(2.8±0.9)pg/ml,P0.05】,IL-4水平为(1.4±0.5)pg/ml,显著低于恩替卡韦组【(3.8±1.5)pg/ml,P0.05】,INF-ɑ水平为(4.0±1.3)pg/ml,显著高于恩替卡韦组【(2.6±0.9)pg/ml,P0.05】,两组血清TGF-β1水平比较无显著性差异(P0.05);治疗前两组血清Foxp3、IL-17和RORγt mRNA水平比较无显著性差异(P0.05),治疗后联合组血清RORγt水平为(0.86±0.31),显著低于恩替卡韦组【(1.56±0.43),P0.05】,而两组血清Foxp3和IL-17mRNA水平比较无显著性差异(P0.05)。结论聚乙二醇干扰素α-2b能通过调控细胞因子和核转录因子水平,从多个环节调控慢性乙型肝炎患者免疫功能,发挥抗病毒作用。     

microRNA194过表达抑制荷瘤小鼠肝癌细胞生长的实验研究

目的探讨micro RNA194过表达对肝癌细胞生长的抑制作用及其具体作用机制。方法通过细胞转染法构建过表达micro RNA194的肝癌细胞Hep3B,并将其接种于Balb/c裸鼠建立荷瘤小鼠。30只Balb/c裸鼠被随机分配为micro RNA194过表达组15只和对照组15只,采用荧光定量PCR法检测Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织micro RNA194水平,采用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测肿瘤组织胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)水平及其蛋白表达情况。结果 Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织micro RNA194 m RNA水平分别为(2.68±0.33)和(2.33±0.38),均显著高于对照组【分别为(1.00±0.12)和(1.00±0.16),P0.01】;在肝癌细胞接种第11 d、16 d和21 d时,micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤体积分别为(0.25±0.08)、(0.31±0.11)和(0.46±0.10)mm3,均显著小于对照组【分别为(0.56±0.13)、(0.73±0.20)和(0.95±0.22)mm3,P0.01】;在肝癌细胞接种第21 d时,micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤质量为(0.85±0.19)g,显著轻于对照组【(1.43±0.27)g,P0.01】;micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤IGF1R m RNA水平和其蛋白表达量分别为(0.78±0.12)和(0.81±0.17),均显著低于对照组【分别为(1.0±0.16)和(1.0±0.11),P0.01】。结论 micro RNA194过表达可以抑制肝癌细胞生长,有可能是通过抑制了下游靶基因IGF1R的表达而发挥作用的。     

非诺贝特联合双环醇治疗非酒精性脂肪性肝病患者肝组织PPARγ2 mRNA水平变化

目的 探讨应用非诺贝特联合双环醇治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者的疗效及肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ₂(PPARγ₂)水平变化。方法 2018年2月～2019年12月我院收治的NAFLD患者66例,采用随机数字表法分为对照组33例和观察组33例,分别给予双环醇片口服或在此基础上给予非诺贝特片口服治疗,两组均治疗3个月。肝穿刺获得肝组织,采用PCR法检测肝组织PPARγ₂ mRNA水平,采用化学发光免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平,采用免疫比浊法检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,使用FC500型流式细胞仪检测外周血CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺细胞百分比。结果 在治疗结束时,观察组总有效率为97.0%,显著高于对照组的66.7%(P<0.05);观察组肝组织PPARγ₂ mRNA相对水平为(1.5±0.1),显著高于对照组【(1.1±0.2),P<0.05】;观察组血清TNF-α水平为(26.4±3.1)pg/mL,显著低于对照组【(32.8±6.9)pg/mL,P<0.05】,血清IL-6水平为(35.9±4.9)ng/L,显著低于对照组【(46.4±5.8)ng/L,P<0.05】,血清hs-CRP水平为(5.1±1.4)mg/L,显著低于对照组【(8.4±1.9)mg/L,P<0.05】;观察组外周血CD3⁺细胞百分比为(80.2±11.5)%,显著高于对照组【(60.5±7.7)%,P<0.05】,外周血CD4⁺细胞百分比为(44.7±5.8)%,显著高于对照组【(31.4±4.8)%,P<0.05】,CD4⁺/ CD8⁺细胞比值为(1.5±0.4),显著高于对照组【(1.1±0.3),P<0.05】。结论 联合应用非诺贝特和双环醇治疗NAFLD患者有短期疗效,可能与提高了肝组织PPARγ₂水平,降低了血清炎症细胞因子水平有关,值得进一步研究。     

双能量CT碘定量结合动态对比增强MRI评估肝硬化患者肝脏血流动力学和肝功能临床价值研究

目的探讨双能量CT碘定量结合动态对比增强MRI评估肝硬化患者肝脏血流动力学及肝功能的临床价值。方法 2016年6月～2018年6月我院收治的130例乙型肝炎肝硬化患者和同期在我院检查证实肝脏无异常的健康人30例,行动态对比增强MRI和双能CT增强扫描,测量肝实质血流参数峰值(PV)、最大上升斜率(MSI)、最大下降斜率(MSD)、正性增强积分(PEI)和信号增强率(SER),计算动脉期肝实质碘浓度(Ia)、门静脉期肝实质碘浓度(Ip)、肝动脉碘分数(AIF)和门静脉碘浓度(PVIC)。结果肝硬化组肝实质PV值为(522.1±96.7),显著低于对照组【(609.2±108.8),P0.05】,肝实质PEI值为(200.2±53.3),显著低于对照组【(241.3±61.5),P0.05】;15例CTP C级患者肝实质的PV值为(443.4±57.3),显著低于89例CTP A级【(587.4±94.5),P0.05】,MSI值为(170.1±54.6),显著低于CTP A级【(310.6±69.5),P0.05】,MSD值为(31.9±22.5),显著低于CTP A级【(67.8±19.6),P0.05】,PEI值为(155.6±29.7),显著低于CTP A级【(236.7±53.4),P0.05】,SER值为(109.3±7.5),显著低于CTP A级【(125.6±13.5),P0.05】;26例CTP B级患者Ia值为(0.7±0.2) mg I/ml,C级患者Ia值为(0.8±0.2) mg I/ml,显著高于健康人【(0.5±0.1) mg I/ml,P0.05】,CTP A级Ip值为(2.2±0.5) mg I/ml,B级为(2.0±0.5)mg I/ml、C级为(1.8±0.3) mg I/ml,显著低于健康人【(2.6±0.6) mg I/ml,P0.05】,CTP B级AIF值为(31.7±5.0)%、C级为(47.8±8.9)%,显著高于健康人【(21.1±4.3)%,P0.05】。结论双能量CT碘定量结合动态对比增强MRI检查评估肝硬化患者肝脏血流动力学结果可靠,灌注参数的变化能反映肝功能储备情况。     

血清肝型脂肪酸结合蛋白与非酒精性脂肪肝病程度及相关临床指标的关联及其意义

目的探讨非酒精性脂肪肝(non-alcoholic-fatty liver disease,NAFLD)患者血清肝型脂肪酸结合蛋白(liver-type fatty acid binding protein,L-FABP)与脂肪肝程度及相关临床指标的关系及其意义。方法入选NAFLD 60例,健康对照60例。ELISA法测定血清L-FABP(g/L)及血生化指标,同时计算体重指数(BMl),腰臀比(WHR)及稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),B超判定脂肪肝程度。结果 NAFLD组与对照组相比,血清L-FABP明显增高,(19.35±6.55 vs 15.31±2.49)。NAFLD组ALT、TG、FBG,BMI、WHR水平明显高于对照组,差异显著(P<0.05),TC、AST、GGT两组间差异无统计学意义(P>0.05)。相关性检测结果 L-FABP水平与ALT(r=0.624,P<0.05)、TG(r=0.617,P<0.05)、FBG(r=0.579,P<0.05)、WHR(r=0.692,P<0.05)、BMI(r=0.588,P<0.05),HOMA-IR(r=0.562,P<0.05)呈正相关,与HDL-C(r=-0.596,P<0.05)呈负相关。血清L-FABP含量与脂肪肝程度比较,轻度vs中度(15.85±2.91 vs 18.37±3.80)(g/L),方差分析结果 P>0.05,中度vs重度(18.37±3.80 vs 25.03±5.26)(g/L)P<0.05,与对照组(15.31±2.49)(g/L)比较,仅重度脂肪肝组差异显著,其他各组无统计学差异。结论重度NAFLD血清L-FABP水平明显增高,L-FABP水平与一些肝功能生化指标有关。     

干扰素α-2b与聚乙二醇干扰素α-2a治疗慢性乙型肝炎患者疗效比较研究

目的观察干扰素α-2b与聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者的临床疗效。方法将116例CHB患者分成两组,每组58例。给予对照组普通干扰素α-2b治疗,给予观察组PEG-IFNα-2a,疗程均为48 w。检测血清层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)及血清白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)和干扰素γ(IFN-γ)变化。结果在治疗结束时,观察组HBV DNA转阴率、HBe Ag转阴率、HBe Ag血清转换率和ALT复常率分别为75.9%、29.3%、22.4%和70.7%,显著高于对照组的51.7%、19.0%、10.3%和55.2%(P0.05);观察组血清LN为(148.5±46.0)μg/L,显著低于对照组【(162.6±26.7)μg/L,P0.05】,血清HA为(158.7±67.9)μg/L,显著低于对照组【(201.4±55.1)μg/L,P0.05】,血清Ⅳ-C为(108.3±33.4)μg/L,显著低于对照组【(119.2±62.4)μg/L,P0.05】,血清PⅢP为(145.8±47.2)μg/L,显著低于对照组【(155.3±36.7)μg/L,P0.05】;观察组血清IL-4水平为(1.5±0.6) pg/ml,显著低于对照组【(3.9±1.6) pg/ml,P0.05】,而IL-6水平为(6.9±1.3) pg/ml,显著高于对照组【(3.6±0.9) pg/ml,P0.05】,IL-10水平为(22.6±13.4) pg/ml,显著低于对照组【(17.3±11.4) pg/ml,P0.05】,IFN-γ水平为(37.2±10.2) pg/ml,显著高于对照组【(28.3±10.5) pg/ml,P0.05】;观察组血小板计数减少发生率为51.7%,显著高于对照组的12.1%(P0.05)。结论 PEG-IFNα-2a治疗CHB患者临床疗效优于普通干扰素α-2b,能持久有效地抑制HBV复制,改善血清肝纤维化指标,但不良反应较大,应及时处理。     

非酒精性脂肪性肝病患者血清淀粉样蛋白A、血浆血红素氧合酶1和骨形成蛋白9水平变化及其临床意义探讨

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清淀粉样蛋白A(SAA)、血浆血红素氧合酶1(HO-1)和骨形成蛋白9(BMP-9)水平变化及其意义。方法 2018年7月～2022年3月我院诊治的87例NAFLD患者,行肝活检,根据病理学表现的不同将NAFLD组分为单纯性脂肪肝(SFL)28例、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)48例和肝硬化11例,并根据病理学表现,将NASH分为早期10例和伴有肝纤维化的NASH 38例。另选择56例健康人作为对照。采用免疫比浊法检测血清SAA水平,采用双抗体夹心ELISA法检测血浆HO-1和BMP-9水平。结果 NAFLD组血清SAA和血浆HO-1水平分别为(8.2±1.5)mg/L和(14.9±2.3)ng/ml,显著高于健康人【分别为(3.3±0.6) mg/L和(10.1±2.1)ng/ml,P<0.05】,而血浆BMP-9水平为(95.1±6.1)pg/ml,显著低于健康人【(153.7±10.8)pg/ml,P<0.05】;肝硬化组血清SAA和血浆HO-1水平分别为(9.9±1.5)mg/L和(17.2±2.6)ng/ml,显著高...     

Toll样受体mRNA和相关细胞因子在肝多房棘球蚴病患者体内的变化

目的探讨Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)和TLR4 m RNA在肝多房棘球蚴病(HAE)患者外周血单核细胞(PBMC)和肝组织中的表达情况及其与血浆相关细胞因子水平之间的相关性。方法收集2012年1月至2015年6月在新疆医科大学第一附属医院住院治疗的肝多房棘球蚴病患者(HAE组)28例,以体检健康的志愿者(HC组,n=28例)作为对照,用ELISA检测血浆中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素5(IL-5)、IL-23、IL-10水平,用q RT-PCR法检测PBMCs以及HAE患者肝组织中TLR2和TLR4 m RNA的表达水平,用血细胞分析仪检测外周血嗜酸粒细胞百分比(Eo%)。Spearman秩相关分析PBMCs中TLR2和TLR4 m RNA水平与血浆中细胞因子水平和外周血Eo%的相关性。结果ELISA检测结果显示,HAE组血浆中IFN-γ、IL-5、IL-23、IL-10水平分别为(301.100±47.290)、(43.420±11.380)、(86.580±31.990)、(8.766±7.568)pg/ml,均高于HC组的(301.100±67.790)、(40.970±6.310)、(46.770±15.490)、(6.272±10.360)pg/ml,其中两组的IL-23水平差异有统计学意义(P0.01)。q RT-PCR检测结果显示,HAE组PBMCs中TLR2 m RNA相对表达量为0.100±0.084,高于HC组的0.055±0.040(P0.05);HAE组和HC组的TLR4 m RNA相对表达量分别为0.004±0.003和0.003±0.002,两者间差异无统计学意义(P0.05)。HAE患者肝病灶组织中TLR2和TLR4 m RNA相对表达量分别为29.680±25.650和21.340±16.640,均高于病灶旁的2.308±4.140和5.541±9.233以及正常组织的1.112±1.431和1.100±1.734(P0.01)。HAE组和HC组外周血Eo%分别为0.448±0.240和0.110±0.100,两者差异有统计学意义(P0.01)。Spearman秩相关分析结果显示,PBMCs中TLR2 m RNA水平与血浆中IL-23水平和外周血Eo%之间均存在正相关关系(r=0.368,r=0.382)。结论肝多房棘球蚴病患者PBMCs、肝病灶中的TLR2和TLR4 m RNA表达水平升高,PBMCs中TLR2 m RNA水平与血浆中IL-23水平和外周血Eo%之间均存在正相关关系。     

替米沙坦联合瑞舒伐他汀对2型糖尿病合并冠心病患者肝细胞生长因子和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的影响

目的探讨替米沙坦联合瑞舒伐他汀对T2DM合并冠心病患者血清肝细胞生长因子(HGF)及其受体(c-met)和PPAR-γ表达水平的影响。方法选取95例T2DM合并冠心病患者,将其分为对照组、替米沙坦组和替米沙坦联合瑞舒伐他汀组。检测各组血清HGF、c-met和PPAR-γ水平。结果与对照组比较,替米沙坦组、替米沙坦联合瑞舒伐他汀组治疗后HGF[(338.96±36.51)vs(241.56±29.88)vs(173.23±32.25)pg/ml]、c-met[(0.657±0.162)vs(0.489+0.093)vs(0.247±0.075)ng/m1]和PPAR-γ[(53.76±11.97)vs(35.12±9.66)vs(23.91±6.87)pg/ml]水平降低(P0.05),且替米沙坦联合瑞舒伐他汀组上述指标较替米沙坦组下降更明显(P0.05)。结论替米沙坦与他汀类药物联合应用可能改善T2DM合并冠心病患者血管的内皮损伤,为临床防治糖尿病早期冠状动脉粥样硬化提供了新的思路。     

新冠疫情期间情绪对非酒精性脂肪性肝病患者血生化指标的影响

目的 探讨新冠肺炎疫情期间非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者情绪和肝功能指标的变化。方法 2022年1～6月我科诊治的NAFLD患者28例,常规检测血生化指标,采用问卷调查方法进行抑郁自评量表(PHQ-9)和广泛性焦虑自评量表(GAD-7)评分。结果 在疫情封控后,28例NAFLD患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平分别为(88.6±9.2)U/L和(49.2±3.9)U/L,显著高于疫情封控前【分别为(52.3±4.9)U/L和(31.0±2.7)U/L,P<0.01】,而血清总胆红素、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、血糖和血脂水平无显著性变化(P>0.05);在疫情封控后,NAFLD患者GAD-7评分为(7.9±0.6),显著高于疫情封控前【(5.9±0.5),P<0.05】,PHQ-9评分为(6.9±0.7),显著高于疫情封控前【(5.3±0.5),P<0.05】;在矫正性别和年龄后,NAFLD患者GAD-7评分变化与血清ALT水平升高呈正相关【β=0.033(CI:0.005～0.061),P=0.021】,而与血清AST水...     

慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病患者血清反应性氧化物和脂联素水平变化

目的 分析慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清反应性氧化物(ROS)和脂联素(ADPN)水平的变化。方法 2018年1月～2020年1月我院收治的CHB合并NAFLD患者97例和CHB患者97例,采用全自动生化分析仪检测血生化指标,采用ELISA法检测血清ROS、ADPN和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,应用NAFLD肝纤维化评分(NFS)系统评估NFS评分,使用瞬时弹性扫描仪行肝硬度检测(LSM)和受控衰减参数(CAP)。结果 CHB合并NAFLD患者血清GGT水平为(96.5±13.3)U/L,显著高于CHB组【(67.3±12.5)U/L,P<0.05】;CHB合并NAFLD患者血清FPG、TC、TG和LDL-C水平分别为(5.9±1.0)mmol/L、(5.2±1.1)mmol/L、(2.8±0.4)mmol/L和(2.8±0.4)mmol/L,显著高于CHB组【分别为(4.9±1.0)mmol/L、(4.1±0.8)mmol/L、(1.7±0.3)mmol/L和(2.2±0.3)mmol/L,P<0.05】,而HDL-C为(0.9±0.2)mmol/L,显著低于CHB组【(1.2±0.2)mmol/L,P<0.05】;CHB合并NAFLD患者血清ROS和TNF-α水平分别为(1.7±0.4)U/mL和(32.6±5.4)ng/L,显著高于CHB组【分别为(0.9±0.2)U/mL和(21.5±4.8)ng/L,P＜0.05】,而血清ADPN水平为(8.7±1.9)ng/mL,显著低于CHB组【(10.2±2.3)ng/mL,P＜0.05】;CHB合并NAFLD患者NFS、LSM和CAP分别为(0.2±0.1)分、(10.2±1.3)kPa和(287.4±44.3)dB/m,均显著高于CHB组【分别为(-1.4±0.1)分、(9.1±1.2)kPa和(242.5±38.7)dB/m,P＜0.05】。结论 CHB合并NAFLD患者血清ROS明显升高,而血清ADPN水平显著下降,可能参与了其发病过程。     

肝源性糖尿病患者肝组织干扰素诱导蛋白-10表达变化

目的观察肝源性糖尿病患者肝组织和血清干扰素诱导蛋白-10(IP-10)水平变化,并分析其在肝源性糖尿病发病过程中的可能作用。方法 2016年3月～2018年5月我院诊治的乙型肝炎肝硬化并发肝源性糖尿病患者70例和不伴有糖尿病的乙型肝炎肝硬化患者70例,采用ELISA法检测血清IP-10水平,采用PCR法和免疫组化法分别检测肝组织IP-10 m RNA水平和蛋白表达。结果伴有糖尿病的肝硬化血清IP-10水平为(236.59±28.30) pg/mL,显著高于不伴有糖尿病的肝硬化患者【(205.31±26.92) pg/mL,P0.001】;糖尿病患者肝组织IP-10m RNA水平为(0.59±0.91) lg copies/ml,显著高于肝硬化患者【(0.21±0.66) lg copies/ml,P0.05】,差异具有统计学意义;糖尿病患者肝组织IP-10表达阳性率为31.4%,显著高于肝硬化患者的12.9%,差异具有统计学意义(x2=7.002,P0.05)。结论乙型肝炎肝硬化并发肝源性糖尿病患者血清和肝组织IP-10水平显著升高,其意义还有待于进一步探讨。     

原发性肝癌患者癌组织NLRP3炎性小体表达状况研究

目的 研究原发性肝癌患者癌组织核苷酸结合寡聚化结构域富含脓素亮氨酸重复序列结构域3(NLRP3)炎性小体表达情况。方法 2017年1月～2018年1月我院诊治的原发性肝癌(PLC)患者34例和同期因肝胆管结石切除的肝组织标本30份,采用免疫组织化学法检测肝组织NLRP3炎性小体表达,采用RT-PCR法检测肝组织NLRP3 mRNA 水平,采用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平,采用蛋白印记法检测肝组织NLRP3炎性小体、细胞钙依粘连蛋白、波形蛋白和半胱氨酸蛋白酶-1表达。结果 肝癌组织细胞NLRP3炎性小体阳性率为76.5%,显著高于正常对照组的23.3%(P<0.05);肝癌组织NLRP3 mRNA水平为(-2.58±0.35),显著高于正常肝组织【(0.00±0.24),P<0.05】;PLC患者血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平分别为(17.25±3.36) pg/ml、(60.32±8.14) pg/ml 和(24.68±3.58) pg/ml,显著高于对照组【(10.35±1.25) pg/ml、(33.21±4.20) pg/ml和(10.36±2.54) pg/ml, P<0.05】;正常对照组肝组织钙依粘连蛋白水平为(1.2±0.15),显著高于肝癌组【(0.41±0.04), P<0.05】,而半胱氨酸蛋白酶-1和波形蛋白水平为(0.21±0.03)和(0.42±0.06),显著低于肝癌组【(1.49±0.12)和(1.51±0.14), P<0.05】。结论 原发性肝癌患者癌组织NLRP3炎性小体呈现高表达,可能会导致炎症反应并促进肝癌细胞的迁移。     

肝脏前体细胞移植对CCl4诱导的肝纤维化自发逆转大鼠肝组织学的影响

目的研究肝脏前体细胞(HPCs)移植对纤维化自发逆转大鼠肝脏组织学的影响。方法采用四氯化碳(CCl_4)腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,取14只模型大鼠,随机分为自发逆转组7只和HPCs移植组7只,后者采用经脾内注射HPCs。取肝组织行苏木精-伊红和天狼猩红染色,观察组织病理学变化;采用免疫组织化学法检测肝组织OV6和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;采用Western blot法测定α-SMA、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1蛋白表达;采用ELISA法测定血清I型胶原和白蛋白水平。结果在CCl_4腹腔注射8 w后动物肝组织OV6阳性细胞数量达到高峰,12 w时开始下降;与自发逆转组比,HPCs移植组肝组织纤维化和炎症程度减轻,胶原面积显著降低【(3.14±0.99)对(5.05±0.89),P0.05】;自发逆转组肝组织α-SMA和TIMP-1蛋白相对表达量分别为(1.22±0.10)和(0.43±0.09),均显著高于HPCs移植组的【(0.31±0.08)和(0.25±0.032),P0.05】;自发逆转组血清I型胶原水平为(41.33±8.08)ng/ml,显著高于HPCs移植组的【(31.12±10.08)ng/ml,P0.05】,自发逆转组白蛋白为(33.18±4.69)g/L,显著低于HPCs移植组的【(48.30±2.15)g/L,P0.05】。结论肝脏前体细胞移植能加速肝纤维化的逆转,改善肝功能。