低氧条件下气道上皮细胞增加巨噬细胞趋化和炎症因子的分泌

目的：探讨低氧条件下气道上皮细胞对巨噬细胞趋化和炎症因子表达的影响。方法：将0,100,200, 400,800 μmol/L氯化钴(CoCl2)处理或转染缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α siRNA的人支气管上皮细胞 HBE与人单核细胞THP-1诱导分化的M1或M2巨噬细胞共培养,采用Transwell小室趋化实验记录巨噬细胞趋化数量, ELISA法检测巨噬细胞上清中TNF-α,IFN-γ,IL-4,IL-13,IL-10浓度,RT-qPCR检测HBE细胞HIF-1α和巨噬细胞Cav-1 mRNA的表达。结果：共培养8和12 h,HBE细胞诱导巨噬细胞趋化,并且呈时间和CoCl2浓度依赖性;转染HIF-1α siRNA的HBE相对于未转染组对共培养的M1或M2巨噬细胞趋化诱导明显减弱(P<0.01),在相同培养条件下,M2巨噬 细胞趋化性高于M1巨噬细细胞。巨噬细胞上清中TNF-α,IFN-γ,IL-4,IL-13,IL-10水平呈时间和CoCl2浓度依赖性升 高,共培养8和12 h,TNF-α和IFN-γ浓度增加较IL-4,IL-13,IL-10浓度增加更明显;共培养24 h,IL-4,IL-13,IL-10浓 度增加程度高于TNF-α和IFN-γ。与转染HIF-1α siRNA的HBE共培养的巨噬细胞上清中各细胞因子水平较未转染组均明 显降低(P<0.05或0.01),其中TNF-α,IFN-γ降低更明显。共培养8和12 h,HBE细胞HIF-1α和巨噬细胞Cav-1 mRNA表达 均呈CoCl2浓度依赖性增加;转染HIF-1α siRNA后,HBE细胞HIF-1α和巨噬细胞Cav-1 mRNA表达量均明显减少。结论： 低氧环境下气道上皮细胞可增加巨噬细胞趋化因子和致炎因子的表达,HIF-1α和Cav-1可能是这些过程的重要介质。     

慢性阻塞性肺疾病诱导痰巨噬细胞Toll样受体-2表达及其意义

目的:探讨Toll样受体-2(TLR-2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)诱导痰巨噬细胞上的表达及其与气道炎症的关系。方法:20例COPD急性发作期(AECOPD)、16例COPD稳定期患者、年龄相当的正常人、支气管肺炎患者及健肺支气管肺泡灌洗者各10例纳入本研究。3%-5%氯化钠注射液进行痰液诱导,瑞氏染色行痰细胞分类计数,人淋巴细胞分离液行诱导痰单个核细胞分离。荧光物标记的抗人Toll样受体-2及CD14抗体行巨噬细胞双标,用流式细胞仪检测巨噬细胞平均荧光强度(rMFI)。结果:AECOPD、COPD稳定期、肺炎组诱导痰细胞总数、巨噬细胞及中性粒细胞数均显著高于正常对照组(P<0.01),肺炎组治疗后中性粒细胞数显著低于COPD稳定期组(P<0.01)。正常对照组及肺炎组疗前巨噬细胞TLR-2表达水平分别显著高于COPD稳定期、AECOPD治疗前后(P<0.01),肺炎组疗后则接近正常(P>0.05)。COPD稳定期、AECOPD巨噬细胞TLR-2表达水平与气道中性粒细胞数呈显著正相关(r=0.572,0.892,0.649,P<0.05或0.01)。结论:COPD诱导痰巨噬细胞TLR-2表达水平较正常人低下,这与COPD慢性气道炎症的形成密切相关。     

CXCL2、HIF-1α在前列腺癌组织中的表达及意义

探讨CXCL2和HIF-1α在前列腺癌(prostatic cancer,PC)组织中的表达,分析其与前列腺癌临床病理特征的关系。方法对112例前列腺标本[PC(PC组)76例,前列腺上皮内瘤(prostatic intraepithelial neoplasia,PIN;PIN组)15例,良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH;BPH组)21例]行免疫组化SP法检测CX-CL2和HIF-1α的表达。结果 PC组、PIN组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著高于BPH组,差异均有统计学意义(均P<0.01);PC组CXCL2、HIF-1α阳性表达率显著高于PIN组,差异有统计学意义(P<0.01)。高分化组CXCL2、HIF-1α阳性表达率显著低于中分化组,差异有统计学意义(P<0.05);高分化组、中分化组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著低于低分化组,差异有统计学意义(均P<0.01)。A期组、B期组CXCL2阳性表达率均显著低于C期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),A期组、B期组、C期组CXCL2阳性表达率均显著低于D期组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。A期组、B期组、C期组HIF-1α阳性表达率均显著低于D期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),A期组HIF-1α阳性表达率显著低于B期组、C期组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),B期组HIF-1α阳性表达率显著低于C期组,差异有统计学意义(P<0.05)。PC转移组CXCL2、HIF-1α阳性表达率均显著高于PC无转移组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。PC中CXCL2表达与HIF-1α表达呈正相关(r=0.422,P<0.01)。结论 CXCL2、HIF-1α在PC组织中呈高表达。CXCL2、HIF-1α表达与前列腺癌病理分级、临床分期、淋巴结转移等有关。但CXCL2和HIF-1α在PC发生、发展中的作用机制还有待进一步的研究。     

哮喘患者诱导痰上清液MIP-1α、MIF、MCP-1水平测定

目的:通过测定哮喘患者诱导痰上清液肺泡巨噬细胞炎性蛋白-1α(M IP-1α)、肺泡巨噬细胞移动抑制因子(M IF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,探讨三者在哮喘发病中的作用。方法:轻、中度哮喘患者14例,正常人12例,用高渗盐水进行痰诱导,痰液经解粘、离心后,对沉淀细胞分类计数,使用ELISA测定诱导痰上清液中M IP-lα、M IF、MCP-1浓度。结果:哮喘组诱导痰嗜酸粒细胞、淋巴细胞相对计数均高于正常组(分别为7.7%±1.4%、0.7%±0.8%,P<0.01;4.2%±1.0%、2.1±0.8%,P<0.01),而哮喘组诱导痰肺泡巨噬细胞相对计数构成比(57.8%±3.7%)明显低于正常组(65.9%±3.6%,P<0.01)。哮喘患者诱导痰上清液M IP-1α质量浓度[(36.6±4.8)pg.m l-1]明显高于正常人[(32.6±1.7)pg.m l-1,P<0.05],两组诱导痰上清液M IF、MCP-1浓度无显著差异。哮喘患者诱导痰上清液M IF与嗜酸粒细胞相对计数呈正相关(r=0.53,P<0.05),与肺泡巨噬细胞、淋巴细胞相对计数无相关关系;哮喘患者诱导痰上清液中M IP-1α、MCP-1与肺泡巨噬细胞、嗜酸粒细胞和淋巴细胞相对计数均无相关关系。结论:M IP-1α可能参与哮喘的发病,嗜酸粒细胞可能通过释放M IF参与哮喘     

慢性间断缺氧时sCD40L对人冠状动脉内皮细胞的损伤作用及机制

目的 探讨慢性间断缺氧(CIH)时重组可溶性人CD40L(sCD40L)对人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)的损伤作用及机制。方法 予以sCD40L孵育HCAEC,同时CIH刺激,应用蛋白印迹法(Western Blot)和流式细胞仪检测各项炎症因子。研究CIH时sCD40L对HCAEC的损伤作用及机制。结果单纯外源性sCD40L刺激HCAEC上调转录因子(NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白的表达(P<0.05),对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达无明显影响(P>0.05);在CIH条件下,外源性sCD40L刺激HCAEC均上调HIF-1α、COX-2、NF-κB、ICAM-1蛋白的表达(P<0.05),细胞凋亡加重(P<0.05)。结论 在CIH条件下,外源性sCD40L刺激HCAEC促进炎症因子释放,细胞凋亡加重,从而可能加速HCAEC功能障碍。     

EphB4、EphrinB2和HIF-1α在脑星形细胞瘤组织中的表达及意义

目的探讨促红细胞生成素肝细胞(Eph)B4、Eph受体相互作用蛋白(Ephrin)B2和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在脑星形细胞瘤组织中的表达水平及意义。方法采用原位杂交法检测120例脑星形细胞瘤组织标本(病例组)和20例脑白质组织标本(对照组)的EphB4、EphrinB2和HIF-1α表达水平。结果病例组EphB4、EphrinB2和HIF-1α表达水平均明显高于对照组(P<0.05),病例组病理分级Ⅲ—Ⅳ级、临床表现有出血及坏死的EphB4、EphrinB2和HIF-1α阳性表达率均显著增加(P<0.05)。EphB4、EphrinB2表达水平与HIF-1α表达水平均呈正相关(r=0.483、0.486,均P<0.05)。结论 EphB4、EphrinB2和HIF-1α在脑星形细胞瘤中的异常表达与肿瘤的恶性程度有关,EphB4与EphrinB2可能存在协同作用。更多还原     

肿瘤相关巨噬细胞PKM2表达对食管癌细胞恶性表型的影响

目的 探讨肿瘤相关巨噬细胞(Tumor associated macrophages, TAMs)中M2型丙酮酸激酶(Pyruvate kinase M2,PKM2)表达对食管癌细胞迁移、侵袭恶性表型的影响。方法 慢病毒转染PKM2敲低/过表达质粒至THP-1细胞并诱导分化为TAMs,随机分为PKM2敲低组(PKM2 KD组)、PKM2敲低对照组(PKM2 KD NC组)、PKM2过表达组(PKM2 OE组)和PKM2过表达对照组(PKM2 OE NC组)。qRT-PCR检测PKM2及巨噬细胞表型标志物的表达;进一步与食管癌KYSE150细胞共培养后,Transwell实验检测食管癌细胞迁移和侵袭能力变化。将共培养细胞混合接种裸鼠皮下构建裸鼠荷瘤模型,免疫组化检测PKM2和CD163的表达,ELISA检测葡萄糖和乳酸水平。结果 与PKM2 KD NC组相比,PKM2 KD组TAMs细胞内PKM2表达水平显著降低,NOS2表达上调(P均<0.05),CD163轻微下调(P>0.05),CCL5表达下调(P<0.05);与PKM2 OE NC组相比,PKM2 OE组TAM...     

低氧对小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1表达的影响

目的 探讨低氧环境对小鼠成骨细胞富含半胱氨酸61（Cyr61/CCN1）表达的影响。 方法 分别在氧浓度和去铁敏诱导的低氧环境下培养小鼠成骨细胞,Real-time PCR和Western blotting于不同时间点检测成骨细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Cyr61/CCN1和血管内皮生长因子的表达。分别敲除小鼠成骨细胞中HIF-1α和VHL基因,检测细胞Cyr61/CCN1的表达。 结果 两种低氧环境下,小鼠成骨细胞HIF-1α通路被激活,Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。HIF-1α基因敲除小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著减少,VHL基因敲除成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。 结论 低氧环境通过激活HIF-1α通路来上调小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1的表达。     

人参炔醇重塑巨噬细胞表型调控乳腺癌细胞生物学行为

目的: 探讨人参炔醇对巨噬细胞表型和功能的调控作用及对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法: 用人参炔醇处理4T1乳腺癌细胞,观察各项生物学行为变化;用4T1乳腺癌细胞培养上清液预处理RAW264.7 巨噬细胞系48 h,诱导其向M2型巨噬细胞极化;极化后的巨噬细胞再分别经不同浓度人参炔醇(0,8,16 μg/mL)处理24 h,用qRT PCR、蛋白质印迹、流式细胞术、ELISA法联合检测各组表型、抗原递呈相关分子MHCⅡ类分子、CD80、CD86表达改变、分泌谱变化,以及细胞系迁移、侵袭等。结果： 与0 μg/mL组相比,乳腺癌细胞系经8,16 μg/mL人参炔醇处理后,细胞增殖率明显降低(P均＜0.01),细胞凋亡率明显增加(P均＜0.05),癌细胞趋化作用减弱; M2型巨噬细胞经16 μg/mL人参炔醇刺激后,细胞表型逆转,Arg 1表达明显降低(P均＜0.01),iNOS表达明显增加(P均＜0.01),MHCⅡ、CD80、CD86表达升高;并伴随IL 1β、TNF α表达升高(P均＜0.01),IL 4、IL 8、IL 10表达降低(P均＜0.05);经人参炔醇处理的巨噬细胞能够明显减少乳腺癌细胞的迁移与侵袭。结论： 人参炔醇可重塑巨噬细胞表型和功能,从而间接改变乳腺癌细胞生物学行为。     

HIF-1α、VEGF、sFlt-1与重度子痫前期发病的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)与重度子痫前期发病的关系。方法选择择期剖宫产终止妊娠的孕妇60例,其中重度子痫前期患者(研究组)30例,正常孕妇(正常对照组)30例。采用免疫组织化学SP法检测2组孕妇胎盘组织中VEGF的表达,酶联免疫吸附试验检测2组孕妇血清VEGF、sFlt-1和HIF-1α的表达水平。结果与正常对照组比较,研究组孕妇胎盘和血清VEGF表达水平均显著降低,血清HIF-1α、sFlt-1表达水平均显著升高(均P<0.01)。结论 HIF-1α可能通过VEGF、sFlt-1参与重度子痫前期的发病。 更多还原     

哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠患者中痰髓过氧化物酶、嗜酸粒细胞阳离子蛋白与临床特征的相关性

目的探讨髓过氧化物酶（MPO）、嗜酸粒细胞阳离子蛋白（ECP）在哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠（ACO）患者气道炎症中的 作用及其与临床特征的相关性。方法入组慢性阻塞性肺疾病（COPD）、哮喘、ACO患者及正常人各20例,行肺功能检查测定第 1秒用力呼气量、用力肺活量、呼气流量峰值、最大呼气中期流量。COPD组及ACO组利用COPD患者自我评估测试进行临床 症状评估,哮喘组及ACO组采用哮喘控制测试进行哮喘控制评估。诱导痰检查留取痰液,行细胞分类计数并计算中性粒细胞 比例及嗜酸性粒细胞比例,酶联免疫吸附测定法检测痰MPO、ECP水平。结果ACO组自我评估测试评分较COPD组差异无统 计学意义（P>0.05）,但哮喘控制测试评分较哮喘组减小（P<0.05）。ACO组第1秒用力呼气量、呼气流量峰值、最大呼气中期流 量较哮喘组减小（P<0.05）,用力肺活量较COPD组增大（P<0.05）。ACO组痰中性粒细胞比例较哮喘患者增大（P<0.01）,痰嗜酸 性粒细胞比例较COPD组增大（P<0.01）。ACO组痰MPO水平较哮喘组增高（P<0.05）,痰ECP水平较哮喘组及COPD组均增 高（P<0.05,P<0.01）。ACO组痰MPO水平与痰中性粒细胞比例呈正相关（r=0.8358,P<0.01）,与自我评估测试评分及第1秒用 力呼气量无相关性（P>0.05）。ACO组痰ECP水平与痰嗜酸性粒细胞比例呈正相关（r=0.4666,P<0.05）,与哮喘控制测试评分及 第1秒用力呼气量呈负相关（r=-0.4966,P<0.05;r=-0.4610,P<0.05）。结论ACO患者气道炎症同时存在中性粒细胞性炎症及嗜 酸性粒细胞性炎症,痰ECP水平与哮喘控制水平及阻塞性气流受限程度均存在一定的负相关性。     

CD68、CD163阳性巨噬细胞在食管癌组织浸润及对预后的影响

目的 探讨CD68+/CD163+巨噬细胞在食管癌组织浸润及其对预后的影响.方法 应用免疫组化方法检测CD68+、CD163+巨噬细胞在食管癌组织的浸润,比较CD68、CD163阳性巨噬细胞浸润密度及对食管癌患者预后的影响.结果 食管癌组织CD68、CD163阳性巨噬细胞浸润密度较癌旁正常组织明显增多(t=21.379...     

戒烟干预对早期稳定期慢性阻塞性肺疾病患者气道局部免疫及生活质量的影响研究

背景　吸烟对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者局部气道免疫功能和生活质量均是有害的,烟草的危害是巨大的,戒烟迫在眉睫,戒烟能使戒烟者获益,目前戒烟干预的文献较多,但是对于戒烟和局部气道免疫情况的研究相对较少,而且针对早期COPD的戒烟干预的研究也较少。目的　探讨戒烟干预对早期稳定期COPD患者气道局部免疫及生活质量的影响及临床意义。方法　选取2016年6月-2019年6月到浙江省衢州市人民医院就诊的早期稳定期COPD患者170例,按患者意愿分为戒烟组（106例）及未戒烟组（64例）,戒烟组按照戒烟成功与否分为戒烟成功组（48例）和戒烟失败组（58例）。收集研究对象性别、年龄、吸烟指数等。对患者随访1年（即：0个月、0.5个月、1个月、3个月、6个月、9个月及12个月）,记录诱导痰免疫指标：T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+ 、CD4+/CD8+、CD8+ ）、免疫球蛋白（IgG、IgA、lgM）及补体C3、C4;肺功能检查〔第1秒用力呼气末容积（FEV1）〕;生活质量：咳嗽情况（咳嗽评分）、咳痰情况（咳痰评分）、呼吸困难情况〔呼吸困难量表（mMRC）评分〕、慢性阻塞性肺疾病评估测试（CAT）评分、烟草依赖情况（烟草依赖评分）、吸烟严重度指数、呼出CO值、合并焦虑/抑郁情况〔抑郁焦虑量表（HAD）评分〕,并记录患者随访前1年内及随访期间呼吸道感染情况及COPD急性加重情况。对随访期间相关指标的变化进行比较分析。结果　组别与时间在咳嗽评分、咳痰评分、FEV1、mMRC评分、CAT评分、HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数评分、呼出CO值、随访期间呼吸道感染次数、随访期间患者急性加重次数上存在交互作用（P<0.05）。组别在咳嗽评分、咳痰评分、FEV1、mMRC评分、CAT评分、HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数评分、呼出CO值、随访期间呼吸道感染次数、随访期间患者急性加重次数上主效应显著（P<0.05）,时间在咳嗽评分、咳痰评分、FEV1、mMRC评分、CAT评分、HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数评分、呼出CO值、随访期间呼吸道感染次数、随访期间患者急性加重次数上主效应显著（P<0.05）。随着随访时间延长,未戒烟组咳嗽评分、咳痰评分、CAT评分、mMRC评分、HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数、呼出CO值、随访期间呼吸道感染发病次数、随访期间COPD急性加重次数逐渐上升,FEV1逐渐下降（P<0.05）;随着随访时间延长,戒烟成功组咳嗽评分、咳痰评分、CAT评分、mMRC评分、HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数、呼出CO值、随访期间呼吸道感染发病次数、随访期间COPD急性加重次数逐渐下降,FEV1逐渐上升（P<0.05）。组别与时间在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4间存在交互作用（P<0.05）;组别在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4上主效应显著（P<0.05）,时间在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4上主效应显著（P<0.05）。戒烟成功组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、补体C3、补体C4水平在其余各随访时间与随访6个月时比较,差异有统计学意义（P<0.05）。戒烟成功组IgM水平在其余各随访时间与随访12个月时比较,差异有统计学意义（P<0.05）。戒烟失败组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4水平在其余各随访时间与随访1个月时比较,差异有统计学意义（P<0.05）。随访开始时,3组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG、IgM、补体C3、补体C4与FEV1呈正相关（P<0.05）,与HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数评分及呼出CO值呈负相关（P<0.05）。CD8+与FEV1呈负相关（P<0.05）,与HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数评分及呼出CO值呈正相关（P<0.05）。随访结束时,戒烟成功组和未戒烟组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG、IgM、补体C3、补体C4与FEV1呈正相关（P<0.05）,与咳嗽评分、咳痰评分、HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数评分及呼出CO值呈负相关（P<0.05）。CD8+与FEV1呈负相关（P<0.05）,与HAD评分、烟草依赖评分、吸烟严重度指数评分及呼出CO值呈正相关（P<0.05）。结论　烟草对早期稳定期COPD患者局部气道免疫功能和生活质量均是有损害的,戒烟干预有利于气道免疫功能和生活质量的改善,戒烟成功者获益更大,即使戒烟失败,短期戒烟患者也可获益。但烟草对人体的危害存在延续性,戒烟至少6个月后各项指标才能明显改善。局部气道免疫功能和生活质量均有相关性,气道免疫功能的改善可提高患者生活质量和预后,其中T淋巴细胞亚群和IgA、IgG更能反映气道免疫情况。     

不同评价系统对慢阻肺患者病情及治疗疗效的评估价值

目的 探索不同评价系统对慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）患者临床诊疗的实用性和临床意义。方法 回顾性分析2020年11月~2021年1月收治入南方医科大学第三附属医院呼吸与危重症医学科的28例慢阻肺急性加重患者临床资料,收集患者入院时第1秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1%pred）、慢阻肺评估测试（CAT）、呼吸困难评分（mMRC）、基础呼吸困难指数（BDI）、慢阻肺临床问卷（CCQ）、圣乔治呼吸问卷（SGRQ）、BODE指数、汉密尔顿抑郁量表（HDRS）及出院1月后CAT、mMRC、呼吸困难变化指数（TDI）、CCQ、SGRQ、HDRS。对入院时的FEV1% pred、CAT、mMRC、BDI、CCQ、SGRQ、BODE、HDRS进行相关性分析,并根据患者出院后吸入药物种类,将患者分为单药组（8例）、二联组（10例）、三联组（10例）,对3组患者出院1月后TDI及CAT、mMRC、CCQ、SGRQ、HDRS变化情况进行分析。结果 FEV1%pred与SGRQ、BDI中度相关(r=-0.66, r=0.61, P< 0.01);CCQ活动评分与mMRC、SGRQ活动评分、BDI高度相关(r=0.82, r=0.92, r=-0.89, P<0.01);SGRQ活动评分与mMRC、BDI高度相关（r=0.84, r=-0.91, P<0.01）;SGRQ症状评分与BODE高度相关(r=0.80,（P<0.01);SGRQ影响评分与HDRS中度相关（r=0.57, P<0.01）。以所有患者为整体进行分析,除CCQ心理评分及HDRS外,各评分均有改善（P<0.05）;单药组CCQ较前下降（P<0.05）,二联组CAT、mMRC、CCQ、SGRQ较前下降（（P<0.05）,三联组CCQ及SGRQ较前下降（P<0.05）,3组TDI差异无统计学意义（P>0.05）。结论 相对于mMRC,更推荐BDI及TDI进行呼吸困难评估;CAT、CCQ、SGRQ疗效反应灵敏,可用于治疗后的常规评估,其中SGRQ最为全面,时间充分的情况下,建议完善SGRQ;BODE评分相对复杂,但对于患者未来生存率有极高的预测价值;建议完善HDRS 进行慢阻肺合并抑郁的常规筛查。     

结直肠癌中肿瘤相关巨噬细胞及基因表型的分析研究

目的结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)CD68~+及CD163~+的检测及与基因表型的关系。方法免疫组化方法检测41例CRC肿物,癌旁5 cm(M5)、10 cm(M10)。不典型增生(Atypical hyperplasia,AH)组织CD68~+及CD163~+的表达,采用病理切片扫描仪细胞计数。对41例CRC肿物进行基因检测。结果CRC患者CD68~+及CD163~+检测肿物组织高于癌旁5 cm、10 cm(P0.01);肿物与不典型组织比较差异无统计学意义(P0.05);癌旁组织M5与M10比较差异无统计学意义(P0.05);回归分析提示CD163~+表达与K-ras基因突变有显著性关系(P0.05)。CD68~+及CD163~+的表达与B-raf基因突变、MSS(微卫星稳定型)、淋巴结转移、脉管癌栓、神经侵犯无相关性(P0.05)。结论 CD68~+及CD163~+在结直肠癌肿物间质中高表达,并高于癌旁组织,与AH表达无相关性。CD163~+在肿物的表达与K-ras基因突变有相关性。     

晚期骨关节炎患者关节软骨细胞中HIF-1α和VEGF的表达

目的 研究低氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在晚期骨关节炎(OA)患者关节软骨细胞中的表达,初步探讨HIF-1α在OA发病机制中的作用.方法 选取18例晚期膝骨关节炎(KOA)接受全膝关节置换术患者的膝关节软骨组织标本,根据取材部位分为KOA负重区组(磨损较重的股骨内髁)和KOA相对非负重区组(磨损较轻的股骨外髁);另选取5例因股骨近端或股骨干肿瘤而截肢患者的正常膝关节软骨组织标本作为对照.HE和SaFRanin O染色下进行Mankin整体评分比较各组关节软骨组织退变程度;免疫组织化学染色检测关节软骨细胞HIF-1α和VEGF表达,比较各组HIF-1α和VEGF阳性细胞计数.结果 KOA负重区组Mankin整体评分为(12.36±0.84),显著高于KOA相对非负重区组的(7.23±0.32)和对照组的(0.88±0.15)(P＜0.05).免疫组织化学染色显示,KOA负重区组关节软骨细胞HIF-1α和VEGF阳性细胞计数分别为4.81±0.62和5.67±0.32,均显著高于KOA相对非负重区组和对照组(分别为2.37±0.68、4.87±0.33和0.78±0.14、2.02±0.45)(P＜0.05).结论 晚期OA患者关节软骨细胞中HIF-1α和VEGF蛋白表达明显增加.提示上调靶基因VEGF表达是HIF-1α在OA发病中可能的调节机制.     

EGCG对低氧诱导下胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 将人胃癌细胞株SGC7901进行传代培养,并采用氯化钴（CoCl2）建立低氧模型,实验设空白对照组（常氧组）、低氧对照组及低氧加不同浓度的EGCG组.分别采用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting检测细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子-A（VEGF-A）的表达.结果 低氧条件下,低浓度EGCG短时间内（24 h）对SGC7901细胞生长无明显抑制作用（P〉0.05）;但随着浓度的升高和作用时间的延长,EGCG可抑制低氧SGC7901细胞的增殖（P〈0.01）,100 μg/mL EGCG作用72 h后,其抑制率可达（76.3±2.9）%.流式细胞仪检测显示,EGCG在低氧环境下可呈时间-剂量依赖性地诱导胃癌细胞凋亡（P〈0.05或P〈0.01）.EGCG可明显抑制低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达（P〈0.05或P〈0.01）,并下调VEGF-A mRNA表达（P〈0.05或P〈0.01）,但对HIF-1α mRNA的转录无明显影响（P〉0.05）.结论 低氧条件下,EGCG可抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A的表达有关.