微核实验评价碳化硅的潜在致突变性

背景：自制碳化硅陶瓷应用于临床前对其安全性进行相应评价。目的：通过微核实验检测自制碳化硅陶瓷对小鼠的致畸作用以评价其生物相容性。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-06/12在中国医科大学中心实验室完成。材料：N1H纯系小鼠80只按性别,体质量随机分成8组,每组10只：碳化硅0.02,0.002,0.0002mL/kg组、纯钛浸提液0.02,0.002,0.0002mL/kg组,生理盐水对照组,75mg/kg环磷酰胺阳性对照组。方法：各组均一次性给药,24h处死小鼠,抽取双侧股骨骨髓制备细胞悬液,推片二张,晾干、固定后浸入姬姆萨染液中染色。选择细胞完整,分散均匀,着色适当的区域在光学显微镜下计数。主要观察指标：计数1000个嗜多染红细胞的微核细胞数;嗜多染红细胞与正红细胞的比值。结果：环磷酰胺对照组微核率高于其他组（P〈0.01）。碳化硅陶瓷组和纯钛浸提液组微核率与生理盐水对照组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。碳化硅陶瓷组与纯钛浸提液组比较差异无显著性意义,嗜多染红细胞与正红细胞的比值均≥1。结论：自制碳化硅对小鼠无致畸作用,有较良好的生物相容性。     

基因重组人源超氧化物歧化酶抗辐射作用的研究

目的 研究不同浓度的基因重组人源超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)对小鼠的抗辐射功能的影响.方法 小鼠经口灌胃给药,剂量分别为1 500 U/Kg,6 000 U/Kg,24 000 U/Kg;另设生理盐水组.各组动物每天固定时间给药1次,连续给药1周.末次给药1 h后,用深部X线治疗机对小鼠进行全身照射,剂量为1.0 Gy.照射后24 h,通过检测各组小鼠骨髓细胞的微核率和染色体畸变率探讨CuZn-SOD的防护作用.结果 与生理盐水组相比,三种不同浓度的超氧化物歧化酶均使小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率及骨髓细胞染色体畸变率显著降低(P<0.01).结论 基因重组人源超氧化物歧化酶CuZn-SOD具有抗辐射作用.     

罗汉果对雄性小鼠骨髓微核和精子形态的影响

背景：对罗汉果的遗传毒性进行研究,可为其安全使用提供实验依据。目的：观察罗汉果水提液对雄性小鼠骨髓细胞微核率和附睾精子畸形率的影响,了解其是否有遗传毒性。方法：按罗汉果水提液最大使用剂量（3g/mL）和最大灌胃容量（20mL/kg）灌胃小鼠,观察罗汉果水提液的急性毒性。将雄性昆明小鼠随机分为5组,分别灌胃给予30,15,7.5g/kg的罗汉果水煎液、蒸馏水,连续5d;或腹腔注射40mg/kg环磷酰胺。于灌胃第5天,采用骨髓嗜多染红细胞微核试验计算小鼠的骨髓微核率。于首次灌胃后第35天,观察小鼠精子畸形率。结果与结论：罗汉果水提液对昆明小鼠的经口急性毒性最大耐受剂量大于120g/kg。罗汉果水提液30,15,7.5g/kg灌胃后,小鼠的骨髓微核率、精子畸形率与正常小鼠无差异（P〉0.05）,均明显低于环磷酰胺诱发的骨髓微核率和精子畸形率（P〈0.05）。说明罗汉果水提液对成年雄性小鼠无明显遗传毒性。     

银杏叶提取物辐射防护作用的研究

目的利用深部X射线照射小鼠,形成辐射损伤,研究银杏叶提取物对小鼠抗辐射功能的影响。方法通过计算小鼠骨髓细胞的微核率和染色体畸变率来考察银杏叶提取物的辐射防护作用。实验组剂量为5mgL／kg,10mg／kg,20mg／kg,阳性对照组给予生理盐水。结果三种不同剂量的银杏叶提取物均使小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率及骨髓细胞染色体畸变率有明显的降低（P〈0．01）。结论银杏叶制剂可能通过清除自由基对骨髓细胞产生一定程度的保护作用,而且这种保护作用达到了平台期,呈现相同程度的辐射抗性。     

两种镍铬烤瓷合金的致突变性观察

实验对自制镍铬烤瓷合金和含铍镍铬合金的致突变性进行检测和比较.选取健康小白鼠64只,随机分为8组,即阴性对照组(生理盐水),阳性对照组(环磷酰胺,40mg/kg),自制镍铬烤瓷合金高剂量(0.769 g/L)、中剂量(0.390g/L)、低剂量组(0.077 g/L)组,含铍镍铬合金高、中、低剂量组(剂量同镍铬烤瓷合金组),每组8只.采用腹腔注射给药(25 μL/g).24 h后以同样剂量第2次注射,给药后6 h麻醉下处死采集骨髓.在油镜下用双盲法计数1 000个嗜多染红细胞的微核细胞数.结果两种样品之间及与阴性对照组相比骨髓细胞的微核率差异均无显著性(P＞0.05);样品组与阳性对照组数据相比差异均有显著性(P＜0.000 1);表明两种镍铬烤瓷合金均不具有明显致突变作用,可作为金属烤瓷冠的基底材料.     

贵金属烤瓷合金与高糖对细胞外液炎性因子的影响

背景：前期研究中发现高糖与烤瓷合金浸提液对小鼠成纤维细胞L-929的增殖存在交互效应。目的：观察3种贵金属烤瓷合金与高糖对小鼠成纤维细胞L-929中白细胞介素6水平的影响。方法：采用两因素析因设计实验研究不同糖浓度（11．1,22．2,33．3mmol／L）下,89％金合金、74％金合金及银钯合金贵金属烤瓷合金浸提液,分别与小鼠成纤维细胞L-929休外共培养24h后,细胞外液中白细胞介素6水平的变化,并设未加入合金材料的空白对照为阴性对照组。结果与结论：两因素析因设计分析结果表明,贵金属烤瓷合金浸提液的主效应有统计学意义（P=0．001）,其中74％金合金与银钯合金白细胞介素6水平低于阴性对照组（P=0．004．0）：糖浓度的主效应也有统计学意义（P=0．005）,33．3mmol／L精浓度组白细胞介素6水平低于11．1mmol／L（正常）糖浓度组（P=O．001）.但贵金属烤瓷合金浸提液与糖浓度两因素对小鼠成纤维细胞L-929细胞外液中白细胞介素6水平的影响无交互作用（P=O．33）。     

细胞培养法评价自制镍铬烤瓷合金的细胞毒性

背景:具有良好抗腐蚀性能的镍铬铸造烤瓷合金正在临床广泛应用,但不容忽视的是其释放出的镍离子、铍离子具有明显的毒副作用.因此,改进合会的组成成分,提高其理化性能和生物相容性是目前研究的热点.目的:检测自制镍铬烤瓷合金的体外细胞毒性,并与口腔科常用的镍铬合金、纯铁金属的细胞毒性进行比较.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-05/12在中国医科大学中心实验室完成.材料:细胞选用对数生长期的小鼠成纤维细胞(L-929细胞).自制镍铬烤瓷合金由中国科学院金属研究所提供,纯钛由日本松风公司提供,镍铬合金由贺利氏古莎齿科有限公司提供.方法:实验分为自制镍铬烤瓷合金、纯钛组、镍铬合金组,阳性对照组,阴性对照组.取96孔培养板,每板选出5组孔,每组重复孔12个,每孔中均加入浓度为1.0×108L-1的细胞悬液100μ L.在自制镍铬烤瓷合金、纯钛组、镍铬合金组孔中分别加入各种材料浸提液100μL,阳性对照组孔中加入铅浸提液100 μ L,使材料浸提液浓度最终为50%,在阴性对照组孔内加入RPMI 1640培养液100 μ L.主要观察指标:分别于培养1,2,3,4,5 d时采用四唑盐比色法测定各组吸光度值,计算相对增殖率.结果:3种金属材料组与阴性对照组之间的吸光度值差异均无显著性意义(P＞0.05),与阳性对照组之间的吸光度值差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01).纯钛组细胞增殖率＞100%,细胞毒性为0级,自制镍铬烤瓷合金组和镍铬合金组的细胞增殖率为86.36%～99.49%,细胞毒性为1级,阳性对照组在培养3d后细胞毒性增长至2级.结论:自制镍铬烤瓷合金仪具有极微弱的细胞毒性,符合口腔材料临床应用的要求.     

一种复合过氧乙酸消毒剂的遗传毒性评估

摘要 目的 评估一种复合过氧乙酸消毒剂的遗传毒性。方法 采用中国仓鼠肺成纤维细胞（CHL）染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,检测和评价该复合过氧乙酸消毒剂的染色体损伤毒性。结果 在加入和未加入S9活化系统的条件下,该过氧乙酸消毒剂在4~500 μg/ml剂量范围内的染色体数目和结构畸变率均<5%。受试物各剂量组与阴性对照相比,动物骨髓嗜多染红细胞微核率无显著性差异（P>0.05）,动物骨髓嗜多染红细胞与正染红细胞的比值（PCE/NCE）也无显著性差异（P>0.05）。结论 该过氧乙酸消毒剂无明显遗传毒性。     

3种牙科金属材料对小鼠成纤维细胞凋亡的影响

背景:有关磁性附着体外包裹不锈钢材料引起的细胞凋亡,经检索CNKI数据库未见报道.目的:观察磁性附着体的3种外包裹牙科金属材料钴铬合金、钛合金及奥氏体不锈钢对L-929细胞凋亡的影响.设计、时间及地点:对比观察,实验于2007-06/12在中国医科大学中心实验室完成.材料:选用对数生长期的小鼠成纤维细胞L-g29,由中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所提供.钴铬合金由贺立氏古莎齿科有限公司提供:钛合会由日本森田公司提供;奥氏体不锈钢由中国科学院金属研究所提供.方法:将钛合金、奥氏体不锈钢和钴铬合金3种金属材料制成圆片形,放置于24孔板中,按浸提液体积与试件表面积比值为0.1 mL/cm2放入RPMI-1640培养液,即得到材料浸提液.实验分为5组:钛合金组、奥氏体不锈钢组和钴铬合金组分别将L-929细胞接种于含不同质量浓度(250,500 g/L,1 kg/L)钛金属、奥氏体不锈钢和钴铬金属的浸提液中;阴性对照组:RPMI1640培养的L-929细胞:阳性对照组:1 00 mg/L丝列霉素处理的L-929细胞.主要观察指标:流式细胞仪检测各组不同质量浓度浸提液干预24 h对L-929细胞凋亡的影响.结果:除250 g/L质量浓度钛合金与阴性对照组之间细胞凋亡率无显著差异(P>0.05)外,其他各组材料同一质量浓度或同一材料不同质量浓度之间细胞凋亡率相比,差异均有显著件意义(P<0.01).结论:3种金属材料对细胞凋亡率均有显著影响,凋亡率大小依次为:钛合金组<奥氏体不锈钢组<钴铬合金组     

三种比色法评价4种牙科金属材料对L-929细胞的毒性

背景：采用不同方法评价材料的细胞毒性可能会得出不同的实验结果。目的：采用3种比色法评价镍铬合金、钴铬合金、3铬13及纯钛等牙科金属材料对小鼠成纤维细胞（L-929细胞）的细胞毒性。方法：以镍铬合金、钴铬合金、3铬13及纯钛4种牙科金属材料的浸提液分别作用于体外培养的L-929细胞24,72h。以体积分数10％小牛血清＋高糖DMEM培养液培养的L-929细胞为阴性对照组,以0.7％丙烯酰胺＋体积分数10％小牛血清＋高糖DMEM培养液培养的L-929细胞为阳性对照组,分别采用MTT、CCK-8及结晶紫3种比色法检测上述材料的细胞毒性。结果与结论：①4种材料浸提液中培养的细胞形态正常,胞内结构清晰,随着培养时间延长细胞大量增殖,与阴性对照组细胞形态无明显差异。阳性对照组细胞数量明显减少,形态完整性受破坏,形成大量细胞碎片。②培养24h时,CCK-8比色法检测中钴铬合金组的细胞相对增殖率低于阴性对照组沪〈0．05）,MTT及结晶紫比色法检测中钴铬合金组的细胞相对增殖率与阴性对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）;培养72h时,MTT比色法检测中4种牙科金属材料组细胞相对增殖率低于阴性对照组（P〈0．01）,CCK-8及结晶紫比色法检测中4组的细胞相对增殖率与阴性对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）,但材料细胞毒性均为0—1级。表明上述4种牙科金属材料细胞毒性均在临床应用的允许范围内,具有良好的生物安全性。