分泌小鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

采用活体内生长ＳＰ２／０骨髓细胞为融合伙伴,用ＳＰ２／０细胞与甲胎蛋白免疫的ＢＡＬＡ／Ｃ小鼠脾细胞进行融合,建立了２株稳定分泌抗ＡＦＰ单克隆抗体的小鼠杂交瘤株。冻存两年后复苏,仍稳定地分泌特异抗体。培养上清的抗体效价达１０＾－３,腹水效价达１０＾－６,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４识别抗原表位不同,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４均属于小鼠ＩｇＧ１亚类。     

分泌抗—HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬ／ＩＳＡ效价分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染色体数为９５～１１０条。结果证明，此细胞株为特异性分泌抗—Ｈｋｅ单克隆抗体细胞株。     

分泌抗——HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬＩＳＡ效价的分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染     

分泌抗人喉癌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及临床意义

用喉癌抗原免疫疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选获得４株分泌抗人喉癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，均收集到腹水型ＭｃＡｂ，并验证其滴度高，纯化效果好，特异性强。     

建立分泌抗人精液抑制素杂交瘤细胞株及其单克隆抗体的研究

用人精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得４株分泌抗人精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＩＢ１０，ＩＧ５，ＩＡ４和ＩＡ６。     

分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用人甲胎蛋白(AFP)免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株(G2和G10)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液和小鼠腹水的特异性抗体效价,分别为2～4×10~(-3)和10~(-6)～10~(-7)。两株杂交瘤细胞染色体的众数为104～108条。经体外连续传代及冻存半年复苏后,仍具有分泌抗体能力,说明其性能稳定。两株所分泌的抗体,均属IgGl型。     

分泌本周氏蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

本文报告了以人的本周氏蛋白(BJK)免疫BALB/C小鼠脾细胞与SP2/o—Ag14小鼠骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)MW400作用下融合,并经7次克隆后获得二株抗人的BJK杂交瘤细胞系(E_6,H_4)。经染色体核型分析证实为杂交瘤细胞。本单克隆抗体经标准兔抗小鼠IgG亚类血清鉴定,属小鼠IgG_2a,IgG_2b。两株细胞经液氮冻存、复苏仍能正常分泌抗体。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定植瘤小鼠的腹水及其血清的抗体滴度分别为10~4—10~5,10~3—10~4。     

分泌抗人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

通过B淋巴细胞杂交技术,成功地制备了分泌抗GST-π单克隆抗体的杂交瘤细胞株A_1和A_2。对获得的两株杂交瘤细胞株进行了染色体核型分析和DNA含量测定。结果表明,它们确系NS-1小鼠骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞的杂交体,抗体类型鉴定结果表明,杂交瘤A_1只分泌IgG_1类免疫球蛋白,而A_2只分泌IgG_(2a)类免疫球蛋白,且两类免疫球蛋白均由k型轻链组成。两株杂交瘤分泌的单克隆抗体仅与GST-π特异反应,与GST的其它类型同功酶及其它可溶性抗原均无交叉反应。     

肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的建立与鉴定

用HFRSV血凝素免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,共获得56株分泌抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系。对其中10株细胞系应用血凝抑制试验证明有9株为特异性分泌抗HFRSV血凝素McAb的杂交瘤细胞系。应用微量细胞培养中和试验证明6株具有中和活性。z株(3D_8和3G_1)具有高滴度的血凝抑制活性和中和活性。10株HFRSV血凝素McAb均能与从不同疫区,不同宿主分离的HFRSV反应,说明HFRSV血凝素具有群共同性。     

第二组分泌抗人血小板单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞

用杂交瘤技术获得了第二组抗人血小板的单克隆抗体。这些单克隆抗体在体外对正常人血小板聚集功能有不同程度和性质的影响。其中SZ-21的E亚克隆分泌的单克隆抗体能完全抑制胶原诱导的血小板聚集并能部分抑制肾上腺素、ADP诱导的血小板聚集。SZ-21E单克隆抗体影响血小板功能的性质,提示其识别的抗原决定簇可能是血小板膜糖蛋白Ⅱ/Ⅲ。其他各株细胞及其亚克隆也有进一步研究的价值。     

二株抗人原发性肝癌AFP—McAb杂交瘤的建立

本文报道从GHC—1及GHC—3分泌的AFP,经过常规方法的改进,获得AFP—McAb。以5pg/kg AFP免疫后的BAL B/C小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,采用ELISA—Ⅰ、DIBA、RPHA—Ⅰ和杂交瘤细胞免疫荧光法,筛建了二株可分泌抗人原发性肝癌的AFP—McAb杂交瘤,定名为GAH_1及GAH_2。 RPHA—Ⅰ测试表明,GAH_1及GAH_2分泌的McAb,可抑制原发性肝细胞癌病人的腹水和血清,但对脐带血不能完全抑制。     

抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文用呼吸道合胞病毒(RSV)作抗原免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,建立3株分泌抗RSV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。经鉴定所产生的McAb确系抗RSV的McAb。     

抗-p30单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

作者用纯化的p30抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。融合率为93.95％,抗体阳性率为21.01％。经克隆化,获得两株分泌抗-p30单克隆抗体的杂交瘤细胞株E_8与G_1。染色体计数:E_8为98.7±6.54;G_1为97.7±7.77。PAGE于γ区出现浓染的蛋白带。免疫组织化学染色和ELISA抑制试验证实该两株细胞分泌的抗体具有较好的种属特异性和器官特异性。均属IgG_2。都不能使人精子凝集和制动。     

地高辛MAb的研究(Ⅰ、分泌地高辛特异性MAb杂交瘤细胞系的建立及抗体特性分析)

用淋巴细胞杂交瘤技术成功地建立了8个分泌地高辛特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系。对各单抗(FD1～8)的分析鉴定表明,其特异性均较普通抗血清为佳。其中高特异性、高亲和力的FD8(IgG1)已用于地高辛浓度检测及中毒救治的研究。     

抗HSV－1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７～１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＬｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ｇ）、ＩｇＧ＿３，腹水抗体效价在１０￣（－５）～１０￣（－７）之间免疫沉淀。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３株与１２０～１２８Ｋ多肽，２株与６０Ｋ多肽发生特异性反应，具有ＨＳＶ型共同抗原特异性。７株ＭｃＡｂ与ＣＭＶ均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于ＨＳＶ的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。