微型双向薄层色谱分析诊断氨基酸代谢病(附24例检测报告)

本文采用微型双向薄层色谱(TLC)分析法,检查了遗传门诊中24名可疑有氨基酸代谢异常的初筛病儿,对其中18例做了血、尿TLC分析,11例诊断为异常,其中8例为苯丙酮尿症(PKU)。3例为同型胱氨酸尿症(HCU)。该检测方法简便、灵敏、快速、重复性好,是诊断氨基酸代谢病的一个良好方法。     

临床化学上的非挥发性有机酸的双向薄层色谱法分析

薄层双向色谱分离分析了43种非挥发性有机酸、其中近20种为有机酸代谢病的标记酸或在某种有机酸病中会出现异常的有密切关系的酸，本文研究选得了一对薄层色谱有机酸分离效果好的展开溶剂；改进了尿液中有机酸的溶剂萃取法，具有良好的提取效果。     

微型双向色谱检测诊断同型胱氨酸尿症

采用本组建立的微型双向薄层色谱法检测诊断先天性氨基酸代谢病,首次在我省发现一例同型胱氨酸尿症患儿。该患儿血中甲硫氨酸及其氧化物(甲硫氨酸砜和甲硫氨酸亚砜)含量明显增加,甲硫氨酸含量为1.25×10~(-3)3mol/L(18.6mg/dl);尿中排出大量同型胱氨酸和少量甲硫氨酸,其同型胱氨酸排泄量为0.55×10~(-3)mol/L(147.6mg/dl)。此病例为胱硫醚β—合成酶缺陷所引起。本方法检测先天性氨基酸代谢病简便,快速、灵敏。     

串联质谱联合气相色谱-质谱检测遗传性代谢病

目的 应用串联质谱检测干血滤纸片中的氨基酸和酰基肉碱谱,联合气相色谱-质谱技术检测尿液中有机酸谱,对遗传性代谢病进行筛查和诊断.方法 留取4981例临床疑似遗传性代谢病儿童的干血滤纸片、尿或尿滤纸片,利用串联质谱仪检测血中氨基酸和酰基肉碱,利用气相色谱-质谱仪检测尿中有机酸,部分患儿结合相关酶活性测定及基因突变分析进行诊断.结果 在4981例患儿中共诊断319例(6.4%)24种遗传代谢病,其中氨基酸代谢病155例(48.6%),8种疾病;有机酸血症150例(47.0%),10种疾病;脂肪酸13氧化代谢病14例(4.4%),6种疾病.结论 串联质谱对氨基酸和脂肪酸代谢病的诊断具有特异性,气相色谱-质谱对有机酸血症的诊断具有特异性,部分氨北基酸代谢病需要这2种技术联合应用才能诊断.     

比较两种不同预处理法的尿液有机酸分析在遗传代谢性疾病筛查和诊断

目的：比较两种不同预处理法的尿液有机酸分析在遗传代谢性疾病筛查和诊断中的应用。方法：留取本院内分泌代谢科80例遗传代谢病高危患儿和80例同年龄段正常儿童尿液,分别经尿素酶预处理法和有机酸萃取预处理法处理后用GC—MS检测尿代谢产物,进行疾病诊断、代谢产物的定性、半定量及抗干扰性分析。结果：尿素酶预处理法共诊断15例代谢性疾病及1例肾小管重吸收障碍,有机酸萃取预处理法诊断出13例代谢性疾病;尿素酶预处理法能检测有机酸、氨基酸、糖、醇及嘧啶类等多种代谢产物,有机酸萃取预处理法仅能检测到有机酸;有机酸萃取预处理法对有机酸的检测值及抗干扰性都要高于尿素酶预处理法。结论：尿素酶预处理法适用于临床不能确诊的遗传代谢病的筛查;有机酸萃取预处理法则适用于临床高度怀疑为有机酸病的诊断。     

藏药智托洁白丸中没食子酸的定性与定量检测

目的:建立智托洁白丸处方中没食子酸定性与定量测定方法。方法:定性测定采用薄层色谱法。定量测定采用高效液相色谱法,色谱柱为Sunfire-ODSC18柱(250mm,4.6mm),柱温30℃,以乙腈-含体积分数0.1%三乙胺的体积分数0.1%磷酸溶液(体积比3:97)为流动相;检测波长为273nm,理论板数按没食子酸峰计算不低于3000。结果:薄层色谱图中,供试品、对照药材和对照品在相应位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。定量检测时,没食子酸进样量在0.0157～0.2830μg范围内线性关系良好,标准曲线为Y=4×107X+6532(R2=0.9998);方法的精密度和重现性均良好(RSD分别为0.05%,1.43%),12h内的稳定性良好(RSD=0.65%);平均回收率为98.07%,RSD=0.76%。9批样品中没食子酸平均含量为8.8mg/g。结论:所建立的薄层色谱定性检测方法和高效液相色谱定量检测方法可用于智托洁白丸中没食子酸的定性鉴别和定量控制。     

不同年龄大鼠不同脑区递质氨基酸含量的比较研究

分离检测脑内递质氨基酸的含量,是研究脑代谢和脑功能活动的一个重要指标。本文应用高效液相色谱——柱后衍生法对大鼠脑内三个部位游离氨基酸进行了分离并对GABA(γ—氨基丁酸)、Tau(牛磺酸)、Gly(甘氨酸)、Glu(谷氨酸)和ASP(天冬氨酸)进行了定量。结果表明:随年龄增长,脑内抑制性递质GABA,Tau和Gly的含量降低或不变,兴奋性递质Glu和ASP含量增高或不变。并且还讨论了不同脑区GABA/Glu以及抑制性递质氨基酸总量与兴奋性递质氨基酸总量比值。     

748例遗传性代谢病高危儿童串联质谱筛查研究

目的 应用串联质谱技术对遗传性代谢病高危儿进行筛查检测。 方法 采集临床疑似遗传性代谢病高危儿童滤纸血片,用衍生法进行前处理后进样,用API3200串联质谱仪分析样本中氨基酸和酯酰肉碱谱及浓度。 结果 在748例高危儿童中检出氨基酸代谢病（AAD）、有机酸代谢紊乱（OAD）和脂肪酸氧化缺陷病（FAOD）29种共95例,检出率12.70%.其中AAD 占56.84%(54/95),OAD 20.00%(19/95) ,FAOD 23.16%(22/92).检出较多的代谢异常为瓜氨酸代谢异常（高瓜氨酸血症、Citrin缺陷病、低瓜氨酸血症等)、持续性高苯丙氨酸血症(经典型苯丙酮尿症、高苯丙氨酸血症和四氢生物蝶呤缺乏症等）、枫糖尿病、丙酰肉碱代谢异常（甲基丙二酸血症或丙酸血症等）、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、肉碱转运障碍等。 结论 应用串联质谱技术可定性和定量分析体内代谢物质浓度水平和代谢关系的变异,对氨基酸代谢病、有机酸代谢紊乱和脂肪酸氧化缺陷病等30余种遗传性代谢病进行高危筛查或临床检测。     

川木香质量标准研究

目的:建立川木香的质量标准。方法:采用硝酸银薄层和HPLC法对川木香进行了定性、定量分析。薄层色谱条件:2.5%硝酸银薄层板,展开剂环己烷-乙酸乙酯-丙酮(8∶1∶1),喷5%香草醛-浓硫酸溶液在105℃烘至显色。定量分析:色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-水(70∶30),检测波长220nm。结果:采用硝酸银薄层鉴别的分离效果明显优于硅胶G薄层。含量测定中去氢木香内酯的平均回收率为97.51%;RSD值为2.38%。结论:所建立的定性鉴别和定量方法可用于控制川木香的质量。     

眼络通冲剂质量控制标准实验室研究

[目的]研究眼络通冲剂的定性和定量质控指标。[方法]采用硅胶G薄层色谱法对冲剂中两种主要成分川芎和三棱进行定性鉴别;用RP-HPLC法对葛根素进行含量测定,采用Kromasil100-5C18（4.6mm×250mm,5μm）为色谱柱,甲醇-水（30：70）作流动相,检测波长为250nm。[结果]葛根素进样量在0.06～0.65μg的范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r=0.9999,日内、日间精密度RSD分别为0.85%和0.48%（n=5）。得高、中、低3个浓度平均加样回收率（n=3）分别为101.2%、101.1%、101.4%,RSD分别为1.1%、0.94%、0.41%。[结论]硅胶G薄层色谱定性法和RP-HPLC定量法结果准确可靠,重现性好,可作为该制剂质控标准。     

润燥清肺膏成分鉴别及含量测定方法研究

目的建立润燥清肺膏中桑叶、甘草的鉴别和甘草中甘草酸铵的含量测定方法。方法用薄层色谱法对桑叶、甘草进行定性鉴别;用HPLC法对甘草中的甘草酸铵进行定量检测。色谱条件:色谱柱:Venusil,C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(36∶64)为流动相;检测波长为250 nm,进样量10μl。结果用建立的薄层鉴别方法可鉴别桑叶、甘草两种药材。甘草酸铵的含量测定在0.056 43~1.128 6μg范围内线性关系良好(r=0.999 8,n=6),平均加样回收率为98.82%,RSD为0.87%(n=6)。结论该鉴别及含量测定方法准确性好、灵敏度高,可用于产品的质量控制,完善了润燥清肺膏的质量标准。     

清热养心颗粒的鉴别及其绿原酸含量测定

目的:建立清热养心颗粒的质量标准.方法:采用薄层色谱法对6味组方药材进行鉴别,并用HPLC法对组方药材金银花所含绿原酸进行含量测定,Supelco ODS-C18柱(4.6×250mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.2%磷酸水(8:92),检测波长327nm.结果:金银花、黄连、黄精、百合、山豆根、甘草6昧组方药材经薄层色谱被全部鉴识,各主斑点分离清晰,阴性无干扰;绿原酸对照品在0.01884μg～0.6008μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),加样回收率平均98.5%(n=6,KSD=0.8%).结论:上述定性及定量可用于清热养心颗粒质量控制.     

TLC和HPLC法测定柳芽中对羟基苯乙烯

用HPLC法和TLC法对柳芽中的有效成分对羟基苯乙烯的含量进行了测定。高效液相色谱条件:色谱柱250 mm×4.5 mm(I.D.)Water's μ-Bondpak-CN 5μm;流动相:环己烷-异丙醇(95:5 V/V);检测波长UV 280 nm紫外检测器。薄层色谱法条件:固定相为硅胶G板;展开剂:苯-醋酸乙酯(2:8);以FeCl_3(5%)乙醇溶液显色后,在CS-930双波长薄层扫描仪扫描定量(λs=400nm,λ_R=650nm)。两法均获得满意结果。     

安乐胶囊质量标准研究

目的 建立安乐胶囊的质量标准.方法 采用薄层色谱(TLC)法鉴别处方中柴胡、甘草、钩藤、首乌藤四味药材;用高效液相色谱(HPLC)法测定甘草中甘草酸的含量,流动相为乙睛-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(25:75:0.3),检测波长250 nm,柱温30℃.结果薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰.甘草酸单铵盐进样量在0.032～0.416μg范围内与峰面积呈很好的线性关系,回归方程及相关系数:Y=1.1385×106X-0.036×104,r=0.9999,加样回收平均回收率为101.2%,RSD=0.34%,表明回收率的重现性较好.结论该法稳定,重复性好,可有效控制安乐胶囊的质量.     

双检测器在药物分析定性定量方面的应用

目前可以用于药物(尤其是成分复杂的中药)定量检测的色谱方法主要有薄层色普法、高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法以及凝胶电泳法等,但是在检测中多使用单一的检测器:紫外检测器或者二极管检测器,从而使可以同时测定的化合物种类和灵敏度受到限制,本文主要介绍了色谱分析中常见的一些检测器,以及双检测器在高效液相色谱、凝胶色谱、气相色谱中的应用,用于实现对各种药物(尤其是复杂中药)中成分中的定量分析,为广大药物工作者在今后更好地从事色谱分析工作,提供一些相关的知识.     

安神解郁胶囊质量控制方法的研究

目的建立安神解郁胶囊定性、定量检测方法。方法采用薄层色谱（TLC）法鉴别方中酸枣仁、丹参、黄连、石菖蒲,采用高效液相色谱（HPLC）法测定酸枣仁皂苷A和B的含量。色谱条件：色谱柱为I nertsil ODS-SP（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（65∶35）,流速为1.0 mL/min,柱温30℃,漂移管温度为40℃,空气压力为340 kPa,检测器为蒸发光检测器。结果定性鉴别薄层色谱特征明显;HPLC法测得酸枣仁皂苷A和B的线性范围分别为0.516~10.320μg/mL（r=0.999 6）、0.248~4.970μg/mL（r=0.999 3）,平均加样回收率（n=6）分别为97.40%（RSD=1.20%）、95.97%（RSD=1.70%）。结论 TLC方法操作简单,结果可靠,重现性好,可有效地控制该制剂的质量。     

民族药青刺尖质量标准研究

目的:建立青刺尖的质量标准。方法:采用生药学方法对青刺尖进行鉴定。并建立了青刺尖中熊果酸薄层色谱鉴别和高效液相色谱含量测定方法。结果:通过薄层色谱可鉴别青刺尖中的熊果酸;采用HPLC测定熊果酸的含量,在0.405~16.2μg范围内线性关系良好,r=0.9995,平均回收率100.0%,RSD=1.76%。结论:该方法准确可靠地进行定性、定量检测,能有效评价青刺尖的质量。     

薄层色谱快速鉴别法检测红花中非法添加色素分析

目的:探究薄层色谱快速鉴别法对红花中非法添加色素的检测效果.方法:在可见光下筛查,并采用高效液相色谱法(HPLC)进行两次检测,将检测结果与对照试剂色谱峰进行比较分析.结果:当薄层色谱与HPLC检测结果处于一致时,9批红花药材中有两批药材含食品禁用色素酸性红73.结论:薄层色谱快速鉴别法操作简单、快捷,具有较好的重复性,且成本较低,可广泛用于红花药物非法添加色素的快速筛查,对于中药材、中药饮片市场监管有着一定的应用价值与实践意义.     

高效液相色谱法测定山茱萸中熊果酸的含量

山茱萸为一种收涩药 ,具有补益肝肾、收敛固脱之功效[1] ,其有效活性成分熊果酸的含量测定《中国药典》1995版采用索氏提取、薄层色谱分离 ,最后用薄层扫描法定量的方法[2 ] 。该法操作十分繁琐 ,又很费时间。本文采用超声波提取、高效液相色谱法定量的检测方法 ,具有精密度高、检测速度快、分离效果好、重现性好的特点。本文通过 2组对照实验即超声波提取与索氏提取、薄层扫描定量与高效液相定量对照 ,所测得的含量数据相吻和 ,证实了采用本法代替《中国药典》1995版的方法是完全可行的。1　仪器与试药1.1　药品与试剂无水乙醇 (分析纯 ) ;…     

杏香兔耳风提取物质量标准研究

目的:建立杏香兔耳风提取物的质量控制方法.方法:通过薄层色谱(TLC)法和高效液相色谱(HPLC)法对杏香兔耳风提取物进行质量控制.结果:杏香兔耳风提取物中3,5-二咖啡酰基奎宁酸线性范围为0.083～0.830 μg,r=0.9999,表明线性关系良好,平均加样回收率为98.55%,RSD为0.85%(n=6).结论:TLC和HPLC两法合用,可定性、定量控制杏香兔耳风提取物中3,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量,准确度高,重现性好,操作便捷.