日本血吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶诱生的保护性免疫应答特征的研究

目的：研究日本血吸虫重组谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ）在不同品系小鼠（ＢＡＬＢ／ｃ小鼠及Ｃ５７ＢＬ／６小鼠）诱生免疫应答的差异。方法：将ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ（弗氏佐剂）经皮下免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠及Ｃ５７ＢＬ／６小鼠,收集免疫前和免疫后血清及取小鼠脾脏,分析ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫小鼠诱生的特异性抗体、脾脏淋巴细胞特异性增殖能力及细胞因子种类等。结果：ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠所诱生的抗体总ＩｇＧ及ＩｇＧ亚类均较明显高于免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。抗体ＩｇＧ亚类分析显示,ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠诱生较高滴度的ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ及ＩｇＧ２ｂ（血清按１∶４００稀释,Ａ４９２ｎｍ值分别为＞３．０、１．１２７、＞３．０）,而在ＢＡＬＢ／ｃ小鼠主要诱生较低滴度的ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ及ＩｇＧ２ｂ（血清按１∶４００稀释,Ａ４９２ｎｍ值分别为１．１８９、０．３９、０．６２５）;ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫能够诱导小鼠Ｔｈ细胞激活。细胞因子分析显示ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠既能诱生较高水平的ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ,又能诱生ＩＬ－５。而ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠仅     

小鼠肝细胞细胞色素P450 1A1/1A2诱导的免疫细胞化学研究

目的小鼠肝细胞细胞色素Ｐ４５０１Ａ１／１Ａ２的免疫细胞化学研究。方法应用免疫细胞化学的方法研究了诱导剂β＿萘酚黄酮对Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ和ＤＢＡ／２小鼠肝细胞中细胞色素Ｐ４５０１Ａ１／１Ａ２的诱导。结果免疫电镜发现，Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ实验组小鼠肝细胞内质网上有大量胶体金标记抗体结合，对照组则无类似改变。ＤＢＡ／２实验组和对照组未发现有金颗粒结合。结论Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ小鼠肝细胞Ｐ４５０１Ａ１／１Ａ２活性在诱导剂注射后４８ｈ达高峰。增加诱导剂剂量并不相应增高该酶活性的表达。     

日本血吸虫副肌球蛋白全基因核酸疫苗在小鼠诱生的保护性免疫力

目的： 研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗免疫Ｃ５７ ＢＬ／６ 及ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠诱生的保护性免疫力。方法： 将构建的日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗 （ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７） 经后腿胫前肌免疫Ｃ５７ＢＬ／６及ＢＡＬＢ／ｃ小鼠, 共免疫３ 次, 每次间隔３ ｗ ｋ。末次免疫后３ ｗ ｋ 以血吸虫尾蚴攻击感染, ６ ｗｋ 后计数成虫负荷及肝、脾、肠组织虫卵数。设不含ＳｊＣ９７ 编码基因的空载体质粒免疫组为对照组。结果： ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７ 免疫Ｃ５７ ＢＬ／６ 小鼠主要诱生ＩｇＧ２ａ 和ＩｇＧ２ｂ 亚类, 而免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠除诱生ＩｇＧ２ａ 和ＩｇＧ２ｂ 亚类外, 还诱生ＩｇＧ１。ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７ 免疫Ｃ５７ＢＬ／６ 小鼠诱生较明显的减虫率 （３５．５％ ～４１．１％ ） 和减卵率 （肝、脾及肠组织减卵率分别为４４．５％ ～５９．６％ 、５６．７％ ～８２．４％ 及５７．９％ ）, 而对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠未诱生保护性。结论： ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７ 核酸疫苗能对Ｃ５７ＢＬ／６ 小鼠诱生较明显保护性免疫力, 而对ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠未诱生免疫保护力     

编码恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1的17区片段的核酸疫苗诱导小鼠体液免疫反应的研究

目的初步研究编码恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１（ＭＳＰ１）的１７区片段的核酸疫苗（ＶＲ１０１２／ＭＳＰ１－１７）诱导小鼠的体液免疫反应。方法ＢＡＬＢ／ｃ小鼠和Ｃ５７ＢＬ／６小鼠分别经每次每只２００μｇ／１００μｌ和１００μｇ／１００μｌ的ＶＲ１０１２／ＭＳＰ１－１７三闪肌注免疫后,用ＥＬＩＳＡ间接法检测免疫鼠血清中抗ＭＳＰ１１７区的抗体。结果两种小鼠均产生明显的抗ＭＳＰ１１７区的抗体,ＢＡＬＢ／ｃ小鼠较Ｃ５７ＢＬ／６小鼠产生的抗体略高,但总体抗体水平不是很高。结论该核酸疫苗具有一定的免疫原性,其保护性仍需进一步研究     

编码恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1的17区片段的核酸疫苗诱？…

目的 初步研究编码恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１（ＭＳＰ１）的１７区片段的核酸疫苗（ＶＲ１０１２／ＭＳＰ１－１７）诱导小鼠的体液免疫反应。方法 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠和Ｃ５７ＢＬ／６小鼠分别经每次每只２００μｇ／１００μｌ和１００μｇ／１００μｌ的ＶＲ１０１２／ＭＳＰ１－１７三闪肌注免疫后，用ＥＬＩＳＡ间接法检测铭疫鼠血清中抗ＭＳＰ１１７区的抗体。结果 两种不均产生明显的抗ＭＳＰ１１７区的抗体，ＢＡＬＢ／ｃ     

口服疫苗预防幽门螺杆菌感染的实验研究

目的：利用感染人类幽门螺杆菌（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）的小鼠模型,研究Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ粗制抗原与霍乱毒素（ＣＴ）或重组霍乱毒素Ｂ亚单位（ｒＣＴＢ）组成的口服疫苗预防ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染的作用。方法：无特殊病原菌级Ｃ５７ＢＬ／６小鼠分为４组,通过灌胃方法分别予各组小鼠以Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ超声粉碎抗原１ｍｇ加ＣＴ１０μｇ、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ超声粉碎抗原１ｍｇ加ｒＣＴＢ１０μｇ、单纯Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ超声粉碎抗原１     

日本血吸虫肝期童虫抗原免疫效果的观察

本文用日本血吸虫９ｄ龄肝期童虫抗原免疫小鼠观察了对同种血吸虫攻击感染的效果。材料和方法１实验动物Ｃ５７ＢＬ／６雌性小鼠７周龄，标准饲料喂养。２日本血吸虫尾蚴自湖南省寄生虫病研究所采购阳性钉螺，逸出尾蚴。３肝期童虫抗原的制备３．１冻融冷浸及超声粉碎处理...     

HBcAg DNA疫苗诱导小鼠（H—2^b）特异性细胞和体液免疫应答

目的 观察ＨＢｃＡｇ ＤＮＡ疫苗（ｐＪＷ４３０３／ＨＢｃ）免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠（Ｈ－２＾ｂ）的特异性细胞和体液免疫应答。方法 基因枪和肌肉注射两种方法接种ＤＮＡ疫苗;ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢｃ（ＩｇＧ）及ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１,ＩｇＧ２ａ）;＾５１铬释放法检测小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ活性。结果 该ＤＮＡ疫苗体外可表达ＨＢｃＡｇ;小鼠经基因枪或肌肉注射接种该疫苗后血清抗－ＨＢｃ滴度分     

耶尔森氏菌YadA蛋白单克隆抗体的研制与鉴定

１．以纯化的ＹａｄＡ蛋白免疫普通小鼠４只，获得小鼠ＹａｄＡ多克隆抗血清；２．利用上述免疫血清建立了ＹａｄＡ多克隆缺本的ＥＬＩＳＡ检测技术，并对其最适条件进行了观察；３．用纯化的ＹａｄＡ蛋白免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠２只，以免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞系ＳＰ２／０融合，获得１７株分泌ＹａｄＡ－ＭｃＡｂ杂交瘤细胞株，将其中４株进行了再克隆，经过半年左右的反复传代及冷冻，复苏测试，抗体分泌稳定，４     

日本血吸虫组织蛋白酶B DNA疫苗抗生殖免疫的研究

目的 探讨日本血吸虫组织蛋白酶ＢＤＮＡ疫苗的保护。方法 分别用Ｓｊ３１ＢＩＮ免疫昆明鼠和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,攻击感染后６Ｗ计数成虫负荷及粪便和组织内虫卵数结果 用构建的ｊ３１ＢＩＮ免疫小鼠成虫发育,肝组织减卵率为５９．３￣６５．０％,肠组织减卵率为５７．６￣６２．１％,粪便减卵率为８６．５％。结论Ｓｊ３１ＢＩＮ可诱导小鼠产生抑制雌虫生殖的免疫力。     

运动训练对老年小鼠巨噬细胞功能的影响

对游泳训练三个月的Ｃ５７ＢＬ／６老年小鼠巨噬细胞功能进行了研究。结果是老年鼠不运动组巨噬细胞的吞噬和抑瘤功能较青年鼠降低；老年鼠运动组巨噬细胞白细胞介素１（ＩＬ－１）分泌、吞噬和抑瘤功能均较不运动组增强（Ｐ＜０．００１）。表明适量运动训练可增强巨噬细胞功能，而起到一定的抗衰老作用。     

一种纯系小鼠动脉粥样硬化病理模型的建立

实验选用Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ纯系小鼠，饲喂含２％胆固醇饮食１６周后，血清脂质（包括总胆固醇、游离胆固醇和甘油三酯）水平升高，血清总胆固醇为３．６９±０．７８ｇ／Ｌ，与人类高脂血症接近；油红Ｏ方法染色后在光镜、激光扫描共聚焦显微镜下观察，形态学结果显示实验组小鼠在主动脉窦瓣膜、冠状动脉等部位均形成典型的含有大量泡沫细胞的动脉粥样硬化斑块，Ｒｏｂｅｒｔｓ＆Ｔｈｏｍｐｓｏｎ评分达到８．０±１．２。这表明成功地建立了一种实验性动脉粥样硬化纯系小鼠整体动物模型。     

重组日本血吸虫中国大陆株rTPI分子对小鼠免疫保护性 …

研究重组日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶分子抗血吸虫感染的保护性作用。方法用ＩＰＴＧ诱导表达,制备纯化的重组ＴＰＩ蛋白,将重组ＴＰＩ抗原免疫Ｃ５７ＢＬ／６及昆明鼠,８周后用血吸虫尾蚴攻击感染,４５display status后剖杀,计数减虫率及减卵率。结果Ｃ５７ＢＬ／６     

鸡疟原虫雌配子单克隆抗体的制备和鉴定

对鸡疟原虫雌配子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞ＮＳＩ鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出的６株杂交瘤细胞，证明能分泌效价高、特异性强的单克隆抗休 类鉴定为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ，其中２Ｈ１、６Ｅ２、１Ｇ１、１２Ｄ１株ＭｃＡｂ为抗膜抗体，而３Ｈ１和６Ｃ２株ＭｃＡｂ为非抗膜抗体。     

以转基因动物研究类风湿关节炎的易感基因

目的通过人ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠的胶原性关节炎动物模型研究易感基因对类风湿关节炎及药物治疗的影响。方法将人ＨＬＡＤＲα＋４β基因转入Ｃ５７ＢＬ／６×ＤＢＡ／１Ｆ１代小鼠复制出转基因动物,并予胶原和佐剂免疫建立胶原性关节炎模型。以分子生物学技术检测外源基因的整合和表达,以发病时间、病理评分及血清Ⅱ型胶原抗体水平研究ＨＬＡＤＲ４基因对关节炎易感性及甲氨蝶呤治疗的影响。在体外通过淋巴细胞增殖及阻断实验研究Ⅱ型胶原及抗ＨＬＡＤＲ、Ｌｙｔ２和Ｌ３Ｔ４单抗对淋巴细胞增殖的影响。结果①人ＨＬＡＤＲ４基因稳定整合于Ｃ５７ＢＬ／６×ＤＢＡ／１Ｆ１代小鼠,主要在脾、肾中表达。②ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠对照组发病时间较非转基因小鼠组提早（Ｐ＜００５）。③ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠的对照组总病理评分和软骨破坏评分较相应的甲氨蝶呤治疗组高（Ｐ＜００５）,非转基因小鼠的对照组的总病理评分、软骨破坏评分和骨质侵蚀评分较相应的甲氨蝶呤治疗组高（Ｐ＜００５,Ｐ＜００１）。④ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠对照组和甲氨蝶呤治疗组的Ⅱ型胶原抗体水平较相应的非转基因小鼠组高（Ｐ＜００５,Ｐ＜０００１）,且均高于二组正常血清对照组（Ｐ＜     

吖啶诱变剂ICR—170致弱日本血吸虫尾蚴诱导的保护性？…

为了观察吖啶诱变无产卵能力的血喟虫是否能诱生抗感染的保护性免疫力，用１０μｇ／ｍｌ吖啶诱变往日上７０致弱日本血吸虫尾蚴作免疫原，免疫Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ小鼠两次，分别于初次免疫后６、８、１０ｗｋ用正常尾蚴作攻击感染。结果免疫鼠成虫减少率为６８．９％，肝组织虫卵减少率为７４．９％。动态观察显示，初次免疫后６ｗｋ攻击感染的减虫率最高，减卵率高峰在６～８ｗｋ．表明诱变剂ＩＣＲ－１７０致弱日本血吸虫尾蚴发育的     

小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡相关蛋白的表达

目的 探讨嗜鼠心肌Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）诱导的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠病毒性心肌炎（ＶＭＣ）细胞凋亡的机制。方法 给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种０．１ｍｌ１００ＴＣＤ５０ＣＶＢ３ｍ，感染后批断脊处死小鼠，应用双重荧光染色技术、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和共聚焦显微镜对小鼠心肌细胞凋亡及部分相关蛋白表达进行检测。结果 ＣＶＢ３ｍ可诱发小鼠ＶＭＣ。感染病毒后９～１２ｄ病变达到高峰，检出率达１     

丙型肝炎病毒核心基因免疫研究

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心（Ｃ）基因免疫用于预防和治疗ＨＣＶ感染的可行性和有效性．方法将ＨＣＶＣ基因片段插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３质粒ＣＭＶ启动子的下游，在证实其可以在小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０（Ｈ２ｄ）中表达之后，将重组质粒注射ＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ２ｄ）小鼠股四头肌，ＥＬＩＳＡ检测血清中抗体产生水平；３ＨＴｄＲ掺入法测定免疫小鼠淋巴细胞ＨＣＶＣ抗原特异性增殖能力，４ｈ５１Ｃｒ释放法检测免疫小鼠细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬｓ）体外杀伤功能．结果免疫小鼠２０只，初次免疫２ｗｋ后，血清中均出现了ＨＣＶＣ抗体，且增加免疫剂量可提高抗体滴度；淋巴细胞增殖指数为６１０，明显高于对照组（Ｐ＜００１），ＣＴＬｓ体外特异性杀伤率为６３１％，也高于对照组（Ｐ＜００１）．结论ＨＣＶＣ基因免疫不仅可以诱导机体产生特异性的体液免疫，而且产生特异性的细胞免疫，它可能是防治ＨＣＶ的有效方法．     

Cyclin D1和pRb在胃癌的的表达及其临床意义

应用免疫组织化学技术检测ＣｙｃｌｉｎＤ１和ｐＲｂ在胃癌及其癌旁粘膜中的表达,探讨其在胃癌的发生和发展中所起的作用１材料和方法１．１材料共选取胃癌手术切除标本５７例,经１０％中性福尔马林液固定,常规脱水,石蜡包埋．１．２方法应用免疫组织化学ＡＢＣ（ＡｖｉｄｉｎＢｉｏｔｉｎＣｏｐｌｅｘ）法,ｃｙｃｌｉｎＤ１小鼠单抗ＤＣＳ－６购自美国Ｎｅｏｍａｒｋｅｒ公司,Ｒｂ小鼠单抗购自美国Ｚｙｍｅｄ公司,ＡＢＣ试剂购自美国Ｖｅｃｔｏｒ公司,微波进行抗原修复２结果２．１ＣｙｃｌｉｎＤ１和ｐＲｂ在胃癌、不典型增生和胃…     

应用静脉及脾内注射法对BLAB／C鼠免疫效果的初步探讨

本文报道用杜氏利曼原虫前鞭毛体免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，采用尾静脉注射三次，第四次和加强免疫则只剪开皮肤，直接刺入脾内注射前鞭毛体，每次注射虫体０．５￣１×１０＾７只，每次免疫间隔２周，用ＢＡＬＢ／Ｃ鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ瘤细胞融合，再克隆技术２株杂交瘤细胞分别命名为１Ｆ７－Ｄ６和２Ａ２－Ｈ１１，抗体滴度分别为１：５１２００，１：２０４ ８００以上，可见此法不仅免疫时间短，抗原用量少，且抗体效价高，用双