9-硝基喜树碱自微乳化注射液的研制及其体内药动学

 目的 制备9-硝基喜树碱(9-NC)自微乳化静脉注射给药系统,并考察其在大鼠体内的药动学情况.方法 采用伪三元相图确定微乳形成的区域,以正交实验方法确定最佳处方,并对9-NC自微乳化制剂的稳定性进行了评价,同时还考察了该制剂在正常SD大鼠体内静脉注射后的药动学行为.结果 以注射用大豆油为油相、EPC/Tween 80为乳化剂、无水乙醇为助乳化剂等成分组成的9-NC自微乳化给药系统(9-NC SeH-emulsification Mtcroemulsion Drug Delivery Systems,9-NC SMEDDS)在临用前用5%葡萄糖注射液稀释50倍后可自发形成粒径(40.6 ±0.23)nm 的微乳,9-NC SMEDDS 和溶液药动学参分别为:t 1/2(0.97±0.14)h和(0.69±0.11)h, (372.77±49.62) ng/(h·ml)和 (225.60 ± 56.10) ng/(h·ml) MRT (1.40±0.21)h和(0.99±0.15)h.结论 9-NC SMEDDS具有较好的物理和化学稳定性,可显著提高9-NC 静脉给药的生物利用度.     

LC/MS/MS分析方法测定人血浆中匹多莫德的浓度

目的建立LC/MS/MS测定人血浆中匹多莫德的浓度。方法以舒巴坦为内标,采用甲醇-1%甲酸水溶液(10∶90,v/v)为流动相,以SymmetrySheildC18(3.5μm,20cm×2.1mm)色谱柱为分析柱,通过电喷雾电离源(ESI),以正离子多离子反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z245.2→m/z134.0(匹多莫德),m/z234.0→m/z124.2(舒巴坦)。结果匹多莫德线性范围0.010~20.0mg·L-1,定量下限为0.010mg·L-1(n=5)。日内、日间的RSD均<6.7%,平均回收率>90%。结论本法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于匹多莫德临床药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中拉米夫定浓度

 目的 试图建立测定人血浆中拉米夫定浓度的液相色谱-串联质谱法.方法 以吉西他滨为内标,内标法定量.流动相:甲醇-10 mmol/L乙酸铵(12: 88,v/v);质谱采用离子喷雾离子源,扫描方式为多反应监测(MRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z 230m/z 111.9(拉米夫定)和m/z 263.8m/z 111.9(吉西他滨);药动学参数采用DAS2.0软件处理获得.结果 拉米夫定和内标吉西他滨的保留时间分别为2.9 min和2.4 min;拉米夫定的线性范围为0.0100~2.0000 μg/ml ,r=0.9996,回归方程:Y=0.0032X+0.0003,最低检测浓度为0.0100 μg/ml;提取回收率为95%～105%范围内;日内日间精密度RSD<6%.结论 此法适合人体血浆拉米夫定浓度的监测及生物利用度研究,结果准确、可靠.     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中福多司坦的浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中福多司坦的浓度。方法采用C18色谱柱（3.5μm,50mm×2.1mm）,以甲醇-0.01%氨水（5∶95,V/V）为流动相,流速：0.2ml/min。结果人血浆内源性杂质对样品测定无干扰,福多司坦的最低检测浓度为0.05mg/L,在0.05～20.0mg/L范围内线性关系良好（r=0.9997）,低中高3种浓度的平均回收率分别为97.70%,100.84%和99.58%,精密度RSD均小于6%。结论本法快速、灵敏、准确,可用于测定人体血浆中福多司坦的浓度。     

氯霉素甲硝唑洗鼻剂的含量测定及其2-甲基-5-硝基咪唑的定量检查

目的建立高效液相色谱法测定氯霉素甲硝唑洗鼻剂中氯霉素、甲硝唑含量测定方法及其有关物质2-甲基-5-硝基咪唑的定量检查方法。方法采用高效液相色谱法。IntersilC18分析色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相：甲醇-水（36∶64,含1%磷酸二氢钠,0.005mol.L-1十二烷基磺酸钠,磷酸调pH值3.0）,流速：1ml/min,检测波长310nm。结果2-甲基-5-硝基咪唑、甲硝唑和氯霉素理论板数分别约为4300、3700和3500,回归方程分别为：Y=0.0003191X-0.000003240（r=0.9993）,Y=0.000001435X-13.64（r=0.9997）和Y=0.000008098X-22.71（r=0.9998）;线性范围分别为0.0005700～0.002280μg;0.4230～2.115μg和0.4500～2.250μg;平均回收率分别为98.7%、100.3%、98.4%,RSD分别为2.4%、1.6%、1.2%;检测限分别约为0.0001、0.003、0.03μg。结论用高效液相色谱法同时测定氯霉素甲硝唑洗鼻剂中氯霉素、甲硝唑及其有关物质2-甲基-5-硝基咪唑的含量,操作简便,结果准确。     

替硝唑和甲硝唑在胆病患者血浆和胆汁中浓度测定

目的 比较替硝唑和甲硝唑在胆病患者血浆和胆汁中浓度，为临床合理用药提供依据。方法胆道手术后患者分别iv替硝唑或甲硝唑400mg，用HPLC法检测12h内血浆和胆汁中药物浓度。结果替硝唑在12h内，甲硝唑在3～4h内可维持有效浓度。结论替硝唑可以执行qd给药方案，用于治疗胆道感染比甲硝唑更有利。     

LC-MS／MS同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度

目的高效液相色谱·串联质谱联用法（LC—MS／MS）同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度。方法样品用甲醇进行沉淀蛋白后进样,Zorbax Eclipse TC—C18色谱柱,以甲醇旬．1％甲酸的1mmol·L^-1甲酸铵溶液,采用梯度洗脱进行分离,3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测（MRM）扫描方式进行检测。结果对乙酰氨基酚线性范围为：0．05-20μg·mL^-1,定量下限为0．05μg·mL^-1,准确度与精密度结果显示对乙酰氨基酚日间、日内RSD均≤5．50％,相对偏差一8．08％～5．73％,方法提取回收率92．0％～99．0％,稳定性测定值与添加值的相对偏差均〈15％;右氯苯那敏线性范围为：0．05～20ng·mL^-1,定量下限为0．05ng·mL^-1,准确度与精密度结果显示右氯苯那敏日间、日内RSD均≤13．71％,相对偏差-1．29％～1．71％,方法提取回收率89．8％～101．4％,稳定性测定值与添加值的相对偏差均〈15％。结论本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重复性高,可用于同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的　建立RP -HPLC法测定人血浆中替米沙坦浓度。方法　用AgilentZORBAX×ODS柱 (4 .6× 1 5 0mm ,5 μm) ,流动相为水 -乙腈 -三乙胺 (6 0∶4 0∶0 .1 ) ,荧光检测激发波长为 30 0nm ,发射波长为 380nm ,采用萘乙酸为内标。结果　替米沙坦保留时间为 9min左右 ,浓度线性范围 1 0～ 35 0 0 μg·L-1 。结论　该法准确、快速、简便 ,可用作人血浆中替米沙坦浓度测定方法     

以双氯酚酸为探针采用高效液相色谱法快速测定CYP4502C9的酶活性

目的建立一种快速、高效的以双氯酚酸作为探针药物评价细胞色素P4502C9（CYP2C9）酶活性的高效液相色谱．紫外检测方法。方法色谱柱为Agilent Zorbax SB—C18柱（50mm×4．6mmI．D．,5μm）;流动相为乙腈（含0．01％七氟丁酸）-水（含0．01％七氟丁酸）（65：35,V／V）,流速2．0mL/min;检测波长为280nm。双氯酚酸与人CYP2C9酶在37℃温孵适当时间后,加入100μL乙腈-冰乙酸（94：6,V／V）终止反应,10000g离心后取上清液进样分析测定。结果4’-羟基双氯酚酸的保留时间为1．35min,线性范围为1．00—200μmol·L^-1（r=0．9999）,最低定量限为1．00μmol·L^-1,回收率为99．5％-100．8％;双氯酚酸的保留时间为2．25min,线性范围为1．00～200μmol·L^1（r=0．9999）,最低定量限为1．00μmol·L^-1,回收率为99．3％～101．1％。两者的日内、日间RSD均〈15％,温孵体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论该方法快速、稳定、灵敏度高,适合体外双氯酚酸及其代谢物4’-羟基双氯酚酸的测定,可应用于体外CYP2C9酶活性的评价及酶动力学的研究。     

HPLC测定藏药螃蟹甲中8-乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量

目的建立藏药螃蟹甲中8-乙酰氧基山栀子苷甲酯的HPLC测定方法,为进一步控制螃蟹甲药材及其制剂的质量提供参考依据。方法色谱柱为SymmetryC18（4．6mm×150mm,5μm）,流动相：乙腈-水（6：94）,HAe调pH=4．50,流速0．8mL／min,柱温20℃,检测波长234nm。结果8．乙酰氧基山栀子苷甲酯浓度在0．787～14．76μg·mL^-1范围内与峰面积积分值线性关系良好（r=0．9999）;加样回收率为99．21％（RSO=1．68％）。螃蟹甲药材中8-乙酰氧基山栀子苷甲酯平均含量为（0．62±0．19）mg·g^-1。结论本方法简便、准确、专属性强,可用于螃蟹甲药材中8-乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量测定。     

HPLC-MS/MS法快速测定人血浆中氟哌噻吨浓度及生物等效性研究

目的建立测定人血浆中氟哌噻吨浓度的高效液相串联质谱法（HPLC-MS/MS）,用于氟哌噻吨美利曲辛片的生物等效性研究。方法以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6mm×150mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈（含1%甲酸）：0.02mol/L甲酸铵水溶液（80：20,V：V）,流速：0.8ml/min;柱温：40℃,以醋酸乙酯：二氯甲烷（4：1,V：V）为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择性反应监测（SRM）对氟哌噻吨（m/z435.2→305.1）和氯普噻吨（m/z316.2→231.1）进行测定。结果氟哌噻吨的高（1μg/L）、中（0.5μg/L）、低（0.05μg/L）3个浓度的平均回收率分别为101.01%、96.19%和106.63%,日内（n=5）、日间（n=3）RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为0.025μg/L。线性范围为：0.025～2.5μg/L,回归方程为：F=0.6625ρ＋0.0049,r=0.997（n=7）,权重为1/ρ2。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中左西孟旦

目的建立快速、灵敏的HPLC-MS/MS法测定人血浆中的左西孟旦浓度。方法以氢氯噻嗪为内标,血浆样品经甲基叔丁基醚沉淀蛋白,以甲醇为流动相,采用C18色谱柱进行分离,电喷雾离子化源,以多重反应监测方式进行负离子检测。结果测定血浆中左西孟旦方法的线性范围为0.5～1200 ng/ml,定量下限可达0.5 ng/ml。结论本方法专属性好,准确、快速,适用于左西孟旦注射液的临床药代动力学研究。     

食品及补剂中降糖药物的初筛及确证方法研究

为探索更有效的食品及补剂中降糖药物的检测方法,本研究采用液相色谱/质谱联用的技术研究检测了食品补剂中的7种降糖药物,分别采用乙酸乙酯提取法和甲醇直接提取法,建立了快速、有效的检测食品补剂中降糖药物的初筛及确证方法。检测限在20~500pg之间。     

液相色谱-质谱法同时测定大鼠血浆中游离型神经甾体

目的建立同时测定SD大鼠血浆中脱氢表雄酮(DHEA)、孕烯醇酮(PREG)和别孕烯醇酮(AP)的高效液相色谱质谱法。方法选择甲睾酮(MT)作为内标。雄性SD大鼠的血浆使用液液萃取后,再经固相萃取、衍生化后,以高效液相色谱质谱检测器测定DHEA、PREG和AP的浓度。采用大气压化学离子源(HPLC/APCIMS),选择离子检测方式。结果血浆中DHEA、PREG和AP线性范围分别为:0.030～2.00ng·ml-1,0.025～2.00ng·ml-1,相关系数分别为0.9988、0.9996和0.9988。低、中、高浓度血样的提取回收率在70.4%～92.4%之间,相对回收率为:92.6%～105.6%,日内、日间RSD均小于15%。正常雄性SD大鼠的血浆PREG和AP分别为0.29±0.24ng·ml-1、0.19±0.20ng·ml-1,每ml血浆DHEA含量均低于定量限。结论本实验方法具有灵敏度高、准确度好及变异较小的特点,适合测定雄性SD大鼠血浆中3种游离型神经甾体的含量。     

高效液相色谱法测定人血浆中还原型谷胱甘肽浓度

目的建立HPLC方法测定人血浆中还原型谷胱甘肽（GSH）的浓度。方法采健康人体血浆样品，加入定量的二硫苏糖醇（DTT），用10％高氯酸沉淀蛋白，在硼酸缓冲液中与邻苯二甲醛（OPA）进行衍生化，取上清液20txl进样测定。C18色谱柱，流动相为0．02mol·L^-1KH2PO4缓冲盐-乙腈（V：V=94：6）；流速1ml／min；荧光检测波长λex 340nm，λem 420nm。结果GSH标准衄线在0．5～200mg·L^-1内，线性良好，r=0．9968（n=7）。日内和日间精密度的RSD均在9％以内，3种浓度下样品的方法回收率均〉95％。结论该方法准确，无干扰，可用于人体药动学及生物等效性研究。     

液相色谱串接质谱测定马饲料中的三种生物碱

本文建立了采用高效液相色谱串接质谱(LC-MS/MS)同时快速筛查和定量测定马复合饲料中三种天然痕量生物碱(吗啡、可待因、罂粟碱)的方法。样品经充分粉碎后用1 mmol/L HClO4溶液提取,并通过混合型固相萃取进行净化。采用ZORBAX Eclipse Plus-C18(150 mmL×2.1mm ID,3.5μm)色谱柱以含0.4%甲酸的水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,正离子多反应监测(MRM)模式下进行检测。吗啡的检出限为0.50 ng/g,定量限为1.0 ng/g;可待因的检出限为0.75 ng/g,定量限为1.5 ng/g;罂粟碱的检出限为0.20 ng/g,定量限为0.50 ng/g。三种药物空白饲料高、中、低添加浓度水平下的回收率在77.4~97.8%之间,日内、日间精密度分别不高于6.2%和7.1%,实验结果表明本方法有较好的灵敏度和精密度,可以满足马饲料中该类药物的常规检测分析。     

高效液相色谱法测定头孢他啶血药浓度

目的建立测定头孢他啶血药浓度的方法。方法高效液相色谱法采用Kromasil C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-磷酸二氢钾溶液（15：85）为流动相,流速1．0ml／min,检测波长254nm。结果头孢他啶吼浆浓度在0．5～200．0mg·L^-1范围内线性笑系良好（r=0．9999）。低、中、高3个浓度的方法回收率为94．91％～105．95％,RSD〈12％;提取回收率为89．50％～92．94％,RSD〈5％。结论本方法简便、准确、精密度好,可用于临床药动学研究。