趋化因子CCR2,CXCL9在口腔黏膜下纤维性变中的表达

目的：通过检测趋化因子CCR2,CXCL9在早、中、晚期口腔黏膜下纤维性变（OSF）组织中基因及蛋白表达的改变,进一步探讨OSF的发病机制。方法：收集早、中、晚期OSF组织,RT—PCR检测趋化因子CCR2,CXCL9基因mRNA的表达,Western blot检测组织中趋化因子CCR2,CXCL9蛋白的表达。结果：趋化因子CCR2,CXCL9基因mRNA及蛋白在早、中、晚期OSF组织中与对照组相比均呈现表达下调,在早、中、晚期病变组织中表达依次递减。在早期OSF病变组织中,CCR2,CXCL9基因mRNA较健康对照组分别上调406％和2051％,蛋白表达分别升高385％和1506％;在中期OSF病变组织中,CCR2,CXCL9基因mRNA较健康对照组分别上调369％和1901％,蛋白表达分别升高310％和1419％;在晚期OSF病变组织中,CCR2,CXCL9基因mRNA较健康对照组分别上调357％和1760％,蛋白表达分别升高309％和1401％。结论：早、中、晚OSF各期组织中趋化因子CCR2,CXCL9基因mRNA和蛋白水平表达均异常升高。此类因子的异常表达可能与OSF的发病机制相关。     

口腔黏膜下纤维性变癌变中Survivin的表达及意义

目的:检测口腔黏膜下纤维性变(OSF)及其癌变组织中凋亡抑制蛋白Survivin的表达,探讨Survivin在OSF癌变过程中的临床意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测10例正常口腔黏膜组织、40例OSF组织和42例OSF癌变组织中Survivin的表达情况.结果:正常口腔黏膜组织上皮中无Survivin阳性表达,OSF癌变组织中Survivin阳性表达率(95.2%)显著高于OSF组(47.5%)(P＜0.01),而早、中、晚期OSF 3组间Survivin阳性表达率无显著性差异(P＞0.05).结论:Survivin蛋白的过度表达在OSF癌变过程中具有重要作用;Survivin有望成为OSF癌变的早期诊断标志物.     

HGF/c-met在口腔黏膜下纤维化组织中表达的研究

收集早、中、晚期口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,OSF)组织各10例及正常的口腔颊黏膜组织5例,采用免疫组化SABC法对各种组织中的HGF及c-met的表达情况进行检测。结果显示在正常的口腔颊黏膜组织中HGF和c-met呈阳性表达,早、中、晚期OSF组织中表达明显降低(P<0.05)。说明HGF/c-met在OSF组织中表达受到抑制,促进了OSF的发病。     

口腔黏膜下纤维化中结缔组织生长因子表达的研究

目的:探讨结缔组织生长因子(CTGF)在口腔黏膜下纤维性变(OSF)发病机制中的作用。方法:采用免疫组化SP法,用CTGF兔抗人多克隆抗体检测30例OSF患者及5例正常对照者口腔黏膜组织中CTGF蛋白的分布。结果:CTGF蛋白在正常口腔黏膜中为阴性表达,在早、中期OSF病变组织中呈阳性表达(P<0.05)。结论:OSF病变组织中CTGF蛋白表达增加,该蛋白可能通过促进成纤维细胞的增殖和细胞外基质的沉积,参与了OSF的发病。     

口腔黏膜下纤维化中VEGF和TSP表达及相关性的研究

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血小板反应蛋白(thrombo-spondin,TSP)在口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis,OSF)中的表达,探讨两者的相关性及在OSF发病中的作用.方法:选取30 例OSF患者,其中早、中、晚期各10 例, 5 例健康志愿者作为对照组.取每例研究对象口腔颊黏膜,采用免疫组化SP法检测VEGF和TSP的蛋白表达. 结果:VEGF在OSF早期较正常口腔黏膜中表达增高,中、晚期逐渐下降,其中早期组与正常组、中期组、晚期组比较均有显著性差异(P<0.05).TSP在OSF早、中期表达持续增高,晚期稍下降,各组间差异无显著性(P>0.05).病变组织黏膜下层中VEGF与TSP呈负相关(r=-0.620,P<0.05).结论:VEGF和TSP的异常表达可能是OSF微血管病变的重要发病机制之一.     

hBD-2在口腔黏膜下纤维性变、扁平苔藓、口腔鳞癌中表达的研究

目的:探讨人类β-防御素2(hBD-2)与口腔黏膜疾病发病机制的关系及其在口腔黏膜中的作用。方法:采用免疫组织化学染色法,检测hBD-2在正常口腔黏膜、口腔黏膜下纤维化(早、中、晚期)、扁平苔藓和口腔鳞癌(1级)中的表达情况,计算阳性表达率并测量免疫组化染色的平均光密度值(MOD),应用SPSS17.0统计软件进行数据分析,计数资料采用χ2检验。结果:hBD-2在NOM、OSF、OLP、OSCC中均有表达,主要表达于上皮细胞、间质细胞和基底细胞胞浆膜上。hBD-2阳性率排序为OSCC>OSF(早期)>OLP>NOM。OSCC的阳性率明显高于后三者,差异具有统计学意义(P<0.05);OSF(早期)、OLP、NOM阳性率差异不具有统计学意义,但OSF中期hBD-2表达明显上调(P<0.05)。hBD-2平均光密度值由大到小排序为OSCC>OSF(中期)>OSF(晚期)>OLP>OSF(早期)>NOM。OSCC与NOM、OSF(早、中、晚期)、OLP间差异均具有统计学意义(P<0.05),NOM与OSF早期以及OLP差异不具有统计学意义。结论:hBD-2在正常口腔黏膜、口腔黏膜下纤维性变、口腔扁平苔藓、口腔鳞癌的表达及分布情况不同。hBD-2在OSF各期中表达程度不同,可能提示hBD-2与纤维化进程有关。     

Survivin磷酸化在口腔黏膜下纤维性变及其癌变组织中的表达

目的检测凋亡抑制蛋白Survivin活性形式——Survivin Thr34位磷酸化(p-Survivin)在口腔黏膜下纤维性变及其癌变组织中的表达,探讨Survivin在OSF癌变过程中的作用及意义。方法应用免疫组化SP法检测10例正常口腔黏膜组织、40例OSF组织及42例OSF癌变组织中p-Survivin的表达,并以Western Blot分析p-Survivin的表达。结果正常口腔黏膜上皮组织中无p-Survivin表达;OSF癌变组p-Survivin阳性表达率(97.6%)高于OSF组(50.0%);而OSF早、中、晚期3组间p-Survivin阳性表达率无显著性差异。Western Blot验证了免疫组化的检测结果。结论p-Survivin在OSF癌变过程中可能起促进作用,为OSF早期诊断和治疗提供理论依据。     

c-fos、c-jun蛋白在口腔黏膜下纤维性变组织中的表达研究

目的 :检测c -fos、c -jun蛋白在口腔黏膜下纤维性变 (OSF)组织中的表达及分布 ,探讨其在OSF发病机制中的作用。方法 :采用免疫组化SABC法 ,用c -fos、c -jun兔抗人多克隆抗体检测 5 6例OSF病变组织、15例口腔黏膜扁平苔藓 (OLP)病变组织及 10例正常口腔黏膜组织中的c -fos、c -jun蛋白的表达及分布。 结果 :c -fos、c -jun蛋白在OSF病变组织有明显的阳性表达 ,正常口腔黏膜及OLP组织为阴性表达 (P <0 .0 5 )。其表达主要位于OSF病变上皮组织 (P <0 .0 5 ) ,且表达强度为正相关 (γs=0 .744 ,P <0 .0 1)。结论 :c -fos、c -jun蛋白在OSF病变组织中高表达 ,在OSF发病机制中有重要作用。     

口腔黏膜下纤维性变中u-PA和PAI-1的表达及意义

目的:了解尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)及其抑制剂(PAI-1)在口腔黏膜下纤维性变(OSF)组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组化染色法和图像分析法,对OSF早、中、晚期各10例及10例正常口腔黏膜组织中的u-PA及PAI-1的表达及分布进行分析。结果:OSF病变组织中u-PA和PAI-1有异常表达,其阳性物质主要分布于固有层血管内皮细胞、成纤维细胞及炎症细胞的胞质,PAI-1各期阳性表达强度均高于正常口腔黏膜组(P<0.05),u-PA早期阳性表达显著升高(P<0.05),中晚期则逐渐降低(与正常组比P>0.05)。结论:u-PA、PAI-1在OSF病变组织中的异常表达,可能是影响OSF发生发展的重要因素。     

单核细胞趋化蛋白-1在口腔黏膜下纤维性变中的表达及意义

目的：探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在口腔黏膜下纤维性变（OSF）组织中的表达及其意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测45例OSF和15例正常口腔黏膜组织中MCP-1的表达及分布情况。结果：OSF组织中MCP-1的表达较正常组织增加,差异有统计学意义（P〈0.01）,MCP-1在OSF早期组织与中、晚期组织中的表达有显著性差异（P〈0.05）。结论：MCP-1可能通过趋化、激活免疫和炎症细胞,在OSF发生发展中发挥重要作用。     

口腔黏膜下纤维化中VEGF mRNA的表达研究

目的:研究口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis,OSF)患者早、中、晚期组中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达,探讨VEGF与OSF微血管病变发生发展的关系.方法:选取OSF患者30例,其中早、中、晚期组各10例,5例健康志愿者为对照组.每例研究对象取其1:3腔黏膜,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,研究OSF患者早、中、晚期组中VEGF mRNA的表达水平.结果:VEGF mRNA在OSF早、中期的表达均较正常口腔黏膜高(P＜0.05):VEGF mRNA在OSF早期的表达均明显高于中、晚期(P＜0.05),其中中期的表达与晚期相比差异无显著性(P＞0.05).结论:VEGF对OSF微血管病变的影响主要在黏膜下层,各种调控因素在基因转录水平导致VEGF的高表达可能是OSF局部组织缺血的代偿.     

TLR2在口腔黏膜下纤维性变组织中的表达及意义

目的：通过检测口腔黏膜下纤维性变（OSF）组织中TLR2的表达情况,初步探讨TLR2在OSF发病中的作用。方法：选取OSF患者30例（早、中、晚期各10例）为实验组,正常者5例为对照组,每例研究对象取其口腔颊黏膜,采用免疫组化SABC法检测各组织中TLR2的表达情况。结果：正常口腔颊黏膜组织中TLR2呈阳性表达,在OSF组织中TLR2表达明显增强（P〈0.05）,主要表达于黏膜下组织;OSF早、中、晚期组织中TLR2的表达无显著性差异（P〉0.05）。结论：与正常口腔黏膜相比,OSF组织中TLR2的表达增高,提示TLR2在OSF发病中起一定的促进作用。     

口腔黏膜下纤维性变组织中Smad7蛋白的表达研究

目的检测Smad7蛋白在口腔黏膜下纤维性变(OSF)组织中的表达及分布,探讨其在OSF发病机制中的作用。方法采用免疫组化抗生蛋白链菌素生物素复合体法(strept Avidin-Biotin complex,SABC),用Smad7兔抗人多克隆抗体检测20例OSF病变组织及10例正常口腔黏膜组织中的Smad7蛋白的表达及分布。结果Smad7在OSF病变组织中为弱阳性表达,在正常口腔黏膜组织中为阴性表达,差别具有显著意义(P<0.05)。结论Smad7蛋白在OSF病变组织中弱阳性表达,在OSF发病机制中有重要作用。     

整合素α1在口腔黏膜下纤维性变发病机制中的作用

目的:观察口腔黏膜下纤维性变(OSF)组织中整合素α1的表达与分布,及槟榔碱对体外培养的人口腔黏膜成纤维细胞(FB)表达整合素α1mRNA的影响,探讨整合素α1在OSF发病中的作用与机制.方法:①采用免疫组织化学染色方法,观察整合素α1在10例正常口腔黏膜组织和OSF早、中、晚期各20例病变组织中的表达与分布,并采用半定量方法检测正常口腔黏膜组和OSF各组FB上整合素α1的表达强度.②采用RT-PCR法检测体外培养FB分别在0、10、20、40μg/ml浓度组别槟榔碱刺激下,整合素α1mRNA的表达水平.结果:①正常口腔黏膜组织中,整合素α1表达低,主要分布于上皮基底细胞和血管内皮细胞,呈胞膜或胞质阳性,FB极少见阳性表达;而OSF病变组织中,除表皮基底细胞及血管内皮细胞外,FB细胞膜及胞质内均见整合素α1的大量表达,炎症细胞上亦可见少量表达.OSF各期FB表达整合素α1均强于正常组(P<0.05),早中期组表达增高,晚期组表达降低,与中期组有统计学差异(P<0.05).②对照组整合素α1mRNA表达量低,在槟榔碱10、20 μg/ml浓度组表达逐渐升高与对照组存在显著性差异(P<0.05).40μg/ml组出现下降与10μg/ml组无显著性差异(P>0.05);结论:槟榔碱通过刺激口腔黏膜FB表达与分泌整合素α1,进而诱导胶原合成增多,可能是OSF发生机制之一.     

IP-10和IL-6在口腔扁平苔藓中表达的研究

目的:检测正常口腔黏膜与口腔扁平苔藓(OLP)黏膜的上皮和固有层结缔组织中干扰素诱导蛋白10(IP-10)、细胞因子白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达,探讨其在OLP中的作用。方法:应用荧光实时定量RT-PCR技术检测10例OLP黏膜和6例正常口腔黏膜的上皮和固有层结缔组织中IP-10、IL-6mRNA的表达量。结果:OLP黏膜上皮和固有层结缔组织中IP-10、IL-6mRNA的表达均较正常口腔黏膜明显升高(P<0.05),但IP-10、IL-6mRNA的表达量没有明显差异(P>0.05)。结论:OLP组织中趋化因子IP-10、细胞因子IL-6表达量改变可能与其发生发展有一定关系。     

口腔黏膜下纤维性变组织中Smad2/3蛋白的表达研究

目的：检测Smad2／3蛋白在13腔黏膜下纤维性变（OSF）组织中的表达及分布,探讨其在OSF发病机制中的作用。方法：采用免疫组化SABC法,用Smad2／3兔抗人多克隆抗体检测20例OSF病变组织及10例正常13腔黏膜组织中的Smad2／3蛋白的表达及分布。结果：Smad2／3在OSF病变组织中为中等强度表达,在正常口腔黏膜组织中为强阳性表达,具有显著性差异（P〈0．05）。结论：Smad2／3蛋白在OSF病变组织中中等强度表达,在OSF发病机制中有重要作用。     

口腔黏膜下纤维化组织中β1整合素的免疫组化研究

目的：观察β1整合素在人口腔黏膜下纤维化（oral submucous fibrosis,OSF）组织中的形态学定位,并探讨β1整合素与OSF病变的关系。方法：用免疫组化技术和图像分析技术观察OSF早、中、晚期及正常口腔黏膜10例β1整合素定位分布。结果：OSF组织中β1整合素免疫阳性物质含量有超量表达,主要分布在上皮棘细胞、基底细胞、间质成纤维细胞、血管内皮细胞及平滑肌细胞,并且β1整合素在OSF各期表达的比较有显著性差异。正常黏膜组织中β1整合素免疫阳性颗粒表达极弱。结论：β1整合素与OSF的发生和发展有关。     

口腔黏膜下纤维性变及其癌变组织中端粒酶逆转录酶表达

目的:探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)在口腔黏膜下纤维性变(OSF)癌变过程中的作用。方法:用免疫组织化学SP法检测10例正常口腔黏膜组织,46例OSF组织,14例OSF癌变组织以及10例相邻非癌变OSF组织中hTERT表达情况。结果:正常口腔黏膜组织上皮中无hTERT阳性表达,OSF癌变组织中hTERT阳性表达率(12/14)明显高于OSF组(7/46)(P<0.005),相邻非癌变OSF组织中hTERT阳性表达率(7/10)明显高于普通OSF组(7/46)(P<0.005)。结论:hTERT蛋白过度表达在OSF癌变过程中具有重要作用。     

口腔黏膜下纤维化组织中内皮素受体mRNA表达的研究

目的:通过研究内皮素A型受体(endothelin receptor A,ETA)和内皮素B型受体(endothelin receptor B,ETB)在口腔黏膜下纤维化中mRNA的表达,探讨ETA、ETB与口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis,OSF)病变发生发展的关系.方法:选取30例OSF患者,其中早、中、晚期组各10例,5例健康志愿者作为对照组,每例研究对象取其口腔颊黏膜,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究ETA、ETB在OSF中mRNA的表达水平.结果:ETA mRNA和ETB mRNA在OSF各期中的表达均较正常口腔黏膜高(P＜0.05);ETA mRNA在OSF早期的表达明显低于中、晚期(P＜0.05),其中期的表达与晚期相比差异无显著性(P＞0.05);ETB mRNA在OSF各组之间的表达差异无显著性(P＞0.05).结论:咀嚼槟榔等理化因素导致的ETA、ETB在基因转录水平的高表达以及由此所介导的缩血管效应可能是OSF微血管病变发生发展的始动因素.     

miR-630在OSF及伴OSF的OSCC组织中的表达研究

目的:研究微小RNA-630 (miR-630)在口腔黏膜下纤维性变(OSF)和伴OSF口腔鳞癌组织中的表达,初步探讨miR-630在口腔鳞癌及OSF癌变发生发展过程中的作用.方法:采用实时荧光定量PCR (real-time q-PCR)检测13例正常黏膜组织(A1组)、12例OSF组织(A2组)、22例伴OSF口腔癌癌旁组织(A3组)及相对应伴OSF口腔癌组织(A4组)中miR-630表达,用SPSS 19.0分析比较miR-630的表达含量.结果:伴OSF口腔癌组织与正常口腔黏膜组织相比,miR-630的表达升高(P＜0.05);伴OSF口腔癌癌旁组织与正常口腔黏膜组织相比,miR-630的表达升高(P＜0.05);伴OSF口腔癌组织与OSF黏膜组织相比,miR-630的表达升高(P＜0.05);伴OSF口腔癌癌旁组织与OSF黏膜组织相比,miR-630的表达有升高(P＜0.05):伴OSF口腔癌组织与伴OSF口腔癌癌旁组织相比,miR-630的表达有升高的趋势,但未见显著统计学差异(P＞ 0.05);OSF黏膜组织与正常口腔黏膜组织相比,miR-630的表达无统计学差异(P＞0.05).结论:miR-630在伴OSF口腔鳞癌组织中表达较正常黏膜组织及OSF组织均显著增加,其异常高表达可能与口腔癌及OSF癌变的发生、发展相关.