甘露消毒丹对小鼠IFN、NK及IL-2影响的研究

采用组织培养与放射免疫法,研究了甘露消毒丹全方、残方及加味方,对小鼠ＩＦＮ、ＮＫ、ＩＬ－２的影响。结果表明：甘露消毒丹全方、加味方与苦残方,对小鼠ＩＦＮ效价的影响,明显高于造模组;甘露消毒丹全方、加味方与苦残方,均能显著增强ＮＫ活性;甘露消毒全方对ＩＬ－２刺激指数的影响,优于加味方与芳残方、苦残方。     

甘露消毒丹及其拆方体外抗肠道病毒71型作用

目的观察甘露消毒丹及其拆方体外抗肠道病毒71型(EV71)的作用。方法运用细胞培养技术,病毒毒力测定采用Reed-Muench法计算半数组织培养感染量(TCID50),确定实验用为100 TCID50。将甘全方(甘露消毒丹全方)、清残方(甘露消毒丹方中清热解毒药物组成)、利残方(甘露消毒丹方中化浊利湿药物组成)、病毒唑药液用维持液1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶96、1∶128、1∶256稀释,采用MTT法测定各浓度药物吸光度OD值,根据各药不同浓度的OD值计算其细胞存活率,以药物浓度为横坐标(g/ml)、细胞存活率(%)为纵坐标绘出非线性回归曲线,选择各药的90%细胞存活率浓度为药效学实验浓度。分别将90%细胞存活率浓度的甘全方、清残方、利残方、病毒唑药液和100 TCID50病毒各50μl混合,加到单层人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(RD细胞)上,各设4复孔,每孔均设正常细胞对照、病毒对照,采用MTT法计算各药物对病毒生长的抑制率。结果根据Reed-Muench法计算得出TCID50=10-2.89/ml,从回归曲线获得各药90%细胞存活率浓度分别为甘全方:10-2.43=0.0037 g/ml;清残方:10-2.7=0.0020 g/ml;利残方:10-2.09=0.0081 g/ml;病毒唑:10-3.19=0.64 mg/ml。清残方EV71病毒抑制率为97.4%,甘全方为91.74%,利残方为75.64%,病毒唑为36.99%。结论甘露消毒丹全方及其拆方具有比病毒唑更强的抗EV71作用,清热解毒法在方中发挥了更强的抗EV71作用。     

甘露消毒丹及其拆方对CoxA16感染小鼠炎症因子及NF-κB信号通路的影响

目的:观察甘露消毒丹及其拆方对柯萨奇16病毒(Cox A16)感染模型小鼠脾组织IL-10、TGF-α含量及脑组织NF-κB蛋白的影响,探讨甘露消毒丹及其清残方、芳残方抗炎的可能机制。方法:ICR纯种小白鼠40只,随机分为5组,即空白组、模型组、全方组、芳残方组(甘露消毒丹中芳香化湿药物组成)、清残方组(甘露消毒丹中清热解毒药物组成),予单次腹腔注射Cox A16制备感染模型,采用ELISA法检测各组小鼠脾组织中的IL-10、TGF-α的表达,用Western blot法测定脑组织中NF-κB蛋白的含量变化。结果:与空白组比较,模型组脾组织IL-10、TGF-α含量升高,脑组织NF-κB相对表达量上调(P0.05或P0.01);与模型组比较,全方组脾组织IL-10、TGF-α含量显著升高,脑组织NF-κB相对表达量明显下调(P0.05或P0.01);与芳残方组比较,全方组脾组织IL-10含量增加、脑组织NF-κB相对表达量下调(P0.05);与清残方组比较,全方组脾组织TGF-α含量增加、脑组织NF-κB相对表达量下调(P0.05)。结论:甘露消毒丹及其拆方对Cox A16感染模型小鼠抗炎作用机制可能与增加脾组织IL-10、TGF-α含量,下调脑组织NF-κB相对表达量有关。     

甘露消毒丹及其拆方对柯萨奇病毒A16小鼠模型P-选凝素糖蛋白配体1和促炎因子的影响

目的观察甘露消毒丹及其拆方对柯萨奇病毒A16型(Cox A16)小鼠模型P-选凝素糖蛋白配体1(PSGL-1)和促炎因子的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法 7日龄ICR小鼠150只,随机分为正常组、模型组、全方组、芳残方组、清残方组和利残方组,每组25只。除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20μL107TCID50的Cox A16标准株原液进行造模。除正常组和模型组外,其余各组给予相应药物干预。于给药后第10日取材,检测PSGL-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-4的表达,并进行病理组织观察。结果除正常组外,其余各组小鼠肌肉组织内存在大量Cox A16,表明造模成功;HE染色结果显示,甘露消毒丹及其拆方可减轻Cox A16对肌肉的损伤。与正常组比较,模型组PSGL-1蛋白表达明显升高(P0.01);与模型组比较,全方组、芳残方组、清残方组和利残方组不同程度抑制PSGL-1蛋白的表达,减少致炎因子TNF-α、IL-1β、IL-4的产生(P0.01)。结论甘露消毒丹及其拆方具有抗炎作用,其中以全方组效果最明显。     

甘露消毒丹对CoxA16小鼠模型的影响

目的:探讨甘露消毒丹对柯萨奇病毒A16型(CoxA16)小鼠模型的影响。方法:7日龄ICR小鼠150只,随机分为正常组、模型组、阿昔洛韦组、甘露消毒丹组,每组25只;除正常组外,其余各组每只小鼠腹腔内注射20ul 107TCID50的CoxA16标准株原液进行造模,造模后的第5天,除正常组和模型组外,其余4组使用相应的药物干预治疗。观察小鼠临床表现;在光镜下观察肌肉组织形态学变化;用细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)检测肌肉匀浆液对Hela细胞存活率的变化;电镜观察肌肉组织病毒颗粒的变化,采用ELISA法检测肌肉组织IL-6、IL-10、INF-γ的浓度。结果:与模型组比较,发现阿昔洛韦及甘露消毒丹(24.4g/kg、12.2g/kg、6.1g/kg)均可提高小鼠的生存率并使体重恢复到正常情况。HE染色和电镜结构表明甘露消毒丹(24.4g/kg、12.2g/kg、6.1g/kg)和阿昔洛韦均可减轻CoxA16病毒对肌肉的损伤,并减少肌肉内病毒的颗粒。通过肌肉组织匀浆液对Hela细胞存活率的变化表明甘露消毒丹能抑制病毒在肌肉内的生长。ELISA检测结果发现阿昔洛韦与甘露消毒丹均能减少IL-6的浓度,并提高IL-10、INF-γ的表达。结论:甘露消毒丹对CoxA16感染的小鼠有保护作用,能够抑制并杀死体内的CoxA16病毒。     

心肌泰胶囊治疗病毒性心肌炎的实验研究

目的：观察心肌泰胶囊对柯萨奇病毒的抑制作用及其所诱导的大鼠心肌炎的治疗作用。方法：采用细胞病变抑制法(CPE)观察心肌泰胶囊及心肌片1号的抗柯萨奇病毒B3作用，并用小鼠腹腔注射氢化可的松加柯萨奇病毒B3液制作心肌炎模型，观察心肌泰胶囊的治疗作用。结果：心肌泰胶囊对柯萨奇B3有明显的抑制作用，可明显减少心肌炎小鼠的死亡率，改善一般状况，减轻心肌病理性损伤，结论：心肌泰胶囊对柯萨奇B3病毒确有抑制作用，是治疗心肌炎的有效药物。     

中药复方制剂治疗病毒性心肌炎的临床研究

病毒性心肌炎以柯萨奇Ｂ组病毒引起者最为多见,实验研究证明高山红景天多糖对小鼠具有抗柯萨奇Ｂ５病毒感染能力及对柯萨奇Ｂ３病毒感染大鼠心肌细胞有抑制作用［１、２］。为进一步明确其临床治疗作用,我们应用高山红景天作君药,制成心安康复方制剂。并观察了该药对临...     

中药复方制剂抗柯萨奇B组病毒的实验研究

本文报道了由高山红景天等６味中药组成的复方制剂抑制柯萨奇Ｂ３病毒感染细胞的有效浓度和对感染细胞病变的平均抑制率。结果表明：我们研制的复方制剂对由柯萨奇Ｂ３病毒感染而发生的细胞病变具有一定的抑制作用，有效浓度的平均抑制率为７２．５％。     

疏风解毒胶囊广谱抗病毒功效研究

简版：目的：评价疏风解毒胶囊广谱抗病毒作用。方法：采用细胞病变(CPE)抑制法,以连花清瘟胶囊为对照,从药物的最大无毒浓度开始,测定疏风解毒胶囊对甲型流感病毒HIN1型(FM1株、PR8株、江西修水株、Bl0株、B59株)、单纯疱疹病毒1型、单纯疱疹病毒2型、呼吸道合胞病毒、副流感病毒（仙台株）、柯萨奇病毒B4型、柯萨奇病毒B5型以及腺病毒的抑制作用,按Reed-muench法计算50%细胞毒性浓度(TCso),最大无毒浓度(TCo),50%抑制浓度(IC50)和药物治疗指数(TI)。采用副流感病毒致小鼠肺炎模型,以利巴韦林颗粒和连花清瘟胶囊为对照,测定疏风解毒胶囊对模型小鼠肺指数的抑制作用。……     

虎杖总蒽醌提取物对病毒性心肌炎主要致病病毒抗病毒谱的研究

病毒性心肌炎主要致病病毒为柯萨奇B型病毒，但部分病因也与柯萨奇A型病毒和单纯疱疹病毒、腺病毒型、流感病毒型和埃可病毒损伤靶组织细胞而导致的炎症有关。本项试验观察了虎杖总蒽醌提取物对以上5种病毒感染建株细胞和原代培养心肌细胞模型的抑制作用。     

芳香化浊液对流感病毒FM1株体外抑制作用实验研究

目的：观察芳香化浊液体外抑制甲1型流感病毒FM1株的作用。方法：通过在细胞培养液中加入不同浓度的芳香化浊液,并设置阳性药物、正常细胞对照,观察细胞不出现病变的最小稀释浓度作为该药的无毒界限。接种甲1型流感病毒FM1株于狗肾传代细胞（MDCK）,采用细胞病变抑制法观察不同浓度的芳香化浊液体外抑制甲1型流感病毒FM1株的作用。结果：芳香化浊液的最大无毒浓度为1：16000,细胞病变抑制法检测结果显示：芳香化浊液在最小无毒浓度1：64000时可表现为对甲1型流感病毒FM1株的完全抑制作用。结论：芳香化浊液体外能明显抑制甲1型流感病毒FM1株,且有效治疗浓度无细胞毒性。     

解毒益气活血方抑制血管生成的实验研究

目的:探讨解毒益气活血方对体外血管形成的抑制作用。方法:采用MTT法观察解毒益气活血方对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响。结果:解毒益气活血方在10%～20%浓度范围内,具有抑制血管内皮增殖作用(内皮存活率在63.8%～58.5%),且均与对照组有显著差异。结论:解毒益气活血方(10%～20%)在体外具有抑制血管增殖作用。     

抗EB病毒口服液对EB病毒抗原表达的抑制作用及其细胞毒作用

目的 观察抗EB(Epstein-Barr)病毒口服液对EB病毒抗原表达的影响及对鼻咽癌CNE2细胞的细胞毒作用。方法 用间接荧光法测定抗EB病毒口服液对Raji细胞早期抗原(early antigen，EA)表达及B95-8细胞病毒壳抗原(virus capsid antigen，VCA)表达的影响；用MTT法测定其对鼻咽癌CNE2细胞的细胞毒作用。结果 抗EB病毒口服液在无毒的浓度下，对Raji细胞EB病毒EA抗原表达有较强的抑制作用，其IC50值为0．667mg／mL：对B95-8细胞EB病毒VCA抗原表达有较强的抑制作用。其IC50值为0．89mg／mL；对正丁酸钠激发的B95-8细胞EB病毒VCA抗原表达亦有较强的抑制作用，其IC50为1．1mg/mL。抗EB病毒口服液对人鼻咽癌细胞CNE2的IC50为7．57mg／mL。结论 抗EB病毒口服液能抑制EB病毒抗原的表达,在较高的浓度下对鼻咽癌细胞CNE2具细胞毒作用。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞抑制作用的血清学研究

目的：探讨肾康注射液与苯那普利对人肾小球系膜细胞（MC）增殖的不同抑制作用强度。方法：采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法,观察具有降逆泄浊,益气活血作用的中药肾康注射液及苯那普利对MC增殖的影响。结果：肾康注射液与苯那普利对MC增殖均具有抑制作用,但在等效剂量浓度下,肾康注射液对MC的抑制作用优于苯那普利,结论：MC是肾康注射液发挥治疗作用的重要靶细胞,抑制MC增殖可能是该方延缓肾小球硬化的重要机制之一。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞抑制作用的血清学研究

目的探讨肾康注射液与苯那普利对人肾小球系膜细胞(MC)增殖的不同抑制作用强度。方法采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法，观察具有降逆泄浊、益气活血作用的中药肾康注射液及苯那普利对MC增殖的影响。结果肾康注射液与苯那普利对MC增殖均具有抑制作用，但在等效剂量浓度下，肾康注射液对MC的抑制作用优于苯那普利。结论MC是肾康注射液发挥治疗作用的重要靶细胞，抑制MC增殖可能是该方延缓肾小球硬化的重要机制之一。     

胃康宁含药血清对胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用及机理研究

目的:观察胃康宁含药血清对胃癌细胞的增殖影响,从细胞凋亡角度探讨作用机理。方法:制备胃康宁含药血清培养胃癌细胞,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechst DNA荧光染色法检测细胞凋亡,并计数凋亡率。结果:胃康宁各剂量组在初期均有抑制细胞增殖的作用,而高、中剂量抑制时间更持久。胃康宁高剂量组具有诱导细胞凋亡的作用。结论:胃康宁含药血清可明显抑制细胞增殖,其机理除与诱导细胞凋亡有关,还与细胞周期受阻也有关系。     

蜂王浆冻干粉含药血清对小鼠B16BL6黑色素瘤细胞增殖的影响

目的:观察蜂王浆冻干粉含药血清对小鼠B16BL6黑色素瘤细胞增殖的影响。方法:蜂王浆冻干粉大鼠灌胃1d、3d10d的含药血清与小鼠B16BL6黑色素瘤细胞体外培养,MTT比色法观察对细胞增殖的影响。结果:给药10d组血清能显著抑制B16BL6细胞的增殖,不灭活血清作用强于灭活血清,其抑制效应呈剂量依赖性,40%浓度作用最强。而给药1d、3d组血清抑制效应不明显。结论:蜂王浆冻干粉含药血清能抑制B16BL6细胞的增殖,其效应随大鼠给药时间的延长而增强,提示蜂王浆刺激机体产生自体活性物质在其抑瘤效应中发挥重要作用。     

化瘀祛痰方药对H2O2诱导人脐带静脉内皮细胞氧化应激保护作用的研究

目的探讨化瘀祛痰方药含药血清对H2O2诱导人脐带静脉内皮细胞（EA.hy926细胞）氧化应激的保护作用。方法体外培养EA.hy926细胞,随机分为5组。正常对照组：仅用DMEM完全培养基培养,不加任何药物;H2O2刺激组：培养液中加入终浓度为300μmol/L H2O2;含药血清低剂量组、含药血清中剂量组、含药血清高剂量组分别使用5%、10%、20%含药血清预处理24 h后加入终浓度为300μmol/L H2O2。各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用MTT法检测细胞活性,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力,2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶（LDH）活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮（NO）活性。采用细胞活性氧检测试剂盒,通过荧光显微镜观察细胞内活性氧水平的变化。结果与正常对照组相比,H2O2刺激后细胞活性明显下降,SOD、NO活性显著降低,而LDH活性、MDA含量则显著增加,活性氧水平明显升高。10%、20%化瘀祛痰方药含药血清可显著提高细胞存活率及SOD、NO活性,而显著降低LDH活性、MDA含量及活性氧水平。结论化瘀祛痰方药对H2O2诱导EA.hy926细胞氧化应激具有保护作用,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

卷柏属药用植物提取物体外抗柯萨奇病毒作用研究

目的:比较研究卷柏属7种药用植物的13种提取物在体外抗柯萨奇病毒CVB3的作用。方法:采用13种提取物培养CVB3感染的Hep-2细胞,观察比较细胞病变效应(CPE),72h后MTT法测定细胞活性。结果:在Hep-2细胞体系中,卷柏属7种药用植物的乙酸乙酯和95%乙醇提取物部位具有一定的抑制CVB3对细胞的致病变作用,使细胞存活率提高。结论:卷柏属药用植物可以作为新的抗CVB3的资源植物。     

川陈皮素对乳腺癌细胞的化疗增敏作用

目的 探讨川陈皮素对乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外化疗增敏作用.方法 以MDA-MB-231细胞为研究对象,MTT法测定细胞增殖抑制率,DNA Ladder、核小体双抗体ELISA和流式细胞仪测定MDA-MB-231细胞凋亡情况,凝胶阻滞实验(EMSA)和ELISA检测川陈皮素对核转录因子(NF-κB)的转录激活的影响.结果 20 μmol/L川陈皮素分别与1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素联合使用肿瘤细胞增殖抑制率为75.1%和82.6%,单独使用1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素肿瘤细胞增殖抑制率为40%和45%;核小体双抗体夹心酶免疫法和DNA凝胶电泳实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显促进MDA-MB-231细胞的凋亡,EMSA和ELISA实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显抑制NF-κB的转录活性.结论 川陈皮素可以促进临床化疗药物对乳腺癌细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能是通过抑制NF-κB转录作用.