Graves患者TSH抗独特型抗体检测及其意义

根据自身免疫性甲状腺疾病发病机制，新的独特型－抗独特型免疫网络学说，用兔抗人ＴＳＨＡｂ检测ＴＳＨＡｂ_２。以正常人为对照，其结合率ｘ＋２ｓ为正常上限，大于此值为阳性。１００例ＴＲＡｂ阳性组有５２％患者ＴＳＨＡｂ_２阳性，５０例ＴＲＡｂ阴性组有４％患者ＴＳＨＡｂ２_阳性，两组有明显差异（Ｐ＜０．０５）。ＴＲＡｂ和ＴＳＨＡｂ_２正相关（ｒ＝０．５８２，Ｐ＜０．０５）。同时用制备的ＴＳＨ抗体吸附ＴＲＡｂ阳性血清后再测ＴＲＡｂ吸附前后有明显差异（Ｐ＜０．０５）。ＴＳＨＡｂ_２的检出为探讨Ｇｒａｖｅｓ’发病机制提供了一条新思路。     

甲状腺疾病患者TsAb的阳性率调查

甲状腺疾病患者ＴｓＡｂ的阳性率调查李廷赵克明王玉凤辜晓萍沈守祥＊（安丘市人民医院山东安丘２６２１００＊潍坊市人民医院）促甲状腺受体抗体（ＴＲＡｂ）包括阻断型抗体（ＴｓＢＡｂ）和刺激型抗体（ＴｓＡｂ）两种亚型，ＴｓＡｂ是Ｇｒａｖｅ＇ｓ病（ＧＤ）发病的主...     

自身免疫性甲状腺病TSH受体抗体异质性研究

目的 研究自身免疫性甲状腺病（ＡＩＴＤ）患者ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）的异质性。方法 选择异质性ＴＲＡｂ患者６例,用ＥＢ病毒转染其外周血Ｂ淋巴细胞并筛选能产一单克隆ＴＲＡｂ的阳性细胞孔。结果６例患者的ＴＳＨ结合抑制免疫球蛋白（ＴＢＨⅡ）测定值为５１￣８９％,患者１、２、４、５、６存在甲状腺兴奋性抗体（ＴＳＡｂ）,而患者１、２、３可测各甲状腺阻断抗性体（ＴＳＢＡｂ）、以ＥＢ病毒转染外周血Ｂ淋巴细胞后     

化学合成的转化生长因子α七肽的抗体制备及对BT325细胞增殖…

转化生长因子α（ＴＧＦα）抗体可被用于识别和定位细胞产生的ＴＧＦα及抗肿瘤，作以化学合成的七肽为抗原制备抗体，并观察其生物效应。方法：采用碳化二乙胺为交联剂，将人工化学合成的ＴＧＦα七肽（ＮＨ３－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｈｅ－Ａｓｎ－Ａｓｐ－ＣＯＯＨ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联，并以此作抗原免疫家兔制备ＴＧＦα抗体，观察此抗体的生物学效应，结果：ＴＧＦα七肽合成正确，七肽与ＢＳＡ偶联     

TRAb和T淋巴细胞亚群联合检测对预测Graves病复发的临床意义

采用酶联免疫法和单克隆抗体法测定４２例Ｇｒａｖｅｓ病人，在用丙基硫氧嘧啶（ＰＴＵ）治疗过程中ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）和外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化，并对病人停药后随诊一年的结果表明ＰＴＵ治疗１８个月后，ＴＲＡｂ持续高水平和Ｔ淋巴细胞未恢复到正常者易复发。     

化学合成的转化生长因子α七肽的抗体制备及对BT_（325）细胞增殖的抑制作用

目的：转化生长因子α（ＴＧＦα）抗体可被用于识别和定位细胞产生的ＴＧＦα及抗肿瘤，作者以化学合成的七肽为抗原制备抗体，并观察其生物效应．方法：采用碳化二乙胺为交联剂，将人工化学合成的ＴＧＦα七肽（ＮＨ３－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｈｅ－Ａｓｎ－Ａｓｐ－ＣＯＯＨ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联，并以此作抗原免疫家兔制备ＴＧＦα抗体，观察此抗体的生物学效应．结果：ＴＧＦα七肽合成正确；七肽与ＢＳＡ偶联率达１２．５８∶１；免疫动物抗血清先经硫酸铵沉淀分离，再经用连接有ＴＧＦα七肽胃蛋白酶（ｐｅｐｓｉｎ）偶联物的活化ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱纯化，ＴＧＦα七肽抗体得率为０．７ｇ／Ｌ抗血清；免疫细胞化学染色显示该抗体能识别ＢＴ３２５细胞产生的ＴＧＦα；ＴＧＦα七肽抗体具有剂量依赖性抑制肿瘤细胞（ＢＴ３２５细胞）生长的作用．结论：作者制备的ＴＧＦα七肽抗体具有识别、定位细胞产生的ＴＧＦα和抗肿瘤的生物学效应．     

利用卵巢癌抗独特型抗体制备的Ab3及其功能特性研究

利用卵巢癌抗原内影像型单克隆抗独特型抗体６Ｂ１１和１Ｈ１２代替肿瘤抗原，诱导动物产生特异性体液免疫反应。经ＥＬＬＳＡ检测证明，由抗独特型抗体（Ａｂ２）刺激产生的抗－抗独特型抗体（Ａｂ３）能与卵巢癌组织抗原ＯＣ１６６－９特异性结合。用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分析证明Ａｂ３与Ａｂ１的抗原结合特性相同。Ａｂ３血清还可通过抗体依赖性细胞介导的细胞介导的细胞毒作用特异性杀伤卵巢癌ＳＫＯＶ３细胞，表明其与     

自身免疫性甲状腺疾病患者血中TSAb及TSBAb的观察

为了解自身免疫性甲状腺疾病患者体内刺激型及阻断型抗体共存情况，检测了４２７例Ｇｒａｖｅｓ病（Ｇｒａｖｅｓ′ｄｉｓｅａｓｅ，ＧＤ）及１０６例桥本甲状腺炎（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ′ｓｔｈｙｒｏｄｉｔｉｓ，ＨＴ）患者血中甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）及甲状腺刺激阻断抗体（ＴＳＢＡｂ），结果：ＧＤ组及ＨＴ组ＴＳＡｂ，ＴＳＢＡｂ的阳性率分别为９１．６％，７．７％及１４．２％，３７．７％，ＧＤ患者ＴＳＡｂ及ＴＳＢＡｂ     

动态监测TRAb的儿童Graves病治疗中的意义

目的动态监测ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）在儿童Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）治疗中的变化，探讨其在指导治疗和预测复发中的价值。方法采用酶联免疫法测定ＧＤ患儿用他巴唑治疗前、治疗６月、１２月、１８月、２４月和复发时ＴＲＡｂ的含量。结果ＧＤ患儿治疗前及复发时ＴＲＡｂ含量及阳性率明显高于治疗后各组（Ｐ＜０．０１）。治疗后各组随着时间推移ＴＲＡｂ含量及阳性率依次降低。停药时复发组ＴＲＡｂ含量及阳性率显著高于未复发组（Ｐ＜０．０１）。结论ＴＲＡｂ与ＧＤ的发生和复发密切相关，停药时ＴＲＡｂ阳性者易于复发。动态监测ＧＤ患儿治疗过程中ＴＲＡｂ的变化对于指导治疗和预测复发具有重要价值。     

FORMATION OF DES－ASP－ANGIOTENSIN Ⅰ IN THE HYPOTHALAMIC EXTRACT OF NORMOTENSIVE AND HYPERTENSIVE RATS

ＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＤＥＳ－ＡＳＰ－ＡＮＧＩＯＴＥＮＳＩＮⅠＩＮＴＨＥＨＹＰＯＴＨＡＬＡＭＩＣＥＸＴＲＡＣＴＯＦ　ＮＯＲＭＯＴＥＮＳＩＶＥ　ＡＮＤ　ＨＹＰＥＲＴＥＮＳＩＶＥＲＡＴＳＱｉｕＸｉｓｈｅｎｇ（邱喜盛）（ＳｈａｎｇｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏ...     

铜绿假单胞菌lasR基因反义肽核酸序列筛选及其抑制生物被膜形成的研究

目的 筛选靶向铜绿假单胞菌lasR基因的反义肽核酸序列,探讨其对铜绿假单胞菌的生物被膜形成能力的影响.方法 针对铜绿假单胞菌lasR基因设计4条反义寡核苷酸序列,利用斑点杂交筛选出与lasR基因结合最佳的反义寡核苷酸序列,以此合成与穿膜肽连接的肽-肽核酸序列.分别用不同浓度的肽-肽核酸导入铜绿假单胞菌生物被膜模式菌PAO1中,测定不同时相点细菌生长光密度[D(600)]值并进行菌落计数,观察肽-肽核酸对其生长的抑制作用.利用光学显微镜和扫描电镜观察生物被膜形成情况.qPCR方法检测lasR mRNA表达.结果 斑点杂交实验结果显示:4条反义寡核苷酸序列中3条有杂交信号产生,其中第1条序列信号最强,以此为基础合成反义肽核酸.不同浓度的肽-肽核酸对铜绿假单胞菌表现出不同程度的体外抗菌活性,且随着浓度增加,抗菌活性增强.结论 有效筛选出高效反义核苷酸序列,经筛选出的靶向铜绿假单胞菌lasR基因的反义肽核酸对铜绿假单胞菌的生长及生物被膜形成能力有明显抑制作用,同时抑制lasR mRNA的表达.     

阿尔茨海默病Aβ人抗体可变区片段基因的克隆和表达

目的 筛选出β淀粉样蛋白40 (Aβ40)的人源抗体单链可变区片段,克隆单链抗体的基因并在原核生物大肠杆菌表达,为阿尔茨海默病的诊断和治疗开辟新的途径。方法 先将Aβ40包被在免疫反应板上,后用来自正常人外周血淋巴细胞的单链抗体文库结合。经过5轮的生物淘金法筛选,从最后一轮噬菌体感染的大肠杆菌TGl中随机挑选55个克隆进行ELISA测试,筛选出Aβ40特异的单链抗体并对其进行基因测序。将人源抗体单链可变区片段基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,转化大肠杆菌BL21表达谷胱甘肽-s-转移酶(GST)融合的单链抗体。结果 ELISA测试表明,55个克隆中有33个克隆能结合Aβ40,Aβ40对10个克隆的竞争抑制率达到50％以上,而其中5个克隆的抗原结合表位在Aβ40的氨基端1-16个氨基酸之间。DNA测序结果发现,Aβ40单链抗体基因由768bp组成,推导得到的氨基酸序列具有典型的抗体可变区结构。将单链抗体基因克隆到原核表达系统中诱导表达,得到相对分子质量为55000的GST融合抗体表达产物。结论利用非免疫途径筛选出阿尔茨海默病发病中起关键神经元毒性作用的Aβ40的人源抗体单链可变区片段,为该抗体的表达和临床应用打下了基础。     

胃癌相关抗原MG7-Ag模拟肽表位的筛选及测序分析

目的　从噬菌体呈现的随机肽库中筛选胃癌单克隆抗体MG7所识别的胃癌相关抗原的短肽模拟表位 ,为进一步研究胃癌相关抗原与单抗结合的结构基序奠定基础。方法　用胃癌单克隆抗体MG7对呈现于噬菌体衣壳蛋白pⅧ上的 2个九肽库分别进行亲和富集和免疫筛选 ;阳性克隆进一步用荧光标记和硝酸纤维素膜斑点印迹法证实其结合活性 ;经随机抽取部分阳性克隆进行DNA序列分析 ,推导出相应噬菌体呈现肽的氨基酸序列 ,通过序列比较分析相对保守的表位信息 ;运用HLA分子结合分析软件预测已测序短肽与HLA分子结合的可能性。结果　经反复多轮筛选和结合活性检测 ,从pⅧ和pⅧ cys 2个噬菌体肽库中分别得到了 12和 30个阳性克隆 ;通过对部分阳性克隆进行测序分析 ,推导相应的随机肽序列和序列比较分析 ,得到具有相对保守性的表位信息如PLX0 2 S、SAVR、XRMX、YARN等。经计算机预测分析 ,发现它们可与HLA多个分子结合。结论　PLX0 2 S、SAVR、XRMX、YARN等有可能为胃癌单克隆抗体MG7所识别的表位基序。     

OT与hCG对兔黄体细胞孕铜生成的影响

本文采用兔离休黄体细胞孵育方法,观察hCG与不同剂量OT和OT与不同剂量hCG对黄体细胞孕酮生成的影响。结果表明:各种不同剂量OT对hCG致孕酮生成有协同效应,而各种不同剂量hCG对OT致孕酮生成具有抑制作用。提示两种实验结果可能是经不同作用机制实现的。     

脉冲式静脉滴注催产素引产初探

改变催产素持续静脉滴注的引产方法,应用脉冲式静脉滴注催产素引产,经88例临床应用,所有引产病人用药后即刻出现宫缩,引产成功81例,成功率92.05％,77例经阴道分娩平均总产程为15.12小时。且对胎儿、新生儿、分娩方式无不良影响,亦不增加产后出血率。     

噬菌体随机肽库筛选抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶单抗2A5的识别表位

目的利用噬菌体随机肽库技术筛选恶性疟原虫乳酸脱氢酶(pfLOH)抗体2A5的识别表位。方法以抗pfLDH的单抗2A5筛选噬菌体随机12肽库,挑取阳性克隆测定DNA序列,推导其氨基酸序列并进行同源性分析。通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体短肽与单抗2A5之间的结合特性。结果从噬菌体随机12肽库中筛选出21株可与2A5单抗特异结合的噬菌体克隆,其中多数克隆呈现核心序列SQK(R)L,该序列与pfLDH的一级序列具有一定同源性。竞争抑制实验显示,带有核心序列的噬菌体克隆可与pfLDH竞争结合单抗2A5。结论 SQK(R)L是pfLDH单抗2A5特异识别的表位。     

OT与cAMP对兔离体孵育黄体细胞孕酮生成的影响

本实验采用离体孵育黄体细胞方法，观察了ｃＡＭＰ，ＯＴ加ｃＡＭＰ对孕酮生成的影响。结果显示，三种不同浓度ｃＡＭＰ均致孕酮生成，且呈剂量反应关系。     

人工合成的人精子抗原多肽抗体与人精子结合的生物学特性研究

目的　对人工合成的精子多肽 ( 3 5肽 )抗原抗体与人精子的结合情况进行评价。方法　获得抗 3 5肽抗体后 ,用荧光素直接进行标记 ,通过流式细胞仪检测抗体与精子的结合率 ,并在荧光显微镜下观察抗体与人精子的结合部位。结果　人精子抗 3 5肽抗体阳性率为 97 7% ,荧光显微镜下见精子头颈部着色 ,部分见赤道板及头部顶端着色增强。结论　 3 5肽在人精子头表面有高度表达 ,抗 3 5肽抗体可与人精子表面高度特异结合。     

中脑导水管周围灰质内催产素对大鼠痛阈影响的实验研究

目的：探讨中脑导水管周围灰质内催产素与内源性强啡肽在痛觉调制中的相互关系。方法：以钾离子透入法引起大甩尾反应的电流强度为痛行为反应的指标，观察向导水管周围灰质内注入催产素和抗强啡肽A1－13血清，对动物痛阈的影响。结果：导水管周围灰质内注入催产素后，大鼠痛阈明显升高；而注入抗强啡肽血清后，对催产素的镇痛效应无显著影响，结论：导水管周围灰质内催产素在痛觉调制中发挥着重要的作用，且其作用不依赖于导水管周围灰质内的内源性强啡肽。     

缩宫素鼻用液（滴鼻剂）升高乳压、促进子宫平滑肌收缩的实验研究

目的：通过动物实验观察缩宫素滴鼻剂的药理效应。方法：选用大鼠离体子宫、哺乳大鼠及家兔,分别观察不同剂量的缩宫素滴鼻剂对子宫平滑肌及乳压的影响。结果：大鼠子宫平滑肌收缩幅度（张力）由０．２７ｃｍ增加到０．４９～１．６３ｃｍ,收缩频率由６．３～７．２次／分升到１２．２０～２２．５０次／分;大鼠乳压由０．３９～０．４６ｋｐａ提高到０．５６～１．２１ｋｐａ,家兔乳压由０．７６ｋｐａ升到１．２７～２．０６ｋｐａ,与对照组比较均具有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。结论：缩宫滴鼻剂 有明显促进子宫平滑肌收缩,升高乳压,促进乳汁的分泌作用。