Toll样受体2/4在人牙龈上皮细胞的表达研究

目的:探讨Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)在人牙龈上皮细胞(human gingival epithelial cells,HGECs)的表达情况,以及上述受体在脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激下表达水平的改变?方法:采用逆转录PCR技术检测TLR2?TLR4 在HGECs的基因表达,采用real-time PCR技术和流式细胞技术检测1 μg/ml牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)?LPS或1 μg/ml大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) LPS刺激后,该细胞TLR2?TLR4表达水平的改变?结果:来自不同个体的HGECs均表达TLR2,TLR4 mRNA?1 μg/ml P.gingivalis LPS刺激后,TLR2基因和蛋白表达水平均明显增高(P < 0.05);1 μg/ml E.coli LPS刺激后,TLR4基因和蛋白表达水平明显增高(P < 0.05)?结论:TLR2?TLR4在HGECs存在稳定表达,并能被LPS的刺激活化,提示上述两种受体可能参与了牙周组织的炎症和免疫反应?     

TLR2和TLR4在人颈动脉硬化斑块中的表达

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)在人颈动脉硬化斑块中的表达及其与斑块形成的关系.方法 根据术后组织病理学报告选择性收集36例新鲜颈动脉硬化斑块,其中软斑组12例,硬斑组12例,混合斑组12例,以及12例正常脾动脉组织作为对照组,采用RT-PCR检测标本组织中TLR2及TLR4 mRNA的表达水平;应用免疫组化检测TLR2和TLR4蛋白在标本组织中的表达.比较不同性质颈动脉硬化斑块组织TLR2和TLR4的mRNA及蛋白表达水平.结果 RT-PCR结果显示颈动脉硬化斑块组织中TLR2和TLR4相对水平分别为(0.926±0.047)和(1.040±0.056).显著高于脾动脉组织的(0.646±0.033)和(0.691±0.031)(P＜0.05);免疫组化结果显示TLR2和TLR4在颈动脉硬化斑块中相对水平分别为(135.295±17.787)和(130.368±14.969),显著高于脾动脉组织的(82.396±6.668)和(98.898±9.089)(P＜0.05);且TLR2和TLR4mRNA及蛋白表达上调水平相关,TLR2和TLR4mRNA及蛋白表达水平与斑块性质有关,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TLR2及TLR4在颈动脉硬化斑块组织中高表达;TLRs信号通路可能促进了颈动脉硬化程度的进展.     

烧伤患者外周血单个核细胞TLR2和TLR4表达的变化

目的观察烧伤患者外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4表达的变化。方法选取深II度以上烧伤30%~50%TBSA烧伤患者23例,伤后48 h取外周血20 mL,同时抽取健康献血者(设为对照组)12例,外周血20 mL。常规方法分离出单个核细胞,用异硫氢酸荧光素(FITC)标记的小鼠抗人TLR2抗体和藻红蛋白(PE)标记的小鼠抗人TLR4抗体对外周血单个核细胞进行免疫染色,流式细胞仪(FCM)测定FITC、PE阳性细胞率及其平均荧光强度(MFI)。结果烧伤后48 h,患者外周血单个核细胞TLR2-FITC阳性细胞数量上升,为(57.57±18.56)%,与对照组的(26.32±10.31)%相比,P<0.05;细胞表面TLR2-FITC荧光强度下降,TLR2-FITC MFI为58.5±18.76,低于对照组(69.79±23.42);TLR4-PE阳性率为(29.84±13.28)%,与对照组的(12.75±5.18)%相比,P<0.05;TLR4-PE MFI减弱,与对照组相比,P<0.05。结论烧伤患者外周血单个核细胞TLR2/4阳性数量均升高,而TLR2/4表达强度降低。     

腹膜透析液对腹膜间皮细胞TLR2和TLR4表达的影响

目的：观察不同浓度葡萄糖（dextrose）腹膜透析液、艾考糊精（icodextrin）腹膜透析液对人腹膜间皮细胞 Toll 样受体2（TLR2）和 TLR4表达的影响。方法体外培养人腹膜间皮细胞株第5～10代（HMrSV5,DMEM ／F12培养基含10％胎牛血清）用于实验研究。 M TT 检测细胞活力,实验分为5组：阴性对照组、1．50％ dextrose 组、2．50％ dextrose 组、4．25％ dextrose 组、7．5％ icodextrin 组,应用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测 TLR2和 TLR4的表达水平。结果不同浓度 dextrose 腹膜透析液作用24 h 对腹膜间皮细胞 TLR2和 TLR4的表达无明显影响。作用48 h ,1．50％ dextrose 组、2．50％ dextrose 组、4．25％ dex-trose 组 TLR2分别降低（5．5±2．8）％、（31．4±7．5）％、（54．9±1．9）％,TLR4分别降低（32．9±17．6）％、（47．7±13．5）％、（66．4±13．5）％;作用72 h ,1．50％ dextrose 组、2．50％ dextrose 组、4．25％ dextrose 组 TLR2表达分别降低（29．4±14．7）％、（38．9±9．9）％、（63．5±16．5）％,TLR4表达分别降低（59．5±16．8）％、（63．1±9．5）％、（79．2±14．0）％;7．5％ icodextrin 组TLR2和 TLR4表达与阴性对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 dextrose 透析液下调 HM rSV5 TLR2和 TLR4的表达;icodextrin 透析液对 TLR2和 TLR4的表达无显著影响。     

外周血TLR2及TLR4表达与血管性痴呆的相关性

目的探讨中国汉族人群Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)外周血表达水平及其与血管性痴呆(VaD)的相互关系。方法采用病例-对照研究的方法,选择性别、年龄等相关因素相匹配的中国汉族VaD病人和健康人(对照组)各200例,应用聚合酶链反应(PCR)技术和流式细胞仪定量检测外周血单核细胞表面TLR2和TLR4蛋白和mRNA的表达水平。结果 VaD组TLR2和TLR4的mRNA与蛋白表达水平均明显高于对照组(t=12.30~63.50,P<0.05)。多元线性回归分析显示,两组TLR2蛋白表达水平及TLR4的mRNA和蛋白表达水平与VaD之间存在显著相关(P<0.05)。结论外周血中TLR2和TLR4的表达水平与VaD的发病之间存在相关关系。     

TLR4 mAb对人正常肝内胆管上皮细胞LPS-TLR4-NF-κB通路的影响

目的对脂多糖( LPS)及Toll样受体4单克隆抗体( TLR4 mAb)作用于体外培养的人肝内胆管细胞( HiBEC)后其TLR4 mRNA和核转录因子-κB( NF-κB) mRNA的表达情况进行了研究。方法体外培养HiBEC,采用 RT-PCR 法检测经LPS和不同浓度的TLR4 mAb作用后,HiBEC细胞株中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达情况。结果 LPS可以上调HiBEC中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达( P<0．05);而 LPS 作用于 TLR4 mAb 处理后的 HiBEC 中其TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达下调;高质量浓度TLR4 mAb使NF-κB mRNA的表达下调更明显( P<0．05)。结论LPS 能上调HiBEC中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达;而 TLR4 mAb 则能拮抗 LPS 对 HiBEC 的刺激作用,下调TLR4 mRNA和NF-κB mRNA 的表达。     

脂多糖促进人近端肾小管上皮细胞TLR4的表达

目的:研究人近端肾小管上皮细胞(HKC)在脂多糖(LPS)刺激下Toll样受体4(TLR4)的表达及作用。方法:实验细胞分两组,LPS刺激组(50mg/LLPS加入体外培养的HKC)和正常对照组;应用免疫荧光染色在激光共聚焦显微镜下观察LPS刺激24h后TLR4在HKC中的分布及表达强弱;半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测各组TLR4及内参照β-actin在mRNA水平和蛋白水平的表达量;Annexin V-FITC结合流式细胞仪检测各组细胞的早期凋亡率情况。结果:LPS刺激组TLR4的免疫荧光强度显著高于正常对照组,TLR4主要分布于HKC的胞膜及胞质区;刺激组TLR4 mRNA表达高于正常对照组(1.051±0.082比0.38±0.036),差异有显著性(P<0.01);刺激组TLR4蛋白表达高于正常对照组(0.371±0.033比0.105±0.008),差异有显著性(P<0.01);LPS刺激组细胞的早期凋亡率(41.29%)显著高于正常对照组(2.36%)。结论:LPS能刺激HKC高表达TLR4,且促进HKC的早期凋亡,TLR4可能在LPS诱导的HKC凋亡中发挥一定的作用。     

TLR2、TLR3和TLR4的表达与变应性鼻炎

Toll样受体是近年发现的一组天然受体,其不仅能识别病原微生物和激活天然免疫,而且调节获得性免疫和诱导免疫耐受,与变应性鼻炎密切相关。宿主通过Toll样受体识别大量病原体相关结构,利用细胞信号转导途径激活机体免疫细胞,一方面参与早期的宿主防御,在天然免疫应答中发挥重要作用;另一方面通过分泌细胞因子、趋化因子、黏附分子等参与炎性反应,最终激活获得性免疫系统。     

系统性红斑狼疮病人外周血髓样树突状细胞TLR2和TLR4表达情况及其临床意义研究

目的：检测系统性红斑狼疮(SLE)病人外周血中髓样树突状细胞(mDC)表面Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)的表达情况及血清白细胞介素(IL)-10、IL-17A表达水平,探讨其在SLE发病机制中的作用及临床意义。方法：纳入SLE病人54例作为研究对象,根据SLEDAI-2000将SLE病人分为稳定组和活动组,同时选取本院30例健康志愿者作为对照组,应用流式细胞术检测SLE病人及健康志愿者外周血中mDC表面TLR2、TLR4的表达情况,并用ELISA法检测SLE病人及健康志愿者血清中IL-10、IL-17A的表达水平。结果：活动组SLE病人mDC-TLR2表达率高于稳定组、对照组(P<0.01),mDC-TLR4表达率高于对照组(P<0.01)。SLE病人血清中IL-10、IL-17A表达水平均高于对照组(P<0.01)。mDC-TLR2表达与抗Sm抗体呈正相关(P<0.05),与血清IgG、24 h尿蛋白定量呈负相关(P<0.05);mDC-TLR4表达与血小板计数呈正相关(P<0.05)。结论：SLE活动组病人mDC-TL...     

Hp感染性胃癌组织TLR2、TLR4表达及其临床意义

<正>我国是胃癌的高发国家之一,年新发病例约40万例,2009年数据统计显示,胃癌年新发病例约占全部癌症的7.8%,约99万例^[1]。既往研究证实,胃黏膜长期慢性炎症刺激是导致胃癌发生发展的独立危险因素之一^[2-3]。幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)可介导CagA基因及对上皮细胞保护层具穿透能力的HtrA的蛋白酶等毒性因子表达,参与激活胃黏膜组织免疫及炎症反应引发黏膜受损,甚至萎缩,     

尿路感染者病原体检测及耐药性分析

目的探讨尿路感染的病原菌分布及细菌对抗菌药物耐药情况,为临床诊断和治疗泌尿生殖系统感染疾病提供可靠的依据,指导临床合理用药。方法对医院2006年1月至2007年6月住院及门诊尿路感染患者尿培养分离出的391株病原菌进行鉴定和药敏分析。结果391株尿路感染的菌株中以革兰阴性菌为主,尤以大肠埃希菌最为常见,其次为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌;在革兰阳性菌中以肠球菌属为主;真菌感染的数量明显增加;细菌对各种抗菌药物有不同程度的耐药率,表现为多重耐药。结论尿路感染常见病原菌耐药严重,临床应根据药敏试验结果有针对性筛选敏感药物进行治疗。     

尿路感染病原菌分布及耐药性分析

目的 探讨尿路感染病原菌分布及其耐药特征,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法 应用TDR微生物分析系统,结合K-B法药敏试验对尿培养分离的611株细菌进行鉴定和药物敏感性测定,以SPSS软件进行统计分析.结果 611株病原菌中,革兰阴性杆菌321株,占52.5%;革兰阳性球菌260株,占42.6%,其它棒状杆菌及真菌等30株,占4.9%.在所有分离菌中,大肠埃希菌检出率最高（209株,34.2%）,其余依次为粪肠球菌（107株,17.5%）、凝固酶阴性葡萄球菌（70株,11.5%）、肺炎克雷伯菌（39株,6.4%）、屎肠球菌（26株,4.3%）等.革兰阴性杆菌对美洛培南敏感性最高,耐药率在0%～5.9%之间,而对复方新诺明和氨苄西林耐药率分别达51.3%～76.9%和46.7%～83.6%.革兰阳性球菌中,葡萄球菌对万古霉素均敏感,但对苯唑西林耐药率已达50%;粪肠球菌对6种抗菌药物的耐药率高达79.4%～94.4%;表皮葡萄球菌对4种抗菌药物的耐药率高达74.0%～94.0%;呋喃妥因对革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌均具有较强抗菌活性,耐药率在0%～20.5%之间.结论 大肠埃希菌、粪肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌是尿路感染的主要病原菌;不同菌种对不同抗菌药物耐药率差别较大;临床医师应结合当地尿路感染病原菌的分布特征及药敏试验结果合理选用抗菌药物.     

尿路菌群在女性急性单纯性和反复发作性下尿路感染特征

目的：观察尿路菌群在急性单纯性和反复发作性下尿路感染的不同特征,以探索反复发作性尿路感染（recurrent urinary tract infection,rUTI）诊治新方向。方法：纳入2020年5月至2021年9月重庆医科大学附属第一医院和奉节县人民医院的单纯下尿路感染女性患者53例,分为急性组27例和反复组26例,收集尿液标本进行尿培养并采用16s核糖体核糖核酸（16 sribosomal ribonucleic acid,16srRNA）二代测序检测尿液中菌群。结果：(1)2组尿路菌群在菌门中,俭菌超门急性组平均值0.004 9±0.0026,反复组平均值0.002 8±0.001 8,浮霉菌门急性组平均值0.003 5±0.001 9,反复组平均值0.002 3±0.002 0,差异有统计学意义（t=3.444、2.160,P=0.001、0.035）;在菌属中,急性组相对丰度平均值较高的菌属中,苍白杆菌属急性组平均值0.026 9±0.010 9,反复组平均值0.017 1±0.010 3,差异有统计学意义（t=3.372,P=0.001）;(2)急性组的α多样性分值中位...     

泌尿外科导尿管与非导尿管相关性尿路感染病原菌分布及耐药性比较

目的 探讨泌尿外科导尿管与非导尿管相关性尿路感染病原菌及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 选取2013 年１月-2015 年10 月该院泌尿外科收治的尿路感染患者,分为导尿管组与非导尿管组。采集合格尿标本进行细菌培养及药物敏感实验,进行统计学分析。结果 导尿管组与非导尿管组病原学分布差异有统计学意义（P <0.05）。导尿管组革兰阳性菌以葡萄球菌属细菌较多,金黄色葡匋球菌为主,而非导尿管组革兰阳性菌以肠球菌属细菌为主;导尿管组革兰阴性菌以非发酵菌较多,非导尿管组以肠杆菌科细菌为主。导尿管组检出肠杆菌科细菌耐药率较非导尿管组高;导尿管组检出鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌及肠球菌耐药率高于非导尿管组。结论 导尿管与非导尿管相关性尿路感染的病原菌分布存在差异,导尿管相关性尿路感染病原菌耐药率高于非留置导尿管患者。     

2014-2019年某医院尿路感染病原菌分布及耐药情况

目的 分析某医院2014-2019年尿培养产生的病原菌分布及耐药情况,为临床正确应用抗菌药物提供依据。方法 收集2014-2019年尿培养发现的病原菌资料,对其分布、药敏结果进行分析。结果 共分离出病原菌2 363株,革兰氏阴性菌为1 480株(62.6%),革兰氏阳性菌为502株(21.2%),真菌381株(16.1%);大肠埃希菌检出率最高,占所有检出病原菌总数的37.7%,对多数头孢类药物、喹诺酮类药物耐药率在40%以上,近6年无明显变化;对酶抑制剂、碳青霉烯类的耐药率近6年无明显增高,在6%以下,仍处于较低水平。肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌中ESBL菌株分别为49%、50%,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌对亚胺培南的耐药率分别为0.8%、1.4%、2.4%;铜绿假单胞菌对亚胺培南、氨曲南的耐药率分别为11%、14%。屎肠球菌对多种抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌,均对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素有较高的敏感性。表皮葡萄球菌对苯唑西林、青霉素的耐药率分别为60%、86.7%;对万古霉素敏感率为100%。真菌对伊曲康唑的耐药率最高为17.6%,未出现对5-氟胞嘧啶耐药真菌。结论 本研究尿培养中以革兰氏阴性菌为主,主要为大肠埃希菌,临床上可将头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦作为初始经验用药。     

Toll-like receptor 4 and human defensin 5 in normal endocervical epithelial cells

BACKGROUND: Toll like receptors (TLRs) and human defensins (HD) have recently been identified as fundamental components of the innate immune responses to bacterial pathogens. We used in vitro model of human primary endocervical epithelial cells (HPEC) to investigate their role in the immune defense of the endocervix. METHODS: TLR4 expression in HPEC and endocervix were investigated by Immunofluorescence (IF). HPEC were treated with lipopolysaccharide (LPS) for 0, 24 and 48 hours, and at each time point, the supernatant was harvested and analyzed by ELISA for secretion of HD5, IL-6 and TNF-α, and the cell proteins were analyzed for TLR4 and HD5 by western blot and/or IF detection. We also compared HD5 expression pattern between the HeLa cell line and HPEC. Finally, the data was analysed with SPSS10.0. RESULTS: TLR4 expression on the surface of endocervix and HPEC were testified. LPS could upregulate the secretion of HD5, IL-6 and TNF-αin a time dependent manner (after 24hours:P<0.05;after 48hours:P<0.01 compared to unstimulated cells),while intracellular HD-5 decreased over time. TLR4 protein in HPEC increased over a 24 hour time period, and thereafter decreased (P<0.01, comparing to unstimulated). HD5 expression patterns in HPEC are different from HeLa. CONCLUSION: TLR4 in HPEC is constitutively expressed and functional. Our results show that the HPEC may take part in the mucosal immune response to LPS and play an important role. With LPS stimulation, HPEC can secret HD5 to the lumen. HPEC may be better model for immunological study.     

维生素 D 受体基因启动子甲基 化异常与婴儿尿路感染相关性 研究

目的研究维生素D受体（VDR）基因启动子甲基化异常与婴儿尿路感染的关系。方法选择急性尿路感染患儿32例（尿路感染组）和同期健康体检婴儿30例（健康对照组）。采用荧光定量PCR法检测VDR、DNA甲基化转移酶（DNMTs）mRNA表达水平,重亚硫酸氢钠测序技术检测VDR基因启动子的甲基化水平。结果尿路感染组患儿VDRmRNA表达水平高于健康对照组婴儿,DNMT1mRNA表达水平低于健康对照组婴儿,两组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。两组DNMT3a、DNMT3bmRNA表达水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。尿路感染组患儿VDR基因启动子甲基化水平显著低于健康对照组婴儿,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论尿路感染患儿VDRmRNA表达水平升高,VDR基因启动子的甲基化水平降低,VDR基因甲基化异常与婴儿尿路感染相关。     

老年糖尿病患者合并尿路感染的病原菌分布及耐药性分析

目的分析本院老年糖尿病患者合并尿路感染病原菌分布及耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供科学依据。方法分析本院2008年1月～2010年12月266例老年糖尿病合并尿路感染患者尿培养分离出302株病原菌及其耐药性。结果老年糖尿病合并尿路感染的菌株以革兰阴性杆菌为主,199株（65．9％）,其次是革兰阳性球菌,87株（28．8％）和真菌,16株（5．3％）,耐药菌株比率呈上升趋势。结论老年糖尿病患者合并尿路感染病原菌以大肠埃希菌为主,其次为凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、肠球菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、真菌,耐药率呈上升趋势,多重耐药现象普遍存在,对老年糖尿病合并尿路感染的病原菌及其耐药性监测,可为老年糖尿病患者尿路感染的诊治提供依据。     

慢性肾衰竭合并尿路感染的病原分布及耐药性浅析

目的:分析研究慢性肾衰竭合并尿路感染的发病率、病原菌分布、耐药性及其中多重耐药菌检出情况,为临床合理选择抗生素提供理论依据.方法:统计我院肾内科2010年1月~2016年6月慢性肾衰竭患者1052例,分析其中208例合并尿路感染者清洁中段尿尿培养结果及药敏情况.结果:1052例慢性肾衰竭患者中有208例合并尿路感染,感染率为19.77%.208例尿路感染患者的尿液样本中有81例培养阳性,阳性率为38.9%;81株病原菌中包括革兰氏阴性菌69株,革兰氏阳性菌8株,真菌4株.大肠埃希菌对哌拉西林耐药率最高为82.93%,对头孢他啶/克拉维酸钾、亚胺培南的耐药率最低为7.32%;肺炎克雷伯菌对哌拉西林耐药率最高为77.78%;葡萄球菌属对青霉素、苯唑西林等耐药率最高为83.3%;肠球菌属对头孢曲松、庆大霉素等耐药率最高为100%;77株细菌中共检出多重耐药菌25株,其中产超广谱 β-内酰胺酶肠杆菌科细菌(ESBLs)的检出率为32.26%,耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的检出率为8.06%.结论:慢性肾衰竭患者合并尿路感染的感染率较高,常见病原菌主要为革兰氏阴性菌,且以大肠埃希菌居多,不同病原菌对各类抗菌药物的耐药性不同,加强病原学检测及细菌耐药性监测、合理规范使用抗生素可有效控制尿路感染并减少耐药菌株的产生.