人,大鼠烧伤皮肤提取物抗原特性的研究

为了从抗原分子水平上分析与研究人与大鼠烧伤皮肤提取物ＨＢＳＥ与ＨＮＳＥ，以及人与大鼠新鲜皮提取物（ＲＢＳＥ与ＲＮＳＥ）之间的异同，本实验采用双相免疫扩散，单相免疫扩散，火箭免疫电泳，抗体ＩｇＧ的纯化与ＨＲＰ标记，以及ＥＬＩＳＡ等方法的免疫化学分析，结果表明：ＨＢＳＥ和ＲＢＳＥ的抗原性强于ＨＮＳＥ与ＲＮＳＥ的抗原性及抗ＨＢＳＥ和抗ＲＢＳＥ的特异性，与ＨＮＳＥ和ＲＮＳＥ仅有很弱的交叉反应，因而提示，Ｈ     

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达

目的;研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ ＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃ ＨＴａ,转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞,３７℃振荡培养４ｈ使发生转座,于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９细胞,将转染上清再次感染ｓｆ细胞,以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分析,检测重组蛋白。结果：序     

Advances in the study on rheological behavior of leukocyte during severe shock.

ＡＤＶＡＮＣＥＳＩＮＴＨＥＳＴＵＤＹＯＮＲＨＥＯＬＯＧＩＣＡＬＢＥＨＡＶＩＯＲＯＦＬＥＵＫＯＣＹＴＥＤＵＲＩＮＧＳＥＶＥＲＥＳＨＯＣＫＺｈａｏＫｅｓｅｎ赵克森ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃ...     

重组汉坦病毒核壳蛋白的制备及其单克隆抗体的研制

将ＰＣＲ扩增的ＨＴＶ７６－１１８ＲＮＡ小片段的ｃＤＮＡ克隆插入到载体ｐＤＳ５６／ＲＢＳⅡ－（Ｏ）－６Ｈｉｓ中,通过ＩＰＴＧ诱导表达以及镍螯合层析纯化重组ＮＰ,经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫转印和ＥＬＩＳＡ方法分析其蛋白特性,证实该重组ＮＰ与毒粒ＮＰ相同,均为４９．６ｋｕ,能与肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者血清产生特异性反应。以此重组ＮＰ作为抗原制备抗ＮＰ单克隆抗体,获得两株持续稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用抗ＮＰＭｃＡｂ建立检测ＩｇＭ抗体的ＥＬＩＳＡ捕获法。证实纯化重组ＮＰ作为抗原,避免了组织培养病毒的感染性和非特异性以及难以标准化的缺点。所建立的ＥＬＩＳＡ捕获法检测ＨＦＲＳ患者血清中ＩｇＭ抗体的方法特异性强、敏感性高,可作为ＨＦＲＳ的早期诊断试剂     

EXPERIMENTAL WORK AND RESEARCH

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＷＯＲＫＡＮＤＲＥＳＥＡＲＣＨＥｆｆｅｃｔｓｏｆＲｈｅｕｍｏｆｆｉｃｉｎａｌｅｏｎｔｈｅＲｅｎａｌＨｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙａｎｄＨｙｐｅｒｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅＳｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ－ＩｎｄｕｃｅｄＤｉａｂｅｔｉｃ...     

重组汉坦病毒核壳蛋白的制备及其单克隆抗体的研制

将ＰＣＲ扩增的ＨＴＶ７６－１１８ＲＮＡ小片段的ｃＤＮＡ克隆插入到ｐＤＳ ５６／ＲＢＳⅡ－（Ｏ）－６Ｈｉｓ中,通过ＩＰＴＧ诱导表达以及镍螯合层析纯化重组ＮＰ,经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,免疫转印和ＥＬＩＳＡ方法分析其蛋白特征,证实该重组ＮＰ与毒粒ＮＰ相同,均为４９．６ｋｕ,能与肾综合征血热（ＨＦＲＳ）患者血清产生特异性反应,以此重组ＮＰ作为抗原制备抗ＮＰ单克隆抗体,获得两株持续稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细     

p53基因失活与大肠腺癌病理改变的关系

探讨Ｐ５３基因失活与大肠腺癌Ｄｕｋｅｓ’分期、转移等病理改变的关系,方法Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＦＬＰ分析大肠腺癌组织中１７ｐＬＯＨ的改变;ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测大肠腺癌Ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变;两种单抗（ＰＡｂ２４０,ＰＡｂ１８０１）ＬＳＡＢ免疫组化方法检测大肠腺癌Ｐ５３蛋白表达,ＳＰＳＳ下Ｆｉｓｈｅｒ’ｓｅｘａｃｔｔｅｓｔ处理结果。结果１０９例大肠腺癌中,１７ＰＬＯＨ与Ｄｕｋｅｓ’ｓＤ期     

大鼠肺微血管内皮细胞的G蛋白亚型鉴定

本实验拟在体外培养大鼠肺微血管内皮细胞 (ＲＰＭＶＥＣｓ)的基础上 ,用免疫细胞化学Ｓ Ｐ法和免疫荧光细胞化学间接法检测ＲＰＭＶＥＣｓ膜Ｇ蛋白亚型。1　材料和方法1.1　材料　　ＤＭＥＭ培养干粉 (美国ＧＩＢＩＣＯ公司 ) ;荧光 (ＦＩＴＣ)结合的羊抗兔抗体、兔抗大鼠ＩｇＧ抗体免疫血清 (北京中山公司 ) ;Ｇｓα、Ｇｉα和Ｇｑα兔抗大鼠抗体 (ＩｇＧ) (ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ .Ｉｎｃ)。1.2　检测ＲＰＭＶＥＣｓＧ蛋白亚型方法1.2 .1　免疫细胞化学Ｓ Ｐ法　　ＲＰＭＶＥＣｓ经 4%多聚甲醛固定 ,3 %Ｈ2 Ｏ2 …     

Modified Buyang Huanwu Decoction(补阳还五汤)inTreating 65 Patients of Renal Syndrome Hemorrhagic Fever

ＦｒｏｍＭａｙ 1 996ｔｏＡｕｇｕｓｔ 1 997，ｗｅｔｒｅａｔｅｄ 65 ｐａｔｉｅｎｔｓｓｕｆｆｅｒｅｄｆｒｏｍｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｆｅｖｅｒｗｉｔｈｒｅｎａｌｓｙｎｄｒｏｍｅ（ＨＦＲＳ）ｗｉｔｈｍｏｄｉ ｆｉｅｄＢｕｙａｎｇＨｕａｎｗｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎ（补阳还五汤，ＢＹＨＷＤ）ｃａｐｓｕｌｅⅠａｎｄⅡ，ａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈ 3 0 ｐａｔｉｅｎｔｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｒｏｕｔｉｎｅｄｒｕｇｓａｓｃｏｎｔｒｏｌ．ＭＥＴＨＯＤＳＣｌｉｎｉｃａｌＤａｔａ　　Ｎｉｎｅｔｙ ｆｉｖｅｐａｔｉｅｎｔｓ…     

Uterine rupture in Zanzibar.

ＵＴＥＲＩＮＥＲＵＰＴＵＲＥＩＮＺＡＮＺＩＢＡＲＹａｎｇＷｅｉｗｅｎ杨伟文ＦｉｒｓｔＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｓｕｚｈｏｕ２１５００６（ＹａｎｇＷＷ，ａｍｅｍｂｅｒｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＴｅ...     

多发性骨髓瘤细胞体内生长特性的实验研究

目的:为建立人多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)荷瘤SCID小鼠模型,研究人多发性骨髓瘤在SCID小鼠体内生长的特性。方法:体外培养IL-6依赖的人MM细胞株XG7,接种于SCID小鼠皮下;观察肿瘤生长状态,通过流式细胞技术监测肿瘤细胞表型。结果:成瘤后的肿瘤细胞CD28、CD138等分子的表达与接种前没有明显变化。结论:通过研究人MM细胞的体内生长特性可为MM的治疗奠定良好的基础。     

人精子膜抗原的提取及分析

目的:用两种酶裂解法提取精子膜抗原并对其进行蛋白浓度测定和成分分析。方法:分别用尿素裂解液和表面活性剂Triton X-100﹑脱氧胆酸钠(DOC)的TDOC裂解液裂解液提取精子膜抗原,借助BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,并通过SDS-PAGE法比较分析蛋白成分。结果:两种方法提取的精子膜抗原经SDS-PAGE,考马斯亮蓝染色后均有条带显示,TDOC裂解液提取的样本中显示仅有一条蛋白带,分子质量集中在100ku左右,尿素裂解液提取的样本中有多条蛋白条带,分子质量集中在130～35ku。结论:尿素裂解液提取法提取精子膜抗原的效果优于TDOC裂解液提取法,为抗精子相关抗体的研究提供了条件。     

大鼠脑组织蛋白质双向电泳技术的建立

目的：建立大鼠脑组织蛋白质双向电泳技术。方法：利用不同体积的裂解液提取大鼠脑组织中的蛋白质,并通过不同的蛋白质上样量（1mg,2mg,3mg）,进行双向电泳,考马斯亮蓝染色,图谱分析。结果：在等电点3～10,分子量6．5～200ku范围内分离得到蛋白质斑点为,1mg蛋白质上样量为546个蛋白质斑点,2mg为780个,3mg为805个斑点。2mg蛋白质上样量的双向电泳图谱更清晰,分离更好。结论：成功建立了大鼠脑组织蛋白质的双向电泳技术。     

河南省肠出血性大肠杆菌(EHEC O157:H7)感染之流行与基因特征研究

目的 :了解河南省肠出血性大肠杆菌 (enterohemorrhagicescherichiacoli,EHEC)的流行状况与流行菌株的志贺毒素基因型。方法 :采集河南省 14个监测点上腹泻病人、家畜家禽粪便和肉食品等标本分离E HEC菌株。应用分子生物学技术检测EHEC菌株的rfbO157、rfbO111、hlyA、eaeA、stx2 和stx1等毒力基因和志贺毒素基因亚型 ,应用细胞培养技术检测菌株Vero细胞毒性。结果 :从腹泻病人、家畜家禽、肉食品、苍蝇、蜣螂中均分离出EHECO15 7:H7菌株 ,波尔山羊的带菌率最高达到 2 9.8%。 13 8株携带志贺毒素基因的菌株中 ,EHECO15 7:H7计 95株 ,占产毒菌株的 68.8% ;EHEC非O15 7菌株 43株 ,占 3 1.2 %。菌株可分为 5种毒素基因型 ,EHECO15 7:H 7仅含stx2 基因 ,以stx2 vha亚型为主 ,不含有stx1基因。EHEC非O15 7血清型毒素基因型较复杂。携带stx1和 /或stx2 的菌株均具有Vero细胞毒性。结论 :河南省腹泻病人和家畜家禽中存在EHEC感染。EHECO15 7:H7血清型是优势菌型 ,羊是主要宿主动物。目前河南省EHECO15 7:H7菌株毒素基因型为stx2 并以stx2 vha亚型为主。     

重组日本血吸虫26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断

目的将日本血吸虫(中国大陆株)26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶(26 ku SjGST)基因克隆入pET28a(+)并诱导表达26 ku rSjGST蛋白,纯化并用于急性血吸虫病免疫诊断.方法构建重组质粒pET28a-SjGST,转化到E.coli BL21,经IPTG诱导表达并进行SDS变性蛋白质电泳,以小鼠抗GST单克隆抗体为一抗,进行Western-blot分析.用His·BandPurification Kit亲和层析纯化重组蛋白,以此重组蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性血吸虫患者血清和非流行区正常人血清. 结果成功地构建了重组质粒pET28a-SjGST,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达.Western blot分析表明,该重组蛋白能被小鼠抗GST单克隆抗体识别.ELISA结果表明,rSj GST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为92.3%.结论 rSj GST得到表达和纯化,该重组蛋白用于急性血吸虫患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,为进一步探讨其在血吸虫病诊断中的应用奠定了基础.     

人自体表皮细胞培养及移植研究

目的为提供烧伤、创伤大面积皮肤缺损修复时所需的表皮细胞.方法用少量的自体表皮细胞体外培养后移植于创面.结果移植后表皮细胞成活增殖,皮肤表皮获得重建.结论为皮源严重不足的烧伤、创伤患者的皮肤修复提供了一种方法.     

人内皮抑素基因转染原代成人黑色素瘤细胞

目的:研究人内皮抑素（human endostatin,hEndo）基因转染的原代黑色素瘤细胞的体外和体内生物学特性。方法:先构建重组人内皮抑素的真核表达载体pcDNA3.1-hEndo,将人内皮抑素基因导入原代成人黑色素瘤细胞,检测转基因细胞hEndo蛋白的表达、分泌和抑制细胞增殖活性,并验证转基因细胞在体外和裸鼠体内的生长特性。结果:载体pcDNA3.1-hEndo经酶切后获得5.4kb和624bp条带,电转后G418筛选获得克隆;RT-PCR检测到转染细胞表达hEndo mRNA,Western blot检测到转染细胞分泌hEndo蛋白,MTT表明转基因细胞上清可抑制细胞增殖;裸鼠体内生长实验显示转基因黑色素瘤生长速度明显低于对照组（P<0.05）,肿瘤组织RT-PCR示hEndo基因稳定表达。结论:转hEndo基因原代黑色素瘤细胞可有效、稳定地表达有生物学活性的hEndo,hEndo能抑制瘤细胞在动物体内的生长速度。     

康威达消毒液杀菌效果及安全性评价

试验表明,康威达消毒液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭率均达100％;对枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率达99.89％。小鼠急性经口毒性LD_(50),雌雄两性均大于5g/kg体重,根据消毒剂急性毒性分级标准,属实际无毒类。豚鼠一次皮肤刺激试验,平均刺激指数为0,根据急性皮肤刺激强度评价标准,该样品属无刺激性。小鼠微核试验为阴性。     

舰艇用非金属材料燃烧时烟雾成分的定性分析

目的：定性检测舰艇发生火灾时非金属材料燃烧或高温热解产生的烟雾成分，为救治中毒人员和采取防护措施提供依据。方法：将7种常用非金属材料在燃烧试验箱中燃烧，用检测仪器和GC-MS进行定性分析。结果：烟雾中含有十多种无机气体和数百种有机气体，其中多数组分具有很高毒性。结论：烟雾中的有毒气体组分可以导致人体吸入性中毒。