雌激素受体β在乳腺癌中的表达

目的:探讨雌激素受体(ERβ)在乳腺癌表达情况以及其与乳腺癌的关系.方法:选取经根治性手术治疗的乳腺癌患者52例为研究对象.采用免疫组织化学法测定乳腺癌组织中ERβ的表达.根据ERβ表达情况将患者分成ERβ阳性组和阴性组,并结合临床病理指标和生物学指示作对比分析.结果:ERβ表达与Ki67表达负相关(P=0.019),ERβ蛋白的表达与月经状况,肿瘤大小, TNM分期,组织学类型无关,与其他生物学指标P53、C-erbB-2和GST-π表达无关.结论:ERβ表达状况对乳腺癌患者预后的判断有一定价值,为独立的预后影响因素.     

雌激素受体β在子宫内膜中的表达

目的：研究雌激素受体β在子宫内膜以及子宫内膜异位灶中的表达。方法：用反转录聚合酶链式扩增以及免疫组化法测定在位及异位子宫内膜组织β雌激素受体BmRNA以及蛋白的表达。结果：在位及异位子宫内膜都探测到雌激素受体口mRNA,而在位及异位内膜用免疫组化法均未探测到雌激素受体β蛋白。结论：在位及异位子宫内膜组织不表达雌激素受体β蛋白。     

17β-雌二醇和三苯氧胺对雌激素受体阳性胃癌细胞生长和胸腺素α原基因表达的影响

目的检测2株胃癌细胞是否可作为17β-雌二醇(E2)及其拮抗剂三苯氧胺(TAM)作用的靶细胞;检测E2及TAM对胃癌细胞胸腺素α原(ProTα)mRNA表达的影响,探讨TAM在胃癌治疗中的作用。方法首先,RT-PCR和免疫细胞化学(ICC)法检测胃癌细胞SGC-7901和BGC-823的雌激素受体(ER)亚型ERα和ERβ的表达。随后,分别观察不同浓度的E2和TAM对细胞生长速度和细胞形态学的影响。用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率,Hoechst 33258染色(法)检测细胞凋亡。再用半定量RT-PCR检测不同浓度的E2和TAM对BGC-823细胞ProTα基因表达的影响。结果 (1)ERα在SGC-7901细胞有阳性表达。在BGC-823细胞,ERα和ERβ均有表达。(2)10 nmol/L E2可促进2株胃癌细胞的生长,且增殖的BGC-823细胞伴有ProTαmRNA水平增高(P<0.05)。(3)TAM对SGC-7901和BGC-823有生长抑制及诱导凋亡作用(P<0.05),同时伴有ERα(+)/ERβ(+)BGC-823细胞ProTαmRNA表达水平下降(P<0.05)。结论 E2和TAM能够影响ERα和ERβ阳性胃癌细胞生长。SGC-7901和BGC-823的生长具有E2依赖性,可能与其ERα阳性特征有关。E2和TAM能够通过ProTα直接或间接作用影响ERα(+)/ERβ(+)胃癌细胞生长。抗E2治疗对某些胃癌可能有效。     

雌激素受体β与雌激素相关肿瘤的研究进展

人们对雌激素受体（estrogen receptor,ER）的认识经历了如下几个阶段,1962年Jensen发现了介导雌激素作用的雌激素受体,1986年Green克隆出雌激素受体蛋白质,1996年Kuiper在大鼠前列腺和卵巢cDNA文库中又成功克隆出一种新型雌激素受体,称为雌激素受体β（estrogen receptor beta,ERβ）,     

雌激素受体β的研究进展

雌激素受体β(ERβ)具有重要的生理和病理意义,它与雌激素受体α结构相似,但在组织学分布方面不尽相同。本文就ERβ的分子生物学特性、组织学分布及与疾病的关系等作一综述。     

子宫内膜异位症患者异位内膜间质细胞雌激素受体-a、雌激素受体-β的表达

目的:观察雌激素受体-a(ER-a)和雌激素受体-a(ER-β)在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜间质细胞中的表达,探讨其与子宫内膜异位症发生机制的关系.方法:应用体外细胞培养.流式细胞术栓测等方法,检测子宫内膜异位症患者在位及异位内膜间质细胞中ER-a和ER-β的表达.结果:子宫内膜异位症患者ER-a及ER-β在异位内膜间质细胞中的含量均低于在位内膜和子宫肌瘤患者在位内膜,但两组受体间均无明显差异.结论:子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜间质细胞中ER-a和ER-β表达有明显差异,表明除了已知的ER-a对子宫内膜增殖和分化有作用外,ER-β可能对子宫内膜的功能也有重要影响,并提示深入研究二者之间的关系对子宫内膜异位症的发生发展、临床生物特性、治疗及预后有重要价值.     

雌激素受体β亚型的表达和定位对性功能的调节作用

目的 为进一步研究雌激素受体β亚型(ERβ)对小鼠睾丸发育及性功能调节的作用。观察了出生后1，2，3，4周的小鼠睾丸和成年小鼠睾丸中ERβ的表达和分布情况。方法 采用出生1，2，3，4周雄性昆明小鼠的发育过程以及成年雄性昆明小鼠各2只，分成2组．第1组4只，第2组4只。采用免疫组织化学染色和免疫荧光组织化学染色方法检测小鼠睾丸中ERβ。结果 小鼠睾丸中ERβ的表达随出生时间增长而呈逐渐上升的趋势，在出生后1，2周的小鼠睾丸中ERβ主要分布于睾丸问质细胞。在出生后3，4周小鼠睾丸中ERβ分布于睾丸间质细胞胞质和细胞核，核仁呈阴性，成年小鼠睾丸间质细胞中ERβ分布较幼年小鼠密度增加。结论ERB在小鼠睾丸发育过程中可能作为一种特异性受体通过睾丸间质细胞影响和调节雄性激素的分泌进而对生精过程和精子的成熟有重要的调节作用。     

子宫内膜异位症患者异位内膜间质细胞雌激素受体-a、雌激素受体-β的表达

目的：观察雌激素受体-α（ER-α）和雌激素受体-β（ER-β）在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜间质细胞中的表达，探讨其与子宫内膜异位症发生机制的关系。方法：应用体外细胞培养，流式细胞术检测等方法，检测子宫内膜异住症患者在位及异住内膜间质细胞中ER—α和ER—β的表达。结果：子宫内膜异住症患者ER-α及ER-β在异位内膜间质细胞中的含量均低于在位内膜和子宫肌瘤患者在位内膜，但两组受体间均无明显差异。结论：子宫内膜异住症患者在位内膜和异位内膜间质细胞中ER—α和ER—β表达有明显差异，表明除了已知的ER—α对子宫内膜增殖和分化有作用外，ER-β可能对子宫内膜的功能也有重要影响，并提示深入研究二者之间的关系对子宫内膜异位症的发生发展、临床生物特性、治疗及预后有重要价值     

突触核蛋白-γ对乳腺癌雌激素受体表达的影响

目的探讨突触核蛋白-γ(synuclein-γ,SNCG)表达对乳腺癌雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达的影响.方法构建慢病毒SNCG过表达及干扰载体,分别转染人乳腺癌T47D(SNCG+/ER+)细胞株。在SNCG过表达和SNCG干扰细胞组中,RT-PCR方法检测SNCG和ER的mRNA水平表达,Western blot法检测SNCG和ER的蛋白水平表达,并做Pearson法相关统计分析。结果在mRNA水平,SNCG过表达组中ER基因的mRNA表达量显著增高,两者呈正相关(P=0.03,R=0.81);SNCG干扰组中ER基因的mRNA表达量显著降低,两者呈正相关(P=0.01,R=0.82)。在蛋白表达水平,SNCG过表达组ER表达显著增强,两者呈正相关(P=0.03,R=0.85);SNCG干扰组ER表达显著降低,两者呈正相关(P=0.04,R=0.83)。结论 SNCG对ER表达有正向调节作用,为进一步研究SNCG与ER的相互作用机制及SNCG与乳腺癌内分泌治疗之间的关系奠定实验基础。     

JAG2基因沉默影响大肠癌细胞株侵袭能力的研究

目的 Notch信号在肠上皮细胞种系分化和引发肠腺瘤和肠癌中起着关键的作用。本文试图探讨Notch信号的配体JAG2在大肠癌中的作用。方法 Real-Time PCR和Western blot分别检测JAG2特异性si RNA对JAG2 m RNA及蛋白表达的抑制率,细胞增殖实验和细胞侵袭实验观察si RNA对细胞增殖及侵袭能力的影响,人类肿瘤转移RT2 Profiler?PCR Array用于筛选JAG2下游靶基因,并应用特异性抑制化合物抑制靶蛋白活性。结果特异性si RNA对JAG2 m RNA及蛋白的表达具有抑制作用(P<0.05),对细胞增殖无明显影响(P>0.05),对细胞侵袭能力明显抑制(P<0.05),而组织蛋白K(CTSK)活性降低可能参与了这一过程。结论 JAG2基因可能对大肠癌细胞的侵袭转移能力起促进作用。     

Modification of chemokine receptor expression to enhance levels of trafficking receptors on autologous cytokine-induced killer cells derived from patients with colorectal cancer

Cytokine-induced killer (CIK) cells have achieved therapeutic benefit in treatment of solid tumors in clinic. However, some patients show no response after CIK treatment. Animal assays have shown that successful infiltration of CIK cells to the tumor sites could affect the outcome. Chemokines play important roles in lymphocyte trafficking. Understanding the molecular mechanism of chemokines in the process of CIK cell homing is important for further modification of CIK therapy. In this study, we investigated the spectrum of chemokine ligands in the colorectal cancer sites and observed that chemokine ligands CCL20 and CXCL10 were overexpressed in the CRC tumor tissues compared with adjacent tissues. Although the corresponding receptors CCR6 and CXCR3 increased on CIK cells compared with PBMCs, their expression on CIK cells derived from CRC patients had lower levels than healthy donors, which might be a limited factor for autologous-CIK cells trafficking to tumor site. Importantly, stimulation with chemokines CCL20 and CXCL10 promotes the expression levels of CCR6 and CXCR3 on CIK cells, thus augmenting the relative migration of CIK cells in vitro. Our results suggest that modification of surface chemokine receptors may enhance the homing ability of CIK cells for better therapeutic achievements.     

趋化因子SDF-1及其受体对卵巢癌细胞增殖及迁移的影响

目的:探讨趋化因子受体CXCR4在人卵巢癌细胞中的表达及SDF-1/CXCR4系统与卵巢癌细胞恶性表现的关系.方法:采用RT-PCR检测卵巢癌细胞系SW626中CXCR4的表达,MTT法检测SW626细胞增殖能力的变化,通过体外微孔隔离室板(Transwell)检测SDF-1对SW626细胞迁移及CXCR4的封闭对其迁移的影响.结果:CXCR4 mRNA在SW626细胞呈阳性表达,抗CXCR4单克隆抗体(20 μg/mL)对SW626细胞增殖有明显的抑制作用(P＜0.05),SDF-1可促进SW626细胞的迁移,CXCR4的封闭能抑制SDF-1对SW626迁移的这种促进作用(P＜0.05).结论:SDF-1及其受体CXCR4的相互作用可能在卵巢癌细胞增殖和迁移中发挥着重要作用,干扰SDF-1/CXCR4的相互作用可能成为治疗卵巢癌的一个有意义的靶点和策略.     

CO2气腹对结直肠癌细胞侵袭转移能力的影响

目的探讨CO2气腹对结直肠癌细胞侵袭转移能力的影响。方法99例结直肠癌患者分为腹腔镜手术组50例和开腹手术组49例,通过免疫组织化学方法检测2组患者结直肠癌手术组织标本中缺氧诱导因子-1α、β-链蛋白和E-钙黏蛋白的表达,并进行比较。结果腹腔镜组与开腹组患者手术标本中缺氧诱导因子-1a（72％与67％）、β-链蛋白（38％与47％）和B钙黏蛋白（50％与49％）的表达率比较差异无统计学意义（P〉0．05）;腹腔镜组与开腹手术组p链蛋白（68％与65％）和E-钙黏蛋白（66％与57％）在细胞膜中表达缺失差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CO2气腹不影响缺氧诱导因子-1α的表达及β链蛋白和E-钙黏蛋白的表达及结合,可能不促进结直肠癌的侵袭转移。     

CXCR4基因转染对大鼠真皮多能干细胞生物学性状的影响

目的:观察CXCR4基因转染对大鼠真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells,dMSCs)分化、增殖、迁移等生物学性状的影响。方法:分别采用荧光激活细胞分类法、绘制细胞生长曲线法、细胞培养分化诱导法和Transwell小室培养体系中化学趋化法,观察CXCR4基因转染后,CXCR4阳性细胞数目以及dMSCs增殖、分化和迁移能力的变化情况。结果:CXCR4基因转染后,CXCR4阳性dMSCs数目明显高于对照组(P<0.05),dMSCs增殖能力略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);从Transwell小室上层迁移到下层的dMSCs明显高于对照组(P<0.05)。同时,转染CXCR4基因的dMSCs可向成脂、成骨、成肌细胞方向分化。结论:CXCR4基因转染后,dMSCs中CXCR4表达增加,并有效地增强其迁移能力,且未影响dMSCs的增殖和分化能力。     

核小体结合蛋白调控CXCR4抑制前列腺癌PC-3细胞的侵袭作用

目的 探讨抑制人核小体结合蛋白1(NSBP1)基因后抑制非激素依赖性前列腺癌细胞系PC-3侵袭能力的作用机制.方法 通过慢病毒lentivirus-NSBP1转染非激素依赖性前列腺癌细胞系PC-3后,MTT法观察细胞活性变化,Transwell实验观察细胞侵袭能力的变化,应用Western-blot技术检测NSBP1、CXCR4蛋白的变化情况.结果 抑制NSBP1表达水平后非激素依赖性前列腺癌细胞系PC-3细胞活性降低,侵袭能力降低,同时伴有CXCR4蛋白的表达降低.结论 通过慢病毒转染抑制NSBP1的表达可以抑制非激素依赖性前列腺癌细胞系PC-3的侵袭能力,NSBP1可能是通过调控CXCR4蛋白的变化影响细胞侵袭能力的.     

葛根素体外影响小鼠胚胎长骨雌激素受体β表达的作用

目的:以体外培养小鼠胚胎长骨为靶器官,观察葛根素对骺板雌激素受体亚型雌激素受体β分布及含量的影响,并与内源雌激素比较,分析葛根素对骨可能的作用机制。方法:实验于2003-05/2004-05在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。以小鼠胚胎长骨为靶器官,以雌二醇1×10-6mol/L处理为阳性对照组,同时设空白对照组、葛根素干预组分为1×10-6,1×10-5,1×10-4mol/L3个浓度组。①小鼠怀孕16d时取出胚胎,剔除雌性胎鼠前肢肌肉和软组织,剥离出尺骨,做为实验靶器官置于BGJb培养基中,葛根素和雌二醇作用48h后,测量长骨总长和骨干长。每组培养长骨8根,重复3次。②长骨固定、脱钙后作石蜡切片,进行免疫组织化学染色,光镜下观察阳性细胞定位,图像分析系统下测定免疫反应阳性细胞数和阳性细胞面积。结果:雌性胎鼠长骨全部进入结果分析,无脱失。①长骨经葛根素和经雌二醇处理48h后,葛根素1×10-4,1×10-5mol/L组及阳性对照组骨总长及骨干长与空白对照组相比,差异有非常显著性意义[(3.97±0.12),(1.51±0.07);(3.79±0.06),(1.40±0.03);(4.05±0.1),(1.62±0.05);(3.43±0.05,1.24±0.04)mm;P<0.01],葛根素10-6mol/L组仅骨总长与空白对照组相比差异有显著性意义[(3.56±0.06)mm,P<0.05];葛根素1×10-4mol/L的作用与阳性对照组差异无统计学意义(P>0.05),1×10-5,1×10-6mol/L组作用弱于阳性对照组(P<0.01)。②空白对照组骺板静止区和肥大区雌激素受体β蛋白几乎不表达,仅增殖区有较弱表达。经葛根素和1×10-6mol/L雌二醇作用后,增殖区表达明显增强,肥大区和静止区软骨细胞也都出现雌激素受体β蛋白的阳性表达。葛根素1×10-6,1×10-5,1×10-4mol/L组阳性细胞数和阳性细胞面积均小于阳性对照组[29.8±2.9,43.5±5.1,63.3±5.8,83.3±6.9,(819.78±164.53),(1175.76±188.73),(1585.15±198.93),(2036.12±384.23)μm2,P<0.01～0.05],作用明显弱于雌二醇,并表现出剂量依赖的趋势。结论:葛根素在体外可促进软骨内成骨。同雌激素一样,葛根素也能够上调骺板雌激素受体β的表达。提示葛根素对软骨内成骨的促进作用可能与其上调雌激素受体β在骺板的表达有关。     

葛根素体外影响小鼠胚胎长骨雌激素受体β表达的作用

目的：以体外培养小鼠胚胎长骨为靶器官，观察葛根素对骺板雌激素受体亚型雌激素受体β分布及含量的影响，并与内源雌激素比较，分析葛根素对骨可能的作用机制。方法：实验于2003-05／2004-05在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。以小鼠胚胎长骨为靶器官，以雌二醇1&;#215;10^-6mol／L处理为阳性对照组，同时设空白对照组、葛根素干预组分为1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-4mol／L 3个浓度组。①小鼠怀孕16d时取出胚胎，剔除雌性胎鼠前肢肌肉和软组织，剥离出尺骨，做为实验靶器官置于BGJb培养基中，葛根素和雌二醇作用48h后，测量长骨总长和骨干长。每组培养长骨8根，重复3次。②长骨固定、脱钙后作石蜡切片，进行免疫组织化学染色，光镜下观察阳性细胞定位，图像分析系统下测定免疫反应阳性细胞数和阳性细胞面积。结果：雌性胎鼠长骨全部进入结果分析，无脱失。①长骨经葛根素和经雌二醇处理48h后，葛根素1&;#215;10^-4，1&;#215;10^-5mol／L组及阳性对照组骨总长及骨干长与空白对照组相比，差异有非常显著性意义[（3．97&;#177;0．12），（1．51&;#177;0．07）；（3．79&;#177;0．06），（1．40&;#177;0．03）；（4．05&;#177;0．1），（1．62&;#177;0．05）；（3．43&;#177;0．05，1．2&;#177;0．04）mm；P〈0．01]，葛根素10^-6mol／L组仅骨总长与空白对照组相比差异有显著性意义[（3．56&;#177;0．06）mm，P〈0．05]；葛根素1&;#215;10^-6mol／L的作用与阳性对照组差异无统计学意义（P〉0．05），1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-6moL／L组作用弱于阳性对照组（P〈0．01）。②空白对照组骺板静止区和肥大区雌激素受体β蛋白几乎不表达，仅增殖区有较弱表达。经葛根素和1&;#215;10^-6mol／L雌二醇作用后，增殖区表达明显增强，肥大区和静止区软骨细胞也都出现雌激素受体β蛋白的阳性表达。葛根素1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-4mol／L组阳性细胞数和阳性细胞面积均小于阳性对照组[29．8&;#177;2．9，43．5&;#177;5．1，63．3&;#177;5．8．833&;#177;6．9，（819．78&;#177;164．53）．（1175．76&;#177;188．73），（1585．15&;#177;198．93），（2036．12&;#177;384．23）μm^2，P〈0．01～0．05]，作用明显弱于雌二醇，并表现出剂量依赖的趋势。结论：葛根素在体外可促进软骨内成骨。同雌激素一样，葛根素也能够上调骺板雌激素受体β的表达。提示葛根素对软骨内成骨的促进作用可能与其上调雌激素受体β在骺板的表达有关。     

CO2气腹对结直肠癌细胞侵袭转移能力的影响

目的探讨CO2气腹对结直肠癌细胞侵袭转移能力的影响。方法 99例结直肠癌患者分为腹腔镜手术组50例和开腹手术组49例,通过免疫组织化学方法检测2组患者结直肠癌手术组织标本中缺氧诱导因子-1α、β-链蛋白和E-钙黏蛋白的表达,并进行比较。结果腹腔镜组与开腹组患者手术标本中缺氧诱导因子-1α(72%与67%)、β-链蛋白(38%与47%)和E-钙黏蛋白(50%与49%)的表达率比较差异无统计学意义(P>0.05);腹腔镜组与开腹手术组β-链蛋白(68%与65%)和E-钙黏蛋白(66%与57%)在细胞膜中表达缺失差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CO2气腹不影响缺氧诱导因子-1α的表达及β-链蛋白和E-钙黏蛋白的表达及结合,可能不促进结直肠癌的侵袭转移。