抗人重组SCF单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

本研究利用PEX31B作为载体,在大肠杆菌表达出重组人SCF融合蛋白。用该蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠。通过鼠-鼠杂交瘤技术,成功地获得4株分泌抗人重组SCF单克隆抗体(下称单抗)的杂交瘤细胞系。经检测,它们所分泌的抗体亚类均为IgG1,免疫印迹试验和抗体特异性鉴定证实,4株单抗均能特异性地识别可溶性SCF。抗SCF单抗杂交瘤细胞系的建立,为深入研究SCF的生物学特性、功能以及SCF产品的纯化,提供了有力的工具。     

抗人重组SCF单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

本研究利用ＰＥＸ３１Ｂ作为载体，在大肠杆菌表达出重组人ＳＣＦ融合蛋白。用该蛋白作为抗原，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过鼠－鼠杂交瘤技术，成功地获得４株分泌抗人重组ＷＳＣＦ单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经检测，它们所分泌的抗体亚类均为ＩｇＧ１，免疫印迹试验和抗体特异性鉴定证实，４株单抗均能特异性地识别可溶性ＳＣＦ。抗ＳＣＦ单抗杂交瘤细胞系的建立，为深入研究ＳＣＦ的生物学特性、功能以及ＳＣＦ产品的纯化，提供了     

分泌抗人喉单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

中国人民解放军白求恩国际和平医院冯金辉等4人在《免疫学快报》1987年7(1)10～11发表本文,报道已建立抗人喉单克隆抗体杂交瘤细胞系三株,经4次克隆化,体外传代培养167天,经液氮冻存复苏,以间接荧光法和ELISA测抗体,均能稳定地分泌抗体。经染色体     

抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立秦玉倩吴悦周月梅（上海生物制品研究所免疫研究室，上海２０００５２）Ｖｅｔｅｒｌｅｉｎ等［１］报道用抗尿激酶（ＵＫ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）亲和层析柱，能从ＵＫ粗制品、甚至新鲜尿液中提取高纯度的ＵＫ，从而大大降低制备...     

分泌抗人结肠癌细胞单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

结肠癌是一种严重危害人类健康的常见恶性病症。本病高发于大洋、欧、美洲等地区。在我国,结肠癌在恶性肿瘤中居第六位;因此,对结肠癌的研究受到国内外的重视。自1975年Kohler和Milstein首次报告杂交瘤技术以来,已渗透到生物医学的各个领域,在肿瘤学中亦得到了广泛应用。目前已制备出抗人肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、白血病等的单抗隆抗体。这为肿瘤的进一步研究提供了有用的手段。抗人结肠癌单克隆抗体的研究,国外     

抗人补体B因子单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立

B因子是补体交替活化途径的重要成分之一,是一种单链的分子量为93,000的β球蛋白,其在正常血清中的浓度为200μg/ml。当补体交替途径活化时,B因子在C3b和镁离子存在的情况下,被D因子裂解成Ba和Bb两个片段,最终形成C_3转化酶和C_5转化酶,参予补体后续成分的活化。抗补体B因子McAb的研究,国外已有报导,其中有的抗B因子McAb具有稳     

抗人结肠癌杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体特性研究

本研究利用手术中取得的新鲜结肠癌组织免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制得５株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中ＨＣ６株杂交瘤细胞经过１８０ｄ连续培养，单克隆抗体ＭＣ６分泌稳定、选择性强、效价高。免疫组化检测发现，ＭＣ６相应抗原在结肠癌组织及结肠癌细胞系呈高度表达（９０～１００％），显著高于其它癌组织、癌旁组织、正常粘膜及癌细胞系（０～４４．４％）；中度以上染色者占阳性总数的８０％以上；主要分布于细胞膜上。除癌细胞膜和胞浆呈阳性反应外，腺腔内粘液亦可见不同程度的着色，表明ＭＣ６相应抗原是一种在结肠癌细胞膜上占优势的抗原，并可脱落至腺腔。此单克隆抗体的成功研制为发现新的结肠癌生化标志，结肠癌的早期诊断及术后病情的监测提供了可能性。     

抗人血清型IgA单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和鉴定

本文使用从IgA骨髓瘤患者血清中提出的IgA,免疫BALB/c小鼠,采用常规细胞融合的方法,获得4株针对IgA的单克隆抗体杂交瘤细胞系。抗体效价培养上清为10~(-2),诱生腹水ELISA测定为10~(-1)～10~(-6),冻存6个月后复苏,腹水效价仍保持10~(-1)～10~(-6)。染色体分析为102,基本上是Sp2/0骨髓瘤细胞染色数68和小鼠脾细胞42之和,说明为杂交瘤细胞。专一鉴定:本McAb经ELISA测定证明,仅与IgA起反应,小鼠亚类测定证明为IgG_1本McAb与     

抗人甲状腺球旦白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

甲状腺炎及各种甲状腺功能异常疾病在我国是常见病、多发病,其中一部分属于自身免疫性疾病,在发病机制、免疫病理、免疫治疗等方面存在大量问题。各种甲状腺肿瘤的发病率居肿瘤发病率的前十位,有关病理诊断、术后观察、早期诊断等工作尚需进一步深入。为了协助临床甲状腺疾病的诊治和科研工作,我们进行了抗人甲状腺球蛋白(HTg)单克隆抗体的研究。目前,已基本建立分泌抗HTg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,兹简报如下: 用纯化的HTg(上海市普陀区中心医院提供)免疫Balb/c小鼠,首次量165μg/只,加     

一组分泌抗人粒细胞单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用正常人的外周血粒细胞免疫Balb/c小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,用间接免疫荧光法及扁桃腺冰冻切片免疫过氧化物酶染色技术,从2次细胞融合中筛选并经克隆化得到一批稳定分泌抗粒细胞单抗的杂交瘤细胞系。对其中4株(FPMNI-FPMN4)杂交瘤细胞系所分泌的单抗作了系统的鉴定,证实它们是粒细胞特异性的单抗。     

抗绿脓杆菌外毒素A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

本文采用绿脓杆菌外毒素A(PEA)免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与Sp2/0细胞进行融合。取有克隆生长孔上清用EL-ISA法筛选有抗体分泌阳性孔,再选阳性孔用有限稀释法进行连续亚克隆。共进行8次融合,由于假阴性及假阳性的干扰,在前7次融合中,仅建株成功杂交瘤1株。命名为14F10。在排除假阴性及假阳性干扰后,在第8次融合中建株成功5株,命名为:23B9,23F1,23C12,24A6及24B5。在传代培养     

抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

以RSV(Long株)抗原液滴鼻免疫BALB/c小鼠两次后,于小鼠腹腔脾区攻击。Sp 2/0骨髓瘤细胞和小鼠免疫脾细胞1:1O混合,50％PEG(MW1000)介导融合。用免疫间接萤光法检测,测出萤光(++)以上的阳性孔46个。对其中6个孔连续克隆三次,稳定传35代,获得稳定分泌抗RSV McAb杂交瘤细胞6D_9、4C_2、6F_3、6F_7、6H_9及10F_5六株。其小鼠腹水效价达1:8000～102400(++)。Ig亚类除6F_2外均为Ig 2a,6F_3未出沉淀线。因未做IgA、IgM类型鉴定,故有待证实。经交叉实验证明该McAb与腺病毒Ⅶ型、麻疹病毒、副流感病毒Ⅲ     

抗绿脓杆菌毒素A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

本文采用绿脓杆菌外毒素A免疫BALB/c小鼠取脾细胞与Sp2/0细胞融合,建立了6株分泌单克隆抗体的杂交瘤,分别命名为14F10,23B9,23F1,23C12,,24A6及24B5。其中,23F1及24A6在传代培养中逐渐丧失了分泌抗体的能力,其余4株可稳定地分泌抗体。它们的Ig亚类鉴定;14F10为IgM,23B9为IgC1,23C12为JgG2b,24B5为JgG1。注射入同系小鼠腹腔,可产生高滴度抗体,在夹心ELISA试验中己证实均为抗绿脓杆菌外毒素A特异性的。此外,文中还讨论了在间接ELISA初次筛选中出现的假阴性及假阳性的原因及其排除方法。     

抗工程菌产HBcAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

制备乙型肝炎核心抗原(HBcAg)和核心抗体(抗-HBc)是深入研究乙型肝炎不可缺少的条件之一。目前国内已建立多株抗-HBc单克隆抗体,但免疫用的HBcAg基本上是从尸肝中提取。由于富含HBcAg的尸肝不易获得,而且从组织中提取纯化抗原的步骤也比较复杂,因此抗原来源困难。近年来,HBcAg已能用遗传工程菌进行大量生产,本文报告用菌产HBcAg制备抗HBc-     

胰岛素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

自从Kohler和Milstein建立杂交瘤技术以来,在生物学各领域内得到广泛地研究和应用。在内分泌学方面也得到了应用,已经有十几项激素单克隆抗体代替经典抗血清的报道。本文为建立胰岛素单克隆抗体杂交瘤细胞系而进行了研究,现报道如下。     

32株分泌抗HBsAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

<正> 取纯化HBsAg免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,选原始抗体阳性孔细胞进行多次克隆化。两次融合试验共得32株分泌抗HBsAg-McAb的杂交瘤细胞株。其培液上清的PHA效价为1:32～1:1,024,对流(CEP)效价为1:2～1:16。诱生小鼠腹水的PHA效价,25/32株为10~(-4) ～10~(-5),7/32株>10~(-6),其中8/32株ELISA法效价可达10~(-7)。CEP和AGD效价最高分别达1:6,400和1:3,200。 选出21株分泌抗体能力较强者进行冻存,并对其纯度和特异性进行鉴定。结果证明,21株杂交瘤分泌的McAb均属小鼠IgG_1亚类,能较好地中和乙肝患者血清中的HBsAg。与人白蛋白或正常人血清进行CEP或AGD试验,均无沉淀线出现。说明这些McAb具有良好的纯度和专一性。     

抗幽门螺旋菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

抗幽门螺旋菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定王正祥，申厚凤，陈红菊，童鲲（扬州大学医学院微生物学教研室，扬州２２５００１）幽门螺旋菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｎｙｌｏｒｉ）感染与慢性胃炎及消化性溃疡密切相关，并基本肯定是急性胃炎和慢性Ｂ型胃炎的致病...