单一酶试剂快速测定血清鸟嘌呤脱氨酶

本文介绍用单一酶试剂测定血清鸟嘌呤脱氨酶,并进行了实验探讨.批内CV 为2.14～2.72%,批间CV 为4.81～5.01%,Km 为1.2×10~(-2)mmol/L.本法采用0.27mmol/L 的底物浓度为Km 的22.5倍.最适pH8.0,光吸收峰为550nm 波长.76名正常成年人血清乌嘌呤脱氨酶活性(?)±SD 为4.28±1.87U/L.32例早期急性肝炎患者血清鸟嘌呤脱氨酶活性除2例正常外,其他均显著高于正常人,(?)±SD 为33.72±11.87U/L(P<0.001)。     

免疫分离法测定血浆脂蛋白残粒胆固醇的临床评价

目的　对免疫分离法测定血浆脂蛋白残粒胆固醇 (RLP C)进行方法学评价 ,并探讨其临床应用价值。方法　分析免疫分离法测定血浆RLP C的精密度、准确度、干扰因素 ,并将该法与超速离心法 (UC)进行比较 ,同时用该法测定 80例正常人、70例冠心病患者、72例 2型糖尿病患者和2 5例Ⅲ型高脂蛋白血症患者空腹血浆RLP C水平。结果　免疫分离法测定血浆RLP C的批内CV为 2 .78%～ 4 .98% ,批间CV为 3.99%～ 7.5 7% ,RLP C浓度 2 .4 4mmol/L以下时线性良好 ,r =0 .992。分析灵敏度为 0 .0 5mmol/L ,回收率为 92 .1%～ 98.3% ,免疫分离法 (X)与超速离心法 (Y)具有良好的相关性 ,Y =1.0 2 2X +0 .0 2 1,r =0 .989。甘油三酯 (TG) <15 .3mmol/L ,血红蛋白 (Hb) <5g/L ,低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C) <7.0mmol/L ,高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C) <3.0mmol/L ,胆红素 <342 μmol/L ,抗坏血酸 <15 0mmol/L时对方法无显著干扰。冠心病患者、2型糖尿病患者和Ⅲ型高脂蛋白血症组空腹血浆RLP C分别为 (0 .4 4 5± 0 .2 5 1)mmol/L、(0 .336± 0 .172 )mmol/L和(0 .878± 0 .6 72 )mmol/L ,均显著高于正常人 [(0 .190± 0 .0 70 )mmol/L],P <0 .0 0 1。结论　免疫分离法测定RLP C操作简单 ,结果准确可靠 ,精密度好 ,符合临床常规使用     

尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶连续监测法试剂盒性能评估

本文就国产尿液 NAG活力连续监测法试剂盒进行了评价。该试剂盒酶促反应延迟时间应选为 3m in,监测时间选择 6 0 s。线性 0～ 15 0 U / L ,r=0 .9998,线性误差小于 7%。重复实验 ,水平 批内为 2 6 .3± 1.1U / L ,CV4.2 % ,随机误差 8.2 % ;批间 s 1.77U / L ,CV 6 .7% ,随机误差 13.2 %。水平 批内 91.3U / L± 2 .43U / L ,CV2 .6 % ,随机误差 5 .2 % ;批间 s 4.44 U / L ,CV 4.9% ,随机误差 9.5 %。平均回收率 99.5 %。测定体检健康者尿样 6 0例 ,经统计学分析 ,结果呈偏态分布 ,男女间差异不显著 (P>0 .0 5 ) ,单侧 95 %上限为 2 .4U / mm ol Cr(37℃ )     

比色测定血清果糖胺的实验研究

本文介绍了一种测定血清果糖胺的单次比色法.该法的主要改进是在果糖胺反应中加用表活剂Triton X-100,使血清糖化蛋白与标准物DMF 的光谱特征得到某些改善,提高了灵敏度;并以碱性的样品制备液对样品进行预处理,有效地消除了抗坏血酸的干扰.方法线性良好,批内与批间CV 分剐为1.5%和3.5%,回收率平均93%。成人正常参考值((?)±2S):男性为1.59±0.30mmol/L 或22.1±3.80μmol/克蛋白;女性则为1.50±0.29mmol/L 或20.6±3.58μmol/L 克蛋白。     

糖化血清蛋白的简易比色测定法

本文报道了用氮化硝基四氮唑蓝(NBT)还原法测定糖化血清蛋白的方法。作者成功地合成了1-脱氧1-吗啡啉果糖(DMF),以此为标准参照物,以果糖胺(mmol/L)报告结果。50例正常人结果X±2S 为1.9±0.25mmol/L。方法批内CV=1.55%,批间CV=2.45%。除血红蛋白有正干扰外,葡萄糖、果糖尿素、肌酐、草酸盐均不呈色。     

乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸

采用乳酸氧化酶氧化乳酸产生丙酮酸和H2 O2 ,然后偶联Trinder显色反应测定血浆中乳酸。方法线性可达 13 2mmol/L ,批内变异系数 (CV)为 0 86 %～ 1 5 6 % ,回收率为 98 9%～ 10 1 5 % ,与LD NBT法比较具有良好的相关 ,r =0 989,Y =0 989X 0 0 3 ,5 0例健康人血浆乳酸参考值为 0 6 1～ 2 5 1mmol/L (x± 2s)。本法简便 ,可靠 ,适合作为乳酸的常规测定方法。     

尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶连续监测法试剂盒性能评估

本文就国产尿液NAG活力连续监测法试剂盒进行了评价.该试剂盒酶促反应延迟时间应选为3 min,监测时间选择60 s.线性0～150 U/L,r＝0 .99 98,线性误差小于7%.重复实验,水平Ⅰ批内为26.3±1.1 U/L,CV 4.2%,随机误差8. 2 %;批间s 1.77 U/L,CV 6.7%,随机误差13.2%.水平Ⅱ批内91.3 U/L±2.43 U/L,CV 2 .6%,随机误差5.2%;批间s 4.44 U/L,CV 4.9%,随机误差9.5%.平均回收率99.5% . 测定体检健康者尿样60例,经统计学分析,结果呈偏态分布,男女间差异不显著(P＞0.05) ,单侧95%上限为2.4 U/mmol Cr(37℃).     

介绍一种新的分光光度法测定维生素E含量

本文介绍分光光度法测定血浆维生素E(VE)的含量。用正交设计方法观察了显色剂、FeCl_3及磷酸对显色的影响。实验结果提示FeCl_3对显色影响较大,血浆VE浓度在2.50～60.00mg/L成线性,批内变异系数CV为2.2%;回收率为102.4%;与荧光法比较呈密切相关(r=0.9849)。应用本法测定32例健康人血浆VE浓度为(?)±SD=11.67±2.24mg/L。溶血标本对本法有干扰,实验用玻璃器皿均须特殊处理。     

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的方法学研究

本文研究了甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)的最佳测定条件。最适pH8.6,Km 值为1.91±0.08mmol/L,选用158mmol/L Tris、64mmol/L 双甘氨肽、10 mmol/L 底物。酶促反应速度在70分钟内呈线性,酶活力在600U/L 内呈线性。高、中,低活力标本批内变异1.7～3.1%,批问变异3.8～6.7%,标本置4℃一周,结果无明显变化。168例健康者GPDA 为150.1±49.8(2SD)U/L,同时研究了测定管、底物空白、对硝基苯胺的光学吸收特性,观察了GPA 试剂在不同pH 和不同时间的变化规律。     

急性心肌梗死患者血浆降钙素基因相关肽含量变化及尿激酶溶栓治疗对其影响的观察

目的 :观察降钙素基因相关肽 (CGRP)在急性心肌梗死 (AMI)中的临床意义以及尿激酶溶栓治疗对其的影响。方法 :采用放免法测定 2 0例 AMI、30例稳定型心绞痛 (SAP)患者和 2 0例正常对照组的血浆 CGRP浓度。结果 :AMI患者入院时的血浆 CGRP平均浓度为 (45 .8± 7.1 ) ng/L,SAP患者为 (42 .9± 9.9) ng/L,正常对照组为 (5 2 .1± 1 6 .0 ) ng/L ,SAP患者的血浆 CGRP浓度较正常对照组明显减低 (P<0 .0 1 )。AMI合并心力衰竭、心源性休克和严重心律失常及梗死面积较大者的血浆 CGRP浓度〔分别为 (6 1 .1± 1 7.4) ng/L、(6 7.7±2 4.1 ) ng/L和 (1 5 5 .7± 46 .5 ) ng/L〕较无并发症者 (1 99.4± 5 2 .1 ) ng/L显著减低 ;CGRP与 CK MB呈显著正相关 (r=0 .42 ,P<0 .0 0 1 ) ;AMI溶栓后梗死相关动脉 (IRA )再通者的血浆 CGRP和 CK MB浓度较溶栓前明显升高 ,分别是溶栓前的 6倍和 2～ 3倍。结论 :检测血浆 CGRP浓度对 AMI病情和预后的判断可提供有益的帮助。 AMI溶栓后早期出现 CGRP和 CK MB浓度明显升高提示 IRA再通。     

血清丙酮酸激酶在血液病的诊断和治疗中的应用

目的探讨血清丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)活性变化在血液系统疾病的诊断和疗效观察中的作用.方法用速率法测定血清PK活性.结果非白血病组和慢性粒细胞白血病组血清PK活性正常,与对照组比较无差异(P＞0.05);急性淋巴细胞白血病组、急性单核细胞白血病组、急性粒细胞白血病组酶活性分别呈轻度升高(140±11 IU/L)、中度升高(241±32 IU/L)、高度升高(495±151 IU/L),与对照组(63±18 IU/L)比较有显著差异(P＜0.05或P＜0.01).酶活性随治疗好转而逐渐降低,病情完全缓解时,酶活性稳定在正常范围内.结论检测血清PK活性可作为血液系统疾病诊断和疗效的动态观察的重要指标.     

微量板酶法测定红细胞内肌酸

目的　建立一种红细胞内肌酸的测定方法。　方法　采用 CTase/SOX/POD三联酶氧化肌酸产生 H2 O2 ,通过偶联显色反应测定红细胞内肌酸。　结果　方法的线性范围为 0～ 2 0 0μmol/L;精密度 :批内 CV 0 .92 %～ 1 .5 1 % ,批间CV1 .2 8%～ 2 .1 2 % ;回收率 98.30 %～ 1 0 1 .69%。采用了 μmol/g Hb和 μmol/LRBC两种红细胞内肌酸测定的单位表示方法 ,消除了实验误差对结果产生的影响。 2 86例健康人红细胞肌酸参考值分别为男性 1 .93± 0 .36μmol/g Hb,684 .3± 1 2 7.5μmol/LRBC;女性 2 .1 7± 0 .4 1 μmol/g Hb,75 9.4± 1 37.9μmol/LRBC。　结论　本方法简便、可靠、线性范围广、特异性好 ,适合作为红细胞内肌酸的常规测定。     

二重滤过血浆置换治疗难治性高脂血症

目的　了解单次二重滤过血浆置换治疗非家族性、难治性高脂血症的短期疗效。方法　 2 0例非家族性高脂血症患者接受二重滤过血浆置换疗法 ,其中 14例患者治疗前血浆总胆固醇 (TC)大于6 .8mmol/L或甘油三脂 (TG)大于 2mmol/L ,低密度脂蛋白 (LDL)水平均高于 3.1mmol/L。取治疗前和治疗结束时的血样 ,分别测量血浆TC、TG、LDL、Apo(A)、Apo(B)、Lp(a)、HDL和纤维蛋白原水平。　结果11例患者具有完整的记录 ,其平均年龄 (4 5 .2 5± 8.33) (2 6～ 5 9)岁 ;平均病程为 6 .7年。单次治疗总置换量为 (4 183± 6 6 7) (30 0 0～ 5 0 0 0 )ml,治疗前后TC、TG、LDL、Apo(A)、Apo(B)、Lp(a)、HDL和纤维蛋白原水平分别为 (6 .86± 1.17)mmol/Lvs (3.4 2± 0 .6 3)mmol/L、(3.92± 2 .13)mmol/Lvs (3.5 7± 1.82 )mmol/L、(4 .0 3± 0 .86 )mmol/Lvs (1.13± 0 .6 6 )mmol/L、(1.34± 0 .37)g/Lvs (0 .85± 0 .30 )g/L、(1.34± 0 .5 7)g/Lvs (0 .70± 0 .34)g/L、(176 .14± 75 .5 3)mg/Lvs (98.4 3± 4 4 .0 8)mg/L、(1.0 3± 0 .2 8)mmol/Lvs (0 .6 8±0 .2 2 )mmol/L、(2 6 3.6± 86 .4 9)mg/dlvs (15 4 .88± 4 4 .12 )mg/dl。TC平均下降 5 1% ;LDL下降约 72 % ;Apo(a)和Apo(b)分别下降 32 %和 4 4 %左右。Lp(a     

二重滤过血浆置换治疗难治性高脂血症的近期和远期疗效

目的 :了解单次二重滤过血浆置换治疗非家族性、难治性高脂血症的短期疗效及对靶器官的长期保护效果。方法 :2 8例非家族性高脂血症患者接受二重滤过血浆置换疗法 ,取治疗前和治疗结束时的血样 ,分别测量血浆TC、TG、LDL、Apo(A)、Apo(B)、Lp(a)、HDL和纤维蛋白原水平。结果 :2 0例患者具有完整的记录 ,平均年龄 5 1.73± 6 .5 8(2 6～ 6 2 )岁 ;平均病程 6 .8年。单次治疗的总置换量为 4 183± 6 6 7(30 0 0～ 5 0 0 0 )ml,治疗前后TC、TG、LDL、Apo(A)、Apo(B)、Lp(a)、HDL和纤维蛋白原水平分别为 6 .86± 1.17mmol/Lvs 3.4 2± 0 .6 3mmol/L、3.92± 2 .13mmol/Lvs 3.5 7± 1.82mmol/L、4 .0 3± 0 .86mmol/Lvs 1.13± 0 .6 6mmol/L、1.34± 0 .37g/Lvs 0 .85± 0 .30g/L、1.34± 0 .5 7g/Lvs 0 .70± 0 .34g/L、176 .14± 75 .5 3mg/Lvs 98.4 3± 4 4 .0 8mg/L、1.0 3± 0 .2 8mmol/Lvs 0 .6 8± 0 .2 2mmol/L、2 6 3.6± 86 .5mg/dlvs 15 4 .9± 4 4 .1mg/dl。TC平均下降 5 1% ;LDL下降约 72 % ;Apo(a)和Apo(b)分别下降 32 %和 4 4 %左右。Lp(a)平均降低 4 0 % ,纤维蛋白原平均下降 4 3%。配对t检验提示单次置换后血浆TC、LDL、Apo(A)、Apo(B)、Lp(a)和纤维蛋白原水平有明显下降 (P <0 .0 5或P <0     

乳酸评价急性胸痛的临床研究

目的　检验乳酸诊断急性心肌梗死(AMI)及判断危重心脏病患者预后的假说。方法　急性胸痛或其它典型AMI症状的患者检测静脉血乳酸。高于2.0mmol/L作为急性心脏疾病的预测值。同时检测心肌磷酸激酶(CK)和同工酶(CK-MB),记录ECG。结果　全部114例患者,65例乳酸高于2.0mmol/L。25例(22%)确诊为急性心肌梗死(AMI),其乳酸为2.7±0.7mmol/L。而Non～AMI乳酸为2.2±0.8mmol/L(P＜0.05)。乳酸诊断AMI的敏感性为96%(95%CI为89%～100%),特异性为55%(95%CI为45%～64%),乳酸阴性预计值为96%(95%CI为89%～100%)。胸痛患者乳酸升高的平均时间为发病3h以内。死亡或要求ICU治疗48h以上的患者其乳酸也明显升高,与不要求ICU治疗者比较其乳酸分别是5.0±4.3mmol/L比1.9±0.6mmol/L(P＜0.01)。结论　乳酸对AMI具有较高的阴性预计值,高乳酸血症与急性心脏病患者病死率及要求住院有明显的相关性。     

直接一步法测定低密度脂蛋白胆固醇

目的对直接一步法测定血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)进行方法学评价,并探讨friedewald公式计算法的可行性.方法通过重复性试验、回收实验、线性实验对该方法进行评价;并同时与friedewald公式计算法进行比较.结果该方法线性范围为0.7～9.1 mmol/L,精密度批内CV 2.76%,批间CV为3.56%;平均回收率是99.2%,参考范围为(2.45±0.55) mmol/L,与friedewald公式计算法相比,在TG<4.52 mmol/L时,二者有良好的相关性,与文献相符;心脑血管病组与正常对照组相比,二者差异有显著性(P<0.01).结论一步法准确性及重复性均符合要求,方便快速,在TG<4.52 mmol/L时,用计算法经济更方便;而TG≥4.52 mmol/L时,用测定法才能得到准确的结果.     

[3H]-油酸标记的大肠杆菌底物测定血清磷脂酶A2活性的方法及评价

目的:探讨血清磷脂酶A2(PLA2)活性测定动力学特点并进行方法学评价.方法:采用[3H]-油酸标记大肠杆菌膜为底物,观察不同条件下PLA2的作用特点,选择最适反应条件,并进行方法学评价试验.结果:PLA2的最适pH为8.0～8.5;当Ca 2+≤8 nmol/L时,PLA2活性呈Ca2+浓度依赖性;PLA2催化水解大肠杆菌膜磷脂的反应有底物饱和性,其表观Km为6.0 μmol/L;血清用量在2～14 μl内呈线性关系(r＝0.924 8,P<0.05);蛇毒PLA2在0.5～10 ng范围内呈线性(r＝0.960 4 ,P<0.01);当血清用量为10 μl,反应在25 min内呈线性(r＝0.929 9,P <0.005).批内CV为6.2%,批间CV为9.3%,回收率为92.6%;轻度溶血、1.06 mmol/L的TG及0.16 mmol/L的Triton X-100对该法无明显干扰;48例健康人血清PLA2活力的95%可信区间为461.9～623.2 u/L((x)±t0.05,vS(x)).结论:以[3H]-油酸标记的大肠杆菌膜为底物测定血清磷脂酶A2活力是一种灵敏度极高,特异性较强,准确度满意的放射化学分析法.该法较为简单、快速、适于临床批量测定以及科学研究.     

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定及其应用

本文介绍速率法测定血清甘氨酰脑氨酸二肽氨基肽酶(Glycylprolinc dipcptidylaminopeptidase,GPDA)的方法.并应用于自动生化分析仪,测定的最适pH 为8.6,酶活力在1300 U/L 以下成线性,三份高、中、低值酶活力标本批内CV 0.7%～1.4%,批间CV1.2%～4.4%.132例正常人GPDA 为185.2±28.6((?)±s)U/L,65例原发性肝癌组为408.0±216.1 U/L((?)±s),明显高于正常组(p<0.001),且与AFP 水平无相关意义(r=0.0361),24例胃癌和18例肺癌,分别为99.5±16.6 U/L 和111.8±23.0U/L 明显低于正常组(p<0.001),并发现GPDA 在食道癌及贲门癌病人亦有下降趋势(p<0.01)。     

Architect i2000免疫分析仪测定血清肿瘤标志物甲胎蛋白、CA125的初步评价

目的:对Architect i2000免疫分析仪定量检测肿瘤标志物的方法学予以初步评价。方法:根据美国临床实验室标准化委员会颁布的《定量临床检验方法的初步评价:批准指南(EP10-A)》提供的方法,按照特定顺序连续5d测定低、中、高浓度人混合血清中的甲胎蛋白(AFP)、CA125浓度。计算偏差、总不精密度及其截距、斜率、非线性、携带污染和漂移,并进行t检验。结果:3种浓度AFP的绝对偏差为低值-0.29μg/L、中值-6.33μg/L、高值-8.63μg/L,均低于允许偏差的±2.109μg/L、±31.032μg/L、±63.72μg/L。3种浓度CA125的绝对偏差为低值-0.79IU/mL、中值-4.73IU/mL、高值-4.17IU/mL,均低于允许偏差的±3.381IU/mL、±34.494IU/mL、±39.315IU/mL。3种浓度AFP总不精密度批内变异系数(CV)分别为3.755%、2.622%、2.617%,均小于厂家说明书规定的10%。中、高两种浓度CA125总不精密度CV分别为5.693%、3.482%,均小于全国临床检验操作规程规定的允许不精密度6.8%,低浓度CA125的总不精密度...     

正常人与2型糖尿病患者血糖水平漂移的比较

目的:探讨正常人及新诊断2型糖尿病患者血糖水平漂移变化的差异,为糖尿病患者的一级康复预防提供理论依据。方法:采用动态血糖监测系统(continuousglucosemonitoringsystem,CGMS)对43例正常人及47例新诊断、未经干预治疗的2型糖尿病患者进行连续(71±10)h的血糖监测。结果:正常人组与2型糖尿病组在平均血糖水平犤(5.3±0.5)mmol/L比(12.2±2.6)mmol/L犦,日内血糖最高值犤(7.8±1.4)mmol/L比(18.5±2.7)mmol/L犦,日内血糖漂移最大幅度犤(3.9±1.6)mmol/L比(11.2±2.8)mmol/L犦,两组餐前及餐后的平均血糖值之间差异均具有显著性意义(P<0.001)。正常人组血糖漂移于2.8～7.8mmol/L所占的日内时间百分比为99%(87%～100%);而2型糖尿病组血糖>7.8mmol/L及11.1mmol/L的时间百分比分别为95%(28%～100%)和62%(6%～100%)。CGMS观测值与血浆葡萄糖值及指端毛细血管血糖值均呈显著正相关(r=0.93,r=0.95,P均<0.001)。结论:动态血糖监测能更为详细地显示正常人及2型糖尿病患者血糖水平的漂移变化,对糖尿病的防治及康复具有临床应用价值。