γ-谷氨酰基转移酶法快速鉴定脑膜炎奈瑟菌

目的探索γ-谷氨酰基转移酶活性检测在脑膜炎奈瑟菌快速鉴定中的意义。方法以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺为底物,建立简便快速的脑膜炎奈瑟菌酶反应鉴定法,并对底物浓度、反应温度、反应时间、细菌浓度等实验条件进行优化。结果L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺浓度在6~8mmol/L,细菌浓度在4~8个麦氏单位,37℃水浴30~60min,脑膜炎奈瑟菌即可呈明显的黄色反应,淋病奈瑟菌和卡他莫拉菌等其他革兰阴性双球菌无肉眼可见的颜色变化。结论γ-谷氨酰基转移酶法是一种快速简便可靠的脑膜炎奈瑟菌鉴定方法。     

脑膜炎奈瑟菌的PCR快速诊断

目的建立特异、敏感、快速的脑膜炎奈瑟菌检测方法。方法应用PCR技术检测流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)疑似病例脑脊液和血液标本中脑膜炎奈瑟菌种属(Neisseria meningitides,Nm)及各群的特异性DNA片段。结果 6例流脑疑似病人的脑脊液标本中检出5份Nm CRGA基因阳性,5份含有Nm C群SIAD(C)基因片段;血液标本中检出1份Nm CRGA基因阳性,1份含有Nm C群SIAD(C)基因片段。结论所建立方法可用于Nm的快速诊断。     

A群、C群脑膜炎奈瑟菌人群抗体水平分析

由于脑膜炎奈瑟菌菌群的变迁,近些年流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)流行趋势逐渐由A 群向B群和C群发展,本世纪以来,我国曾出现多次C群流脑爆发流行[1],故其诊断和预防引起了学者的高度重视.为此,我们对部分健康人群A群、C群抗体水平进行了检测分析,报告如下.     

人群脑膜炎奈瑟菌带菌检验方法的研究

目的:研制一种能够在低温下保持脑膜炎奈瑟菌活性并具有增菌作用的培养基。方法:配制一种小牛血清"双抗"培养基,用已知量A、C群脑膜炎奈瑟菌检定其保菌和增菌效果,并用该法在正常人群中检测带菌率,以常规方法的检测结果作配对比较。结果:应用小牛血清"双抗"培养基可使脑膜炎奈瑟菌在4℃24小时内基本不死亡,部分菌株可生存8天,同时可使存活的细菌从3～9 CFU/ml增加到(6～7)×107 CFU/ml;对364名正常人检测,其检出率达1.65%,而常规方法检出率为0(P<0.05)。结论:小牛血清"双抗"培养基在4℃的不利条件下,有显著保菌作用,同时具有显著增菌作用。     

脑膜炎奈瑟氏菌C群引起的流脑1例报告

我院于2004年12月～2005年2月共收治了14例流脑病人,其中有5例为某小学五年级的在读学生,只有1例培养出脑膜炎奈瑟氏菌C群.     

盐城市固定人群新型脑膜炎奈瑟菌带菌调查

目的：了解盐城市人群中是否有不可分群的新型脑膜炎奈瑟菌及其带菌状况。方法：应用＂小牛血清双抗培养基＂采样、增菌,巧克力色平板培养基分离培养并进行系统鉴定。结果：在一个50人的小群体中,在不同时间点,4次检测不可分群的新型脑膜炎奈瑟菌的带菌率分别为：12.00%、18.37%、34.04%、30.95%（P〈0.05）,在各次检出的所有群别脑膜炎奈瑟菌菌株中所占比例分别为：75.00%、39.13%、72.73%、81.25%（P〈0.05）。结论：在盐城市人群中可检出两类不可分群的新型脑膜炎奈瑟菌,不同季节均有较高的带菌率,且高温季节带菌率高于寒冷季节。     

河北省邯郸市脑膜炎奈瑟菌药物敏感性检测分析

目的了解邯郸市脑膜炎奈瑟菌的常用抗生素的耐药性,并指导流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)的防控工作以及临床用药。方法采用E-test浓度梯度法对邯郸市2009-2013年分离的80株脑膜炎奈瑟菌进行12种抗菌药物的敏感性检测。结果 80株流脑膜炎奈瑟对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟、氯霉素和美洛培南等抗生素均敏感,敏感率达100.00%;对环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率达95%以上,而对复方新诺明的耐药率达100.00%。并且对阿奇霉素、利福平和四环素都有不同程度的耐药。结论邯郸市分离得到的80株脑膜炎奈瑟菌对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟、氯霉素和美罗培南普遍敏感,而对复方新诺明、环丙沙星和左氧氟沙星有较高的耐药性。部分菌株对一些抗生素具有耐药性,仍需全面监测其耐药性。     

4例C群脑膜炎奈瑟氏菌感染的分离培养及药敏分析

目的:通过对4例C群脑膜炎奈瑟氏菌感染患者的分离培养、分群及药敏分析,提高我们对脑膜炎奈瑟氏菌感染的检测水平,为临床提供治疗依据。方法:2006年11月至2007年3月先后分离出的4株脑膜炎奈瑟氏菌的鉴定、分群及药敏分析。结果:青霉素S2/4;头孢曲松S4/4;环丙沙星S2/4;复方新诺明S0/4。结论:C群脑膜炎奈瑟氏菌感染者首先头孢曲松预防流脑。     

湖北省首例C群脑膜炎奈瑟菌致死亡病例报告

<正>1病例资料患者,女,25岁,湖北省黄石市商业服务人员,2009年2月5日在家出现畏寒、发热、乏力、双下肢疼痛半日,烦躁不安、伴有恶心、呕吐,少许咳嗽,无头昏、头痛症状,在家未治疗,2009     

血液中脑膜炎奈瑟菌的分离鉴定药敏试验及临床分析

流脑至今仍是世界各国非常关注的一种常见的急性呼吸道传染病，其病原菌就是脑膜炎奈瑟菌。此菌经呼吸道进入机体，突破血脑屏障入侵颅脑，引起急性脑脊髓髭，甚至引发暴发性流行.据WHO最近报告，进入20世纪90年代后期，在非洲的一些国家内又出现了流脑新的周期流行，1996年至1998年共报告了265454例，病死率为10％～20％。此外，在冰岛、苏格兰和英格兰等地也报道过此病发病增多，并出现局部地区流行。除脑脊液外，此菌在血液中也时有发现，且不时出现于成人身上，傅萍就曾于2003年报道过一中年患者的血液中培养出一例A型脑膜炎奈瑟菌。笔者也于2005年3月通过血培养发现1例，现报告如下。     

脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NspA基因重组的构建和表达

目的 构建脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NspA基因重组子,实现其在大肠杆菌的高效表达.方法 提取脑膜炎奈瑟菌标准株基因组DNA,PCR扩增NspA基因,插入表达质粒载体pET-30c中,构建pET-NspA重组子,转化大肠杆菌BL21 (DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) 诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白,镍琼脂糖凝胶纯化NspA 融合蛋白.结果 获得了脑膜炎奈瑟菌NspA基因的表达重组子,得到NspA诱导表达蛋白并进行了初步纯化.结论 成功构建了脑膜炎奈瑟菌NspA基因的表达重组子,实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达,为研究该蛋白的免疫学性能、制备抗体和研制预防脑膜炎的疫苗奠定了基础.     

东阳市健康人群脑膜炎奈瑟菌抗体水平和带菌调查

目的 了解东阳市健康人群脑膜炎奈瑟菌（Nm）抗体水平和带菌情况，为制定预防和控制流行性脑脊髓膜炎（流脑）的有效措施提供依据。方法 采用整群抽样方法，对三种不同人群（普通人群、密切接触人群、对照组人群）采集血清标本，应用酶联免疫吸附试验检测A、C群Nm抗体；采集咽拭子，采用增菌咽拭液标本，接种于双抗血平皿37℃24h培养，分离Nm。结果 调查的444例健康人群中，A群Nm抗体阳性率78．60％，GMT为1：42．26，C群Nm抗体阳性率21．17％，GMT为1：10．36，A群Nm抗体水平较高，而C群Nm抗体水平则较低。405例接种A群流脑疫苗者抗体阳性率（81．73％）和GMT（1：44．46）明显高于39例未接种者（阳性率和GMT分别为46．15％和1：16．63）（P〈0．01），与是否接种过A群流脑疫苗有关联性。Nm带菌率为1．73％，以C群和D群为主，密切接触人群的Nm带菌率明娃高于其他人群。结论 东阳市健康人群中对A群流脑具有较高的免疫力，而对C群流脑免疫力较低，一旦有传染源介入，极易引起暴发和流行，及时、有效地接种A＋C流脑多糖疫苗对预防和控制流脑显得十分重要。     

广东省东莞市脑膜炎奈瑟菌多位点序列分型研究

目的 对东莞市2004—2017年分离的41株脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis,Nm）进行基因分型研究,了解菌株间的遗传进化关系。方法 采用多位点序列分型（MLST）技术、进化分析软件BioNumerics 7.5及聚类分析软件eBURST V3对菌株进行核酸序列分析。结果 41株脑膜炎奈瑟菌分为A、B、C、W135四个群,其中1株A群、9株B群、23株C群、8株W135群。共有11个不同STs,分别属于ST-4821、ST-11、ST-5、ST-41/44克隆群及4个无序列分类（UA）,另有1株B群及1株C群菌株无法得到ST型。其中ST-4821 Complex及ST-11 Complex为主要克隆群,分别占61.54%、23.08%。不同血清群其STs/ST-Complex 有明显不同：C群菌株以ST-4821 Complex为主,有 ST-4821、ST-4831、ST-4833、ST-5798型,其中ST-4821型有3种基因序列;W135群全为ST-11 Complex,有ST-11和ST-5412型,ST-11集中在2015年分离出的菌株,均同源;A群仅有1株ST-5型;B群较分散。eBURST V3 聚类分析发现,东莞市ST-11 Complex基因型相对稳定,ST-4821Complex 基因型已具遗传多样性。结论 东莞市Nm 分子型具有基因多样性,以C群（ST-4821/ST-4821 Complex）和W135群（ST-11/ST-11 Complex）两大克隆群占绝对优势,B 群呈分散状态出现在不同的ST克隆群中,可能不同血清群之间已产生荚膜转换,提示B群出现基因重组进化特征。     

河北省首例W135群脑膜炎奈瑟菌感染病例调查

目的调查河北省首例W135群脑膜炎奈瑟菌（Neisseriameningitidis,Nm）感染病例。方法查阅病例病案,进行流行病学调查,采集病例及密切接触者标本进行实验室检测。结果患者发热、间断性呕吐、伴有颈项强直,无惊厥、无皮肤瘀点瘀斑;血白细胞计数8．1×109个／L;脑脊液外观混浊、蛋白质2．63g／L、白细胞2．78X106个几。脑脊液培养得到可疑Nm菌株。初步诊断为流脑。最终脑脊液标本经荧光定量PCR基因检测确诊为W135群Nm感染病例。患者经抗菌药物治疗已痊愈出院。结论河北省存在W135群Nm流行可能性,应警惕W135群流脑疫情暴发。荧光定量PCR方法具有快速、微量、可靠等优点,在流脑诊断方面实用价值较高。     

55株脑膜炎奈瑟菌对12种抗生素体外敏感性试验

目的了解脑膜炎奈瑟菌（Nm）的耐药性，为指导预防和临床用药。方法采用2006年美国临床试验室标准化研究所（CISI／NCCIS）推荐的纸片扩散法和最低抑菌浓度法测定深圳市55株Nm对抗生素的敏感性并进行分析。蛄果所有菌株对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟、美洛培南、米诺环素、氯霉素、利福平敏感，而全部菌株对复方新诺明耐药，32．7％（18／55）的菌株对环丙沙星耐药，38．2％（21／55）的菌株对萘啶酸耐药，有多重耐药现象。蛄论Nm菌株对磺胺类药物耐药情况严重。在临床和预防用药时，应慎重使用。     

深圳市2005～2006年健康人群脑膜炎奈瑟菌带菌调查

目的了解2005—2006年深圳市健康人群脑膜炎奈瑟菌（Nm）的带菌状况，为制定有效的防制方案提供依据。方法将健康人群分为0-、5-、10-、15-、25-、35-和45-岁以上7个年龄组，采集咽拭子，进行Nm培养分离和鉴定，用血清学诊断和PCR方法分群。结果2005—2006年深圳市健康人群Nm带菌率为4．4％（55／1255），其中B群49株（89．1％），c群4株（7．3％），29E2株（3．6％）。在两次流脑疫情中各分离到1株B群Nm。结论2005—2006年深圳市健康人群主要携带B群Nm，未检出A群Nm，A群流脑传染源较少。     

淋病奈瑟氏菌的鉴定及耐药性分析

淋病是性传播中发病率最高的一种疾病.淋病奈瑟氏菌是引起淋病的病原菌.可引起男性尿道炎、前列腺炎、附睾炎、膀胱炎、关节炎等;引起女性的尿道炎、阴道炎、子宫颈炎、附件炎;新生儿经产道可引起淋病性眼结膜炎.随着公共场所的增加,淋病奈瑟氏菌感染的途径越来越多,危害也越来越大,所以淋病奈瑟氏菌的鉴定以及抗生素耐药性分析,对临床治疗中抗生素的选择是十分重要的.我们将临床分离到淋病奈瑟氏菌的286例标本,提出生化鉴定并对药敏结果进行了初步分析,总结如下:     

100株奈瑟氏菌呼吸道感染的分离及鉴定

奈瑟氏菌属细菌为上呼吸道正常寄居菌,当机体免疫力降低或由于病毒感染等其它原因造成局部病理变化时,则可引起此类细菌的感染和继发性感染,也称之为条件致病菌。我院以上呼吸道感染患者经多次痰培养为此类菌,占分离菌类90%以上或纯培养,并未分离出其它致病菌作为判断感染标准,为此特向临床提供参考报告。现将我院近三年由该类菌引起的上呼吸道感染患者痰培养结果分析报告如下:材料与方法1标本来源:上呼吸道感染患者连续三次痰培养均未检出其它致病菌,标本检出奈瑟氏菌属其中某一种菌占分离菌数90%以上或纯培养,将其菌种保留分析。2标本分离…     

一起由脑膜炎奈瑟氏菌引起流脑疫情调查

2006年3月14日洮南市瓦房中学发生了一起流恼疫情，接到报告后洮南市和白城市疾控中心有关人员立即到达现场，进行流行病学调查和采样。现报道如下。