整合子系统与细菌多重耐药研究进展

细菌的多重耐药已成为临床治疗的难题，整合子是携带编码抗生素耐药基因盒的DNA片断，在细菌获得和传播耐药基因方面起着重要作用。本文就整合子及其基因盒的分类、分布、结构、来源、整合子对基因盒的捕获表达、整合子与细菌的多重耐药性关系及多重耐药菌感染的治疗等作一阐述。     

基因盒-整合子系统介导细菌多重耐药的研究进展

基因盒-整合子系统是一种可移动基因元件，可捕获表达耐药基因，并通过质粒或转座子在细菌中水平传播。现就整合子的发现、结构、分类；整合子对基因盒的捕获、表达；整合子与细菌耐药性的关系以及整合子的检测等方面进行综述。     

细菌整合子研究进展

整合子是近年来在细菌中发现的一种可移动性基因元件，通过位点特异性重组捕获并表达外源性基因盒，是导致耐药基因在细菌间水平播散的重要原因。本文就整合子的发现、结构、分类；基因盒的结构、来源；整合子对基因盒的捕获、剪切与表达；整合子与细菌耐药性的关系以及整合子的检测等方面进行综述。     

整合子与铜绿假单胞菌多重耐药性研究进展

铜绿假单胞菌（PA）多重耐药性是临床抗感染治疗的难点，以往的研究多注重PA的天然耐药机制，如外膜渗透性降低及泵出机制。近年来，在PA中发现了多种β-内酰胺酶，如广谱酶中的PSE-1。SHV-1．超广谱酶中的VEB-1。对碳青霉烯类抗生紊（如亚胺培南）耐受的金属β-内酰胺酶。但上述研究只局限于细菌的单一耐药机制。不能解释为什么没有接触过抗生素的病原菌也会出现对抗生紊的多重耐药。基因盒一整合子系统是细菌基因组中可移动的基因克隆和表达单位，能携带位点特异性重组系统组分，形成多种基因的组合、排列，对细菌及质粒基因组的进化具有重要意义。并且通常涉及到抗生素的耐药基因。与细菌产生多重耐药和耐药基因的水平传播密切相关。目前发现，细菌整合子携带的耐药基因有70余种，整合子作为一个移动遗传元件，通过质粒、转座子在细菌同种或不同种属间进行基因水平转移。使细菌的耐药性在病原菌中广泛传播。整合子结构是国际上研究细菌多重耐药机制、监测细菌耐药性播散趋势的热点。     

新型细菌耐药元件——整合子系统

已有证据表明整合子系统是微生物中主要的耐药机制,由其介导的细菌耐药是细菌发生水平基因转移和产生耐药机制的主要的途径。目前知道的整合子可分为两类:传统的整合子和超级整合子;前者的基因盒可编码一种或多种耐抗生素和消毒剂,存在于转座子、质粒和细菌染色体;而后者的基因盒编码了很多不同的功能,它们只在细菌的染色体上存在,有的可以同时携带一百多个基因盒;目前只在特定菌株中发现超级整合子。研究表明,整合子上的基因盒可能最初都来之于超级整合子。本文就整合子的结构、分布、起源及它对基因进化产生的影响等几个方面的研究进展进行讨论。     

细菌耐药机制——整合子系统研究进展

在探讨细菌耐药机制的研究中,用基因突变和耐药性质粒介导细菌耐药性来解释似乎不够完全,1989年,Stokes和Hall首次提出了一个与耐药基因水平传播有关的新的可移动基因元件:整合子(integion,In)。在革兰阴性菌的多重耐药中,整合子是耐药性迅速发展的主要原因[1]。本文对整合子系     

细菌演化的天然工具——超级整合子

已有证据表明整合子是细菌发生水平基因转移和产生耐药机制的主要因素。目前知道的整合子可分为两类：多重抗性整合子和超级整合子。多重抗性整合子基因盒可编码一种或多种耐抗生素和消毒剂基因。存在于转座子、质粒和细菌染色体；超级整合子有的可以同时携带数百个基因盘，可以编码很多不同的功能基因，它们只在细菌的染色体上存在，目前只在特定菌株中发现超级整合子。研究表明，整合子上的基因盒可能最初都来之于超级整合子。本文就超级整合子的结构、分布、起源及它对基因进化产生的影响等几个方面的研究进展进行讨论。     

水生细菌耐药性的遗传机制

水产养殖中抗生素的过度使用,导致耐药细菌以及多重耐药细菌大量出现,极大限制了我国水产养殖业的发展.本文根据水体特殊环境,针对抗生素进入水体后降解缓慢使水生细菌更容易产生耐药性的特点,从染色体介导的耐药性、质粒介导的耐药性、转座子介导的耐药性、整合子和基因盒介导的耐药性、插入序列共同区(ISCR)介导的耐药性5个方面对水生细菌产生耐药的遗传机制进行介绍,有助于正确使用抗生素,减少抗生素耐药基因的传播,对新抗生素药物的研发有一定的指导意义.本文同时指出ISCR因子具有强大的系统功能,尤其是ISCR1、ISCR2在水生细菌耐药性方面的介导作用,值得关注,不容忽视.     

泌尿系感染产ESBLs肺炎克伯菌株的基因型检测

整合子与基因盒是细菌基因组中可移动的遗传物质,是细菌的天然克隆与表达,携带位点特异性重组系统组分,可将许多耐药基因盒整合在一起,从而形成细菌的多重耐药性[1]。产ESBLs的肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae Kpn)的耐     

肺炎克雷伯菌ESBLs基因型与Ⅰ类整合子的相关性研究

整合子与基因盒是细菌基因组中可移动的遗传物质,是细菌的天然克隆与表达,携带位点特异性重组系统组分,可将许多耐药基因盒整合在一起,从而形成细菌的多重耐药性[1]。产ESBLs的肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae Kpn)的耐     

定量分析铜绿假单胞菌第一类整合酶基因的表达

目的整合于是具有整合和表达外来耐药性基因盒能力的基因元件。在细菌耐药性基因的积累和传递中起重要作用。本研究通过定量分析第一类整合子整合酶基因（intI1）在细菌不同生存状态的表达水平，探讨整合子的作用机制。方法培养和提取两株第一类整合子阳性铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌、被膜脱落菌等三种生长状态的总RNA，采用竞争RT-PCR方法定量检测菌体在以上三种状态下intI1 mRNA的表达水平。结果铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌和被膜脱落菌都有intI1 mRNA表达；两株菌在三种状态下intI1 mRNA的表达量不同，其中生物被膜菌表达最高，被膜脱落菌次之，液相培养菌最低；生物被膜菌intI1 mRNA的量较液相培养物高约15倍，较被膜脱落菌高约4倍。结论铜绿假单胞菌intI1在生物被膜中mRNA表达上调，随着菌体从被膜脱落以及菌体持续的液相培养intI1表达下调。提示整合子在生物被膜菌中可进行活跃的基因盒的捕获、移动和积累。有利于细菌耐药性的提高及扩散。     

Ⅰ类整合子介导大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药机制的初步研究

目的了解临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中I类整合子的分布情况,探讨整合子与细菌耐药之间的关系。方法琼脂平皿稀释法进行药敏试验;双纸片法筛选出产ESBLs的菌株;运用PCR扩增、DNA测序及DNA序列比对等方法对其携带的I类整合子相关耐药基因进行分析。结果 36株大肠埃希菌与46株肺炎克雷伯菌对头孢克肟、头孢克洛、头孢氨苄、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢噻肟钠、阿莫西林纳/舒巴坦钠、氨苄西林钠/舒巴坦钠及头孢哌酮/舒巴坦钠等的耐药率分别为61%、86%、86%、50%、75%、64%、39%、47%、30%与65%、63%、78%、52%、67%、54%、48%、41%、28%;10株细菌检测出产ESBLs,其中大肠埃希菌4株,肺炎克雷伯菌6株,并全部检测出1类整合子,其整合子可变区的耐药基因排列顺序与GenBank登录号为NC010410的菌株达到100%相似,并且皆含有blaVEB-1耐药基因盒。结论Ⅰ类整合子及整合子相关基因盒在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中分布广泛,整合子在细菌耐药中发挥作用。     

第一类整合子整合酶基因intI1的定位分析

目的　整合子 ( integrons)介导的细菌耐药特性已成为研究细菌耐药机制的热点 ,在研究了来自正常人携带沙门氏菌中整合子的分布和特性的基础上 ,进一步探讨整合子的基因定位。方法　从已鉴定的整合子阳性菌株出发 ,分别提取其质粒和染色体 DNA,进行质粒的接合转移试验。对染色体 DNA进行限制性酶切 ,以第一类整合酶基因 int I1( DIG标记 )为探针 ,进行 Southern杂交。结果　 4株整合酶阳性菌株不存在含有第一类整合子的接合性质粒 ,确定 4株整合子阳性菌株的整合酶基因 int I1基因位于染色体上。结论　本文发现的整合子阳性菌株对耐药基因的捕获是通过染色体 DNA介导的。     

Possible role of integrase gene polymerase chain reaction as an epidemiological marker: study of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii isolated from nosocomial infections

Eighty-six strains of Acinetobacter baumannii from India and Nepal were investigated for the presence of integrons in relation to multiple drug resistance by integrase gene polymerase chain reaction (PCR). Integrons were found to be present at a rate of 43.02% (37/86). Integrons were significantly correlated with multidrug resistance to several antibiotics. Class 1 integrons were detected in 81.1% of integron-positive strains, whilst 18.9% were found to be positive for class 2 integrons. The majority of class 2 integrons (71%) were encountered in strains isolated from post-operative wards of both countries. The highest integron carriage in isolates of A. baumannii (63.6%) was observed in 2005. Hence, it is likely that integrons play an important role in antibiotic resistance and possibly indicate epidemic behaviour of A. baumannii. Integrase gene PCR may be used as routine screening and identification for the surveillance of clinical isolates of A. baumannii with epidemic potential.     

100株住院儿童大肠埃希菌Ⅰ类整合子研究

目的:了解Ⅰ类整合子在住院儿童分离大肠埃希菌中分布流行情况。方法:根据NCCLS推荐的纸片扩散法进行药敏试验;PCR扩增临床大肠埃希菌Ⅰ类整合子整合酶基因和可变区基因盒。结果:患者整合酶检出率68%,Ⅰ类整合子基因盒检出率为65%。Ⅰ类整合子的大小约为772 bp～2360 bp,100株细菌各含1～2个Ⅰ类整合子,整合子中最常见的基因盒排列为dfrA17+aadA5和dfrA12+aadA2。结论:Ⅰ类整合子在多重耐药大肠埃希菌中广泛流行,是介导细菌多重耐药性的重要分子机制,应加强基因水平耐药监测。     

辽宁地区沙门菌整合子与耐药相关性研究

摘要：目的 及时掌握辽宁地区沙门菌整合子的分布以及对常用抗菌药物的耐药情况,获取沙门菌整合子与耐药性的相关性,从而为临床用药及治疗提供指导。方法 本文对来源于食品以及病患的149株沙门菌,利用PCR扩增的方法,进行整合子类别的筛选,并将扩增的整合子基因盒进行基因测序,同时通过药敏板测定(耐药性实验)对沙门菌与15种临床常用抗菌药物的耐药相关性进行研究。结果 149株沙门菌中未发现第II类、第III类整合子,检出第I类整合子的菌株50株,I类整合子阳性率为33.6%。50株整合子阳性菌株中25株携带耐药基因盒,片段范围从1500~1800 bp。测序结果表明,其中22株整合子携带dfrA17-aadA5基因盒,2株携带dfrA12-aadA2基因盒,1株首次检出罕见耐药基因盒linG。根据整合子携带情况不同,对15种抗菌药物的耐药率进行对比分析,结果显示整合子阳性菌对9种抗菌药物的耐药率显著高于整合子阴性菌(P<0.01),分别为氨苄西林、四环素、氯霉素、头孢噻肟、头孢唑林、庆大霉素、复方磺胺甲恶唑、阿奇霉素和环丙沙星。辽宁地区沙门菌多重耐药率达50.3%。结论 I类整合子在沙门菌中分布广泛,抗性基因表型与耐药结果相一致,整合子的携带与沙门菌多重耐药率高度相关。沙门菌对亚胺培南和头孢西丁保持高敏感率,可以用于对常规抗菌药物耐药的沙门菌的治疗。     

Antibiotic resistance in gram-negative bacteria: the role of gene cassettes and integrons.

Resistance of gram-negative organisms to antibiotics such as beta-lactams, aminoglycosides, trimethoprim and chloramphenicol is caused by many different acquired genes, and a substantial proportion of these are part of small mobile elements known as gene cassettes. A gene cassette consists of the gene and a downstream sequence, known as a 59-base element (59-be), that acts as a specific recombination site. Gene cassettes can move into or out of a specific receptor site (attl site) in a companion element called an integron, and integration or excision of the cassettes is catalysed by a site-specific recombinase (Intl) that is encoded by the integron. At present count there are 40 different cassette-associated resistance genes and three distinct classes of integron, each encoding a distinct Intl integrase. The same cassettes are found in all three classes of integron, indicating that cassettes can move freely between different integrons. Integrons belonging to class I often contain a further antibiotic resistance gene, sull, conferring resistance to sulphonamides. The sull gene is found in a conserved region (3'-CS) that is not present in all members of this class. Class I integrons of the sull type are most prevalent in clinical isolates and have been found in many different organisms. Even though most of them are defective transposon derivatives, having lost at least one of the transposition genes, they are none the less translocatable and consequently found in many different locations. The transposon Tn7 is the best known representative of class 2 integrons, and Tn7 and relatives are also found in many different species.