应用间断流动式血细胞分离机采集外周血造血干细胞的效果分析

目的:为寻找采集外周血造血干细胞更合适的手段,探讨间断流动式血细胞分离机采集外周血造血干细胞的效果。方法:选择中山大学第五附属医院血液风湿科2004-2006年12例行外周血造血干细胞移植住院患者。①实验对象:供者5例,男1例,女4例,一般状况良好,与患者关系为同胞妹妹3例,同胞弟弟1例,同胞姐姐1例;患者7例,男3例,女4例,23～62岁,7例为自体移植,5例为异基因移植。血液系统疾病患者9例(非霍奇淋巴瘤3例,急性淋巴细胞白血病2例,急性髓细胞白血病2例,慢性粒细胞白血病1例,骨髓增生异常综合征1例);自身免疫性疾病3例(重型系统性红斑狼疮2例,难治复发性类风湿关节炎合并干燥综合征1例)。②实验过程:每位供/患者均知情同意并签署知情同意书。对于自体患者,根据患者的疾病类型采取不同的干细胞动员化疗方案,联合化疗后7～10d,待白细胞下降至最低点,一般为≤1.0×109 L-1时,给予粒细胞集落刺激因子5μg/kg皮下注射,白细胞升至3.0×109 L-1时开始采集;对于allo-PBSCT供者直接给予粒细胞集落刺激因子5μg/kg,皮下注射,1次/d,共5d,同时应用流式细胞仪检测CD34 细胞数,至白细胞升至≥20.0×109 L-1或当CD34 细胞升高>20个/μL时采用增强型多功能血细胞分离机PBSC程序卡采集健康供者和患者外周血造血干细胞。③实验评估:分析采集效率、血液学参数、不良事件发生率、以及供、受者ABO血型不合的患者回输干细胞溶血反应等情况。结果:12例供者、患者均进入结果分析。①共进行了24次采集,其中1次采集1例,2次采集7例,3次采集3例,平均循环次数(25±5)次,采集时间(228±32)min,处理血量(7234±1205)mL,复方枸橼酸钠溶液用量为(623±96)mL,干细胞收集量为(102±21)mL,CD34 细胞采集效率为(54.3±30.7)%,细胞计数示白细胞为(156±34)×109 L-1,单个核细胞为(79.7±13.2)×109 L-1,流式细胞仪检测CD34 细胞为(10.30±4.38)×106/kg受者体质量。②不良反应轻微,24次采集过程中出现不良反应6次均为枸橼酸盐所致低钙血症反应。血红蛋白和血小板与采集前相比分别下降9.36%和11.10%。供、受者ABO血型不合的3例患者在输注造血干细胞悬液后均未出现溶血反应。③12例均获造血功能重建,无移植相关死亡。结论:用间断流动式血细胞分离机采集外周血造血干细胞效果良好,不良反应轻微,能有效的减少被采集者红细胞、血小板的丢失,对供、受者ABO血型不合者不需去除造血干细胞悬液中的红细胞,值得临床应用。     

应用血细胞分离机采集ABO血型不合供者的外周血干细胞

为了探索应用血细胞分离机采集ABO血型主要和(或)次要不合的供者外周血造血干细胞的得率及不去除红细胞或血浆用于干细胞移植的可行性,采用CobeSpectra(Version6.1)血细胞分离机的自动干细胞采集程序对9例异基因外周血造血干细胞供者进行采集,其中ABO血型主要不合4例,次要不合2例,主要次要均不合3例。对ABO血型主要不合及主要、次要均不合的供者每循环收集的细胞成分和血浆的量分别作相应调整。输注前从产品袋中留取标本检查有核细胞计数、单个核细胞比例、CD34 细胞计数和细胞的成活率(台盼蓝拒染率)。输入时对受者采取一系列保护肾功能的措施。液体总量控制在4000毫升/日。结果显示:除1例因供者体重远大于受者经1次采集即可满足移植所需细胞量外,其余供者均经2次采集收集到足够的有核细胞直接回输给受者或冰冻保存备用。共采集PBSC17次,平均每次获得有核细胞3.77×1010个,单个核细胞占97%-99%。CD34 细胞数平均为8.62×106/kg,细胞拒染率均为100%。ABO血型主要不合及主要、次要均不合的供者每次采集的PBSC产品中含压积红细胞8-10ml,ABO血型次要不合供者每次采集的PBSC产品中含血浆80-120ml,不去除红细胞及血浆,直接回输给受者。无1例出现溶血性输血反应,造血功能均获得重建。结论:采用CobeSpectra血细     

应用CS-3000 Plus血细胞分离机采集血型不合供者的外周血干细胞的临床研究

[目的]探讨应用CS-3000 Plus血细胞分离机采集ABO及Rh血型不合的供者外周血干细胞(PBSC)的得率及不去除红细胞或血浆用于异基因外周血干细胞移植的可行性.[方法]采用CS-3000 Plus血细胞分离机的自动干细胞采集程序对14例异基因外周血干细胞供者进行采集,其中ABO血型主要不合5例,次要不合6例,主要次要均不合2例,Rh血型主要不合1例.供者循环收集的细胞成分按供者外周血的红细胞比容(HCT)和单个核细胞(MNC)计数作相应调整.输注前从产品袋中留取标本检查有核细胞计数、MNC比例、CD34 细胞计数和台盼蓝拒染率.回输时对受者采取使用糖皮质激素、水化、碱化、利尿等保护措施.[结果]供者均经2～3次采集收集到足够的有核细胞直接回输给受者.共采集PBSC 30次,平均每次获得有核细胞5.65×1010,单个核细胞占96%～98%.CD34 细胞数平均为6.52×106/kg,细胞拒染率均为100%.ABO血型主要不合、主要、次要均不合及Rh主要血型不合的供者每次采集的PBSC产品终体积均为50 ml,产品中含压积红细胞3～7 ml,ABO血型次要不合供者每次采集的PBSC产品中含血浆15～25 ml,不去除红细胞及血浆,直接回输给受者,无一例出现溶血性输血反应,造血均获得重建.[结论]采用CS-3000Plus血细胞分离机,通过调整参数采集血型不合供者的外周血干细胞,减少血型不合的红细胞,可以获得足够的干细胞数量并安全用于移植.     

ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集及移植效果研究

目的探讨应用CS-3000 Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者外周血造血干细胞的效率及不去除红细胞和/或血浆进行异基因外周血造血干细胞移植(PBSCT)的安全性。方法经G-CSF 5μg/(kg.d)动员的异基因外周血干细胞供者33名,应用CS-3000 Plus血细胞分离机的干细胞采集程序于动员后d 5采集,其中ABO血型主要不合12名,次要不合8名以及ABO血型相合13名。根据供者外周血的红细胞压积(Hct)和单个核细胞(MNC)计数,对分离机参数作相应调整。输注前从产品袋中留取干细胞,检测有核细胞数、MNC比例、CD34+细胞数、红细胞、血浆含量。单次处理循环血量(9 986±2 489)ml,抗凝剂用量(971±162)ml。供者采集前注射10%葡萄糖酸钙,以预防低钙反应。观察PBSC输注后受者的生命体征、尿液颜色及是否有溶血相关不良反应等。结果ABO血型主要不合组、次要不合组与ABO血型相合组采集物中的有核细胞数、CD34+细胞数、MNC比例无统计学差异(P>0.05),3组供者每次采集的PBSC产品终体积近60 ml,ABO主要不合组采集物中混入红细胞为(3.67—10.25)×1010/袋,ABO次要不合组采集物中血浆量为22—38 ml,不去除红细胞及血浆,直接回输给受者,均未出现溶血反应,所有患者造血功能均获得重建。结论应用CS-3000 Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者的外周血干细胞,通过调整分离机参数,减少ABO血型不合红细胞的混入,可以获得足够的干细胞数量并安全用于移植。     

ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集

目的研究ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集方法,探讨不去除红细胞和/或血浆进行造血干细胞移植的安全性。方法 29例异基因外周血干细胞移植供者与受者HLA配型为全相合或1～3位点不合,其中ABO主要不合13例,次要不合7例,ABO血型相合9例。采用CS-3000Plus血细胞分离机的干细胞采集程序对ABO血型不合供者的外周血造血干细胞进行采集,不去除红细胞和/或血浆,直接回输给受者。结果 ABO血型主要不合、次要不合及血型相合的供者每次采集的外周血干细胞(PBSC)产品终体积为(59.11±1.19)ml,单个核细胞(MNC)采集物、MNC比例、CD34+细胞、RBC含量三组间的差异无统计学意义。结论应用CS-3000Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者外周血造血干细胞,不仅对供者安全,而且采集产品中造血干细胞浓度较高,血型不合的红细胞污染较少,不需要去除红细胞和血浆,可安全地用于ABO血型不合的受者。     

ABO血型主要不合供者外周血干细胞单采中COM.TEC血细胞分离机的应用

背景:异基因外周血造血干细胞移植大约1/3是在ABO血型不合的供受者之间进行的.目的:探讨ABO血型主要不合供者外周血造血干细胞在不去除红细胞情况下应用COM.TEC血细胞分离机直接回输给受者的可行性.方法:27例HLA全相合同胞供者皮下注射粒细胞集落刺激因子5 μg/(kg?d),连续5 d干细胞动员,于第5天开始应用COM.TEC血细胞分离机进行外周血造血干细胞单采,每次总处理血量为3.0~3.5个供者全身血量.ABO相合供者按常规方法进行单采,主要不合供者采取动态调整白膜收集量和保持稳定充足的血流量以减少红细胞污染.结果与结论:27例供者中ABO主要不合供者11例,相合供者16例.主要不合组产品体积及红细胞内含量均显著低于相合组(P < 0.05),回输给受者均未出现急性溶血反应;2组单个核细胞及CD34+细胞计数差异无显著性意义(P > 0.05),受者均获造血重建,中性粒细胞及血小板重建时间相似(P > 0.05).提示应用COM.TEC血细胞分离机进行ABO主要不合供者外周血造血干细胞单采,可以保持稳定充足的血流量情况下通过动态调整白膜收集量参数,在不影响采集产品产量和质量的同时显著减少红细胞的污染,预防回输后受者的急性溶血反应.     

G-CSF动员供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后复发白血病的临床研究

目的观察重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后,白血病复发的有效性及安全性。方法对2009年7月至2011年2月该科20例异基因造血干细胞移植后复发的白血病患者,予以输注G-CSF动员后供者外周血单个核细胞。其中5例急性淋巴细胞白血病-CR2,8例急性髓系白血病-CR2,2例急性髓系白血病-CR3,3例急性混合细胞白血病,2例加速期慢性髓系白血病。在异基因造血干细胞移植后,半年内,20例患者均复发,予G-CSF动员后,供者外周血单个核细胞输注,每次输注细胞量按1×105/kg、2×105/kg、4×105/kg逐级增加,每次输注间隔4周。结果 12例患者再次完全缓解,8例患者未缓解。输注后,3例患者发生了Ⅰ~Ⅱ度急性移植物抗宿主病,12例患者发生了慢性移植物抗宿主病,5例未发生并发症,未观察到输注相关的全血细胞减少。结论 G-CSF动员供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后,白血病复发有较好的疗效,不良反应小,值得临床进一步推广。     

ABO血型主要不合供者外周血干细胞单采中COM.TEC血细胞分离机的应用

背景：异基因外周血造血干细胞移植大约1/3是在ABO血型不合的供受者之间进行的。目的：探讨ABO血型主要不合供者外周血造血干细胞在不去除红细胞情况下应用COM.TEC血细胞分离机直接回输给受者的可行性。方法：27例HLA全相合同胞供者皮下注射粒细胞集落刺激因子5μg/（kg.d）,连续5d干细胞动员,于第5天开始应用COM.TEC血细胞分离机进行外周血造血干细胞单采,每次总处理血量为3.0～3.5个供者全身血量。ABO相合供者按常规方法进行单采,主要不合供者采取动态调整白膜收集量和保持稳定充足的血流量以减少红细胞污染。结果与结论：27例供者中ABO主要不合供者11例,相合供者16例。主要不合组产品体积及红细胞内含量均显著低于相合组（P〈0.05）,回输给受者均未出现急性溶血反应;2组单个核细胞及CD34＋细胞计数差异无显著性意义（P〉0.05）,受者均获造血重建,中性粒细胞及血小板重建时间相似（P〉0.05）。提示应用COM.TEC血细胞分离机进行ABO主要不合供者外周血造血干细胞单采,可以保持稳定充足的血流量情况下通过动态调整白膜收集量参数,在不影响采集产品产量和质量的同时显著减少红细胞的污染,预防回输后受者的急性溶血反应。     

捐献外周血造血干细胞供者动员和采集护理

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员和外周血造血干细胞(PBSC)采集对供者的影响及相应的护理措施。方法:对21例异基因外周血造血干细胞供者采用G-CSF皮下注射5~6 d,使用COBE Spectra血细胞分离机采集外周血干细胞。做好对供者的动员和采集护理。结果:21例供者均顺利完成PBSC动员和采集,所有供者采集总量均达到受者移植细胞数要求。随访1~3个月供者均状况良好。结论:细致的护理可以使PBSC动员、采集期间和移植工作顺利完成。     

自动血细胞分析仪检测外周血造血祖细胞的方法学特点

背景:Sysmex XE-2100就是一种能通过幼稚细胞通道可以检测外周血中造血祖细胞较先进的全自动血细胞分析仪,由于该技术应用时间较短,临床上特别需要了解其检测造血祖细胞的方法学特点、检测性能及临床应用范围.目的:评价全自动血细胞分析仪检测外周血造血祖细胞方法学的特点,并探讨其临床应用.设计、时间及地点:对照观察实验,于2005-05/2006-10在中南大学湘雅二医院完成.对象:异基因外周血造血干细胞移植的健康供者5人,男4人,女1人,年龄20～28岁.急性淋巴白血病患者与非急性淋巴白血病患者各5例,其中男6例,女4例,平均26岁.住院待产孕妇10例,平均27岁.方法:采集动员前后健康供者、白血病患者外周血、采集物及孕妇脐血,采用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪检测造血祖细胞,同时应用流式细胞仪检测CD34 细胞.主要观察指标:①干细胞移植的健康供者和白血病患者动员后造血祖细胞和CD34 细胞的变化.②待产孕妇分娩时胎儿脐带血中造血祖细胞和CD34 细胞的比较.③高值、中值及低值样品中造血祖细胞检测的批内变异系数CV值.结果:动员后,外周血、采集物与脐带血中造血祖细胞与CD34 细胞均呈良好直线相关性(r > 0.77).高值、中值及低值样品中造血祖细胞检测的批内变异系数CV值均< 6.0%.在×106 L-1范围内计数造血祖细胞有极好的线性关系(r=0.995).动员过程中,健康供者于第4天造血祖细胞与CD34 细胞明显上升,于第5天同时达到高峰,但造血祖细胞较CD34 细胞变化幅度更大;白血病患者造血祖细胞与CD34 细胞亦同时上升,同时达到高峰.结论:Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪能快速高效地检测出外周血、脐血和采集物中造血祖细胞,对外周血造血干细胞最佳采集时机的快速判断、干细胞成功采集的预测和白血病患者造血功能恢复的观察等,具有良好的临床应用价值.