气流分散聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂的生物安全性*

背景：前期实验已经成功制备甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅（PMMA/SiO2）纳米复合材料，并证实其有良好的机械性能。 目的：进一步评价气流分散PMMA/SiO2纳米义齿树脂的生物安全性，为今后开展临床实验提供研究依据。 设计、时间及地点：随机分组设计，对比观察实验，于2006-09/2007-10在天津医科大学基础医学院微生物实验室及公共卫生学院毒理实验室完成。 材料：采用气流分散法，以纳米SiO2与甲基丙烯酸甲酯复合制备PMMA/SiO2纳米义齿树脂。 方法：参照IS07405-1997(E)标准，对气流分散PMMA/SiO2纳米义齿树脂材料进行细胞毒性实验、溶血实验、急性全身毒性实验、口腔黏膜刺激实验以及皮肤致敏实验，初步评价其生物安全性。 主要观察指标：MTT法测定细胞相对增殖率并评级；溶血实验测定溶血率；急性全身毒性实验观察小鼠一般状态及体质量变化；口腔黏膜刺激实验观察试件接触部位组织切片；皮肤致敏实验观察致敏区红斑及水肿反应。 结果：细胞毒性实验表明PMMA/SiO2纳米材料的细胞毒性为1级，显示极轻微的细胞毒性；溶血实验显示其溶血率小于5%；急性全身毒性实验和口腔黏膜刺激实验显示材料实际无毒、无明显黏膜刺激性；皮肤致敏实验显示无明显致敏性。 结论：气流分散PMMA/SiO2纳米义齿树脂具有良好的生物安全性。     

罗汉果对雄性小鼠骨髓微核和精子形态的影响

背景：对罗汉果的遗传毒性进行研究,可为其安全使用提供实验依据。 目的：观察罗汉果水提液对雄性小鼠骨髓细胞微核率和附睾精子畸形率的影响,了解其是否有遗传毒性。 方法：按罗汉果水提液最大使用剂量(3 g/mL)和最大灌胃容量(20 mL/kg)灌胃小鼠,观察罗汉果水提液的急性毒性。将雄性昆明小鼠随机分为5组,分别灌胃给予30,15,7.5 g/kg的罗汉果水煎液、蒸馏水,连续5 d;或腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺。于灌胃第5天,采用骨髓嗜多染红细胞微核试验计算小鼠的骨髓微核率。于首次灌胃后第35天,观察小鼠精子畸形率。 结果与结论：罗汉果水提液对昆明小鼠的经口急性毒性最大耐受剂量大于120 g/kg。罗汉果水提液30,15,7.5 g/kg灌胃后,小鼠的骨髓微核率、精子畸形率与正常小鼠无差异(P > 0.05),均明显低于环磷酰胺诱发的骨髓微核率和精子畸形率(P < 0.05)。说明罗汉果水提液对成年雄性小鼠无明显遗传毒性。     

两种镍铬烤瓷合金的致突变性观察★

摘要：实验对自制镍铬烤瓷合金和含铍镍铬合金的致突变性进行检测和比较。选取健康小白鼠64只，随机分为8组，即阴性对照组（生理盐水），阳性对照组（环磷酰胺，40 mg/kg ），自制镍铬烤瓷合金高剂量（0.769 g/L）、中剂量（0.390 g/L）、低剂量组（0.077 g/L）组，含铍镍铬合金高、中、低剂量组（剂量同镍铬烤瓷合金组），每组8只。采用腹腔注射给药（25 μL /g）。24 h后以同样剂量第2次注射,给药后6 h麻醉下处死采集骨髓。在油镜下用双盲法计数1 000个嗜多染红细胞的微核细胞数。结果两种样品之间及与阴性对照组相比骨髓细胞的微核率差异均无显著性 (P > 0.05)；样品组与阳性对照组数据相比差异均有显著性 (P < 0.000 1)；表明两种镍铬烤瓷合金均不具有明显致突变作用。可作为金属烤瓷冠的基底材料。     

金属加强丝与义齿基托修理后弯曲强度：不同数目影响的差异

背景：聚甲基丙烯酸甲酯长期以来作为义齿基托材料在牙科领域得到了广泛应用,然而义齿折裂是修复学至今尚未解决的难题。因此,如何增强义齿修理后的弯曲强度显得尤为重要。 目的：研究加入不同数目的金属加强丝对义齿基托修理后弯曲强度的影响。 方法：用聚甲基丙烯酸甲酯热凝树脂制作25个50 mm×30 mm×2.5 mm的长方体试件,将试件在万能试验机上压断,测得其弯曲强度。各组试件断面经预备后分别加入1~4根不锈钢丝,未加入钢丝组为对照组,并用自凝树脂修理裂缝,测定修理后试件的弯曲强度,计算强度恢复率。 结果与结论：各组试件修理后的弯曲强度均明显低于修理前(P < 0.01)。除加入1根钢丝组外,其余各组强度恢复率均高于对照组 (P < 0.05)。加入2,3,4根钢丝各组间强度恢复率比较,差异无显著性意义(P > 0.05)。结果证实加入2~4根金属加强丝可增强义齿基托修理后的弯曲强度。 关键词：金属加强丝;义齿修理;弯曲强度;聚甲基丙烯酸甲酯;口腔生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.08.042     

微核实验评价碳化硅的潜在致突变性

背景：自制碳化硅陶瓷应用于临床前对其安全性进行相应评价。 目的：通过微核实验检测自制碳化硅陶瓷对小鼠的致畸作用以评价其生物相容性。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-06/12在中国医科大学中心实验室完成。 材料：N1H纯系小鼠80只按性别，体质量随机分成8组，每组10只：碳化硅0.02，0.002，0.000 2 mL/kg组、纯钛浸提液0.02，0.002，0.000 2 mL/kg组，生理盐水对照组，75 mg/kg环磷酰胺阳性对照组。 方法：各组均一次性给药，24 h处死小鼠，抽取双侧股骨骨髓制备细胞悬液，推片二张，晾干、固定后浸入姬姆萨染液中染色。选择细胞完整,分散均匀,着色适当的区域在光学显微镜下计数。 主要观察指标：计数1 000个嗜多染红细胞的微核细胞数；嗜多染红细胞与正红细胞的比值。 结果：环磷酰胺对照组微核率高于其他组 (P < 0.01)。碳化硅陶瓷组和纯钛浸提液组微核率与生理盐水对照组比较，差异无显著性意义(P > 0.05)。碳化硅陶瓷组与纯钛浸提液组比较差异无显著性意义，嗜多染红细胞与正红细胞的比值均≥1。 结论：自制碳化硅对小鼠无致畸作用，有较良好的生物相容性。     

载微球骨水泥的体内生物相容性

背景：课题组在前期实验中已经证实了载聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物微球骨水泥具有较高的强度,良好的注射性能和体外可降解性能,但其生物相容性如何还不清楚。 目的：选择急性毒性试验,溶血试验,微核试验等检测载微球骨水泥的生物相容性。 方法：首先合成柱状骨水泥和包裹微球骨水泥,取1 g材料加入到100 mL的磷酸缓冲液中无菌条件下浸泡3 d后提取的上清液即为骨水泥浸提液和微球骨水泥浸提液。以急性毒性实验、溶血试验、微核试验和热原试验来考察材料的体内毒性。 结果与结论: 急性毒性实验结果显示,骨水泥浸提液组和微球骨水泥浸提液组(除高浓度微球骨水泥组外)与阴性对照组均无明显差异,说明该材料浸提液没有对小鼠产生明显的毒性反应。溶血实验显示,各组材料对健康人血的溶血率均未超过5%。微核实验结果显示除0.4 mL骨水泥组和0.4 mL微球骨水泥组的微核率与阴性对照组差异有显著性意义,其余各组差异无显著性意义,说明该微球骨水泥的浸提液无明显细胞遗传毒性作用,但是高浓度和高剂量组的微球骨水泥仍有较低的毒性作用,主要表现为溶血率和微核率的提高,因此在应用时要适当控制微球骨水泥的剂量和浓度。热原试验显示,注射后家兔平均体温升高为0.06 ℃,小于1.4 ℃,说明材料无致热作用。 关键词：聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物;骨水泥;微球;体内生物相容性;生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.007     

骨髓间充质干细胞下调类风湿性关节炎小鼠脾脏单个核细胞TLR8及TLR9的表达

背景：间充质干细胞能够缓解类风湿性关节炎小鼠的症状，但是其机制还不清楚。 目的：观察骨髓间充质干细胞对类风湿性关节炎小鼠脾脏单个核细胞表达TLR8及TLR9等的影响。 方法：DBA/1J小鼠随机分3组，非造模组不造模，阳性对照组和实验组制备Ⅱ型胶原诱导的小鼠类风湿性关节炎模型。实验组尾静脉注射移植大鼠骨髓间充质干细胞。 结果与结论：与阳性对照组比较，实验组小鼠关节直径明显减小，关节炎症细胞浸润程度明显降低，但比非造模组略高；小鼠脾脏单个核细胞表达TLR8、TLR9和白细胞介素1β的水平较阳性对照组明显降低(P < 0.01或P < 0.05)；阳性对照组与实验组中TLR8与TLR9的表达均无明显相关性(P > 0.05)。说明骨髓间充质干细胞下调了类风湿关节炎小鼠脾脏单个核细胞表达TLR8及TLR9的水平，但TLR8与TLR9的表达无相关性。     

纯钛金属与聚甲基丙烯酸甲酯树脂材料基托全口义齿修复后的语音学评价

摘要 背景：有研究表明口腔中修复体的范围、厚度和形态直接影响患者的语音功能,而纯钛金属基托和树脂基托由于材料厚度的不同对语音功能的影响有所不同。 目的：通过分析配戴纯钛金属基托与聚甲基丙烯酸甲酯树脂基托全口义齿同一患者的计算机语音学参数,探讨上颌义齿基托对语音功能的影响。 方法：用计算机语音分析系统及语音分析软件PRAAT4.4.34对同一患者分别配戴纯钛金属基托义齿、聚甲基丙烯酸甲酯树脂基托义齿提取辅音/x,sh,r,zh,ch,j ,q/第一强频集中区频率值、辅音/g,k,zh,ch,j,q/嗓音起始时间值进行统计学分析,并对两组舌根塞音三维语谱图进行观察比较。 结果与结论：聚甲基丙烯酸甲酯树脂基托全口义齿由于基托厚度较大而在一定程度上不利于患者语音功能的恢复,选择纯钛金属基托义齿,减少舌腭区基托厚度更有利于患者语音功能的恢复。结果提示用计算机语音分析系统提取分析第一强频集中区频率值和嗓音起始时间等语音学参数对患者配戴全口义齿后语音清晰度分析具有客观性,上颌义齿舌腭区基托材料厚度越小,越有利于患者语音功能的恢复。 关键词：全口义齿;无牙颌;辅音;语音学;钛;聚甲基丙烯酸甲酯;生物材料     

小鼠胎盘间充质干细胞移植对造血系统自然衰老的影响*

背景：造血系统作为人体重要组成部分,随着年龄的增长会出现功能不断衰退。 目的：观察小鼠胎盘间充质干细胞对小鼠造血系统自然衰老的延缓作用。 方法：取孕13.5 d Balb/c小鼠胎盘,制备胎盘间充质干细胞。6月龄Balb/c小鼠48只随机分均为细胞移植组和对照组。细胞移植组尾静脉输注胎盘间充质干细胞,每月1次,共6次;对照组输注生理盐水。第3个月进行外周血象、骨髓有核细胞计数、成纤维细胞集落培养、造血祖细胞集落培养和外源性脾集落形成单位计数检测;第6个月时增加骨髓切片观察、骨髓细胞重建造血能力测定。 结果与结论：细胞移植组小鼠一般情况优于对照组;干预第3个月,细胞移植组的骨髓有核细胞计数、巨噬系祖细胞、巨核系祖细胞多于对照组,其他指标无明显差别;干预第6个月,除外周血象仍无差别外,其他的上述指标均明显高于对照组;观察期内两组的上述指标均随时间延长呈下降趋势,但细胞移植组下降速度明显慢于对照组,差异有显著性意义(P < 0.05)。组织学观察发现,细胞移植组骨髓造血组织较对照组丰富,而对照组骨髓脂肪化显著增加;实验还发现细胞移植组骨髓细胞的造血重建能力明显优于对照组。结果提示,小鼠胎盘间充质干细胞能够延缓小鼠造血系统的衰退。     

小鼠脂肪源间充质干细胞在重型再生障碍性贫血中的应用

背景：骨髓间充质干细胞联合造血干细胞移植是最有希望解决造血重建缓慢的策略之一，但临床实施中，抽取骨髓进而分离、扩增间充质干细胞尚不能为大部分健康供者所接受。 目的：探讨小鼠脂肪源间充质干细胞对异基因重型再生障碍性贫血模型鼠造血功能的影响。 设计、时间及地点：细胞学体内实验，于2007-05/11在河南省肿瘤医院中心实验室完成。 材料：雄性6~8周龄BALB/c（H-2Kd）小鼠20只，雌性7~8周龄C57BL/6（H-2Kb）小鼠50只，均购于河南省实验动物中心。 方法：贴壁法体外分离培养20只雄性BALB/c小鼠脂肪源间充质干细胞；反复吹打20只雌性C57BL/6（H-2Kb）小鼠骨髓细胞，加入EDTA-NH4Cl液去除红细胞，即为骨髓有核细胞。剩余30只雌性C57BL/6（H-2Kb）小鼠均给予一次全身3.0 Gy 60Co-γ照射，照射后第4，5，6天皮下注射环磷酰胺及氯霉素，建立重型再生障碍性贫血模型。模型鼠随机分为3组，联合组经尾静脉输入骨髓有核细胞2×107个+脂肪源间充质干细胞3×106个，骨髓有核细胞组单纯输入骨髓有核细胞2×107个，对照组输入生理盐水0.2 mL，10只/组。 主要观察指标：定期检测外周血和股骨有核细胞数以及巨噬细胞/粒细胞集落形成单位数的变化，PCR法鉴定Y染色体，流式细胞仪检测移植小鼠骨髓及脾脏CD3和H-2Kd阳性表达情况。 结果：细胞移植后第2周，联合组外周血有核细胞数、股骨有核细胞数、巨噬细胞/粒细胞集落形成单位数均明显高于骨髓有核细胞组（P < 0.05），且随移植时间的延长，各种细胞数量逐渐恢复（P < 0.05）。细胞移植后第4周（即造血恢复期），联合组外周血可特异性地扩增Y染色体的SRY基因片段，移植小鼠骨髓及脾脏中CD3和H-2Kd双阳性细胞达6.66%，提示在受体小鼠体内有供体细胞的存在。 结论：脂肪源间充质干细胞能够重建重型再生障碍性贫血小鼠的造血功能，促进小鼠造血系统的恢复。