大鼠垂体前叶GAP-43样阳性神经纤维与腺细胞之间的关系

目的:在大鼠双侧肾上腺切除后,探讨垂体前叶内大量芽生的生长相关蛋白-43(GAP-43)样阳性(LI)神经纤维与各腺细胞之间的关系. 方法:将成年雄性SD大鼠15只随机分为5组(n=3),手术切除大鼠双侧肾上腺,1 wk后取垂体前叶标本分别进行抗GAP-43与抗促肾上腺皮质激素(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)、黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、生长激素(GH)抗体的免疫组织化学双标染色,观察GAP-43-LI神经纤维与各腺细胞之间的关系. 结果:大鼠双侧肾上腺切除后,垂体前叶内GAP-43-LI神经纤维表达数量显著增加,提示垂体前叶内神经纤维正在进行活跃的芽生及突触改建,并与含ACTH、PRL、GH的细胞密切相关. 结论:垂体前叶内芽生的神经纤维与腺细胞密切相关,可能具有一定的特异性,为哺乳动物垂体前叶神经-体液双重调节假说提供了又一论据.     

离体培养的大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞中松弛素样因子mRNA的表达及调节

目的:观察松弛素样因子(relaxin-like factor, RLF)mRNA在离体培养的大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞中的表达,初步探讨影响其表达调控的可能机制.方法:离体培养来自健康Wistar大鼠卵巢的颗粒细胞和黄体细胞,分别加入血小板活化因子(PAF)、促性腺激素(FSH或hCG)、腺苷酸环化酶激动剂(Forscolin)、蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波酯(PMA),以培养液作为对照.采用RT-PCR方法观察各组RLF mRNA的表达,每组设5个复孔.结果:离体培养的大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞均有RLF mRNA的表达,颗粒细胞中加入PAF、FSH、Forscolin、PMA组RLF mRNA的表达均较对照组增强(P＜0.05或P＜0.01);黄体细胞中加入PAF、Forscolin、PMA组RLF mRNA的表达均较对照组增强(P＜0.05),但加入hCG组无明显变化.结论:大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞RLF mRNA的表达受PAF的正性调节,蛋白激酶A(PKA)和PKC信号通路的激活可能促进RLF mRNA的表达.     

二仙汤及其拆方对雌性大鼠垂体前叶细胞黄体生成素和卵泡刺激素的影响

目的:从细胞生物学水平观察二仙汤及其拆方和部分提取物对原代培养的雌性大鼠垂体前叶细胞的作用。方法:在原代培养的大鼠垂体前叶细胞中直接加入二仙汤全方或其拆方及部分提取物,用放射免疫法测定培养液中黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)的含量。结果:二仙汤全方及其拆方滋阴泻火方和调理冲任方直接加药能促进大鼠垂体前叶细胞LH和FSH的分泌;温肾益精方也有一定促进趋势。二甲亚砜作为淫羊藿苷和仙茅苷的溶剂对实验结果有一定影响。结论:二仙汤全方及其拆方滋阴泻火方和调理冲任方对垂体前叶细胞LH和FSH的分泌有促进作用。     

雌性Wistar-Furth大鼠动情期间垂体前叶内源性neuregulin-1的表达变化(英文)

目的研究雌性Wistar-Furth大鼠发情期不同时段垂体前叶neuregulin-1(Nrg1)的表达变化。方法采用RT-PCR观察雌性Wistar-Furth大鼠不同发情期间垂体Nrg1亚型及其内源受体ErbB-2及ErbB-4mRNA表达变化;应用Western blotting检测蛋白质水平垂体前叶及后叶Nrg1亚型表达变化。采用免疫荧光染色明确表达Nrg1的垂体细胞,并观察垂体前叶Nrg1及磷酸化ErbB-4的分布。此外,研究雄性恒河猴垂体前叶Nrg1及ErbB-4共表达。结果结果显示在大鼠动情周期Ⅰ(E1)和动情周期Ⅱ(E2),部分Nrg1亚型,尤其是Ⅲ型Nrg1mRNA表达水平较高,与E1andE2期垂体前叶Western blotting结果一致。免疫荧光染色表明促性腺激素细胞是垂体前叶Nrg1的主要来源。E1andE2期垂体前叶Nrg1分布广泛,同时伴有ErbB-4受体磷酸化激活。此外,可观察到雄性恒河猴垂体前叶部分Nrg1与ErbB-4毗邻分布。结论雌性Wistar-Furth大鼠垂体前叶有多种Nrg1亚型表达以及Nrg1/ErbB-4信号通路的存在,且与动情周期相关。在雄性非人灵长类垂体前叶存在以Nrg1/ErbB-4为基础的邻分泌机制。     

低密度脂蛋白对肾小球系膜细胞、TGF-β和FN mRNA表达的影响

目的:观察低密度脂蛋白(LDL)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(MsC)生长及转化生长因子β(TGF-β)和纤维连接蛋白(FN)基因表达的影响.方法:体外培养的MsC培养液中加入LDL共同孵育,采用3H-TdR渗入法检测MsC增殖情况;应用Northern blot检测TGF-β mRNA和FN mRNA的表达;应用斑点杂交法检测抗TGF-β抗体对FN mRNA表达的影响.结果:(1) LDL刺激MsC在小剂量以剂量依赖(50～150 μg/ml)和时间依赖(24～72 h)促进增殖(P<0.05),大剂量(200 μg/ml)抑制增殖(P<0.05).(2) Northern blot显示LDL刺激MsC增殖,其TGF-β和FN mRNA表达以剂量和时间依赖方式增强.TGF-β mRNA表达较FN mRNA提前24 h.(3) Dot blot 显示,加入抗TGF-β抗体后,FN mRNA的表达较未加前明显减弱.结论:LDL不仅可刺激肾小球MsC的增殖,并且增加TGF-β和FN mRNA的表达.     

褪黑素抑制促甲状腺释放激素刺激乳鼠垂体前叶细胞催乳素基因的表达

褪黑素（melatonin，MEL）主要由松果腺分泌，它是一种吲哚类激素，其功能之一能抑制下丘脑的促性腺释放激素和垂体前叶的促性腺激素。本工作利用原位杂交方法，观察了MEL对促甲状腺释放激素（thyrotropinreleasinghormone，TRH）兴奋垂体前叶激素-催乳素（prolactin，PRL）表达的影响。结果表明，在一定浓度范围内，MEL不但可抑制TRH刺激PRL基因表达的效应，还可直接抑制垂体前叶细胞PRL基因的表达。这为进一步探讨在体条件下MEL对PRL合成与分泌的调节，提供了实验依据。     

吗啡依赖和戒断大鼠行为及垂体阿黑皮源基因表达

目的 :结合行为学观察从分子水平上研究吗啡依赖和戒断机理及丁丙诺啡对吗啡戒断的影响。方法 :观察吗啡戒断大鼠的戒断体征及条件性位置偏爱情况 ;利用核酸分子杂交技术研究其垂体阿黑皮源 ( POMC)基因表达的变化。结果 :停用吗啡后 ,大鼠条件性位置偏爱的消失迟于戒断体征 ,吗啡依赖及戒断时垂体 POMC m RNA含量下降。结论 :垂体 POMC基因表达的改变可能是精神依赖产生的生理基础之一     

去肾上腺大鼠垂体内IL-6水平的变化PCR定量技术的辅助分析

目的　探测白细胞介素-6 (IL-6)是否与垂体前叶中的神经纤维的营 养效应有关. 方法　应用免疫组织化学和原位杂交技术对去肾上腺大鼠垂 体中的IL-6表达 进行形态观察,并试用两种微量PCR方法对同一组织中的IL-6进行蛋白水平和mRNA水平的定 量检测. 结果　免疫组织化学分析,阳性物质主要存在于垂体前叶滤泡星 形(FS)细胞中,但 其含量变化却不甚清晰. PCR定量分析,IL-6在上述两个水平上的表达均有增加,且基因激 活时间上于术后24 h. 结论　IL-6变化与ACTH无关,可能参与下丘脑-垂 体-肾上腺(H PA)轴以外的垂体前叶功能调节的其他路径,譬如通过神经支配而发挥影响.     

雷公藤甲素对大鼠垂体促肾上腺皮质激素含量的影响

目的了解较长期使用雷公藤甲素对正常大鼠血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）含量的影响。方法雄性SD大鼠20只随机分为2组,连续灌胃7周,其中空白对照组10只：2％丙二醇2ml／kg,bid;雷公藤甲素组10只：2％丙二醇雷公藤甲素混溶液20μg／kg,bid。用放射免疫分析法检测两组大鼠血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）含量,用免疫细胞化学染色法观察ACTH在两组大鼠垂体中的表达。结果雷公藤甲素组血浆ACTH含量与空白对照组有显著差异;ACTH在雷公藤甲素组大鼠垂体中的表达高于空白对照组。结论雷公藤甲素对下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPAA）可能作用机制之一是兴奋垂体ACTH神经细胞,使垂体分泌、释放ACTH增加。     

调节食欲-生殖的信号肽在雄激素致不孕大鼠中的表达及滋肾阴药的作用

目的探讨雄激素不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的中枢机制及滋肾阴药的作用。方法给出生9日龄SD雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立ASR模型。用原位杂交、双标原位杂交的方法检测与肥胖发生有关的几种信号肽/激素如神经肽Y(NPY)、瘦素(leptin)受体长体(OB-Rb)、前阿黑皮素原(POMC)mRNA在ASR下丘脑弓状核(ARC)的表达含量和其关系,以及灌服滋肾阴药后上述指标的变化。结果ASR呈肥胖、无排卵状态。ASR的ARC中NPYmRNA神经元上有OB-RbmRNA表达,NPYmRNA神经元与POMCmRNA神经元有突触联系。NPY和POMC基因表达水平明显增加(P<0.01),OB-Rb基因表达水平明显降低(P<0.01)。中药治疗ASR后,大鼠出现减肥和排卵现象,ARC中NPY、POMC基因表达下降,OB-Rb基因表达上升至正常大鼠水平(P>0.05)。结论ASR肥胖及无排卵可能与NPY、POMC基因过表达、OB-RbmRNA数目减少有关,中药可能有调控这些信号肽的表达而发挥减肥及促排卵作用。     

褪黑素载药纳米粒的优化设计及研制

目的：探讨采用复合乳液-溶剂挥发法制备褪黑素载药纳米粒的最佳工艺条件。方法：以聚乳酸、壳聚糖可降解生物材料为载体,明胶为分散剂,span-80和tween-80混合液为微乳液,根据微粒的表面形态、粒径大小、分布、包封率、载药量选择最佳工艺条件,制备褪黑素载药纳米粒。结果与结论：原子力显微镜下可见纳米粒表面圆滑,分布均匀。正交设计效应曲线图直观分析和方差分析结果显示,搅拌速度、溶剂挥发温度、聚乳酸与褪黑素投药比、壳聚糖浓度是影响制备工艺的主要因素。在30℃,1000r／min搅拌速度,搅拌时间45min,m(褪黑素)：m(聚乳酸)为1：5,V(Tween-80)：V(Span-80)为5：1,壳聚糖质量浓度为1％条件下,可制备成平均粒径为45．84nm,包封率为38．33％,载药量为8．35％的褪黑素载药纳米粒。     

孕周与母儿血甲状腺激素含量的关系

目的：观察不同孕周与母儿血甲状腺激素的关系。方法：应用放射免疫分析法对67例中、晚期妊娠要求引产患者，10例早产及78例孕足月自然分娩患者进行了母血及胎儿脐静脉、脐动脉血中TSH、T3、T4的测定。结果：TSH值在母血及胎儿血中随着孕周的增加而增加．T3值在胎儿血中与母血中比较，显示低T3血症，T4值接近正常母体水平。结论：测定母血中的甲状腺激素，可动态观察不同孕周甲状腺激素变化，可及时发现胎儿低甲血症。     

HepG2 细胞谷胱甘肽含量和谷胱甘肽转移酶活力的诱导

目的：建立一种具有较高ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力的肝细胞系。方法：将ＨｅｐＧ２细胞在０．１,０．３,０．５ｍｇ／Ｌ浓度的ＣＤＤＰ间歇作用下传代１２个月后得到三种稳定的ＣＤＤＰ耐药细胞系ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．３,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．５细胞的ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力,结果用显著性ｔ检验方法作统计学处理。结果：诱导刺激后的子代ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０     

急性心肌梗死心力衰竭患者血浆肌钙蛋白Ⅰ、高敏C-反应蛋白和NT-proBNP的变化及心脉隆干预疗效

目的研究急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)心力衰竭(简称心梗心衰)患者血浆中肌钙蛋白(Ⅰcardiac troopingⅠ,cTnI)、高敏C-反应蛋白(high-sensitivity creactive protein,hs-CRP)、N末端脑钠肽前体(N-terminal-pro-brain-natriuretic-peptide,NT-proBNP)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)的变化,探讨心脉隆对急性心梗心衰患者干预的疗效。方法选取35例健康者为正常对照组;42例急性心梗心衰患者为心梗组,并随机将其中21例患者分为心脉隆组,21例为常规治疗组,两组均按急性心肌梗死治疗指南进行处置,常规治疗组患者接受抗血小板、抗凝、降脂、扩张冠状动脉、抗心衰等方面治疗,心脉隆组在此基础上加用心脉隆静脉滴注;心脉隆的使用方法为5%的葡萄糖中加入6mL心脉隆2次/d,疗程为14d。结果与正常健康人比较,急性心梗心衰患者肌钙蛋白I、高敏C-反应蛋白、NT-proBNP、肌酸激酶同工酶及左心室收缩末期容量指数(left ventricular ...     

高效液相色谱法检测人血浆中咖啡因及其3种去甲基代谢产物

以８－氯茶碱作为内标，利用高效液相色谱同时测定人血浆中咖啡及其３种去甲基代谢产物－－副黄嘌呤、可可碱和茶碱的方法。这４种物质可以在一个固定相柱子上被同时分离；流动相为甲；０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠（３０：７０）（Ｖ／Ｖ）；流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；紫外检测器，波长２７４ｎｍ。实验表明这４种物质的最小检出量均在７５ｎｇ／ｍｌ，并具有较好的线性、重复性及较高回收率。     

同型半胱氨酸与缺血性心肌病和扩张性心肌病的关系探讨

目的：探讨同型半胱氨酸（Hcy）水平变化与缺血性心肌病和扩张性心肌病的关系及意义。方法：选取我院冠心病患者198例,其中缺血性心肌病患者80例（A组）,扩张性心肌病患者53例（B组）,普通冠心病患者65例（对照组）,入选者均行冠状动脉造影。比较三组的一般临床资料。采用酶联免疫法测定并比较三组血清同型半胱氨酸水平,测定相关生化指标。采用彩色多普勒超声诊断仪测定三组左房内径,左室舒末内径及左室射血分数。结果：B组与对照组相比,同型半胱氨酸水平无明显差异,A组同型半胱氨酸水平明显高于对照组（P〈0.05）,A组同型半胱氨酸水平与B组相比显著增高（P〈0.05）,A组年龄高于B组及正常对照组（P〈0.05）。三组一般临床资料,如糖尿病、血脂、高血压、吸烟饮酒、叶酸、维生素B12水平等方面比较,差异无统计学意义。与对照组相比,A组与B组的左房内径、左室舒末内径明显增大（P〈0.05）,左室射血分数明显降低（P〈0.05）。结论：检测同型半胱氨酸水平在临床上可对鉴别缺血性心肌病和扩张性心肌病提供帮助。     

急性胰腺炎患者血清IMD及PCT动态变化监测的临床价值

目的 探讨急性胰腺炎(AP)患者血清垂体中叶素(IMD)及降钙素原(PCT)动态变化监测的临床价值.方法 选取我院2013年1月至2016年9月急性胰腺炎患者91例作为研究对象,所有患者均于入院时、第3天、第5天、第7天采集静脉血,采用酶联免疫吸附法测定PCT,同时进行APACHEⅡ评分;根据患者急性胰腺炎严重程度分为轻症胰腺炎(MAP)组49例和重症胰腺炎(SAP)组42例.比较两组IMD及PCT动态变化.结果 组内比较,两组患者第3天、第5天、第7天IMD均低于入院时,第3天PCT明显高于入院时,差异均有统计学意义(P<0.05);MAP组第5天、第7天PCT明显低于入院时,SAP组第5天PCT高于入院时,第7天低于入院时,差异均有统计学意义(P<0.05);组间比较,MAP组患者入院时、第3天、第5天、第7天IMD均高于SAP组,PCT均低于SAP组,差异均有统计学意义(P<0.05);MAP组患者24 h APACHEⅡ评分为(4.54±0.98)分,明显低于SAP组的(15.09±3.72)分,差异有统计学意义(P<0.05);MAP组、SAP组APACHEⅡ评分与IMD的相关系数分别为-0.089、-0.118,呈负相关;与PCT相关系数分别为0.194、0.233,呈正相关(P<0.01).结论 血清IMD及PCT可在一定程度上反映AP严重程度及疗效,具有较高的临床价值.     

阴茎勃起功能障碍的检测及法医学鉴定

目的探讨阴茎海绵体内药物试验、夜间阴茎勃起监测、视听性刺激、阴茎皮肤交感反应等四种检查方法在外伤性阴茎勃起功能障碍的法医学鉴定中的应用价值,分析外伤性阴茎勃起功能障碍的伤残等级评定问题.方法收集50例道路交通事故损伤所致外伤性阴茎勃起功能障碍司法鉴定案例的资料,采用统计学方法对资料进行分析.结果本文资料中损伤构成比为单纯骨盆骨折18例（36%）,骨盆骨折伴尿道断裂23例（46%）,会阴部软组织损伤、血肿5例（10%）,会阴部皮肤撕脱伤4例（8%）;交通方式为行人25例（50%）,骑自行车12例（24%）,乘坐自行车10例（20%）,驾驶员3例（6%）;阴茎海绵体内药物试验提示阴茎血管功能正常者41例（82%）,提示阴茎动脉或海绵体功能障碍者9例（18%）;夜间阴茎勃起监测正常17例（34%）,轻度异常20例（40%）,中度异常11例（22%）,重度异常2例（4%）;视听性刺激结果正常者42例（84%）,异常者8例（16%）;阴茎皮肤交感反应正常者23例（46%）,异常者27例（54%）.结论夜间阴茎勃起监测是最佳的检查方法阴茎海绵体内药物试验、视听性刺激、阴茎皮肤交感反应的检查结果进行综合分析,可有助于判断鉴定.     

脑出血急性期TCD、fVEP的临床动态观察与相关性研究

目的探讨脑出血急性期经颅多普勒超声(TCD)的动态变化规律以及与颅内压、病情、预后之间的相关性.方法对54例首次发病且发病24 h内入院的幕上自发性脑出血患者,于入院第1、7、21天进行床旁TCD检测,并与fVEP、MESSS进行对比研究及相关性分析.结果脑出血急性期TCD异常以大脑前循环为主,主要表现为高阻力低流速的血流频谱,出血侧更明显,两侧血流明显不对称.连续TCD监测发现,降低的血流速度逐渐增高,同时增高的脉动指数(PI)则逐渐降低,至发病3周后TCD检测基本恢复至正常范围.无创颅内压监护仪所得颅内压值与大脑中动脉Vm呈负相关,与PI值呈正相关.MESSS评分与大脑中动脉Vm呈负相关,与PI值呈正相关.结论TCD检查可用于脑出血患者急性期脑血流动力学的监测和病情判断.fVEP法无创颅内压监护与TCD两者结合使用有助于判断颅内压的动态变化并指导降颅压治疗.     

血液灌流对长期血液透析病人各项指标改善的临床研究和护理体会

目的:探讨血液灌流、血液透析联合治疗比单独血液透析治疗尿毒症的优越性。方法:回顾分析66例使用血液灌流血液透析联合治疗患者,随机抽取其中30例,计算肌酐、尿素氮、中分子毒素(middlemoleculesubstancesMMS)下降率,患者睡眠、食欲、高血压、皮肤瘙痒等症状改善情况,另以30例单纯运用血液透析患者作对照,比较其透析效果。结果:血液灌流、血液透析联合治疗患者透后血肌苷和尿素氮均下降60%,顽固性皮肤瘙痒等临床症状明显改善,无明显并发症,其透析效果远远超出单纯血液透析患者。结论:血液灌流是一种安全、有效的方法,配合血液透析使用可以提高患者生存质量,延长患者生命。