高脂及劳倦伤脾大鼠有机阴离子转运肽oatp2b1 mRNA及蛋白表达研究

目的观察脾虚状态下大鼠有机阴离子转运肽oatp2b1基因和蛋白表达,探讨oatp2b1在湿浊转运中的作用。方法24只大鼠随机分为正常组、高脂组、劳倦组,每组8只。造模成功后,每只大鼠取肺、脾、肝、肾、胃、小肠、大肠组织各1块。劳倦组单号日期采用特制束缚筒,每次3 h,双号日期令大鼠在冷水（10±1） ℃中游泳7 min,连续12周。模型组、正常组常规标准大鼠颗粒饲料喂养12周,高脂组大鼠以高脂饲料喂养12周,均自由饮食饮水。采用RT-PCR、Western Blot法检测肺、脾、肝、肾、胃、小肠、大肠组织oatp2b1 mRNA、蛋白表达。结果高脂组肾、肝oatp2b1 mRNA含量高于正常组及劳倦组（P<0.01, P<0.05）;正常组oatp2b1 mRNA表达量由高至低为肝>肺>脾>大肠>小肠>肾>胃;劳倦组oatp2b1 mRNA表达量由高至低为肝>肺>大肠>脾>肾>胃>小肠;高脂组oatp2b1 mRNA表达量由高至低为肝>肺>脾>小肠>肾>大肠>胃。肺组织oatp2b1蛋白表达量由高至低为劳倦组>正常组>高脂组（P>0.05）。脾组织oatp2b1蛋白表达由高至低为高脂组>正常组>劳倦组（P>0.05）;肾组织oatp2b1蛋白表达量由高至低为正常组>劳倦组>高脂组（P>0.05）;肝组织oatp2b1蛋白表达量由高至低为正常组>高脂组>劳倦组（P>0.05）;其中胃、大肠、小肠中oatp2b1蛋白表达量极低。正常组oatp2b1蛋白表达由高至低为肺>脾>肝,肾>胃、大肠、小肠;劳倦组oatp2b1蛋白表达由高至低为：肺>脾>肾>肝>胃、大肠、小肠;高脂组oatp2b1蛋白表达由高至低为：脾>肺>肾>肝>胃,大肠,小肠,差异无统计学意义（P>0.05）。结论肝、肾等脏器在脾失健运状态下的湿浊转运中可能发挥重要作用,oatp2b1是机体参与湿浊运化的物质基础之一。脾主运化湿浊的功能,可能不仅包括胃肠道的功能在内,而且也可能包括一部分肝脏及肾脏的功能。     

高脂及劳倦伤脾大鼠有机阴离子转运肽oatp4a1 mRNA及蛋白表达

目的 观察有机阴离子转运肽oatp4a1在脾虚模型大鼠各组织中的表达。探讨其在水液湿浊转运中的作用机制。方法 选取6只SPF级大鼠制备劳倦伤脾模型,另选取12只大鼠随机分为空白对照组(空白组)、高脂饮食组(高脂组),每组6只。劳倦伤脾模型组(劳倦组)单号日期采用特制束缚筒,每次3 h,双号日期令大鼠在冷水［(10±1)℃］中游泳7 min,连续2周。劳倦组、空白组常规标准大鼠颗粒饲料喂养12周,高脂组大鼠以高脂饲料喂养12周,均自由饮食饮水。采用RT-PCR和Western blot法检测肺、脾、肝、肾、胃、小肠、大肠组织oatp4a1 mRNA、蛋白表达。结果 劳倦组大鼠扎堆懒动,烂便,毛色粗糙, 饮食饮水量减少,体重下降(P<0.05),与临床脾虚证表现基本相符, 提示劳倦伤脾动物模型造模全部成功。高脂组大鼠第9周之后开始出现食欲不振,精神萎靡,嗜卧懒动,毛发疏松粗糙,晦暗无光泽等脾虚症状,形成痰湿证大鼠。与空白组比较,高脂组第9周平均体重升高(P<0.05)。oatp4a1 mRNA在肺、脾、肝、肾、胃、小肠、大肠7种脏器中都有表达;各组各组织oatp4a1 mRNA表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);高脂组大鼠肺、肾oatp4a1 mRNA表达量均高于肝(P<0.05)。结论 oatp4a1可能是高脂伤脾大鼠机体参与湿浊转运的物质基础之一,其中肺、肾、大肠在湿浊转运中可能起着重要作用。     

基于AA-Ⅰ代谢中oatp2b1动态表达探讨脾虚证湿浊转运的机制

目的：通过观察脾虚大鼠马兜铃酸（Aristolochic acid-Ⅰ,AA-Ⅰ）的代谢与肺、肝、脾、胃、肾、小肠、大肠7种组织中有机阴离子转运肽oatp2b1基因及蛋白表达的关系探讨中医温浊转运的内涵.方法：48只SD大鼠随机分为空白组、脾虚组、空白＋AA-Ⅰ组、脾虚＋AA-Ⅰ组.脾虚组及空白组分别做AA-Ⅰ药代动力学检测,并分别取肺、肝、脾、胃、肾、小肠、大肠组织;空白＋AA-Ⅰ组及脾虚＋AA-Ⅰ组予AA-Ⅰ灌胃后5、60分钟两个时间点取上述组织,采用RT-PCR、Western blot及免疫组化的方法检测各组织中oatp2b1的基因及蛋白表达情况.结果：空白组与脾虚组AA-Ⅰ血药浓度出现明显差异（P＜0.05）.oatp2b1 mRNA表达：脾虚组中脾组织表达量较空白组降低（P＜0.05）;空白＋AA-Ⅰ组5分钟时与空白组比较各组织表达无差异,60分钟小肠组织表达量较空白组降低（P＜0.05）;脾虚＋AA-Ⅰ组5分钟时胃、肝组织表达量较脾虚组降低（P＜0.05）,60分钟时肾、大肠组织表达量较脾虚组升高（P＜0.05）.oatp2b1蛋白表达变化趋势同基因表达改变基本一致;oatp2b1蛋白分布：肝组织中肝血窦周边的肝细胞及巨噬细胞的细胞膜染色阳性,胃组织中消化腺的胞质染色阳性,肾组织中肾小管包膜及胞浆染色阳性,小肠组织消化腺中胞质及包膜染色阳性,大肠组织胞膜染色阳性.结论：AA-Ⅰ代谢与肝、胃、肾、小肠、大肠组织oatp2b1表达相关,提示湿浊代谢以脾为枢纽,肝、胃、肾、大肠、小肠共同参与并发挥相应协调作用.     

基于AA-I代谢中oatp2b1动态表达探讨脾虚证湿浊转运的机制

目的:通过观察脾虚大鼠马兜铃酸(Aristolochic acid-I,AA-I)的代谢与肺、肝、脾、胃、肾、小肠、大肠7种组织中有机阴离子转运肽oatp2b1基因及蛋白表达的关系探讨中医湿浊转运的内涵。方法:48只SD大鼠随机分为空白组、脾虚组、空白+AA-I组、脾虚+AA-I组。脾虚组及空白组分别做AAI药代动力学检测,并分别取肺、肝、脾、胃、肾、小肠、大肠组织;空白+AA-I组及脾虚+AA-I组予AA-I灌胃后5、60分钟两个时间点取上述组织,采用RT-PCR、Western blot及免疫组化的方法检测各组织中oatp2b1的基因及蛋白表达情况。结果:空白组与脾虚组AA-I血药浓度出现明显差异(P0.05)。oatp2b1 mRNA表达:脾虚组中脾组织表达量较空白组降低(P0.05);空白+AA-I组5分钟时与空白组比较各组织表达无差异,60分钟小肠组织表达量较空白组降低(P0.05);脾虚+AA-I组5分钟时胃、肝组织表达量较脾虚组降低(P0.05),60分钟时肾、大肠组织表达量较脾虚组升高(P0.05)。oatp2b1蛋白表达变化趋势同基因表达改变基本一致;oatp2b1蛋白分布:肝组织中肝血窦周边的肝细胞及巨噬细胞的细胞膜染色阳性,胃组织中消化腺的胞质染色阳性,肾组织中肾小管包膜及胞浆染色阳性,小肠组织消化腺中胞质及包膜染色阳性,大肠组织胞膜染色阳性。结论:AA-I代谢与肝、胃、肾、小肠、大肠组织oatp2b1表达相关,提示湿浊代谢以脾为枢纽,肝、胃、肾、大肠、小肠共同参与并发挥相应协调作用。     

基于高尿酸血症大鼠oatp1a1表达的萆薢总皂苷降尿酸机制探讨

目的通过观察高尿酸血症大鼠胃、肝、肾、小肠和大肠组织oatp1a1表达水平探讨萆薢总皂苷降尿酸的机制。方法SD大鼠随机分为空白组、模型组、萆薢总皂苷低剂量组和萆薢总皂苷高剂量组,检测各组大鼠血清尿酸水平和胃、肝、肾、小肠和大肠各组织中oatp1a1表达水平。结果与模型组比较,萆薢总皂苷低剂量组和高剂量组大鼠血清尿酸水平明显降低,大鼠胃、肝、肾、小肠和大肠各组织oatp1a1表达量明显升高(P0.05)。结论萆薢总皂苷能明显降低大鼠血清尿酸水平,其机制可能是上调大鼠胃、肝、肾、小肠和大肠组织oatp1a1表达水平。     

有机阴离子转运肽oatp2b1在痰湿证大鼠组织中表达及意义

目的:通过观察痰湿状态下大鼠有机阴离子转运肽oatp2b1基因和蛋白表达来探讨oatp2b1在痰湿转运中的作用。方法:24只大鼠随机分为2组,正常组、模型组各12只。模型组采用高脂饮食造模3个月,每只大鼠取脾、肝、肾组织各1块。采用实时荧光定量PCR、Western Blot方法及免疫组化法检测组织中oatp2b1的基因表达、蛋白表达情况。结果:模型组肝、肾组织中oatp2b1 mRNA表达量高于正常组(P<0.01,P<0.05);而模型组脾组织中oatp2b1 mRNA表达量低于正常组(P<0.01)。两组oatp2b1蛋白在脾、肝、肾组织有不同程度表达,但差异无统计学意义。模型组中脾脏的巨噬细胞、肝脏的枯否氏细胞及肾小管上皮细胞均有oatp2b1蛋白分布,较正常组表达增强。结论:痰湿伤脾,脾失运化状态下,肝、肾在痰湿转运中发挥重要作用,oatp2b1可能是机体参与痰湿运化的物质基础之一。     

基于oatp3a1表达的苍附导痰汤治疗肥胖型多囊卵巢综合征模型大鼠机制的探讨

目的探讨苍附导痰汤(CFDTT)对肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠组织中oatp3a1表达的影响及作用机制的探讨。方法采用改良Poresky联合高脂饮食造模法,制作肥胖型多囊卵巢综合征大鼠模型,造模后将大鼠随机分为模型组、二甲双胍(metformin)组、苍附导痰汤低剂量组、苍附导痰汤高剂量组,每组12只,另选12只大鼠作为正常对照组,观察药物干预14天后各组大鼠肺、脾、肝、肾组织中oatp3a1基因及蛋白表达的变化。结果与正常对照组比较,模型组肝、脾、肾组织中oatp3a1表达量明显下降(P﹤0.01),肺组织中oatp3a1无明显变化(P0.05);与模型组比较,CFDTT高剂量组和二甲双胍组大鼠肝、脾、肾组织中oatp3a1明显升高(P﹤0.01),CFDTT低剂量组肝、脾、肾组织中oatp3a1表达轻度升高(P﹤0.05),CFDTT高剂量组与二甲双胍组比较差异无显著性(P0.05)。结论苍附导痰汤可能通过调节肝、脾、肾组织中oatp3a1的表达,改善肝、脾、肾脏腑的功能,增强痰湿运化而发挥作用。     

从脾虚大鼠AA-I的排泄与脏腑oatp2a1、oatp2b1的表达探讨脾肾关系

目的通过观察脾虚大鼠马兜铃酸(aristolochic acid,AA)代谢与肾、大肠、小肠组织中有机阴离子转运肽(organic anion transporting polypeptide,oatp)2a1、oatp2b1mRNA及蛋白表达的关系,探讨中医学脾肾之间的相互关系。方法 46只SD大鼠随机分为空白组(12只)、脾虚组(22只)、AA-I组(6只)、脾虚AA-I组(6只)。脾虚组及脾虚AA-I组采用利血平5 mg/(kg·d)皮下注射连续16天造模。空白组及脾虚组选取6只大鼠行颈动脉插管,并予AA-I灌胃后5、15、30、45、60 min颈动脉取血行AA-I药代动力学检测;脾虚组选10只大鼠行肾、大肠、小肠AA-I组织浓度测定;脾虚组及空白组各取6只分别予生理盐水灌胃,AA-I组、脾虚AA-I组予AA-I灌胃后60 min时间点取肾、大肠、小肠3种组织,采用RT-PCR及Western blot方法检测各组织中oatp2a1、oatp2b1m RNA及蛋白表达。结果与空白组比较,脾虚组大鼠灌胃后15、30、45、60 min时体内AA-I血浆浓度值明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。脾虚组60 min时AA-I血浆浓度下降,肾及大肠组织浓度升高,小肠中组织浓度明显下降。空白组与脾虚组中上述3种组织oatp2a1、oatp2b1mRNA表达无差异;与空白组比较,AAI组小肠oatp2a1、oatp2b1mRNA表达降低,大肠oatp2a1mRNA表达降低(P0.05,P0.01);与脾虚组比较,脾虚AA-I组肾组织中oatp2a1、oatp2b1mRNA表达升高(P0.05),大肠组织oatp2b1m RNA表达升高(P0.05)。结论脾虚脾失运化状态下,AA-I代谢差异可能与肾、大肠、小肠组织oatp2a1、oatp2b1表达改变相关,并提示肾、大肠在脾虚状态下物质代谢中发挥重要协调作用,验证了中医脾肾相关理论。     

脾虚大鼠有机阴离子转运肽Oatp2a1基因表达及意义探讨

目的:通过观察脾虚状下大鼠oatp2a1基因表达来探讨Oatp2a1在湿浊转运中的作用。方法:32只大鼠随机分为4组,分别为正常组(6只)、正常+AA大鼠模型组(6只)、脾虚大鼠模型组(10只)、脾虚+AA大鼠模型组(10只)。采用皮下注射利血平的方法造脾虚大鼠模型,造模成功后给予相应组别大鼠马兜铃酸灌胃3天,最后采用实时荧光定量PCR方法检测各组大鼠肺、肝、肾、胃、小肠、大肠等组织中Oatp2a1的基因表达情况。结果:Oatp2a1在上述6种脏器中都有不同程度的表达。肝组织中,脾虚组大鼠模型Oatp2a1的表达量较正常组明显升高(P=0.035,P<0.05);小肠组织中,脾虚组大鼠模型中Oatp2a1的表达较正常组明显下降(P=0.004,P<0.01)。在给予马兜铃酸刺激下,小肠组织中,正常+AA组大鼠模型Oatp2a1的表达较正常组明显下降(P=0.032,P<0.05)。结论:Oatp2a1可能是机体参与湿浊运化的物质基础之一,在脾虚状态下大鼠小肠、肝组织中Oatp2a1的表达变化提示小肠、肝等脏器在脾虚状态下的湿浊转运中可能发挥重要作用,脾主运化湿浊的功能,可能不仅包括胃肠道的功能在内,而且也可能包括一部分肝脏的功能,值得进一步研究。     

基于脾胃虚寒模型的生姜、干姜、炮姜姜辣素部位组织分布与归经的相关性研究

目的:探讨生姜、干姜、炮姜姜辣素部位在脾胃虚寒模型大鼠体内组织分布与归经的关系。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照、生姜姜辣素、干姜姜辣素、炮姜姜辣素组;正常对照组大鼠灌胃去离子水,其余各组大鼠灌胃4℃米醋1 mL/100 g,连续10 d制备大鼠脾胃虚寒模型。造模第5天开始给药,连续给药6 d。各给药组于末次给药后不同时间点腹主动脉取血,并立即处死采集心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠等组织,用UPLC-MS检测姜辣素6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、姜酮4种成分在大鼠各组织中的含量。采用DAS3.0软件分析药动学参数,对4种姜辣素成分在各组织中的AUC_((0-t))值按从小到大的顺序依次赋值1,2,3,4,5,6,7,8,检测不到者赋值为0,计算各成分在各组织中AUC_((0-t))的赋值总和并按大小排序,赋值总和大者表明选择性高,以此认识姜辣素类成分在体内的组织分布与归经的相关性。结果:4种成分在组织中AUC_((0-t))赋值总和的排序结果为,生姜姜辣素:胃大肠小肠=肺肾肝心脾;干姜姜辣素:胃小肠=大肠=肝肺脾肾心;炮姜姜辣素:胃小肠大肠肝肺脾心肾。结论:生姜姜辣素组织分布与生姜归肺、脾、胃经基本一致;干姜姜辣素组织分布与干姜归脾、胃、肾、心、肺的认识基本一致;炮姜姜辣素组织分布与炮姜归脾、胃、肾经的认识基本一致。     

基于脾胃虚寒模型的生姜、干姜、炮姜姜辣素部位组织分布与归经的相关性研究

目的:探讨生姜、干姜、炮姜姜辣素部位在脾胃虚寒模型大鼠体内组织分布与归经的关系。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照、生姜姜辣素、干姜姜辣素、炮姜姜辣素组;正常对照组大鼠灌胃去离子水,其余各组大鼠灌胃4 ℃米醋1 mL/100 g,连续10 d制备大鼠脾胃虚寒模型。造模第5天开始给药,连续给药6 d。各给药组于末次给药后不同时间点腹主动脉取血,并立即处死采集心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠等组织,用UPLC-MS检测姜辣素6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、姜酮4种成分在大鼠各组织中的含量。采用DAS3.0软件分析药动学参数,对4种姜辣素成分在各组织中的AUC(0-t)值按从小到大的顺序依次赋值1,2,3,4,5,6,7,8,检测不到者赋值为0,计算各成分在各组织中AUC(0-t)的赋值总和并按大小排序,赋值总和大者表明选择性高,以此认识姜辣素类成分在体内的组织分布与归经的相关性。结果:4种成分在组织中AUC(0-t)赋值总和的排序结果为,生姜姜辣素:胃>大肠>小肠=肺>肾>肝>心>脾;干姜姜辣素:胃>小肠=大肠=肝>肺>脾>肾>心;炮姜姜辣素:胃>小肠>大肠>肝>肺>脾>心>肾。结论:生姜姜辣素组织分布与生姜归肺、脾、胃经基本一致;干姜姜辣素组织分布与干姜归脾、胃、肾、心、肺的认识基本一致;炮姜姜辣素组织分布与炮姜归脾、胃、肾经的认识基本一致。     

肾不藏志型不寐大鼠肾、心、脑等相关组织IL-6、TNF-α表达的差异研究

目的 探讨肾不藏志型不寐大鼠与正常大鼠肾、脑、心、肝、脾、肺、大肠、膀胱组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的差异。方法 将16只SPF级雄性SD大鼠随机分为不寐组与正常组各8只，不寐组大鼠使用D-半乳糖联合对氯苯丙氨酸构建肾不藏志型不寐模型，正常组大鼠同期正常饲养，于第46天处死大鼠后取材，免疫组化法检测2组大鼠肾、脑、心、肝、脾、肺、大肠、膀胱组织中IL-6、TNF-α表达水平。结果 不寐组大鼠肾、心、脑、肺、大肠组织中IL-6表达水平和肾、脑、大肠、肺组织中TNF-α表达水平均明显高于正常组(P均<0.05),肝、脾、膀胱组织中IL-6表达水平和肝、心、脾、膀胱组织中TNF-α表达水平与正常组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 肾不藏志型不寐大鼠肾、脑、大肠、肺组织中IL-6、TNF-α表达水平及心组织中IL-6表达水平均较正常大鼠升高，这种特征性变化为从“肠-肾-脑轴”认识肾不藏志型不寐现代病理学机制提供了可能，肾不藏志型不寐大鼠肾、心、脑、肺、大肠组织中IL-6、TNF-α表达差异可能是肾不藏志型不寐睡眠相关因子的特征性...     

基于“病证-效应-生物样本分析”方法的酸枣仁“安神”药性物质及归经的研究

目的:研究酸枣仁"安神"药性物质及指标性成分体内分布与归经的相关性。方法:灌胃甲状腺片混悬液160 mg·kg-1连续13天制备大鼠阴虚模型,结合高架十字迷宫装置和明暗箱装置评价酸枣仁对阴虚大鼠焦虑行为的影响;将阴虚焦虑大鼠于灌胃酸枣仁水煎液后10、20、30、40、60、90、120、240 min时摘眼球取血,并立即处死,采集心、肝、脾、肺、肾、胃、脑、大肠、小肠等组织,联合应用HPLC-PDA-ELSD检测斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B在大鼠各组织中的浓度,检测数据用DAS 2.0软件处理得到相关药动学参数。结果:与阴虚模型组比较,酸枣仁显著降低阴虚大鼠24 h内异常增高的进食量(P<0.01)和饮水量(P<0.01),显著增加实验前后体质量差值(P<0.01),显著降低肾脏系数(P<0.01)和肾上腺系数(P<0.01),显著降低T3(P<0.01)、T4(P<0.05)测定值,显著升高TSH测定值(P<0.01),表明酸枣仁可以明显改善阴虚症状;显著增加开臂进入次数百分比(P<0.01)、开臂滞留时间百分比(P<0.01)和明暗箱穿箱次数(P<0.01),表现出明显的抗焦虑作用。指标成分体内分布结果显示,斯皮诺素和酸枣仁皂苷A经血液循环广泛地分布于心、肝、脾、肺、肾、胃、脑、大肠、小肠等组织中,酸枣仁皂苷B经血液循环分布于血、胃、大肠和小肠中,其中,斯皮诺素在组织中的平均分布浓度依次为小肠>胃>肝>脑>大肠>脾>肺>心>肾,在组织中的AUC0-t依次为小肠>胃>肝>大肠>脾>脑>心>肾>肺;酸枣仁皂苷A在组织中的平均分布浓度依次为肺>大肠>心>脾>肝>肾>小肠>胃>脑,在组织中的AUC0-t依次为肺>脾>肝>心>大肠>脑>胃>肾>小肠;酸枣仁皂苷B在组织中的平均分布浓度依次为大肠>小肠>胃,在组织中的AUC0-t依次为大肠>小肠>胃。结论:酸枣仁能有效改善阴虚症状,能很好地对抗阴虚大鼠的焦虑行为,具有良好的抗焦虑作用。酸枣仁中斯皮诺素和酸枣仁皂苷A为"安神"功效物质,也是酸枣仁甘、酸味的物质基础。斯皮诺素和酸枣仁皂苷A成分在阴虚焦虑大鼠体内的分布情况与酸枣仁的归经情况比较接近。     

基于“病证-效应-生物样本分析”方法的桑寄生补肝肾强筋骨功效物质及归经研究

目的:建立与桑寄生功效相对应的骨质疏松模型,观察桑寄生补肝肾强筋骨功效物质及其在大鼠体内分布与归经的关系。方法:采用维甲酸制造骨质疏松模型大鼠模型,观察桑寄生水煎液药效。同时以萹蓄苷、槲皮苷、芦丁为指标成分,对含药组织进行分析检测,观察其体内分布及代谢时间,研究功效相关物质的组织分布与归经的关系。结果:桑寄生水煎液能明显提高骨质疏松模型大鼠左股骨骨重、骨重/骨长、骨重/骨直径等指标,且能降低大鼠血清中骨钙素(OT)、碱性磷酸酶(ALP)含量。大鼠体内桑寄生指标成分的分析结果显示,芦丁仅在胃中有少量分布,萹蓄苷在组织中AUC0?t大小顺序为胃>肾>脑>小肠>大肠>肝>肺,体内维持时间长短顺序为肾=胃>脑>大肠>小肠=脾>肝>心>肺>血清。槲皮苷在组织中AUC0?t大小顺序为肾>胃>肝>心>肺>脾>小肠>大肠>脑,体内维持时间长短顺序为肾=胃=脑=肺=肝=脾=心>大肠>血清>小肠。结论:桑寄生水煎液可对抗维甲酸致大鼠骨质疏松,具有补肝肾、强筋骨作用;萹蓄苷、槲皮苷为桑寄生补肝肾、强筋骨代表成分;萹蓄苷、槲皮苷在大鼠体内分布与桑寄生归肾经的传统认识一致。     

苍附导痰汤对多囊卵巢综合征大鼠治疗机制的研究北大核心

目的:观察苍附导痰汤对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素和炎症因子水平、卵巢组织有机阴离子转运肽(oatp3a1、oatp4a1、oatp2b1)表达的影响,研究该方治疗多囊卵巢综合征的疗效机制。方法:采用改良Poresky联合高脂饮食法造模,模型建立后将成模大鼠按照随机分配原则平均分为模型组、格华止组及苍附导痰汤高、低剂量组,另选16只大鼠作为正常对照组。药物干预14天后检测各组大鼠血清性激素(T、FSH、LH、SHBG)和炎症因子(IL-6、IL-8、TNF-α)水平及卵巢组织oatp3a1、oatp4a1、oatp2b1表达。结果:与正常对照组比较,苍附导痰汤能改善肥胖型PCOS大鼠的状态,降低体质量、性激素和炎症水平,增强卵巢组织oatp3a1、oatp4a1、oatp2b1 mRNA及蛋白表达。结论:苍附导痰汤治疗多囊卵巢综合征的疗效机制可能与下调性激素和炎症水平,促进卵巢组织oatp3a1、oatp4a1、oatp2b1表达有关。     

中医复习思考题及答案选

试述十二经脉的名称及其与脏腑的络属关系。答:十二经脉的名称及其与脏腑的络属关系:手太阴肺经属肺络大肠。手厥阴心包经属心包络三焦,手少阴心经属心络小肠,手阳明大肠经属大肠络肺,手少阳三焦经属三焦络心包,手太阳小肠经属小肠络心,足太阴脾经属脾络胃、足少阴肾经属肾络膀胱、足厥阴肝经肝属络胆,足阳明胃络属胃络脾,足少阳胆经属胆络肝,足太阴膀胱经属膀胱络肾。何谓八会穴?它们各治疗哪些病证?     

清热解毒化浊片对肠源性内毒素血症肝损伤大鼠肝组织TNF-α及小肠ZO-1蛋白的影响

目的:观察清热解毒化浊片对肠源性内毒素血症肝损伤大鼠炎性因子TNF-α及小肠紧密连接蛋白-1(zonula occluden-1,ZO-1)(中文名称)的影响。方法:以高脂饲料和52%Vol.白酒喂养建立肠源性内毒素血症肝损伤模型,造模成功后,随机分为治疗1组、治疗2组和模型组,模型组用白酒及蒸馏水灌胃、治疗1组用白酒及清热解毒化浊片悬浊液灌胃、治疗2组用蒸馏水及清热解毒化浊片悬浊液灌胃。经治疗1个月后检测肝功能(ALT、AST、ALP、GGT)及血浆内毒素水平,观察肝组织及小肠组织病理学改变,免疫组化法检测肝组织TNF-α及小肠组织ZO-1蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组血浆内毒素水平明显升高(P0.01),ALT、AST、GGT水平均明显升高(P0.01),ALP水平升高(P0.05),肝组织TNF-α明显升高(P0.01),小肠组织ZO-1表达降低(P0.05);与模型组比较,治疗2组内毒素水平明显降低(P0.01),治疗1组及2组ALT、AST、GGT水平均明显降低(P0.01),ALP水平降低(P0.05),肝组织TNF-α表达降低(P0.05),小肠组织ZO-1表达升高(P0.05)。光镜下观察,治疗1组及2组大鼠肝组织及小肠组织炎性浸润情况明显改善。结论:清热解毒化浊片可以通过上调肠组织ZO-1蛋白的表达,维持肠黏膜屏障功能,减少内毒素吸收,降低促炎因子TNF-α的释放,从而在一定程度上终止内毒素血症与肝损伤的恶性循环。     

鹿茸对骨关节炎大鼠cAMP/cGMP及TGF-β的影响与归经相关性研究

目的:从信号转导系统与受体学说角度,研究鹿茸对大鼠各脏腑cAMP/cGMP、TGF-β水平的影响,探讨其与归经的相关性。方法:选择3月龄健康雌性SD大鼠24只,体质量(200±20)g,随机分为4组(鹿茸低、中、高剂量组及空白对照组)。常规喂养1周后,除正常组外采用经典Hulth方法制备骨关节炎(OA)疾病模型,造模6周后模型大鼠按分组不同给予鹿茸低、中、高剂量灌喂2周,空白对照组予等量生理盐水灌喂,通过酶联免疫吸附实验和免疫组织化学实验检测鹿茸灌喂后组内脏组织cAMP/cGMP及TGF-β受体的表达水平,通过比较各内脏组织cAMP/cGMP及TGF-β受体相对表达量变化程度,分析鹿茸对各内脏组织的作用趋势。结果:鹿茸低剂量组脾脏cAMP/cGMP水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05);鹿茸中剂量组肾脏、心脏cAMP/cGMP水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05);鹿茸高剂量组肝脏、卵巢cAMP/cGMP水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05);cAMP/cGMP相对表达量由大到小排序为:肾、肝、卵巢、脾、心、脑、胃、肺、肠。鹿茸低、中剂量组肝、肾TGF-β受体表达水平明显升高,差异有统计学意义(P0.05);鹿茸低剂量组脾、胃,鹿茸中剂量组脾,鹿茸高剂量组肠、胃TGF-β受体表达水平明显下降,差异有统计学意义(P0.05);TGF-β受体相对表达量由大到小排序为:肾、肝、卵巢、肺、心、脑、肠、胃、脾。结论:鹿茸对大鼠信号转导系统水平变化及受体表达水平的影响作用以肾脏、肝脏为主,与传统鹿茸归经理论相符。     

益气健脾法对脾虚痰浊AS猪肾组织AQP的影响

目的:探讨脾虚痰浊动脉硬化(AS)巴马小型猪肾组织水通道蛋白的改变及益气健脾法的干预作用及机制。方法:将15只巴马小型猪随机分为正常组、模型组(脾虚痰浊AS模型)、益气健脾组各5只,以高脂饮食喂饲加跑步劳倦结合冠脉球囊拉伤建立脾虚痰浊AS模型。正常组巴马小型猪喂饲正常饲料,模型组球囊冠脉拉伤后高脂饲料结合跑步过劳制备脾虚痰浊AS模型,益气健脾组在模型组处理基础上于高脂饲料中添加益气健脾中药,观察48周后各组巴马小猪的肾脏组织病理形态学改变,肾组织环磷酸腺苷(c AMP)含量、水通道蛋白(AQP)1、2、3及磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)、磷酸化c AMP反应原件结合蛋白(pCREB)表达变化。结果:与正常组比较模型组肾组织病理形态学可见肾小球及肾小管损伤,肾组织AQP1、2、3下调,c AMP/PKA/CREB通路下调,与模型组比较益气健脾组可上调肾组织AQP1、2、3及c AMP/PKA通路。结论:脾虚痰浊AS模型可见肾组织病理损伤,肾组织AQP1、2、3下调,益气健脾法可改善肾组织病理损伤,上调脾虚痰浊AS模型肾脏水通道蛋白的异常,其机制可能与调节c AMP/PKA通路相关。     

试论小肠与相关脏腑病证的传变规律

小肠作为六腑之一，具有受盛、化物、泌别清浊等功能。小肠与心、脾、胃、肺、肝、肾和膀胱以及大肠等脏腑在生理上密切相关，在病理上相互影响，其病变亦相互转化。从小肠与心、小肠与脾胃，小肠与肺，小肠与肝，小肠与肾及膀胱，小肠与大肠等方面对它们之间的相互影响、相互转变来探讨小肠与其他脏腑之间病证的传变规律，以期进一步完善小肠病机理论。