人血浆ACTH的放射免疫分析及临床初步应用

ACTH在血浆中浓度很低,本文用α~(1-28)ACTH联接BSA免疫兔子,生产特异的抗体,制备了稳定的标记品。建立了放射免疫分析法,灵敏度达4pg/ml。不同ACTH浓度,平均回收率为101.8％。测定的批内和批间变异系数分别为2.3～7.0％和8.5～8.8％。整个程序历时4天,操作方便、结果稳定。本文测定健康人(20例)血浆ACTH浓度,于上午8:00的范围值为10～90pg/ml。还进行胰岛素刺激试验和地塞米松抑制试验。对5例病人测定血浆ACTH,结果与临床诊断相符。这对完善肾上腺轴功能的研究有重要的意义。     

用SS-20钙离子分析器测定正常人和病人血清钙离子水平

本研究使用美国ORION公司制造的SS-20钙离子分析器测定了59例正常人和30例病人的血清钙离子水平。每个样品用血清0.5ml,注入后3分钟自动报出结果。测定的批内变异系数为1.72％,批间变异系数为1.8％。59例健康成人,年龄18～54岁,男39例,女20例。男性平均血清钙离子为2.25±0.052mEq/L;女性为2.28±0.079mEq/L,男女无显著差异(P>0.05)。病人中,甲旁亢3例,平均血清钙离子3.23±0.29mEq/     

唾液皮质醇测定的临床意义——生理变化、药物影响和诊断价值

6名正常人肌注ACTH后唾液F分泌高峰时间90分钟,峰值达基值的4.8倍;静滴ACTH8小时唾液F峰值达8.6倍左右,较血浆F反应值明显升高;地塞米松试验唾液F抑制90％,血浆F抑制84.8％。13名正常人昼夜6次唾液F均值1.36ng/ml,11例Cushing综合征患者高达9.1ng/ml,2例addison病患者低至0.14～0.52ng/ml。     

化学发光免疫分析与免疫放射分析检测血清TSH方法比较

目的探讨化学发光免疫分析与免疫放射分析检测血清TSH 2种方法之间的差异。方法对2种方法检测血清TSH进行方法学评价。结果化学发光免疫分析与免疫放射分析检测血清TSH的线性范围分别为0.1~100mU/L和0.15~60 mU/L,化学发光免疫分析的线性范围较宽。2种方法标准曲线的相关系数r分别为0.999 4和0.999 2。化学发光免疫分析的批内变异系数平均为3.1%,免疫放射分析的批内变异系数平均为4.1%,免疫放射分析法在低浓度区域(1.5 mU/L以下)时误差较大,变异系数为16.8%。化学发光免疫分析法高、中、低3种浓度的批间变异分别为3.3%、4.1%、4.6%,免疫放射分析法高、中、低3种浓度的批间变异分别为6.3%、8.9%、15.6%,化学发光免疫分析法较免疫放射分析法重复性好。2种方法测定3种不同浓度的血清回收结果为高值和中值血清回收较好,均在91.3%~104.2%,低值血清回收较差,极低值血清回收更差。用2种方法同时测定50份血清样品TSH含量,其相关系数为0.995,两种方法的测定结果高度正相关。结论2种方法检测血清中TSH含量,均能满足临床诊断要求,化学发光免疫分析法在低浓度区线性范围较宽,在低浓度范围测定较免疫放射分析法更为准确。     

乙型肝炎表面抗原定性测定室内质控物浓度的选择方法

目的 建立定性酶联免疫吸附法(ELISA)测定室内质量控制质控物浓度选择和Levey-Jennings质控图在不同批试剂间连续作图的方法。 方法 以乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的ELISA测定为例,先按NCCLs EP5文件评价方法对系列质控血清(含量分别为0.2、0.5、1.0、2.0和5.0 ng/ml)的批内和批间测定精密度,并根据任一次测定值(S/CO)最好的线性相关确定回归直线方程(y=bx a),选择计算得到的S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV％与该S/CO值的乘积(意即3倍SD)仍大于1的质控物,作为室内质控使用。不同批试剂间质控图的连续,则在换用新批号试剂时,用新批号试剂测定上述系列质控血清,得到一新的直线方程(y2=b2x2 a2)。原批号试剂同样也可得一直线方程(y1=b1x1 a1)。根据两个直线方程即可得到y2/y1之间的换算因子,从而可以将新批号试剂对相同室内质控血清的测定值换算回去,在原质控图上继续作图。结果 所用的HBsAg ELISA测定方法测定含量分别为0.2、0.5、1.0、2.0和5.0ng/ml质控血清的批内变异分别为11.08％、9.49％、9.83％、9.18％和7.25％,批间变异分别为13.25％、14.03％、15.11％、13.29％和9.92％。任选一次测定的具有最好相关的回归直线方程y=3.509x 0.180,可选择的室内质控血清浓度可为0.5或1.0ng/ml。换用其它两批     

唾液皮质醇药物动态试验和病理变化的初步探讨

本文用~3H标皮质醇(F)测唾液、血浆和尿F浓度。6名正常人肌注ACTH(25u)试验中,血和唾液F8Am平均基值分别为141.6和4.4ng/ml;血浆F高峰值在肌注后60～90分钟出现,平均为基值的1.8倍;唾液F峰值在90～120分钟出现,反应倍数平均4.8倍.8Am游离F比率(唾液F/血浆F)3.0％,120分钟升达8.4％。5名正常人静滴ACTH25u8小时,血浆和唾     

Medisafe快速血糖仪性能的评价

目的评价Medisafe血糖仪的性能。方法应用Medisafe血糖仪检测220例静脉全血葡萄糖浓度,与全自动生化分析仪测定的静脉血浆葡萄糖结果进行比较;并检测该仪器的精密度和线性范围,分析不同红细胞压积（HCT）水平对测定结果的影响。结果血糖仪测定值（Y）与生化分析仪测定值（X）的回归方程为Y=0．9731X（r^2=0．9851）。误差分析显示二者之间的检测误差在0％～18％之间。该血糖仪测定结果的批内变异系数（CV）为2．3％～3．6％;不同批号试纸间和不同仪器间的批间CV分别为2．8％～3．5％和3．1％～3．9％。HCT在20％～60％范围内的5个样本的检测结果显示,血糖仪与生化分析仪之间的检测误差为0％～18．4％。结论该血糖仪具有良好的准确度、精密度、线性范围及抗HCT水平变化干扰的能力,且操作简便,适合医院病房检测和糖尿病患者家中自我监测使用。     

酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测血浆中糖基化终极产物

目的建立竞争性ELISA方法，测定血液中的高级糖化终产物的含量。方法对兔及牛血浆白蛋白进行体外葡萄糖修饰，得到糖基化终极产物抗原；用兔此抗原免疫新西兰大白兔得到与其特异结合的抗体。结果1．经过TNBS方法及聚丙稀凝胶电泳鉴定修饰抗原，发现修饰前后蛋白携带自由氨基数至少35％已被葡萄糖修饰且分子量也发生变化。2．免疫获得抗糖基化终极产物的多克隆抗体，并鉴定了此多抗只抗葡萄糖修饰的蛋白而不抗载体蛋白。3．用葡萄糖修饰的蛋白及其多克隆抗体制成ELISA试剂盒，批间、批内变异系数分别为5．8％和9．8％，灵敏度为0．5u／ml。结论得到检测血浆糖基化终极产物的ELISA试剂盒。     

醛固酮对肝星状细胞早期生长反应因子-1信号通路调控的体外研究

目的探讨醛固酮（Aldo）对肝星状细胞（HSC）早期生长反应因子-1（EGR1）信号传导通路的影响。方法采用HSC-T6细胞株，分别给予Aldo 1μmol／L处理10min、30min、1h、2h和3h，western blot检测磷酸化p42／44蛋白的表达。另外，观察细胞外信号调节激酶（ERK）1／2特异性阻断剂U0126、抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）（均预先处理60min，再给予Aldo刺激）和肿瘤坏死因子α对磷酸化p42／44蛋白表达的影响。此外，给予Aldo、U0126和NAC处理后，用电泳迁移率分析（EMSA）检测EGR-1 DNA结合活性的变化；western blot检测血小板衍生生长因子-B（PDGF-B）蛋白的表达。免疫细胞化学检测Aldo对HSC PDGF-B蛋白表达的影响。结果Aldo可诱导磷酸化p42／44的表达，U0126可抑制磷酸化p42／44的表达。EMSA结果显示：Aldo干预HSC 30min后EGR-1 DNA结合活性开始增加，1h达到峰值，然后逐渐减低；U0126可显著抑制Aldo诱导的EGR-1活性增强；NAC对Aldo诱导的EGR-1活性无抑制作用。Aldo可诱导HSC PDGF-B蛋白表达；U0126和NAC对PDGF—B表达无抑制作用。结论Aldo可经ERK1／2通路诱导HSC EGR-1活性增强。Aldo可经EGR—1通路调控PDGF—B的表达。     

人心肌特异表达基因Nelin蛋白的血清水平测定及其意义

目的探讨Nelin蛋白在心血管病患者和正常对照血清表达水平的差别及其意义。方法使用自制的一株Nelin单克隆抗体(MA-H409H5),建立ELISA法标准曲线。通过检测灵敏度(最小检出量)、精确度(批内、批间变异系数)、回收率等以优化实验反应条件,并以此方法测定了580例人血清Nelin蛋白浓度。结果直接ELISA法检测Nelin蛋白的最小检出量为7.8ng/ml,标准曲线在7.8～250.0ng/ml范围内线性良好(r0.99)。精确度测定:平均批内变异系数为4.78%,平均批间变异系数为9.56%。测得回收率为(100±5)%。580例人血清中均可检测到Nelin蛋白的表达,其中正常对照组为(9.34±3.07)μg/ml,冠心病组为(8.57±2.76)μg/ml,该两组Nelin蛋白含量相比有显著性差异(P0.05),而其他各心脏病组与正常组相比均无显著性差异。结论成功建立了人血清Nelin蛋白的ELISA测定法,该方法敏感、特异、可靠。正常对照组和各心血管病患者组均有Nelin蛋白表达,但冠心病组明显低于正常对照组,提示Nelin基因的表达水平可能与冠心病有一定的关系。     

胰腺癌血清PerioStin水平与淋巴结转移的关系

目的 探讨胰腺癌血清Periostin( PN)水平与淋巴结转移的关系.方法 采用ELISA检测血清中PN水平,并进行自制ELISA试剂盒的指标评价.结果 ELISA法检测PN的最小检出限为4.903 ng/ml,标准曲线方程式曲线拟合度R2 =0.968.平均批内变异系数为7.6％,平均批间变异系数为13.15％,回收率为82％ ～ 92％.健康对照者31例的血清PN含量为(22.0±6.8) ng/ml,18例胰腺癌患者的血清PN含量为(37.9±20.9) ng/ml,18例有远处转移的胰腺癌患者的血清PN含量为(45.6±25.8) ng/ml.胰腺癌患者与健康对照者间有显著性差异(P＜0.05),而18例胰腺癌患者与健康对照者和18例有远处转移的胰腺癌患者组间也有显著性差异(P＜0.05).结论 PN-ELISA试剂盒具有良好的灵敏性、特异性和准确性.PN与肿瘤转移有密切关系,且PN蛋白水平的检测可以用于判断胰腺癌和作为诊断胰腺癌是否出现淋巴结转移的指标.     

血浆同型半胱氨酸高效液相色谱法测定

目的 建立高效液相色谱荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸(HCY)的方法。方法 血浆HCY经三丁基磷还原后，与巯基特异结合的荧光物质SBD-F进行衍化反应。衍化反应产物经反向液相色谱进行分离，用荧光检测器测定。结果 所建立的方法HCY浓度在0-45μmol／L范围内与绝对峰面积比呈线性关系，回收率为92．13％-108．04％，样内差异变异系数范围0．5％-3．1％，日内差变异系数范围1．6％-3．8％，日间差变异系数范围2．8％-4．6％。结论 高效液相色谱(HPLC)荧光检测法测定血浆HCY，方法灵敏度高，稳定性及重复性好，可用于临床常规检测和科研工作。     

单克隆抗体双位点夹心ELISA测定人血清载脂蛋白E的研究

利用自制的抗人载脂蛋白E(apoE)单克隆抗体,建立了单克隆抗体双位点夹心ELISA测定apoE的方法,并对该方法的特异性、准确度、精密度和灵敏度进行了评价。载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B、CⅠ、CⅡ、CⅢ不干扰测定,检测下限10ng,回收率101.2％,批内变异系数CV=5.9％,批间CV=8.1％。并测定了1048例正常人和各种疾病患者血清apoE含量。     

包虫病病人唾液中特异性抗体的研究

目的 :研究包虫病病人唾液中的特异性抗体的诊断价值。方法 :用 SPA夹心 EL ISA测定包虫病病人和正常人唾液中 Ig G总量。用抗原中和试验鉴定唾液 Ig G的特异性。结果 :32例包虫病病人和 32例正常人唾液中 Ig G总量分别为 10 5.6± 65.4 μg/ ml和 94 .2± 55.5μg/ ml,差异极显著 ( P<0 .0 1)。抗原中和试验 4 0例包虫病病人唾液 Ig G抗体反应抑制率为 30 %— 82 .1% ,32例正常人唾液无抑制效应。表明唾液中 Ig G抗体为特异性 Ig G抗体。对 89例包虫病病人和 12 9例正常人血清和唾液 Ig G- EL ISA检测结果 ,病人血清阳性率为 92 .1% ,唾液为 78.7%。唾液与血清的阳性符合率为 80 .5% ,阴性符合率为 98.3%。结论 :在包虫病病人唾液中测出特异性 Ig G抗体 ,可作为包虫病的辅助诊断。     

结核病患者唾液异烟肼和利福平浓度

作者选择30例结核病患者(异烟肼慢乙酰化者18例,快乙酰化者12例),每日服用异烟肼300mg 和利福平12mg/kg 后,对其时间配对的唾液和血清标本进行异烟肼和利福平浓度的测定。结果表明,异烟肼弥散入唾液中的速度相当快,服药后第1小时大部分(13/18)患者出现高峰浓度,而且与血清浓度相似.根据唾液浓度推算的异烟肼高峰浓度,药物接触(Exposure)和排泄半衰期等药物动力学参数与根据血清浓度推算的相应值都很相近,其差别均无显著性(P>0.2),而利福平在唾液的浓度明显低于血清,服药后1、2、3、6、8小时,唾液中的几何平均浓度分别为0.2、0.6、0.8、0.5和0.4μg/ml,而血清中分别为3.4、6.5、7.0、4.7和3.0μg/ml。其平均     

急性ST段抬高型心肌梗死PCI术前血清醛固酮水平对近期心力衰竭的预测价值

目的 探讨在急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者中发病初期的血清醛固酮（Aldo）水平是否可以预测近期内心力衰竭的发生。方法 2007年1月～10月连续收集117例STEMI患者,在发病12 h内行急诊冠状动脉介入治疗术(PCI),在术前股动脉穿刺后［发病至抽血时间(5.7±2.5)h］留取血清,采用放射免疫法测定Aldo水平。观察发病后30 d,3个月的心力衰竭的发生情况。结果 按Aldo水平分成3组:Aldo<100 μg/L组,100 μg/L≤Aldo≤200 μg/L组,Aldo>200 μg/L组,随Aldo水平升高,30 d(P<0.05)、3个月(P<0.01)心衰发生率增加。多变量Logistic回归分析中Aldo独立于年龄、性别、家族史、吸烟、高胆固醇血症、高血压、糖尿病等冠心病危险因素,预测30 d心衰发生率（r=0.54,OR 3.3795%CI 1.19-9.60,P<0.05 ）,3个月心衰发生率（r=0.48,OR 2.9895%CI 1.31-6.80,P<0.01）。结论 随着急性心肌梗死早期Aldo的水平增高,心力衰竭事件发生呈明显递增趋势。多变量Logistic回归分析中Aldo为独立预测因素。     

尿液、唾液与血清抗幽门螺杆菌抗体检测的比较

目的：比较尿液、唾液与血清抗幽门螺杆菌（Hp）抗体检测的临床应用价值。方法：应用酶标记免疫吸附测定技术检测102例患尿液、唾液和血清抗Hp IgG，根据快速尿素酶试验，Hp选择性分离培养和组织切片H－E染色确定其Hp感染状态。结果：尿液、唾液和血清三种诊断方法的敏感性、特异性、准确性分别为：96．7％、87．1％、93．5％；93．5％、83．9％、90．3％与95．2％、93．5％、94．5％。结论：以上三种诊断方法依据准确性评优排序，应为：血清方法＞尿液方法＞唾液方法；检测尿抗Hp IgG方法因其准确、简便、易行，应用于流行病学调查尤为可取。     

痛风病人唾液中的尿酸盐水平及其在运动时和昼夜的变化

人体尿酸(以尿酸盐形式存在)的生成和排出处于平衡状态,每日的尿酸盐产量2/3由尿排出,1/3由唾液和肠分泌排泄。作者研究了生理和病理条件下的唾液尿酸盐。测定4例健康志愿者、4例痛风病人以及1例正在接受别嘌呤醇治疗的病人的唾液和血液尿酸盐水平。同时还测定1例志愿者在进行2公里踏车运动测试前、后、休息20分钟后以及全力无氧测试(用自行车测力计,75%体重抗力)30秒后唾液和血液中的尿酸盐水平。此外,还测定另1位志愿者晨4时和下午4时的唾液和血液中的尿酸盐水平。尿酸盐的测定应用尿素酶比色计。结果健康志愿者唾液中尿酸盐水平(上限值:…     

人血清生长激素单克隆抗体放射免疫测定法

本文用杂交瘤技术制备了三株抗人生长激素单克隆抗体3B10、3F3和3H3,进行了抗体性质分析。用其中一株高亲和力、高特异性的单抗3F3,建立了人血清生长激素单克隆抗体放射免疫测定法。方法学考核显示,本方法最小可测量为0.25μg/L,与hPRL和hPL的交叉结合率分别为0.07％和2.8％,批内和批间变异系数分别为4.9％和12.2％,回收率1.013±0.17,稀释试验呈线性关系。用本法测得的hGH值与多抗法相关性好(r=0.95,=1.37 0.96x),两组数据经t检验差异无显著性。用本法测定了32例正常者和8例未经治疗肢端肥大患者的上午空腹血清值,结果与临床相符。     

筛选嗜铬细胞瘤的新方法——离子交换树脂法

本法采用国产离子交换树脂代替进口树脂,测定 尿液总变肾上腺素(Total Metanephrine,TMN),包括变肾上腺素(Metanephrine)和去甲基变肾上腺素(Normetanephrine)。与比色法、薄层层析法、气相色谱法、高压液相色谱法等方法相比,本法简单可靠。变异系数:批内9.48％,批间12.41％;回收率:90.0～99.7％。最小检出量0.2mg/L,线性至