贝壳杉烷二萜单体抗肝癌作用的体外实验研究

目的:研究一种圆滑番荔枝贝壳杉烷二萜单体化合物对人肝癌细胞SMMC-7721生长的抑制作用及其作用机制。方法:以MTT法检测SMMC-7721 细胞经圆滑番荔枝贝壳杉烷二萜单体作用后的活力,用荧光显微镜、扫描电镜观察其形态变化,用流式细胞仪分析细胞周期的变化及计算凋亡率。结果:圆滑番荔枝贝壳杉烷二萜单体对SMMC-7721细胞的抑制作用与浓度呈线性相关,72 h IC50为47.1μmol/L,其抑制作用呈时间依赖性,可使细胞周期阻滞于G0~G1 期,细胞凋亡率为24.98%。结论:圆滑番荔枝中贝壳杉烷二萜单体化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721有显著的抑制作用,可诱导SMMC-7721癌细胞凋亡。     

虫草素对舌癌TCA-8113细胞周期和凋亡的影响

目的:研究虫草素在体外对舌癌TCA-8113细胞周期和凋亡的影响;方法:以噻唑蓝法(MTT)测定虫草素对TCA-8113细胞增殖活性的影响;用流式细胞术测定虫草素对TCA-8113细胞周期的影响情况以及是否诱导TCA-8113发生凋亡作用;采用蛋白免疫印迹检测细胞周期相关蛋白和细胞凋亡相关蛋白的表达情况;结果:虫草素对TCA-8113细胞增殖活性的抑制作用具有浓度依赖性,能够引起TCA-8113细胞发生G2期细胞周期阻滞,并诱导TCA-8113细胞发生凋亡作用;Cyclin B1和Bcl-2表达减少,Cdc2和Bax表达量没用明显变化。结论:虫草素有效的引起TCA-8113发生细胞周期阻滞,诱导TCA-8113细胞凋亡,从而抑制TCA-8113细胞的增殖活性,为进一步应用于临床治疗舌癌等肿瘤疾病提供了依据。     

中医药调控Bcl-2表达诱导胃癌及癌前病变细胞凋亡的研究

胃癌是我国最常见的消化道肿瘤，发病率及死亡率居恶性肿瘤之首。细胞凋亡是恶性肿瘤普遍的自发现象，肿瘤的发生、发展、治疗及预后均与凋亡关系密切。诱导肿瘤细胞凋亡是成功治疗肿瘤的基础和关键。细胞凋亡过程由众多基因共同调控。Bcl-2为一类抗凋亡基因，其通过抑制凋亡而参与肿瘤的发生。研究药物对调节细胞凋亡相关基因的影响对于肿瘤的预防和治疗有重要的意义。其中，中药对抑制凋亡基因Bcl-2的调节作用受到了众多学的关注。     

当归多糖诱导K562白血病细胞凋亡及细胞周期变化的研究

有关资料表明，细胞凋亡与肿瘤发生、发展、恶性转移等密切相关，因此筛选特异性药物治疗肿瘤是目前肿瘤学研究热点之一。多糖在分子生物学中起着控制细胞分化，调节细胞生长，衰老和死亡的决定性作用。当归多糖（Anglica polysacchafide，APS）是中医药学补血药当归的主要有效成分之一，近年来APS对造血系统影响及抗恶性肿瘤的实验药理学研究取得较快进展。文献报道APS对多种移植性肿瘤和白血病细胞有抑制作用，但对其机理研究尚不清楚。本研究利用体外细胞培养法，结合流式细胞术研究APS对白血病细胞株K562细胞增殖，细胞周期分布及细胞凋亡的影响。     

姜黄素与博来霉素联用对A549细胞增殖抑制及细胞周期和凋亡的影响

目的:研究姜黄素和博来霉素联合应用对人肺泡Ⅱ型样细胞A549细胞增殖和细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨姜黄素抗博来霉素诱导的肺纤维化机制。方法:采用MTT法观察姜黄素和博来霉素对A549细胞的增殖抑制作用,并用流式检测细胞周期分布,凋亡试剂盒检测细胞凋亡。结果:姜黄素及博来霉素能抑制A549细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性。姜黄素(Cur)浓度为60μmol/L与博来霉素(BLM)2、4、6、8μg/mL联合24h的抑制率显著高于单用博来霉素组;姜黄素可引起体外培养的A549细胞G0/G1期阻滞;而且对G0/G1期阻滞随作用时间延长而增强。单用博来霉素刺激细胞,培养24h和48h,对细胞周期各个时期的影响没有统计学意义;姜黄素联合博来霉素诱导A549细胞凋亡,细胞核变的不规则皱缩,可见凋亡小体。结论:姜黄素联合博来霉素在体外对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有显著阻滞作用,并可改变细胞凋亡;姜黄素和博来霉素联合应用可能通过改变肺泡上皮细胞细胞周期分布,并通过影响肺泡细胞凋亡从而起到抑制博来霉素治疗过程中肺纤维化的发生发展。     

青藤碱对类风湿关节炎患者滑膜细胞周期的影响

目的探讨中药青藤碱(SN)治疗类风湿关节炎(RA)的相关机制,研究SN诱导滑膜细胞凋亡与细胞周期改变的关系。方法姬姆萨染色光学显微镜下观察滑膜细胞凋亡形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期的表达。结果光镜下可见细胞变圆、细胞质红染、核固缩等典型凋亡形态学变化。流式细胞仪结果显示,SN诱导滑膜细胞凋亡并主要作用于细胞周期G1—S期。结论SN可能通过诱导细胞凋亡而抑制滑膜细胞增殖,这种作用与细胞周期有关,这些有助于将来治疗类风湿关节炎方案的合理设计。     

大黄总蒽醌对人肾小管上皮细胞毒性作用及相关机制研究

目的:探讨在大黄总蒽醌对人肾小管上皮细胞毒性作用及相关机制。方法:以MTT法检测细胞毒性;CPE观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率。结果:大黄总蒽醌对HK-2细胞增殖有直接的抑制作用,呈一定的量效关系,并使细胞形态发生相应改变。大黄总蒽醌能抑制HK-2细胞S期向G2/M期的转化,引起细胞凋亡,尤其在较低剂量(3.75 mg/L)下就可以引起晚期凋亡/坏死,当药物浓度在30 mg/L以下剂量时,其抑制细胞增值作用和对细胞周期的阻滞作用相对较弱,在30mg/L增加到60 mg/L时的过程中,抑制细胞增值和细胞周期的阻滞作用增加明显,甚至出现了明显的晚期凋亡/坏死,高浓度时凋亡率大于50%。结论:大黄总蒽醌对HK-2细胞具有一定的毒性作用,其毒性作用可能与影响细胞周期和凋亡相关。     

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI的作用

目的 研究狗舌草提取物对U266细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI的作用.方法 U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI.结果 狗舌草总提取物影响266细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡细胞增加,用AnnexinV/PI染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与狗舌草提取物有剂量依赖关系.结论 狗舌草提取物对U266细胞有诱导细胞凋亡作用.     

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI的作用

目的 研究狗舌草提取物对U266细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI的作用.方法 U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI.结果 狗舌草总提取物影响266细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡细胞增加,用AnnexinV/PI染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与狗舌草提取物有剂量依赖关系.结论 狗舌草提取物对U266细胞有诱导细胞凋亡作用.     

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI的作用

目的 研究狗舌草提取物对U266细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI的作用.方法 U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡标志物AnnexinV/PI.结果 狗舌草总提取物影响266细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡细胞增加,用AnnexinV/PI染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与狗舌草提取物有剂量依赖关系.结论 狗舌草提取物对U266细胞有诱导细胞凋亡作用.     

紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡及其机制的研究

目的:研究紫草素诱导体外培养的子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡作用及其机制。方法:流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率变化;免疫组化法(SABC法)检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:紫草素可诱导细胞凋亡,改变细胞周期分布,多数细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);紫草素可上调Bax和下调Bcl-2基因蛋白的表达,与空白组对照差异有统计学意义(P<0.05)。结论:紫草素能够诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,其凋亡机制可能与促进Ishikawa细胞中Bax上调,Bcl-2下调相关。     

雷公藤甲素对人正常肝细胞L-O2增殖的影响及机制研究

目的:观察雷公藤甲素(Triptolide,TP)对人正常肝细胞(L-O2)增殖的影响及机制研究。方法:采用CCK-8法、流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率的方法。结果:TP对L-O2细胞的增殖呈现剂量及时间依赖性抑制作用;TP对L-O2细胞周期的影响主要表现在将细胞阻断在S期;细胞的早期凋亡率与对照组相比有显著提高(P0.01)。结论:TP对L-O2细胞具有增殖抑制作用,其机制可能与阻滞细胞周期和诱导L-O2细胞凋亡。     

蛇葡萄素对人前列腺癌PC3细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究蛇葡萄素对人前列腺癌PC3细胞的细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:利用MTT比色法检测蛇葡萄素对PC3细胞的抑制作用,并计算IC50;流式PI单染法检测细胞周期;流式Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果:蛇葡萄素能明显抑制PC3细胞增殖,并呈剂量依赖关系;使细胞增殖阻滞于S期,G0/G1期细胞数减少;蛇葡萄素对PC3细胞作用72小时后的凋亡率随剂量增加而加大。结论:蛇葡萄素显著抑制PC3细胞的增殖,引起细胞S期阻滞,诱导细胞凋亡。     

葛根素对去卵巢裸鼠荷人乳腺癌肿瘤生长的影响

目的:考察葛根素对荷人乳腺癌去卵巢裸鼠肿瘤生长、细胞周期及其凋亡的影响。方法:乳腺癌细胞MDA-MB-231接种于去卵巢裸鼠,待肿瘤长至约0.1 cm~3时随机分组,经口服给予葛根素125、25、5 mg·kg~(-1)干预,以肿瘤生长曲线、肿瘤重量、肿瘤细胞流式细胞仪检测等指标考察葛根素对乳腺癌肿瘤细胞的影响。结果:葛根素能明显抑制去卵巢裸鼠乳腺癌的生长,125 mg·kg~(-1)剂量对肿瘤体积和重量的抑制率分别达24.2%和30.3%,并呈一定的量效关系;且能促进乳腺癌细胞的凋亡,抑制细胞周期S期到G_2/M期的转换。结论:葛根素具有抑制荷人乳腺癌去卵巢裸鼠肿瘤生长作用,其机制可能与促进乳腺癌细胞的凋亡、抑制细胞周期S期到G_2/M期的转换有关。     

补益方抗环磷酰胺造模小鼠脾细胞凋亡作用的研究

目的:研究六味地黄丸等5种补益方对环磷酰胺(CPP)造模小鼠脾细胞凋亡及细胞周期的影响.方法:选择ICR小鼠,采用流式细胞术检测脾细胞凋亡率及细胞周期等.结果:5种补益方中,四君子汤、六味地黄丸、生脉散、金匮肾气丸能拮抗CPP引起的脾细胞增殖抑制;六味地黄丸、四君子汤能拮抗CPP引起的脾细胞凋亡;5种补益方均能拮抗CPP所致的脾脏萎缩.结论:5种补益方均有不同程度的改善CPP所致脾脏损害的作用,其中以四君子汤、六味地黄丸效果较佳.     

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞凋亡的研究

目的：研究狗舌草提取物对U266细胞的细胞凋亡作用及其机制。方法：U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,电镜观察细胞凋亡形态,DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡条带。用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率。结果：狗舌草提取物作用U266细胞,电镜观察到细胞凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡条带,狗舌草提取物影响U266细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡细胞增加,用Annexin V/PI染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与狗舌草提取物有剂量依赖关系。结论：体外实验证实,狗舌草提取物对266细胞有细胞凋亡作用,存在剂量依赖关系。     

中药诱导细胞凋亡抗肿瘤转移治疗中的可能机制

关于恶性肿瘤的侵袭与转移机制，在过去的２０年里，分子基础研究的经典内容是细胞迁移机制，细胞基质降解与粘附机制等。近年来，基因水平的研究，明确了癌基因和抑癌基因及转移相关基因如何引发癌细胞的增殖与凋亡及转移过程。细胞凋亡学说，从一个全新的角度，解释了细胞的增强与凋亡这一矛盾对立统一体与癌基因的活化和抑癌基因功能的丧失及肿瘤转移之间的关系。并分析了肿瘤细胞凋亡与中医药抗肿瘤转移之间的可能性关系，为中医抗肿瘤转移治疗提供理论依据。     

转录因子E2F-1与人类肿瘤

核转录因子E2F-1在细胞周期调控，细胞凋亡和肿瘤发生中具有重要作用。近年来，研究表明E2F-1在人类肿瘤的发生发展中既能作为癌基因又能作为抑癌基因起作用。本文将就E2F-1与肿瘤的关系进行综述。     

桦木酸对人肝癌HepG2肿瘤干细胞增殖的影响

目的观察桦木酸(betulinic acid,BA)对人肝癌HepG2肿瘤干细胞增殖的影响,并从细胞生长周期和细胞凋亡两方面初步探讨其抗肝癌的作用机制。方法体外培养人肝癌HepG2肿瘤干细胞并证明其自我更新能力。CCK-8法检测40、20、10、5、2.5、1.25μmol/L BA作用人肝癌HepG2肿瘤干细胞24、48 h的细胞活力;40、20、10、5μmol/L BA作用人肝癌HepG2肿瘤干细胞48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。结果 BA对人肝癌HepG2肿瘤干细胞增殖有明显的抑制作用,并呈一定的量-效关系;BA能明显影响肿瘤干细胞周期,诱导肿瘤干细胞凋亡,40μmol/L BA明显阻滞细胞周期于S期,且细胞凋亡率达到10.86%。结论 BA对人肝癌HepG2肿瘤干细胞增殖具有明显的抑制作用,其可能通过影响肿瘤干细胞周期及诱导肿瘤干细胞凋亡而发挥作用。     

鹿茸多肽对人胶质瘤细胞生长抑制率及细胞周期的影响

目的观察鹿茸多肽对人胶质瘤细胞生长抑制率及细胞周期的影响,探讨鹿茸多肽抑制肿瘤细胞的增殖及调节细胞周期作用的机制。方法在体外传代的培养人胶质瘤细胞(U251)细胞株中加入不同浓度(50、100、200、400、800μg/mL)的鹿茸多肽,诱导培养48 h,镜下观察细胞的形态学变化,MTT法检测鹿茸多肽对肿瘤细胞增殖情况,计算抑制率;流式细胞术(FCM)分析鹿茸多肽,诱导培养肿瘤细胞48 h后,细胞周期变化情况。结果形态学观察表明,与对照组相比,随着药物剂量的增加,实验组细胞密度逐渐降低,细胞间隙逐渐增宽,细胞体积逐渐缩小,细胞内颗粒逐渐增多。MTT法检测结果表明,鹿茸多肽对肿瘤细胞的增殖抑制作用明显,细胞生长抑制率随着剂量增加抑制率逐渐增加,呈现出良好的剂量依赖性。FCM检测表明,肿瘤细胞G0/G1期与S期所占百分比逐渐减少,G2/M期阻滞。48 h均出现凋亡峰,及凋亡细胞群。结论鹿茸多肽对体外培养的人胶质瘤细胞的增殖有抑制作用,并具有量效关系。可使肿瘤细胞阻滞在细胞周期的G2/M期,继而引起的细胞周期阻滞和诱导其凋亡。