捕获ELISA法检测特异性IgM抗体早期诊断流行性出血热

用捕获ＥＬＩＳＡ法检测流行性出血热（ＥＨＦ）特异性ＩｇＭ抗体对ＥＨＦ早期诊断有重要价值。该法经特异性与灵敏性的检查效果满意：测定５例已知ＥＨＦ病人血清，结果均为阳性；测定１２例肝炎与乙脑病人及５例健康人血清，结果均为阴性；阳性血清用２－巯基乙醇破坏ＩｇＭ，结果为阴性；阴性血清加ＲＦ阳性血清，结果无假阳性。病程３日的血清，荧光法检查为阴性，而该法为阳性。对ＥＨＦ不同病日的系列血清检测结果：病程２日即可出现阳性，３日达８０％，４日以后为１００％。因此早期诊断的价值很大。检查临床疑似ＥＨＦ的１５例病人，８例阳性。由于早期病人血清阳性率并非１００％，因此对可疑病人早期标本阴性结果，有必要进行第２份血清样品检测。     

两种血清型HFRS患者病程中及病后4种特异性抗体测定分析

为评价汉滩及汉城型肾综合征出血热患者免疫状况，用ＥＬＩＳＡ法检测了５４例病程中，４７例病后１－６年ＨＦＲＳ患者（汉滩２４例，汉城２３例）血清中特异性ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体。在病后血清中检出率及抗体滴度几何均数（ＧＭＴ）依次为ＨＦＲＳ－ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ，各本间差异显著（Ｐ〈０．００５），其中ＨＦＲＳ－ＩｇＧ抗体水平在病后第４年仍达１：１００以上（ＧＭＴ值）；ＨＦＲＳ－ＩｇＡ     

HFRS患者血清特异性抗体及特异性循环免疫复合物同步测…

为进一步研究ＨＦＲＳ免疫损伤机制，用ＥＬＩＳＡ法同步测定了１０８例不同临床型，不同病日，病期ＨＦＲＳ患者血清中特异性ＩｇＡ，ＩｇＧ，ＩｇＭ抗体以及ＨＦＲＳ病毒特异性ＩｇＡ，ＩｇＧＩｇＭ型循环免疫复合物（ＣＩＣ）的水平及检出率，发现ＨＦＲＳ－ＩｇＡ型抗体水平在轻型病例高于中，重型病例，其差异在病程早期（发热，低血压休克期，或是３～８病日）尤为突出，而ＩｇＡ型ＣＩＣ则未见到上述差异，ＨＦＲＳ－ＩｇＧ，     

抗组蛋白 Ｈ２ Ａ 抗体间接 ＥＬＩＳＡ 法的建立和临床初步 应用

目的 建立检测血清抗 Ｈ２Ａ 抗体的间接 ＥＬＩＳＡ 技术，探讨抗 Ｈ２Ａ 抗体对类风湿关节炎（ ＲＡ） 的临床意义。 方法 ＲＴ?ＰＣＲ扩增 Ｈ２Ａ 基因，将其克隆到原核表达载体 ｐＥＴ２８ａ，对重组质粒 Ｈ２Ａ ／ ｐＥＴ２８ａ 进行原核表达，经 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测后，利 用 Ｈ２Ａ 重组蛋白建立检测人血清中抗 Ｈ２Ａ 抗体的间接 ＥＬＩＳＡ 方法。 用建立的间接 ＥＬＩＳＡ 方法检测 ５０ 例 ＲＡ 患者和 ５０ 例健 康人对照组血清抗 Ｈ２Ａ 抗体水平。 结果 表达的 Ｈ２Ａ 蛋白相对分子量约为 １５ ０００，与预期大小相符，ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 结果表明组 蛋白 Ｈ２Ａ 与抗 Ｈ２Ａ 抗体阳性血清具有良好的反应原性。 经方法学评估，建立的 ＥＬＩＳＡ 法在特异性、可重复性方面均达到检 测要求。 ＲＡ 组抗 Ｈ２Ａ 抗体水平高于健康人对照组（Ｐ＜０．０１）。 当 ｃｕｔ?ｏｆｆ 值设为 ０．４９４ 时，ＲＡ 患者血清抗 Ｈ２Ａ 抗体的阳性率 为 ８４％（４２ ／ ５０），明显高于健康人对照组 ２０％（１０ ／ ５０），差异具有统计学意义（χ２ ＝ ４１．０２６， Ｐ＜０．０１）。 结论 成功建立了检测 血清抗 Ｈ２Ａ 抗体的间接 ＥＬＩＳＡ 技术。 ＲＡ 患者血清中抗 Ｈ２Ａ 抗体水平明显高于健康人对照组。 抗 Ｈ２Ａ 抗体在 ＲＡ 患者血清 中出现可能具有重要的致病意义。     

应用PCR和ELISA法检测新生儿不同标本中的巨细胞病毒

为了解新生儿感染巨细胞病毒检测方法的可靠性，本文用ＥＬＩＳＡ法筛１８１８例孕妇，查出ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性４６例，并以５０例ＣＭＶ－ＩｇＭ阴性作为对照组，在其分娩时用ＰＣＲ检测脐血、新生儿血、新生儿尿中ＣＭＶ－ＤＮＡ，用ＥＬＩＳＡ法测血清ＤＣＭＶ－ＩｇＭ。结果显示对照组两种方法均为阴性，实验组ＥＬＩＳＡ法阳性率５％，ＰＣＲ法阳性率２７％有显著差异。两种方法比较ＰＣＲ法具有高度特异性和敏感性。并提出先天     

逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）检测汉坦病毒（HTV）

目的探讨ＲＴ－ＲＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检测汉坦病毒ＲＮＡ及抗原的敏感性。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检侧汉坦病毒Ａ９株细胞培养物中病毒ＲＮＡ和抗原。结果ＲＴ－ＰＣＲ敏感性最高，种毒后１天即可检出病毒ＲＮＡ；其次为ＥＬＩＳＡ，种毒后２天可检出冻融细胞上清内的病毒抗原；ＩＦＡ检出感染细胞内病毒抗原的最短时间为７２小时。ＰＣＲ产物的序列分析结果表明，该毒株与汉坦病毒７６－１１８株Ｍ片断的同源性为８１．８％，从而验证了ＲＴ－ＰＣＲ的特异性。结论ＲＴ－ＰＣＲ的敏感性高于双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ。     

PCR和ELISA对单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎的诊断价值

应用ＰＣＲ和ＡＢＣ－ＥＣＩＳＡ法同步检测１０４例临床拟诊病毒性脑炎患者配对脑脊液和血清１３６份。其中２１例患者的３４份配对标本特异性ＩｇＧ阳性及３１例患者的４１份脑脊液中ＨＳＶ－Ⅰ型ＤＮＡ阳性，判为单纯疱疹病毒性脑炎。ＰＣＲ在病早期阳性率较高，病中晚期ＩｇＧ阳性较集中，二法可在临床诊断中互补．     

孕早期特异性IgM抗体检测Torch感染的实际诊断价值

目的：探讨孕早期检测特异性ＩｇＭ抗体诊断Ｔｏｒｃｈ感染的实际诊断价值。方法：采用ＥＬＩＳＡ法和ＰＣＲ技术对照测定１０２例早孕妇女的特异ＩｇＭ抗体和Ｔｏｒｃｈ病原体。结果：以ＰＣＲ检测阳性作为金标准，弓形体ＩｇＭ的敏感性达１００％，特异性为７２４％，阳性预测值为１２９％，阴性预测值为１００％；风疹病毒ＩｇＭ和ＰＣＲ检测无阳性发现；巨细胞病毒ＩｇＭ的敏感性为９５７％。特异性为４４３％，阳性预测值为３３３％，阴性预测值为９７２％，疱疹病毒的敏感性为８８９％，特异性为５７０％，阳性预测值为１６７％，阴性预测值为９８１％。其中弓形体和巨细胞病毒的敏感性高，但阳性预测值低。结论：ＥＬＩＳＡ法检测Ｔｏｒｃｈ特异性ＩｇＭ抗体作为临床筛查是非常有用和必要的，但仅凭ＩｇＭ抗体阳性尚不能说明孕妇目前是否感染，应对ＩｇＭ抗体阳性者进一步做ＰＣＲ－ＤＮＡ测定。     

应用聚合酶链反应技术对汉坦病毒检测分型研究

为探讨肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）的病毒检测和分型及其治疗，分别应用ＲＴ－ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ检测９５例ＨＦＲＳ病人血清中的ＨＦＲＳＶ基因及ＳＩＬ－２Ｒ的含量。结果显示：ＨＦＲＳＶ基因检出率为３５．７９％，越早期阳性率越高，以汉坦型为主，并与血凝抑制试验检测结果相符。ＳＩＬ－２Ｒ的含量在发病过程中皆明显升高，其程度随病期进展而改变，与病的轻重呈正比。     

逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）检测汉坦病毒（HTV）

目的探讨ＲＴ－ＲＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检测汉坦病毒ＲＮＡ及抗原的敏感性。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检侧汉坦病毒Ａ９株细胞培养物中病毒ＲＮＡ和抗原。结果ＲＴ－ＰＣＲ敏感性最高，种毒后１天即可检出病毒ＲＮＡ；其次为ＥＬＩＳＡ，种毒后２天可检出冻融细胞上清内的病毒抗原；ＩＦＡ检出感染细胞内病毒抗原的最短时间为７２小时。ＰＣＲ产物的序列分析结果表明，该毒株与汉坦病毒７６－１１８株Ｍ片断的同源性为８１．８％，从而验证了ＲＴ－ＰＣＲ的特异性。结论ＲＴ－ＰＣＲ的敏感性高于双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ。