水飞蓟宾通过降低MEK/ERK途径依赖的MMP9蛋白表达抑制人乳腺癌细胞的侵袭转移

目的：探讨水飞蓟宾对人乳腺癌细胞生长和侵袭转移的影响及机制。方法：用不同浓度水飞蓟宾处理人乳腺癌细胞系MCF-7 24h,用MTT法和台盼蓝染色法检测水飞蓟宾对MCF-7细胞的抑制作用;用transwell技术检测水飞蓟宾对MCF-7细胞侵袭转移的影响;Western blot检测水飞蓟宾对MCF-7细胞MEK及ERK蛋白磷酸化水平及MMP9表达水平的影响。结果：水飞蓟宾可显著抑制MCF-7细胞的增殖并造成肿瘤细胞死亡;水飞蓟宾通过抑制MEK和ERK的磷酸化降低MMP9的表达并抑制MCF-7细胞侵袭转移的能力。结论：水飞蓟宾抑制人乳腺癌细胞的生长和侵袭转移。     

长链非编码RNA PVT1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨PVT1加重宫颈癌细胞的恶性生物学行为的作用机制.方法 设计shRNA干扰PVT1,接着用sh-PVT1单独或联合miR-484 inhibitor转染SiHa细胞,荧光定量检测PVT1及miR-484的表达水平;荧光素酶报告实验确定PVT1和miR-484的靶向关系;BrdU染色检测PVT1对细胞生长的影响...     

安罗替尼对宫颈癌细胞增殖和迁移与侵袭的影响及作用机制

目的 研究安罗替尼对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 取对数生长期宫颈癌SiHa细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验根据半数抑制浓度（IC50）确定安罗替尼实验浓度,将SiHa细胞分为对照组（0μmol/L）、低浓度组（5μmol/L）、中浓度组（10μmol/L）、高浓度组（20μmol/L）。以平板克隆实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测安罗替尼对SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。以Western blot法检测血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-9、上皮钙黏附素（E-cadherin）、无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)和β-连环蛋白（β-catenin）的表达水平。结果 CCK-8实验显示安罗替尼能够剂量依赖性抑制SiHa细胞的增殖,作用24、48和72 h的IC50分别为（26.96±2.25）、（13.59±1.13）和（9.27±0.75）μmol/L。平板克隆实验显示,处理SiHa细胞48 h后,对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组细胞克隆形成率分别为（62.05±7.88）%、（39.96±5.1...     

白藜芦醇对银屑病细胞生长的影响及其作用机制的探讨

目的 探讨白藜芦醇对银屑病细胞生长的影响及其作用机制。方法 不同浓度的角质细胞生长因子（KGF）诱导人永生角质形成细胞（HaCaT）,显微镜观察及四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法检测HaCaT细胞增殖。选出最佳浓度作用HaCaT细胞复制银屑病模型,采用不同浓度白藜芦醇作用HaCaT细胞,计算半抑制浓度（IC50）,根据IC50选出后续实验白藜芦醇的浓度;将银屑病模型细胞分为阴性对照组（30 μg/L生理盐水）,2.5 μmol/L、5.0 μmol/L、7.5 μmol/L白藜芦醇组,阳性对照组（5.0 μg/mL维A酸）及空白对照组（未加任何药物）,MTT法检测各组银屑病模型细胞的增殖,流式细胞术检测各组银屑病模型细胞的凋亡率,Western blotting检测各组银屑病模型细胞Caspase-3、p-ERK1/2、p-P38蛋白的表达。结果 不同KGF浓度组HaCaT细胞0 h、12 h、24 h、48 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果 ①不同时间点的OD值有差异（P <0.05）;②不同浓度组的OD值有差异（P <0.05）,40 ng/mL KGF组的OD值高于其他浓度组;③不同浓度组OD值的变化趋势有差异（P <0.05）,40 ng/mL KGF组的OD值从24 h开始明显高于其他浓度组。0 μmol/L、0.5 μmol/L、1.0 μmol/L、2.0 μmol/L、4.0 μmol/L白藜芦醇作用HaCaT细胞24 h后的OD值比较,差异有统计学意义（P <0.05）,白藜芦醇浓度升高OD值降低,白藜芦醇可抑制HaCaT细胞增殖,IC50值约5.3 μmol/L。空白对照组、阴性对照组、2.5 μmol/L白藜芦醇组、5.0 μmol/L白藜芦醇组、7.5 μmol/L白藜芦醇组、阳性对照组银屑病模型细胞24 h、48 h、72 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果 ①不同时间点的OD值有差异（P <0.05）;②各组OD值有差异（P <0.05）,③各组OD值的变化趋势有差异（P <0.05）,从48 h开始,5.0 μmol/L、7.5 μmol/L白藜芦醇对银屑病模型细胞具有一定的抑制增殖作用。空白对照组、阴性对照组、2.5 μmol/L白藜芦醇组、5.0 μmol/L白藜芦醇组、7.5 μmol/L白藜芦醇组、阳性对照组银屑病模型细胞的凋亡率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,5.0 μmol/L、7.5 μmol/L的白藜芦醇对银屑病模型细胞有促凋亡作用。5.0 μmol/L白藜芦醇组、7.5 μmol/L白藜芦醇组、阳性对照组与阴性对照组和空白对照组比较,Caspase-3蛋白相对表达量升高（P <0.05）,p-ERK1/2、p-P38蛋白相对表达量降低（P <0.05）。结论 白藜芦醇可能是通过抑制ERK/MAPK和/或P38/MAPK通路发挥作用进而抑制银屑病细胞增殖并促进其凋亡,具体作用机制还有待更深入研究。     

川芎嗪对宫颈癌细胞增殖和侵袭转移的抑制作用及分子机制

目的 探究川芎嗪(TMP)对人宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法 用含有质量浓度为0、0.25、0.50、1.00和2.00 mg·mL^-1 TMP的培养基处理人宫颈癌SiHa细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖能力;用Transwell小室检测细胞侵袭、迁移能力;用蛋白免疫印记法检测细胞内上皮-间质转化(EMT)相关蛋白、基质金属蛋白酶2/7/9(MMP2/7/9)和PI3K/AKT/GSK-3β通路相关蛋白的表达水平。结果 在0.25～2.00 mg·mL^-1浓度范围内,TMP对SiHa细胞的增殖、侵袭和迁移表现出浓度依赖性的抑制作用(P<0.05或P<0.01);与0 mg·mL^-1 TMP处理组相比,0.50、1.00和2.00 mg·mL^-1 TMP处理组细胞内E-Cadherin、PI3K、p-AKT及p-GSK-3β表达水平显著上升,而N-cadherin、Vimentin、β-Catenin和MMP2/7/9的表达水平显著下降(P<0.05或P<0....     

斑蝥素通过抑制MAPK信号通路调控宫颈癌细胞凋亡、迁移及侵袭行为的机制

目的 宫颈癌是继乳腺癌、结肠直肠癌和肺癌之后的女性第四大癌症,严重影响女性身体健康和生活质量。中国是宫颈癌的高危地区之一。来源于大斑芫菁和眼斑芫菁干燥虫体的斑蝥素(cantharidin,CTD)具有抗肿瘤活性且可诱导多种肿瘤细胞凋亡。本文旨在探索斑蝥素对Hela宫颈癌细胞凋亡、迁移和侵袭方面的影响及其相关机制。 方法 CCK-8检测细胞活力;流式细胞术分析细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell分析细胞侵袭;蛋白印迹检测P38、P-P38、P-MAPKAPK和P-Hsp27的表达。 结果 低浓度(<20 μM)的斑蝥素处理Hela细胞对细胞活力无明显影响,细胞存活率在80%以上。高浓度(>20 μM)的斑蝥素处理Hela细胞后会降低Hela细胞活力,细胞存活率在80%以下。与对照组相比,5、10、20 μM斑蝥素组细胞凋亡率依次升高(均P<0.05)。斑蝥素(5、10 μM)处理Hela细胞后,细胞迁移和侵袭能力明显减弱(均P<0.05);20 μM斑蝥素处理Hela细胞后,细胞迁移和侵袭能力减弱更明显(P<0.01)。与对照组相比,5 μM斑蝥素组P-P38/P38的比值、P-MAPKAPK和P-Hsp27表达明显降低(均P<0.05);10 μM斑蝥素组P-P38/P38的比值、P-MAPKAPK和P-Hsp27表达显著降低(均P<0.01);20 μM斑蝥素组P-P38/P38的比值、P-MAPKAPK和P-Hsp27表达降低更明显(均P<0.001)。 结论 斑蝥素可通过抑制MAPK信号通路提高Hela宫颈癌细胞的凋亡,降低细胞迁移及侵袭能力。      

环状RNA hsa_circ_0002185对乳腺癌细胞瘤细胞活力和侵袭能力的影响及其作用机制

目的 ：探讨环状RNA hsa＿circ＿0002185对乳腺癌细胞瘤细胞活力和侵袭能力的影响及其作用机制。方法 ：收集2018年1月至2020年1月在宁夏医科大学总医院接受根治性手术治疗的20对乳腺癌组织及癌旁,通过qRT-PCR检测hsa＿circ＿0002185和hsa-miR-1248在人乳腺上皮细胞MCF10A和人乳腺癌细胞（MCF-7、T47D、BT-474和SK-BR-3）中m RNA的表达水平。构建T47D-siCirc(hsa＿circ＿0002185沉默)和T47D-NC（空载体对照）细胞株系,并以T47D作为空白对照,qRT-PCR检测hsa＿circ＿0002185 m RNA的表达水平;分别采用CCK-8细胞活性实验、划痕实验和Transwell实验检测hsa＿circ＿0002185对T47D细胞的增殖、迁移和侵袭能力;免疫荧光实验检测E-cadherin和Vimentin表达;使用生物信息学网站Circular RNA Interactome预测hsa＿circ＿0002185可互补结合的miRNA,再根据Targetscan网站预测相应miRNA可靶向结...     

调控miR-642a-5p表达对宫颈癌HeLa细胞生物学行为的影响及机制研究

目的:探究调控微小RNA(miR)-642a-5p表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制。方法:通过转染不同质粒将Hela细胞分为miR-642a-5p mimic组、miR-642a-5p mimic NC组,以未做任何处理的Hela细胞作为对照组。RT-qPCR法检测miR-642a-5p、NF-κB mRNA的表达水平,Western blot法检测NF-κB p65蛋白的表达水平,MTT法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:与对照组、miR-642a-5p mimic NC组比较,miR-642a-5p mimic组miR-642a-5p的表达量及细胞凋亡率升高,NF-κB mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平及转染24、48 h的细胞增殖活性、侵袭细胞个数、划痕愈合率降低(均P<0.05);对照组与miR-642a-5p mimic NC组miR-642a-5p、NF-κB mRNA、NF-κB p65蛋白的表达水平及转染24、48 h细胞增殖活性、侵袭细胞个数、划痕愈合率、细胞凋亡率比较,...     

氧化苦参碱通过P38 MAPK通路抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖

目的 观察氧化苦参碱(OXY)对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响,并探讨其机制及作用.方法 人宫颈癌HeLa细胞经过系列浓度的OXY(1.0、2.0和4.0 mg/ml)处理不同时间后,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖的变化.免疫印迹(Western blot)方法测定OXY对HeLa细胞PCNA、Cyclin D1和P38 MAPK、P-P38MAPK计学意义表达的影响.并采用Annexin V-PI双染测定细胞凋亡.结果 氧化苦参碱成浓度时间依赖性抑制HeLa细胞增殖;高浓度氧化苦参碱(4.0 mg/ml)不仅抑制HeLa细胞增殖,而且促进细胞凋亡.与对照组比,OXY处理细胞的PCNA和Cyclin D1蛋白表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),而P-P38 MAPK蛋白表达水平明显升高;P38 MAPK特异性抑制剂可缓解OXY对HeLa细胞增殖的抑制率,增加PCNA和Cyclin D1蛋白表达.结论 OXY能够通过提高P38 MAPK磷酸化而下调PCNA和Cyclin D1表达,抑制HeLa细胞增殖.     

水飞蓟宾对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用

目的 探讨水飞蓟宾对硫代乙酰胺(TAA)诱导的肝纤维化大鼠肝组织的保护作用及对TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用.方法 45只大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组及水飞蓟宾组,每组15只.除对照组外,其余大鼠使用硫代乙酰胺建立肝纤维化大鼠模型,水飞蓟宾组大鼠按照75.6 mg/kg的剂量给予水飞蓟宾灌胃,对照...     

miR-3074通过靶向EPS8基因对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨miR-3074通过靶向调节表皮生长因子受体通路底物8(epidermal growth factor receptor substrate 8,EPS8)基因表达对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响。方法 应用OncoLnc在线数据库分析miR-3074表达水平与宫颈癌患者总生存期的关系。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测miR-3074在宫颈癌细胞系(SiHa、HCC94、C33A、HeLa)和正常宫颈上皮细胞H8中的表达。选取miR-3074表达最低的细胞系,分别转染对照模拟物(对照组)和miR-3074模拟物(miR-3074组)。CCK-8法和Transwell实验分别检测细胞增殖活力和侵袭能力。生物信息学软件RNAhybrid预测miR-3074的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-3074与靶基因的靶向关系。qRT-PCR和Western blot法检测miR-3074对靶基因表达的影响。结果 miR-3074表达水平较高的宫颈癌患者总生存期长于miR-3074表达水平较低的患者,差异有统计学意义(P<0.01)。与H8细胞比较,宫颈癌细胞系中miR-3074表达降低(P<0.05),miR-3074表达最低的细胞系是HCC94(P<0.01)。对照组和miR-3074组miR-3074表达分别为1.03±0.17和13.49±2.66,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,miR-3074组HCC94细胞增殖活力降低(P<0.05),细胞侵袭能力降低(P<0.01)。miR-3074能作用于EPS8mRNA的3′非翻译区(P<0.01)。与对照组比较,miR-3074组EPS8基因表达显著降低(P<0.01)。结论 miR-3074在宫颈癌细胞系中表达下调,miR-3074能够抑制宫颈癌HCC94细胞的增殖和侵袭,其机制可能与靶向抑制EPS8表达有关。     

Resistin对人肾小球系膜细胞表型和功能的作用及机制研究

目的研究巨噬细胞因子抵抗素（Resistin）过度表达对高糖刺激作用下人肾小球系膜细胞p38MAPK信号通路的影响,探讨Resistin调控肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质积聚的作用机制。方法通过转染携带野生型Resistin基因的腺病毒载体（Ad—Resistin）构建过度表达Resistin的人巨噬细胞模型,并与高糖刺激后的人肾小球系膜细胞共培养,^3H-氚标胸腺嘧啶掺入实验检测肾小球系膜细胞增殖,免疫细胞化学检测系膜细胞增殖相关基因（AP-1）的表达,免疫荧光检测细胞外基质蛋白（Laminin）的蛋白表达,Western blot检测系膜细胞内p38MAPK、TGF-β的表达并测定Smad2的磷酸化水平。结果Ad—Resistin感染后,人巨噬细胞Resistin mRNA水平及蛋白表达明显升高（P〈0．01）。同过度表达Resistin的人巨噬细胞共培养后,与对照组比较,人肾小球系膜细胞p38MAPK、TGF-β的蛋白表达明显增强,细胞内Smad2的磷酸化水平显著升高（p〈0．05）,肾小球系膜细胞出现明显的增殖,细胞外基质的合成增多（P〈0．05）。结论巨噬细胞因子Resistin的过度表达可能通过p38MAPK信号通路,调控高糖刺激作用下肾小球系膜细胞的增殖及细胞外基质的异常积聚。     

槲皮素对口腔鳞癌细胞增殖凋亡等细胞生物学行为及p38/JNK MAPK信号通路的影响

目的:探讨槲皮素对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及p38/JNK MAPK信号通路的影响。方法:以体外培养的口腔鳞癌Tac8113细胞为研究对象,分别设置空白对照组,槲皮素低剂量组(25μmoL/L)、高剂量组(50μmoL/L)及阳性对照组(顺铂4μg/mL)。CCK-8法检测槲皮素对口腔鳞癌Tac8113细胞增殖的影响;流式细胞仪检测槲皮素对口腔鳞癌Tac8113细胞凋亡的影响;Transwell实验检测槲皮素对口腔鳞癌Tac8113细胞迁移、侵袭的影响;WB法检测p38/JNK MAPK信号通路相关蛋白表达。结果:与空白对照组相比,槲皮素低、高剂量组及阳性对照组Tac8113细胞增殖活力、迁移数及侵袭数均下降,凋亡率增加(P<0.05);与槲皮素低剂量组相比,槲皮素高剂量组及阳性对照组Tac8113细胞增殖活力、迁移数及侵袭数均下降,凋亡率增加(P<0.05),呈现剂量依赖性;槲皮素高剂量组及阳性对照组Tac8113细胞增殖活力、迁移数、侵袭数及凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,槲皮素低、高剂量组p-p38、p-JNK及Caspase...     

水飞蓟宾对大鼠实验性肝纤维化发生发展作用机制的研究

目的 观察水飞蓟宾(silybinin)在大鼠实验性肝纤维化过程中抗肝维化作用及其可能的机制. 方法 雌性Wistar大鼠70只,随机分为正常对照组(n=5)、纤维化模型组(n=33)和水飞蓟宾治疗组(n=32),后两组各自再随机分为1周、2周、4周、6周组.纤维化模型组以CCl4造成化学性肝损伤;水飞蓟宾治疗组注射CCl4的同时以水飞蓟宾50 mg/(kg*d)灌胃.各组动物(也包括正常对照组)按设计分别于给药后1周、2周、4周、6周末,在乙醚麻醉、无菌无热源条件下,行腹主动脉采血和肝组织取材进行病理学观察.用Western-blot和原位杂交方法 检测各组肝脏结缔组织生长因子(CTGF)的表达;测定各组血浆内毒素(ET)含量,同时也测定羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的水平. 结果与正常对照组比较,纤维化模型组和水飞蓟宾治疗组各项指标均有显著升高,且ET含量升高先于CTGF;与纤维化模型组比较,水飞蓟宾治疗组肝脏病理学损伤性改变有明显的减轻,血浆ET、ALT水平以及肝组织MDA、Hyp含量均有显著的降低,CTGF表达也明显的下调. 结论 水飞蓟宾可有效地改善实验性肝纤维化程度,其机制可能与其降低肠源性内毒素血症、下调CTGF的表达有关.     

水飞蓟宾治疗对慢性乙型肝炎患者肝纤维化指标的影响

目的观察水飞蓟宾治疗对慢性乙型肝炎患者肝纤维化指标的影响。方法 89例慢性乙肝患者随机分为对照组(n=44)和观察组(n=45),对照组采取一般保肝治疗和拉米夫定抗病毒治疗,观察组在此基础上加用水飞蓟宾卵脂复合物胶囊,治疗前后检测肝功能,用放射免疫法检测血清纤维化指标Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CIV)、透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)。结果观察组治疗后血清PCIII、CIV、HA、LN水平较治疗前及对照组治疗后均显著降低(P<0.05)。结论水飞蓟宾治疗对慢性乙型肝炎患者具有抗肝纤维化的作用,值得临床推广。     

白桦脂醇对宫颈癌小鼠自然杀伤细胞杀伤力及淋巴细胞增殖活性的影响

目的 探究白桦脂醇对宫颈癌小鼠自然杀伤(NK)细胞杀伤力及淋巴细胞增殖活性的影响.方法 通过皮下注射人宫颈癌HeLa细胞复制宫颈癌小鼠模型.将45只模型小鼠随机分为模型组、白桦脂醇组和白桦脂醇+SB203580组,每组15只.另取15只未做处理的小鼠作为对照组.白桦脂醇组和白桦脂醇+SB203580组白桦脂醇灌胃干预(...