氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的光镜和电镜研究

提要目的：观察氧化砷作用于食管癌细胞株EC8712细胞凋亡的形态改变。方法：EC8712细胞，以3uMAS2O3作用72小时收获细胞，作光镜HE染色，TUNEL标记，透射电镜和流式细胞仪检查。结果：3uMAS2O3作用72小时，TUNEL标记阳性。流式细胞仪检测有凋亡峰出现（亚G1／G0峰）。电镜检查有二种凋亡类型。一呈典型凋亡细胞核改变，病变分三期。另一种固缩细胞。结论：光镜和电镜检查结果证实AS2O3可以诱导食管癌细胞系EC8712细胞凋亡，因此AS2O3可作为食管癌辅助治疗药物。氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的光镜和电镜研究@沈忠英$汕头大…     

紫杉醇对人食管癌Eca109细胞株生长的影响

目的：观察不同浓度的紫杉醇对食管癌细胞Eca109的影响。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验,细胞形态学观察及流式细胞仪等方法对人食管癌细胞Eca109进行检测和观察。结果：MTT实验显示紫杉醇可抑制食管癌细胞增殖;光镜及电镜可发现药物作用组细胞核固缩、解聚以及凋亡小体,流式细胞仪检测显示G1峰前有明显的凋亡峰。细胞周期分析提示紫杉醇可将Eca细胞阻滞于G2－M期,且与浓度相关。结论：紫杉醇对人食管癌细胞系Eca109细胞的生长有明显的抑制作用,使细胞分裂阻滞于G2－M期,并诱导肿瘤细胞凋亡。     

三氧化二砷通过诱导结肠癌LoVo细胞凋亡和坏死抑制其生长

目的 探讨三氧化二砷（As2O3)对结肠癌细胞系LoVo细胞生长的影响及可能机制。方法 通过肿瘤细胞记数,观察As2O3对LoVo细胞生长的影响。应用光镜、电镜、流式细胞仪以及生化分析仪,观察细胞形态学、凋亡细胞峰并测定培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果 As2O3明显抑制LoVo细胞生长,并呈时间和剂量依赖关系（P＜0．05或P＜0．01）。光镜及电镜下可见典型的细胞凋亡和坏死形态表现。流式细胞仪分析显示：在G1期前出现亚二倍体的凋亡细胞峰。生化分析测定发现：As2O3浓度为2．0μmol/L时,培养上清液中LDH含量增加（P＜0．05或P＜0．01）。结论 As2O3通过诱导LoVo细胞凋亡和坏死抑制其生长。     

三氧化二砷体外诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人胃癌SGC 790 1细胞抑制生长、诱导凋亡的生物学效应。方法 :光学显微镜观察细胞形态 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)还原法检测As2 O3 对该细胞株生长的影响 ,流式细胞仪 (FCM )及 3′ OH末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果 :SGC 790 1细胞经As2 O3 作用后 ,细胞增殖受到明显抑制 ,且呈剂量和作用时间依赖关系 ,细胞周期分析显示G2 M期阻滞 ;FCM检测在细胞周期G1期前出现低于 2倍体的凋亡峰 ;TUNEL标记发现DNA链的断裂。结论 :As2 O3 能抑制人胃癌SGC 790 1细胞增殖 ,并诱导该细胞系凋亡 ,其发生机制可能与细胞周期阻滞有关。     

三氧化二砷诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的机制。方法建立大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖模型。通过透射电镜、流式细胞仪观察As2O3作用后细胞凋亡形态学和细胞胞浆游离钙离子(Ca^2 )浓度的变化。结果经As2O3处理的VSMCs电镜下呈现凋亡的特征性改变,形态学上表现为细胞胞膜完整、染色质固缩及核碎裂。流式细胞仪分析显示,VSMCs在As2O3作用后出现凋亡峰,而As2O3能通过促进细胞外Ca^2 内流和细胞内Ca^2 池的释放提高胞浆游离Ca^2 浓度。结论As2O3可诱导VSMCs凋亡,并可能与胞浆游离Ca^2 浓度升高有关。     

三氧化二砷诱导食管癌细胞凋亡及其对C-myc和TGF-β1表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对体外培养的人食管癌细胞ECA109生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察As2O3处理ECA109细胞后细胞周期和细胞凋亡.细胞免疫化学观察As2O3处理ECA109细胞后,ECA109细胞TGF-β1及C-myc表达的变化.结果 （1）MTT法证实As2O3对ECA109细胞生长有抑制作用,并呈剂量-效应关系.（2）流式细胞仪分析As2O3处理ECA109细胞后细胞滞留于G2/M期,并可见凋亡峰.（3）透射电镜可见ECA109细胞出现典型的细胞凋亡及坏死形态学改变.（4）As2O3下调C-myc和TGF-β1表达.结论 As2O3对人食管癌细胞ECA109有抑制作用,其抑制作用可能通过下调C-myc基因表达,诱导食管癌细胞凋亡和坏死、阻抑细胞周期进程,抑制ECA109细胞增殖.同时通过下调TGF-β1表达阻止食管癌的恶性进程.     

二烯丙基三硫诱导人胃癌细胞凋亡的作用

目的 探讨二烯丙基三硫（diallyl trisulfede，DAlS）诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的作用。方法 采用倒置显微镜、光学显微镜、透射电镜分别观察DATS诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的形态学改变以及用流式细胞术观察亚G1峰。结果 MGC-803细胞经DATS处理24h后，光镜可见细胞胞浆浓缩、核固缩深染等早期凋亡细胞；电镜可见到不同时期凋亡细胞；流式细胞术检测有亚G1峰的出现。结论 DATS具有诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的作用。     

氧化砷诱导食管癌细胞凋亡线粒体超微结构和膜电位的改变

目的 :研究氧化砷 (As2 O3)诱导食管癌细胞凋亡的过程中线粒体超微结构和功能的变化。方法 :培养的食管癌细胞系SHEE85加入 3 μmol LAs2 O3,作用 2 ,4 ,6,12 ,2 4h ,在光镜和电镜下观察细胞形态。以罗丹明 (Rhodamine 12 3 )荧光探针标记线粒体 ,细胞荧光光度计检查线粒体荧光强度 ,计算线粒体跨膜电位 (MTP ,△Ψm)的改变。结果 :线粒体荧光强度的改变反映MTP的状态。荧光强度早期增加 ,中期下降 ,后期最低 ,2 4h后细胞核呈典型凋亡改变伴有线粒体肿胀。结论 :在As2 O3诱导下 ,SHEE85细胞线粒体有明显的形态和功能改变伴随线粒体跨膜电位的降低 ,线粒体改变是As2 O3诱导食管癌细胞凋亡过程重要的一环     

胃癌细胞凋亡过程中PKC活性表达的变化

目的：探讨胃癌细胞凋亡过程中胞浆、胞膜和总蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的变化。方法：选择顺铂诱导胃癌细胞凋亡,采用光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡;应用竞争蛋白结合法检测ＰＫＣ活性。结果：顺铂浓度为２μｇ／ｍｌ作用于胃癌细胞２４ｈ出现典型的凋亡改变,即凋亡小体、细胞皱缩,染色质固缩和片段化,ＤＮＡ梯状条带,流式细胞仪上见“凋亡峰”;胃癌细胞凋亡过程中,从３０ｓ到２４ｈ,胞浆、胞膜和总ＰＫＣ活性均低于对照组。结论：胃癌细胞凋亡过程中,胞浆、胞膜和总ＰＫＣ活性呈下调趋势     

亚砷酸体外对人肝癌细胞株BEL-7402影响的初步研究

目的 体外培养人肝癌细胞株BEL－7402,从多个角度探讨三氧化二砷（As2O3）的抗肿瘤作用及其机制。方法 应用倒置相差显微镜、电子显微镜、透谢电镜、流式细胞仪,分别对不同浓度加药组及对照组BEL－7402细胞的存活。形态学改变,细胞DNA含量的分布进行了观察和测定。结果 0.5、1、2μmol/L As2O3均能抑制人肝癌细胞株BEL－7402细胞的生长增殖。流式细胞仪分析显示,加药组在G1期细胞前均出现亚二倍体峰,且G0／G1期细胞减少,S期细胞增多;电镜下,对照组细胞核质比大、核大、核膜有明显切迹,0.5μmol/L As2O3组细胞核质比减少、核变圆、胞浆内出现分化良好的细胞器, 0.5、1、2μmol/L As2O3组均可见细胞膜完整、核固缩、凋亡小体形成。结论 三氧化二砷不仅抑制人肝癌细胞增殖,而且诱导细胞凋亡。     

Studies on arsenic trioxide induced mice melanoma Cloundman S91 cell apoptosis

INTRODUCTION ArsenichasalonghistoryofuseinChineseandwesternmedicine,buthasbeenoutofuseinthe mid20thcenturybecauseoftheunacceptablesideef fects.There emergenceofarsenictrioxideinclinicaluse isduelargelytopurificationofthiscompoundfromtra ditionalmixturesandtheAs2O3definitionofeffective,low doseregimensforthetreatmentofacutepromyelo cyticleukemia(APL)[1].Recently,theapoptosis As2O3inducedhasbeenobservedinmanycancercell lines,includingesophagedcarcinoma,gastriccancer,neuroblastomalymphoid…     

三氧化二砷对人卵巢癌细胞株体外作用的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)对卵巢癌细胞株体外生长的影响。方法：以As2O3处理卵巢癌细胞株SKOV3，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，测定As2O3对SKOV3生长的抑制作用，并绘制剂量－效应曲线；通过透射电镜观察细胞超微结构的变化；应用流式细胞仪分析DNA含量和细胞周期并测定凋亡特征酶caspase-3的活性变化。结果：0．5－4．0μmol/L三氧化二砷明显抑制SKOV3细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性；透射电镜观察可看到较为典型的细胞凋亡的形态学改变；细胞核固缩，染色质凝集，呈新月状紧贴于核膜周边，凋亡小体形成等；流式细胞仪检测出现DNA含量小于G1峰的亚二倍体凋亡峰，同时出现G2／M期阻滞；SKOV3在As2O3作用下，caspase-3是实现凋亡的效应因子，它的激活必然导致凋亡细胞最终的各种表型变化。结论：As2O3对卵巢癌细胞株SKOV3的生长有明显的抑制作用，诱导凋亡是其主要作用机制之一。     

酒石酸锑钾在诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡中的影响

目的:本研究旨在明确酒石酸锑钾(PAT)在体外对人肝癌BEL7402细胞凋亡的影响及抑癌机制。方法:用PAT以不同浓度、不同时间作用于人肝癌BEL7402细胞,以诱导其凋亡。用MTT比色法观察其细胞毒性,荧光显微镜、透射电镜、TUNEL染色法及流式细胞术(FCM)等方法来检测凋亡,观察其形态学和生化方面的变化。结果:PAT以剂量依赖和时间依赖的方式抑制BEL7402细胞的生长。5～40μmol·L-1的PAT处理48h后,形态学上,肝癌细胞表现为细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡以及凋亡小体形式等凋亡特征的形态学改变。DNA末端原位标记染色法、流式细胞仪均能检测到凋亡细胞。结论:PAT在体外诱导肝癌BEL7402细胞凋亡,能作为一种凋亡诱导剂用于肝癌的治疗。     

乳香提取物诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

目的 :检测不同浓度、不同时间作用下乳香提取物 (BCBE)对人急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞的促凋亡作用。方法 :用琼脂糖凝胶电泳技术、透射电子显微镜 (TEM)和流式细胞仪 (FCM)分别检测Jurkat细胞的DNA梯状带 ,形态学改变及凋亡峰与药物作用的细胞周期。结果 :在一定作用时间和剂量下BCBE能诱导Jurkat细胞凋亡 ,电泳出现典型的限制性降解片段梯带 ;TEM发现胞浆浓缩 ,并有大量空泡染色质聚集 ,有凋亡小体形成 ;FCM发现sub G1 凋亡峰 ,并有时间依赖性 ,G1 期细胞增多 ,S期细胞减少。结论 :BCBE能诱导Jurkat细胞凋亡 ,其作用在一定范围内呈现药物浓度与时间的依赖性     

乳香提取物诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

检测不同浓度、不同时间作用了下乳香提取物对人急性Ｔ淋巴细胞血病细胞株Ｊｕｒｋａｔ细胞的促凋亡作用。方法：用琼脂糖凝胶电泳技术、透射电子显微镜（ＴＥＭ）和流式细胞仪（ＦＣＭ）分别检测Ｊｕｒｋａｔ细胞的ＤＮＡ梯状带,形态学改变及凋亡峰与药物作用的细胞周期。     

黄连素对肝癌细胞生长的影响以及机理

目的:观察黄连素对肝癌细胞株3B生长的影响,并且探讨其作用的机理。为阐明黄连素作为一种新的治疗肝癌的药物提供理论依据以及实验室的结果。方法:应用不同浓度的黄连素作用于肝癌细胞后,通过细胞免疫组化SP法检测细胞膜表面的Caspase-3蛋白的表达,用流式细胞仪和荧光显微镜观察癌细胞凋亡的情况,并应用RT-PCR法检测Caspase-3 mRNA的含量。结果:黄连素对肝癌细胞株3B的生长有明显抑制作用,并有浓度依赖性。在时间相同内,药物处理组的Caspase-3蛋白和mRNA的表达与空白对照组相比较均有显著性差异(P<0.01);流式细胞仪分析存在G2/M阻滞,在G1峰前有明显的凋亡峰;荧光显微镜观察显示细胞形态发生凋亡特征性的改变:细胞膜完整,染色质浓缩,核碎裂,凋亡小体的形成。结论:黄连素能够有效地抑制肝癌细胞的生长,其机理是诱导细胞凋亡;而凋亡的机制可能是通过Caspase-3起作用。     

三氧化二砷诱导人脑胶质瘤干祖细胞凋亡及其机制

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人脑胶质瘤干祖细胞增殖和周期的影响及其相关分子表达。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定As2O3对人脑胶质瘤干祖细胞抑制率,流式细胞术检测As2O3对该细胞凋亡和周期的影响,透射电镜观察细胞形态学变化,Western blot和RT-PCR检测Fas、FasL和p53变化。结果 As2O3可明显抑制人脑胶质瘤干祖细胞的增殖,且呈一定的时间剂量依赖关系（P〈0.05）;此外,人脑胶质瘤干祖细胞周期G1期细胞的比例增加,S期和G2/M期细胞的比例减少;通过形态学观察发现,随着As2O3剂量的增加,镜下凋亡细胞比例逐渐增加,凋亡小体的数量增加;Western blot检测发现,FasL表达上调,p53下调（P〈0.05）。结论 As2O3对人脑胶质瘤干祖细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与上调FasL和下调p53表达相关。     

三氧化二砷对兔晶体上皮细胞增殖的影响及其机制的实验研究

目的:观察不同浓度的三氧化二砷作用不同时间对兔晶体上皮细胞影响及其作用机理。方法:应用不同浓度的三氧化二砷作用于兔晶体上皮细胞后,观察三氧化二砷对兔晶体上皮细胞生长状态的影响;用噻唑蓝(MTT)比色法、透射电镜技术观察其对兔晶体上皮细胞增殖的影响;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞技术检测三氧化二砷对兔晶体上皮细胞凋亡的诱导作用。结果:不同浓度的三氧化二砷作用于兔晶体上皮细胞有明显的时间和剂量依赖性。三氧化二砷作用后细胞生长明显受抑制,并出现明显的凋亡特征性改变;8μmol/L三氧化二砷作用24小时、48小时及72小时后TUNEL法可检测到细胞凋亡水平显著性升高,流式细胞仪分析显示,兔晶体上皮细胞在G1峰前出现明显的凋亡峰。结论:三氧化二砷可明显抑制兔晶体上皮细胞的生长,其机理主要是诱导兔晶体上皮细胞凋亡。     

斑蝥酸钠体外诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨斑蝥酸钠体外诱导肝癌细胞的凋亡。方法 :应用MTT法、流式细胞仪、透射电镜和琼脂糖凝胶电泳综合分析肝癌细胞的变化。结果 :斑蝥酸钠作用 4 8h使肝癌细胞生长明显抑制 ;细胞凋亡率达 4 0 .0 2 %±2 .0 5 % ,并出现典型的凋亡峰 ,细胞增殖于G2 +M期阻滞 ;细胞核染色质出现凝集、边集等超微结构变化 ;细胞DNA电泳也显示了凋亡特有的“梯子”状条带。结论 :斑蝥酸钠体外可诱导肝癌细胞的凋亡 ,细胞生长阻断在G2 +M期。