胸腺注射转染供者主要组织相容性复合物基因的T淋巴细胞诱导免疫耐受的实验

目的 探讨受者胸腺内注射可表达供者主要组织相容性复合物（MHC）基因的受者T淋巴细胞诱导的免疫耐受的效果。方法 将携带供鼠（C57BL／6，H－2^b）k位点基因cDNA的逆转录病毒载体质粒PXN（N2－B19－H－2K^b）经包装细胞PA317细胞包装为重组病毒后，感染体外培养的受鼠（Balb/c,H-2^d）T淋巴细胞，再将此可表达供者MHC抗原的受者T淋巴细胞（H－2K^db）回输受鼠胸腺内，然后将供鼠（H－2^b）的皮肤移植给受鼠（H－2^d），观察免疫耐受的诱导情况。结果 外源性MHC基因（H－2K^b）整合到靶细胞（H－2^d）染色体DNA，并有效地转录，在细胞膜上有H－2K^b分子表达；对照组移植皮肤平均存活时间（MST）为9d；注射单克隆抗体对照组MST为11d；第三供者组MST为11.5d；实验组（胸腺回输H－2K^db嵌合体T淋巴细胞）MST为35d；实验组脾细胞对刀豆素A（ConA）的增殖反应在正常范围，单向混合淋巴细胞反应对第三供者的脾细胞反应正常，但对特异供者的脾细胞无反应。结论 自身T淋巴细胞在胸腺内表达供者MHC抗原可在成年动物诱导出对供者移植的特异性免疫耐受，无非特异性免疫抑制。     

加味当归补血汤对肾小管上皮细胞TGF-β1／SMADs信号转导通路的影响

目的：观察加味当归补血汤对转化生长因子β1（TGF-β1）刺激的小鼠肾小管上皮细胞Smad3、Smad4、Smad7信号通路的影响，探讨该方防治肾间质纤维化的细胞分子生物学机制。方法：原代培养BalB／C小鼠肾小管上皮细胞．用TGF-β（1ng／ml）刺激24h，加味当归补血汤及洛汀新含药血清干预。共分6组：正常组、模型组、加味当归补血汤低中高剂量组（含药血清浓度分别为2．5％、5％、10％）、洛汀新组，观察各组细胞形态学变化，检测细胞Smad3、Smad4、Smad7的mRNA和蛋白质表达情况（PT—PCR、Western-Blotting）。结果：（1）TGF-β1刺激后，肾小管上皮细胞部分形态发生变大，伸长，呈梭形，经中药加味当归补血汤和洛汀新干预后，细胞形态又恢复正常；（2）TGF-β1刺激肾小管上皮细胞后，Smad3、Smad4 mRNA和蛋白质表达显著增加，Smad7 mRNA和蛋白质则显著减少（P〈0、05～0、01）；（3）各浓度加味当归补血汤能显著下调异常增高的Smad3，上调Smad7的基因和蛋白质表达水平（P〈0．05～0．01），能显著下调Smad4基因表达。结论：加味当归补血汤防治肾间质纤维化可能与调控肾小管上皮细胞TGF-β1／Smads信号转导途径相关。     

维持性血液透析患者T淋巴细胞对外源性IL—2的增殖反应

报告１８例持续性血透析患者Ｔ淋巴细胞对外源性白细胞介素－２（ＩＬ－２）的增殖反应。结果显示：ＭＨＤ患者Ｔ淋巴细胞对外源性ＩＬ－２的增殖反应较正常对照组明显下降（Ｐ＜０．００１）。与单次血透前比较，单次血透后ＭＨＤ患者的Ｔ淋巴细胞对外源性ＩＬ－２的增殖反应虽有明显提高，但仍显著低于正常对照组。     

氢化可的松在腹腔镜治疗皮质醇增多症围手术期的应用

目的：探讨氢化可的松在后腹腔镜下治疗皮质醇增多症围手术期激素替代中的应用。方法：回顾性分析36例皮质醇增多症患者在后腹腔镜手术治疗围手术期采用静滴氢化可的松随后改为口服氢化可的松的激素替代方案：术中予静滴氢化可的松100 mg,术后当天、第1 d和第2 d分别静滴氢化可的松100 mg （1次/12 h）、100 mg （1次/12 h）和100 mg（1次/d）,从第2 d开始口服氢化可的松片40 mg（3次/d）,逐渐减量至20 mg开始维持治疗。术后密切观察临床症状,并间断监测血、24 h尿皮质醇变化来评价该激素替代治疗效果。结果：2例出现轻微皮质功能不全症状;6例血Cor（皮质醇）低于正常范围;血钾较术前明显升高（P＜0.05）;术后第1、2 d尿Cor明显升高（P＜0.05）;第7 d尿Cor明显降低（P＜0.05）;血Cor从第2 d开始较术前降低（P值均P＜0.05）。结论：氢化可的松在腹腔镜治疗皮质醇增多症围手术期激素替代治疗中,是安全可行的。     

维持性血液透析患者T淋巴细胞对外源性IL－2的增殖反应

报告１８例维持性血液透析（ＭＨＤ）患者Ｔ淋巴细胞对外源性白细胞介素－２（ＩＬ－２）的增殖反应。结果显示：ＭＨＤ患者Ｔ淋巴细胞对外源性ＩＬ－２的增殖反应较正常对照组明显下降（Ｐ＜０．００１）。与单次血透前比较，单次血透后ＭＨＤ患者的Ｔ淋巴细胞对外源性ＩＬ－２的增殖反应虽有明显提高（Ｐ＜０．０５），但仍显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。     

缬沙坦联合大黄治疗糖尿病肾病的临床研究

目的探讨缬沙坦联合大黄治疗糖尿病肾病的疗效。方法将128例糖尿病肾病（DN）患者随机分为缬沙坦对照组和缬沙坦联合大黄治疗组,疗程均为6个月。结果①与治疗前比较,治疗组治疗后血清总胆固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）明显下降（P〈0．05,P〈0．01）,血清高密度脂蛋白（HDL-C）明显上升（P〈0．05）,对照组上述指标变化不明显（P〉0．05）;②治疗组与对照组均能显著改善早期DN患者尿白蛋白（MA）、尿α1微球蛋白（α1,MG）、尿β2微球蛋白（β2-MG）（P〈0．05）,而治疗组较对照组疗效显著（P〈0．05）。③对临床DN患者的尿蛋白定量、尿α1-MG、尿β2-MG、血白蛋白（ALB）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,治疗组均改善显著,而对照组除尿蛋白定量、尿α1,MG、尿β2-MG改善显著外,其余指标改善均不明显。结论缬沙坦联合大黄治疗糖尿病肾病疗效确切。     

肝部分切除促进肿瘤细胞生长的机制研究

作者为验证肝部分切除对肿瘤细胞生长的促进作用，探讨其发生机制，将１８只ＢＵＦ大白鼠接种了７３１６Ａ肝癌细胞，并分为三组：Ａ组施行单开腹；Ｂ组行７０％肝切除；Ｃ组行单开腹并加转化性生长因子（ＴＧＦ－β）治疗。术后测量肿瘤体积；取Ａ组及Ｂ组术后５天的血清和脾粘着细胞加入混合淋巴细胞培养（ＭＬＲ）及ＣＣＬ－６４细胞培养中；将ＴＧＦ－β也加入ＭＬＲ和７３１６Ａ肝癌细胞培养中。结果表明，Ｂ组及Ｃ组大白鼠，肿瘤细胞生长速度明显增快（Ｐ＜０．０１）；Ｂ组的血清及脾粘着细胞明显抑制ＭＬＲ及ＣＣＬ－６４细胞增殖（Ｐ＜０．０５）；ＴＧＦ－β也显著抑制ＭＬＲ，但对７３１６Ａ肝癌细胞增殖无作用。提示肝部分切除后的血清中存在着ＴＧＦ－β生物活性，ＴＧＦ－β抑制了免疫活性细胞的增殖，从而造成了有利于肿瘤细胞生长的生物环境。     

静脉注射小剂量rhTNF－α对烫伤大鼠T淋巴细胞功能的影响

将ＳＤ大鼠９０只随机分为体内和体外实验组，体外实验组又分为假伤、烫伤和ｒｈＴＮＦ－α治疗组，观察重组人肿瘤坏死因子－α（ｒｈＴＮＦ－α）对烫伤大鼠Ｔ淋巴细胞功能的影响。结果表明，小剂量静脉注射ｒｈＴＮＦ－α可以改善烫伤大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞亚群的分布，并使Ｔｈ／Ｔｓ比值升高（Ｐ＜０．０５）、Ｗ３／２５（Ｔｈ）数量增加，ＯＸ－８（Ｔｓ）数量减少；体外实验表明，ｒｈＴＮＦ－α可以改善Ｔ淋巴细胞对ＣｏｎＡ的反应能力，增强烫伤大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞分泌ＩＬ－２的能力，使伤后７２、１２０和１６８ｈ的ＩＬ－２分别较烫伤组增加１０８％、１４９％和１８３％（Ｐ＜０．０５）。ｒｈＴＮＦ－α作用呈剂量依赖关系，小剂量（ｒｈＴＮＦ－α≤１０ｎｇ／２．５×１０６细胞）对Ｔ淋巴细胞体外增殖起促进作用，超过此剂量则呈抑制作用。结果提示ｒｈＴＮＦ－α的抗感染作用与其增强机体免疫功能有关，适当剂量的ｒｈＴＮＦ－α不但可以改善Ｔ淋巴细胞亚群的分布，而且还可增强Ｔ淋巴细胞免疫活性。     

氟离子植入猪骨源羟基磷灰石对 MC3T3-E1 细胞黏附、增殖与成骨分化的影响

目的 检测氟离子植入猪骨来源羟基磷灰石（PHA）对小鼠前成骨细胞（MC3T3-E1）黏附、 增殖及成骨分化的影响。方法 取猪骨松质用高温烧结的方法制备PHA，使用氟化钠浸泡结合二次高温 烧结进行氟离子植入，制备获得氟化猪骨源羟基磷灰石（FPHA）骨块，进行研磨获得颗粒材料后制备 压片，采用PHA颗粒制备的压片为对照组，采用FPHA颗粒制备的压片为实验组。在压片材料表面接种 小鼠MC3T3-E1前成骨细胞株，通过扫描电镜SEM观察不同时间细胞黏附形态，CCK-8法检测细胞增 殖情况，RT-PCR法检测细胞成骨相关基因碱性磷酸酶ALP、骨钙素BGLAP、骨桥蛋白OPN mRNA 的表达情况。结果 扫描电镜SEM观察可见，PHA与FPHA组细胞黏附生长良好；两组细胞接种1、7d 后OD值比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；FPHA组接种3、5 d后OD值高于PHA组，差异有统计学 意义（P＜0.05）；RT-PCR结果显示，FPHA组细胞接种3、7 d后ALP、BGLAP mRNA表达水平均高于 PHA组，且两组细胞接种7 d后材料表面细胞ALP与BGLAP mRNA表达水平均高于细胞接种3 d后，差异 有统计学意义（P＜0.05）。结论 PHA与FPHA材料均具有良好的细胞相容性，氟离子植入猪骨羟基磷灰 石可促进小鼠前成骨细胞早期增殖与成骨分化。     

复合麻醉对人外周血淋巴细胞促炎性细胞因子mRNA表达的影响

目的 研究复合麻醉中人外周血淋巴细胞IL－8、IL－1β、TNF-α基因表达，探讨异氟醚吸入和硬膜外阻滞对外周血炎性反应的影响。方法 24例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚组（n＝12）和硬膜外组(n=12），在麻醉诱导后即刻和4小时分别取静脉血20ml用外周血淋巴细胞分离液（Ficoll）进行梯度离心，从获得的淋巴细胞中提取RNA，逆转录合成cDNA,PCR后电泳扫描求积，检测淋巴细胞IL－8、IL-1β和TNF－α的mRNA表达。结果 异氟醚组麻醉维持4小时比麻醉诱导后即刻IL－8、IL－1β的表达增加（P＜0.05），硬膜外组麻醉维持4小时与麻醉诱导后即刻IL－8、IL－1β的表达无明显变化（P＞0.05）。两组均未检出TNF－α基因表达。结论 复合麻醉中吸入异氟醚能增强肝脏部分切除病人外周血淋巴细胞促炎性细胞因子mRNA表达，即在转录水平上，异氟醚能增强外周血炎性反应；而硬膜外阻滞无此效应。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。