HLA—G与NK细胞

ＨＬＡ┐Ｇ与ＮＫ细胞居中亮１综述范丽安１审校生殖免疫一直是免疫学家孜孜不倦的研究领域，而母胎界面更是研究的热点，其原因在于其中的免疫保护机制：带有父方同种异型抗原的胚胎，为什么不被母体免疫系统识别并将其排斥？可以设想，如果其中的保护机制得以阐明，那么...     

HLA—G研究进展

ＨＬＡ－Ｇ基因属于非经典ＨＬＡ－Ｉ类基因，具有低多态性和限制性表达的特点，其功能与母胎免疫耐受有关。本介绍了近年来关于ＨＬＡ－Ｇ基因研究的进展。     

HLA—G多态性研究进展

ＨＬＡ－Ｇ是非经典的ＨＬＡ－Ｉ类分子，限制性地表达在母胎界面的组织细胞上，对它在妊娠过程中所发挥的作用已引起广泛的兴趣，在肿瘤细胞的免疫逃逸方面的功能也日益受到重视，虽有各种假说，但具体的作用机制仍不清楚。ＨＬＡ－Ｇ多态性研究是探讨其作用机制的一条重要途径，近年来许多学在这方面做了大量的工作，力求通过ＨＬＡ－Ｇ基因水平的研究进一步阐明ＨＬＡ－Ｇ的功能及作用机理。本就ＨＬＡ－Ｇ基因结构、基因多态     

HLA-G结构与功能研究进展

胎盘组织外绒毛滋养层细胞不表达经典的HLAⅠ类分子 ,使这些细胞易感于NK细胞的攻击 ,但由于表达非经典的MHCⅠ类分子HLA G可以防止NK细胞识别这些细胞 ,HLA G至少是 3种NK细胞抑制受体的配体 ;表达HLA G的滋养层细胞可能递呈肽类给T细胞 ,转染膜结合型HLA G1, G2及可溶型HLA G分子的细胞能抑制同种T淋巴细胞的增殖反应及抗原特异性的CTL反应 ;以及HLA G基因的多态性程度是有限的 ,提示HLA G在母体对半异体的胎儿的免疫耐受中可能起一个重要的作用。     

表达HLA—G1的K562细胞抵抗外周血NK细胞杀伤作用的研究

目的 研究HLA－G1分子对NK细胞杀伤活性的影响。方法 供助脂质体介导的DNA转染技术,将本室构建的真核南闰pcDNA3-HLA-G1转染人K562细胞;通过G418筛选,获得克隆化细胞株K562－G1;应用RT－PCR及流式细胞术分别在RNA水平和蛋白质水平检测HLA－G1的表达;最后,应用MTT比色法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果 与转染了空质粒的对照组相比,外周血NK细胞对K562－G1的杀伤率降低32.43%（P＜0.01）。结论 靶细胞表达HLA－G2分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应。     

胚胎HLA—Ib的表达与母胎免疫逃逸的研究进展

胎儿作为一种同种半异体抗原能够在母体内正常有规律地种植生长,这种发生在母胎界面的免疫逃逸问题几十年来一直是免疫学家们深感兴趣的话题。近年来,随着对人类白细胞抗原(human lympho-cyte antigen,HLA)及自然杀伤细胞(nature killer cell,NK细胞)受体研究的深入,对母胎界面免疫逃逸问题的研究也有了全新的进展。     

HLA—E

人MHC I类基因分两类：经典的Ia基因（包括HLA－A、HLA－B、HLA－C）和非经典的Ib基因（主要包括HLA－E与HLA－G、HLA－F）。3种非经典MHC I类基因位于相同的染色体区域6P21．3，不同于经典分子，具有特异性的转录、蛋白表达和免疫作用。1988年发现HLA－E具有有限的多态性，作为先天的和后天的免疫系统的一部分，它有非常重要的免疫调节作用，本文拟就有关问题作一综述。     

HLA—E分子的研究进展

ＨＬＡ－Ｅ分子作为非经典的ＨＬＡ－Ｉ类分子，广泛分布于各组织细胞表面，行使独特而保守的功能。本文就ＨＬＡ－Ｅ基因及分子结构、表达特点、生物学功能及调控的最新的研究进展作一综述。     

HLA表型与肿瘤逃逸

HLA-Ⅰ类分子表达缺失是肿瘤细胞针对HLA分子具有向T细胞递呈免疫原性多肽这一作用而选择的一种逃逸机制,然而不同类型的肿瘤细胞或同一肿瘤在不同的发展阶段均呈现出不同的HLA-Ⅰ类表达类型。目前,肿瘤组织及肿瘤细胞系中ＨＬＡ－Ⅰ类分子丢失的类型主要有４种：（１）ＨＬＡ－Ⅰ类分子全部丢失;（２）ＨＬＡ单倍型丢失;（３）ＨＬＡ单个座位丢失;（４）ＨＬＡ等位基因丢失。此外,在肿瘤发展过程中非经典ＨＬＡ－Ⅰ类ＨＬＡ－Ｅ、－Ｇ及ＭＨＣ类似物的异常表达可以抑制ＮＫ细胞对肿瘤细胞的溶解,则反映了肿瘤细胞针对ＮＫ细胞的免疫监视作用而选择的一种逃避机制,每一个荷瘤病人都是一个独特的整体,都将产生一个特殊的有助于逃逸的变异体,因此,检测ＨＬＡ抗原在肿瘤细胞上的表达是一个新的指标,有助于制定未来的肿瘤生物治疗策略。     

HLA-G的遗传、功能及临床意义

HLA－G属非经典的HLA Ⅰ类分子，与经典的HLA Ⅰ类分子相比它有3个特点：（1）多态性水平低；（2）体内分布局限于特定组织；（3）由于内含子和外显子间的剪接位点改变可形成4种膜结合型和两种可溶型HLA－G异构体。过去几年大量研究结果表明，HLA－G是一种免疫耐受分子。在此将系统地介绍HLA－G的遗传多态性、表达、功能、对免疫相关疾病的影响、演变及HLA－G的临床应用前景。     

HLA系统与妊娠免疫耐受

保持抗原的差异性和多样性，对种族的生存和进化具有重要意义，在这一前提下，胎儿做为半异体移植物，母体必须对其产生免疫耐受，才能使得妊娠成功。ＨＬＡ－Ｇ抗原多态性最弱，这些分子在妊娠子宫内母体一胎儿交界面的充分表达，可以促进局部耐受的产生，通过抑制细胞杀伤活性等机制，对妊娠起到保护作用。     

HLA—E的研究进展

非经典的ＭＨＣＩｂ类分子ＨＬＡ－Ｅ是继ＨＬＡ－Ａ－Ａ．Ｂ．Ｃ之后发现的第四个ＨＭＣＩ类分子，具有有限的多态性，广泛的组织分布和低水平的细胞表面表达等特点，其与ＮＫ细胞受体ＣＤ９４／ＮＫＧ２的相互作用在抗肿瘤免疫，抗病毒免疫，自身免疫病和母一胎相互作用及体内免疫稳定等方面具有重要的意义。     

DC—SIGN结构和功能的研究进展

树突细胞（DC）是目前已知的功能最强的抗原提呈细胞，它能直接激活静息T细胞的应答反应。90年代开始，DC在人类免疫缺陷病毒－1（HIV－1）感染过程中的作用逐渐受到重视，但是，研究结果颇具争议。最近，在DC表面新发现一种蛋白质－DC－SIGN，它参与了静息T细胞的激活以及HIV－1的感染过程。DC－SIGN的发现不仅有助于阐述HIV－1的致病机理，而且对DC功能的研究开辟了一个崭新的视角。本就比DC－SIGN的研究近况做一综述。     

HLA系统与妊娠免疫耐受

保持抗原的差异性和多样性，对种族的生存和进化具有重要意义。在这一前提下，胎儿做为半异体移植物，母体必须对其产生免疫耐受，才能使得妊娠成功。ＨＬＡ－Ｇ抗原多态性最弱，这些分子在妊娠子宫内母体—胎儿交界面的充分表达，可以促进局部免疫耐受的产生，通过抑制ＮＫ细胞杀伤活性等机制，对妊娠起到保护作用。此外，胎儿所继承的父系经典ＨＬＡ抗原，可以诱导母体外周血免疫系统产生抗体，对妊娠进一步起到保护作用，并且对保证ＨＬＡ基因的遗传多样性具有重要意义。     

体外抗原诱导小鼠T细胞对NK细胞功能的抑制及其可能分子机制研究

目的:为了探讨抗原诱导T细胞抑制对NK细胞功能的抑制及其可能机制.方法:在体外,分别利用抗原、抗原 抗CD80抗体、刀豆蛋白A、抗CD3抗体先行诱导小鼠T细胞,并于诱导后24、48、72、96小时分别引入NK细胞,通过51Cr释放试验动态观察NK细胞的功能状况,激光共聚焦显微镜观察T细胞抑制NK细胞功能的作用模式,同时用RT-PCR方法检测经诱导的T细胞Bc1与Bc2表达情况.结果:①各组在24、48、72小时相点,上清液对NK功能均无显著影响,而到96小时,抗原激活组与抗原 抗CD80抗体诱导组两组上清液对NK细胞的杀伤能力表现出促进作用,与其它各时相点相比有统计学意义(P＜0.05),且后者低于前者,二者相比也具统计学意义(P＜0.05).②刀豆蛋白A与抗CD3抗体刺激组T细胞从T细胞接受刺激24小时起至96小时,均表现了抑制NK细胞功能.抗原 抗CD80抗体耐受诱导组与抗原激活组T细胞则是在诱导后48小时方表现出对NK细胞的抑制,与其它两组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).③只有同种抗原刺激48小时的细胞培养物可检出Bc1、Bc2.其他时相、其他细胞刺激剂作用下均未能检出Bc1,Bc2的表达.结论:经诱导的T细胞能以直接接触的方式抑制NK细胞功能,但不同诱导剂活化的T细胞引起NK细胞抑制的机制可能不同.小鼠HLA-G的类似物-Bc1与Bc2的表达与抗原信号有关,抗原诱导的小鼠T细胞可能通过表达Bc1与Bc2来抑制NK细胞的功能,从而参与移植耐受的形成,这一结论提示这类非经典MHC Ⅰ类分子有可能成为移植耐受的检测标志.     

HLA-G3蛋白能够抑制多克隆NK细胞的杀伤功能

目的 研究HLA－G3蛋白对NK细胞杀伤功能的抑制作用。方法 用RT－PCR方法扩增HLA－G3和HLA－G1的cDNA，并将其克隆到真核表达载体pcDNA3中，采用脂质体转染法将其转入K562细胞，用免疫荧光法确定其在细胞表面表达，细胞毒试验研究其对NK细胞杀伤功能的抑制作用。结果 HLA－G3蛋白和HLA－G1表达在细胞表面，以PBL细胞为效应细胞的细胞毒实验表明K562－G1细胞和K562－G3细胞的细胞裂解率都比K562细胞裂解率低。结论 HLA－G3蛋白能够抑制多克隆NK细胞的杀伤功能。     

可溶性HLA-G1、-G2的原核表达及其蛋白质产物的功能检测

sHLA-G存在于整个妊娠期母胎接触面及母体血循环中,目前被认为是妊娠期一种特异性免疫抑制分子。实验将sHLA-G1、sHLA-G2基因克隆于原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导实现目标融合蛋白的高效表达,并通过Ni2+-NTA柱纯化、蛋白质透析梯度复性获得纯化的His-sHLA-G1、His-sHLA-G2融合蛋白。融合蛋白再经凝血酶酶切、苯甲脒琼脂糖凝胶吸附去除6-His标签后,用于体外功能鉴定。结果显示:sHLA-G2与sHLA-G1一样,同样具有抑制T细胞增殖、抑制NK细胞杀伤活性的功能,提示sHLA-G2为一种免疫致耐分子。     

强直性脊椎炎病人HLA—B27等位基因与HLA—A,B抗原 …

调查强直性脊椎炎病人中Ｂ２７等位基因与其它ＨＬＡ－Ａ、Ｂ抗原之间的关系，为ＡＳ与Ｂ２７关联机理提供线索。方法ＨＬＡ－Ａ１Ｂ抗原分型采用ＮＩＨ标准微量淋巴细胞毒方法，Ｂ２７等位基因的检测采用聚合酶链反应／顺序特异的寡核苷酸探针方法。对上海地区６８例ＡＳ病人和３１８例正常对照进行调查。     

树突状细胞与免疫耐受的研究进展

ＤＣ参与胸腺Ｔ细胞的阴性选择过程，也参与外周Ｔ细胞的致耐，ＤＣ可能是唯一具有胸腺Ｔ细胞阴性选择功能的细胞，在外周，ＤＣ通过“否决”效应，诱导Ｔ细胞失能及其他一些机制诱导耐受生成，本文就此方面研究予以综述。