Apelin-13对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

目的观察Apelin-13对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响并初步探讨其机制。方法sD大鼠40只随机分为4组：正常对照组,糖尿病模型组,Apelin-13低、高剂量组。对照组给予普通饮食,实验组给予高脂高糖饮食4周后一次性腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）30mg／kg,建立糖尿病模型。Apelin-13低、高剂量组分别按50、100μg／（kg·d）连续灌胃8周,8周后计算各组大鼠心脏指数（H／B）和左室质量指数（1eft ventricular mass index,LVMI）,Masson染色观察心肌胶原形态、图像分析测量心肌间质胶原容积分数（collagen volume fraction,CVF）,放射免疫法测定局部心肌血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的浓度,westernblotting法检测转化生长因子-βI（TGF—β1）、基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP-1）及基质金属蛋白酶（MMP-1）蛋白的表达情况。结果糖尿病组H／B、LVMI、心肌间质CVF均显著高于正常对照组（Ｐ〈0．05）,AngⅡ的浓度、TGF—μ1及TIMP-1蛋白的表达明显上调（Ｐ〈0．05）,MMP-1蛋白的表达则明显减少（Ｐ〈0．05）。Apelin-13治疗后,上述趋势均明显好转,并呈剂量依赖性,高剂量组改变更明显。结论Apelin-13可能通过对TGF—β1及基质金属蛋白酶的影响来改善糖尿病心肌间质纤维化。     

Apelin-13对压力超负荷大鼠心肌纤维化及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白内源性配体-13（Apelin-13）对压力超负荷大鼠心肌纤维化的影响,探讨其可能的影响机制。方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（AOB组）、Apelin-13组、阻断剂组（SB431542组）。假手术组游离但不结扎腹主动脉,其余3组于左肾动脉上方0.5 cm处行腹主动脉缩窄术建立压力超负荷模型,3 d后各组给予相应药物干预。4周后取材,计算大鼠心脏指数（H/B）和左心室质量指数（left ventricular mass index,LVMI）;Masson染色光镜下观察心肌组织形态学改变,测算心肌胶原容积分数（collagen volume fraction,CVF）;ELISA法测定血清转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）浓度;Western-blotting检测TGF-β1及Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维的蛋白表达量;RT-PCR检测心肌组织Smad3 mRNA、Smad7 mRNA的表达水平。结果 与Sham组相比,AOB组大鼠H/B、LVMI、CVF、血清TGF-β1均明显升高（P〈0.05）,心肌组织TGF-β1、Ⅰ型胶原纤维、Ⅲ型胶原纤维及Smad3mRNA表达水平亦显著升高（P〈0.05）;与AOB组相比,Apelin-13和SB431542干预组上述指标均明显下调（P〈0.05）。Smad7 mRNA在各组间的表达呈相反趋势。结论 Apelin-13可通过部分抑制TGF-β1/Smads通路以减轻压力超负荷大鼠心肌纤维化。     

丹参对自发性高血压大鼠心肌纤维化的逆转作用及其机制研究

为探讨丹参对自发性高血压大鼠（SHR）心肌纤维化的作用及其可能机制，以WKY大鼠为阴性对照，SHR大鼠为SHR阳性对照，观察丹参对SHR收缩压、胶原含量及心脏左心室醛固酮（ALD）、NO、超氧化物歧化酶（SOD）含量影响。结果显示：丹参组除收缩压（SBP）明显高于WKY组与SHR组无明显区别外，左室Ⅰ、Ⅲ型胶原及ALD含量明显低于SHR组，而明显高于WKY组；NO、SOD含量则明显高于SHR组，但仍明显低于WKY组（P＜0.05)。结果提示：丹参具有预防和逆转自发性高血压大鼠心肌纤维化作用，其机制可能与抑制胶原合成，促进心脏局部胶原分解、抑制心肌局部醛固酮生成、改善心肌血液供应、调节氧自由基代谢等多方面的作用有关。     

生长激素释放肽-2对自发性高血压大鼠心肌纤维化的抑制作用

目的 研究生长激素释放肽-2（GHRP-2）是否可抑制心肌纤维化。方法 由于自发性高血压大鼠（SHR）存在自然发生的严重心肌纤维化,本研究利用SHR作为心肌纤维化模型。SHR从12周龄开始给予GHRP-2皮下注射治疗（100μg/kg,每日1次,共4周）,同龄Wistar大鼠皮下注射等量生理盐水作为正常对照组;利用苦味酸天狼猩红染色法显示SHR左心室肌Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原,用Van Gienson染色法显示左心室总胶原水平;用羟脯氨酸含量测定法评估心肌中胶原合成水平。结果 与正常对照组相比,未经处理的SHR左心室肌中Ⅰ型和Ⅲ型胶原明显增多,羟脯氨酸含量也显著增高。GHRP-2治疗可明显降低SHR心肌中Ⅰ型、Ⅲ型胶原和总胶原的水平,并降低羟脯氨酸含量。结论 GHRP-2可以通过抑制胶原合成而减轻SHR左心室纤维化。     

心脏糜酶对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

目的观察心脏糜酶对自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织胶原合成和心肌纤维化的影响.方法应用病理检查、计算机分析结合逆转录-聚合酶链式反应等方法,检测SHR应用糜酶抑制剂(Ch-Ⅰ)组、SHR组及WistarKyoto大鼠(WKY)组的收缩压、心肌胶原容积分数(CVF)、心肌血管周围胶原面积比(PVCA)和心肌糜酶及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达.结果Chy-Ⅰ组心脏CVF、PVCA分别为(26.8±8.7)%和0.4±0.1,SHR组分别为(46.4±7.8)%和1.9±0.9,WKY组为(24.4±10.7)%和0.4±0.1,Chy-Ⅰ组比SHR组明显下降(P＜0.01),与WKY组无明显差别(P＞0.05).Chy-Ⅰ组心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和糜酶mRNA表达相对含量均明显低于SHR组(P＜0.01),与WKY组无明显差别(P＞0.05).应用Chy-Ⅰ后大鼠血压无改变.结论心肌组织糜酶参与胶原的合成,参与细胞外基质的形成和降解,促进自发性高血压大鼠心肌纤维化.     

三七总皂甙对大鼠压力超负荷性心肌肥大的影响

目的 :研究三七总皂甙 (PNS)对腹主动脉缩窄大鼠心肌肥大的影响。方法 :用腹主动脉缩窄法建立压力超负荷性心肌肥大模型。实验分假手术对照组 (A组 ) ,腹主动脉缩窄组 (B组 ) ,5 0mgPNS (kg·d)ip组 ,10 0mgPNS (kg·d)ip组 ,15 0mgPNS (kg·d)ip组进行。 3周后检测全心重量 (HW)、左心室重量 (LVW )、HW 体重 (BW )、LVW BW即左心室重量指数(LVI)。左心室组织切片苏木精 伊红染色后测心肌细胞直径 (MD)。结果 :15 0mgPNS (kg·d)ip组的HW BW、LVI及MD显著低于B组 (P <0 0 1) ,10 0mgPNS (kg·d)ip组与B组比较MD显著降低 (P <0 0 5 ) ,HW BW、LVI也有下降 ,但无统计学意义(P >0 0 5 ) ,5 0mgPNS (kg·d)ip组与B组比较HW BW、LVI及MD均无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 :一定剂量范围的PNS能抑制腹主动脉缩窄大鼠心肌肥大的形成 ,浓度越高 ,抑制作用越明显     

肾血管性高血压大鼠心肌纤维化的病理组织学研究

目的 :研究高血压时心肌纤维化的组织形态学特点。方法 :采用病理组织学方法 ,观察两肾一夹型高血压大鼠心肌纤维化的组织形态学特点。结果 :高血压组大鼠在实验开始的第 1周就出现明显的血压升高 ,在实验结束时 ,达到 198±33mmHg( 2 6 33± 4 39kPa) ,明显高于对照组 (P <0 0 1)。对照组未发现心肌纤维化病灶。实验组 39只大鼠有 16只检查出纤维化病灶 ,检出率 4 1 0 % ,纤维化病灶数量与血压正相关 ,r =0 4 83,Y =0 389X - 5 177,P <0 0 5。根据纤维化病灶的成分和结构特点 ,心肌纤维化可分为 3种类型 :肉芽组织型、小血管周围型和纤维型。结论 :肾血管性高血压大鼠心肌纤维化与动脉血压升高有关     

卡托普利对自发性高血压大鼠心肌间质纤维化的影响

目的：通过测定自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）左、右心室胶原含量和浓度，观察高血压时心肌间质的改变及卡托普利对其的影响。     

自发性高血压大鼠心肌声学密度与心肌纤维化的关系及药物干预研究

目的探讨声学密度定量分析（AD）技术评估高血压心肌纤维化的价值,同时观察苯那普利和缬沙坦对高血压心肌纤维化的作用。方法10周龄的雄性自发性高血压大鼠（SHR）60只,随机分为SHR对照组(SHRc组)、SHR 苯那普利组(SHRb组)、SHR 缬沙坦组(SHRv组)和SHR 联合用药组(SHRb+v组),每组15只。用药组分别给予苯那普利、缬沙坦或二者半剂量合用灌胃10周,并以Wistar京都（WKY）大鼠15只为正常对照(WKY组)。应用AD技术获取各组大鼠左室相应部位心肌背向散射积分（IBS）与背向散射积分周期变化值（CVIB）;测定其收缩压（SBP）、左室重量（LVM）以及左室重量指数（LVMI）和左室心肌羟脯氨酸浓度（HC）;Masson染色观察心肌胶原含量变化,测量心肌胶原容积分数（CVF）和心肌内血管周围胶原面积（PVCA）,并对所得指标进行相关分析。结果与WKY组相比,SHRc组大鼠SBP、LVM、LVMI、HC、CVF、PVCA、IBS均明显升高（P<0.01）,而CVIB明显降低(P<0.01),三个用药组以上指标均明显改善（P<0.05, P<0.01）。除血压外,其他指标均以联合用药组改善最为显著（P<0.05, P<0.01）。相关分析显示,HC与CVF及PVCA均呈显著正相关（r=0.921、0.885,P<0.01）。室间隔及左室后壁IB%值与CVF（r=0.731、0.756,P<0.01）及PVCA(r=0.776、0.788,P<0.01)均呈显著正相关,而CVIB值与CVF（r=-0.642、-0.716,P<0.01）及PVCA（r=-0.720、-0.755,P<0.01）均呈显著负相关。结论AD技术是评估高血压心肌纤维化及其严重程度的一项可靠技术。苯那普利和缬沙坦可显著降低血压、减轻自发性高血压大鼠早期心肌纤维化,且二者合用可明显减轻心肌纤维化程度。     

Apelin-13对葡萄糖剥夺乳鼠心肌细胞自噬的影响及机制

目的观察血管紧张素1型受体相关蛋白配体（apelin-13）对损伤心肌细胞自噬的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外培养3 d龄内的SD乳鼠心肌细胞,通过葡萄糖剥夺（glucose deprivation,GD）方法建立心肌细胞损伤模型,将细胞随机分为5组：正常对照组（Control组）、葡萄糖剥夺组（GD组）、Apelin-13预处理组（GD＋Apelin-13组）、Tricribine＋Apelin-13预处理组（GD＋Apelin-13＋Tricribine组）和阻断剂组（Tricribine组）。采用透射电镜观察细胞内自噬体的变化,免疫沉淀脂质激酶分析法检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）的活性,Western-blotting法检测细胞内自噬相关蛋白-微管相关蛋白1轻链3（LC3）的表达,以及信号通路相关蛋白Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的表达。结果葡萄糖剥夺可诱导乳鼠心肌细胞自噬体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加（P〈0.01）;Apelin-13预处理能减轻葡萄糖剥夺引起的心肌细胞损伤,使自噬体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下降,提高PI3K的活性,上调Akt、mTOR蛋白的磷酸化水平（P〈0.01）;Akt特异性阻断剂Tricribine可以使Apelin-13的上述保护作用减弱（P〈0.01）。结论 Apelin-13在一定程度上可以抑制GD诱导的心肌细胞自噬,机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。     

Apelin对两肾一夹高血压大鼠离体主动脉环的舒张作用

目的：探讨小分子活性肽Apelin—13对两肾一夹（2K1C）高血压大鼠离体主动脉环的舒张作用及意义。方法：①清洁级雄性SD大鼠27只，随机分为正常对照组和2K1C高血压模型组。测定平均颈动脉压（mCAV）、左心重与体重比值（LVM／BW）以及右肾重／左肾重（RK／LK），以评价2K1C模型。②采用累计加药法，观察Apelin-13分别对用去甲肾上腺素（NE）预收缩的对照组大鼠和2K1C高血压组大鼠离体胸主动脉环张力的作用。结果：①模型组大鼠mCAP、LVM／BW和RK／LK分别较对照组高50．38％（P〈0．01）、32．16％（P〈0．01）和51．02％（P〈0．01）。②Apenn—13在（10^-11～10^-7）mol·L^-1浓度范围内对内皮完整的两组大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用，且模型组舒张率高于对照组（P〈0．05），而模型组与对照．EC50相比差异无显著性（P〉0．05）。结论：Apelin-13具有显著的舒张主动脉的作用，并且对高血压大鼠血管环的舒张作用更强，提示Apelin—13在血管的保护作用中扮演了重要角色。     

Apelin-13对血清剥夺诱导的人脐带间充质干细胞凋亡的影响

目的 观察apelin-13对无血清培养诱导的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)凋亡的影响.方法 采用组织块贴壁培养法培养hUC-MSCs,随机分成无血清培养组(A组)和不同浓度apelin-13处理组,apelin-13处理组浓度分别为0.1 mmol/L(B1组)、0.5mmol/L(B2组)、5 mmol/L(B3组)、10 mmol/L(B4组).倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪测定hUC-MSCs表面免疫标记;流式细胞术检测各组细胞凋亡率,MTT法检测0.5、5mmol/L apelin-13对hUC-MSCs增殖活性影响.结果 流式细胞仪鉴定结果表明,hUC-MSCs表达CD44、CD90、CD105、CD73、HLA-ABC,不表达CD34、CD45、HLA-DR.与A组比较,B1、B2、B3、B4组均抑制无血清培养诱导的hUW-MSCs早期凋亡,凋亡率比较差异均有统计学意义(P＜0.05),B3、B4组与B1、B2组间差异有统计学意义(P＜0.05),B3组与B4组、B1组与B2组差异无统计学意义(P＞0.05).A组与B2、B3组比较,细胞在490 nm OD值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 一定浓度内的apelin-13能抑制无血清培养诱导的hUC-MSCs早期凋亡,且这种抗凋亡作用可能不是通过促增殖作用引起的.     

外源性Apelin-13对重症急性胰腺炎大鼠治疗作用及其机制研究

目的:探究NO在重症急性胰腺炎(SAP)损伤中的作用机制,并明确外源性Apelin-13对SAP的治疗效果。方法:通过开腹胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作SAP大鼠模型。应用随机数表法将60只SPF级SD大鼠随机分三组,每组20只,分别为空白组、SAP组、治疗组。其中空白组分离胃十二指肠,找到胰胆管,不做其他处理;SAP组及治疗组按照SAP动物模型制作标准进行,治疗组在造模同时通过尾静脉注射外源性Apelin-13,SAP组给予注射等量生理盐水。分别于造模后3、6、12、24、48h采集下腔静脉血同时取其胰腺组织。通过ELISA法检测大鼠血清AMS、IL-6、TNF-α、NO浓度,通过蛋白免疫印记检测胰腺组织iNOS、eNOS表达情况,胰腺组织HE染色明确胰腺组织病理损伤。结果:同一观察点治疗组与空白组相比,AMS、IL-6、TNF-α、NO均增高(P<0.05),iNOS呈高表达、eNOS则呈现低表达(P<0.05),胰腺组织损伤较明显。同一观察点SAP组与空白组相比,AMS、IL-6、TNF-α、NO均明显增高(P<0.05),iNOS呈高表达、eNOS则呈现低表达(P<0.05),胰腺组织损伤更显著。同一观察点治疗组与SAP组相比,血清淀粉酶、IL-6、TNF-α、NO均降低(P<0.05),iNOS呈低表达、eNOS则呈现高表达(P<0.05),胰腺组织损伤较轻。结论:外源性Apelin-13对大鼠重症急性胰腺炎的治疗有较明显效果,其机制可能是通过上调eNOS表达、下调iNOS表达从而调节体内NO含量。     

实验性大鼠高血压颅内动脉瘤模型的建立及发生机制的初步研究

目的:探讨实验性大鼠高血压脑动脉瘤形成及脑血管早期病理改变与脑动脉瘤形成的关系。方法:140只SD大鼠随机分为4组,实验组结扎左颈总动脉 电凝两侧肾动脉后支 饮1%的盐水;高血压组电凝两侧肾动脉后支 饮1%的盐水;高血流量组结扎左颈总动脉 饮1%的盐水;对照组不加任何处置,24周后取大鼠右侧大脑前动脉-嗅动脉(ACA-OA)应用光镜及电镜观察脑血管组织学改变。结果:实验组与高血压组血压显著升高,实验组在13只大鼠中在右侧大脑前动脉和嗅动脉分叉处及附近发现瘤前、早期及进展期的动脉瘤改变。结论:高血压和血流动力学异常引起的内弹力膜与平滑肌的破坏是脑动脉瘤发生的因素。     

缬沙坦与卡托普利对自发性高血压大鼠糖脂代谢的影响

目的观察缬沙坦与卡托普利对自发性高血压大鼠(SHR)糖脂代谢的影响。方法对自发性高血压大鼠经缬沙坦与卡托普利分别用药治疗8周,测定给药前后SHR血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三脂(TG)、血糖的含量。结果缬沙坦组较对照组血甘油三酯有明显下降,而血糖、胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇无明显改变。卡托普利组对各参数均无明显改变。结论两种降压药物均不产生血脂及糖代谢的不利影响,缬沙坦有改善作用。     

氯沙坦减轻自发性高血压大鼠主动脉重构及其机制

目的：观察氯沙坦治疗对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉重构及p22phox表达的影响。方法：36只12周龄SHR连续灌胃给予氯沙坦,剂量分别为0,15,30 mg/(kg·d),每组12只;另取12只WKY大鼠作为非高血压对照组。每周测定尾动脉压。8周后检测主动脉病理结构、血浆过氧化氢（H2O2）水平、过氧化氢酶 (CAT)活力、血浆血管紧张素Ⅱ(Ang II)水平、主动脉p22phox的表达。结果：SHR主动脉血管壁明显增厚,尾动脉压、血浆H2O2和AngⅡ水平及主动脉p22phox的表达均显著增高,而血浆CAT活力明显下降;应用氯沙坦治疗在降低血压的同时,可改善SHRL主动脉结构,降低血浆H2O2水平和主动脉p22phox的表达,升高血浆AngⅡ水平及和CAT活力。结论： SHR主动脉血管重构涉及氧化应激,氯沙坦可改善血管重构,其机制与下调p22phox表达、抑制氧化应激有关。     

联麦氧钒对自发性高血压大鼠心肌结构的影响

目的：探讨联麦氧钒对自发性高血压大鼠降压的同时对心肌结构的影响。 方法：自发性高血压大鼠36只,随机分为联麦氧钒组、心痛定阳性对照组及空白对照组。8周后对大鼠心肌进行光镜和电镜检测。 结果：联麦氧钒组大鼠心肌形态学发生变化,光镜下显示心肌纤维排列整齐,细胞核位于肌纤维中央,肌束间隙呈轻微增大,间质内未见胶原纤维沉着;电镜下显示心肌肌原纤维及各A带排列规整,未见明显肌丝溶解,线粒体无明显肿胀,线粒体膜完好,嵴无溶解,未见肌浆网明显扩张。结论：联麦氧钒在降压的同时具有较好的心脏保护作用。     

中药降压脉净对自发高血压大鼠心肌纤维化的干预作用

目的应用中西医结合方法防治自发性高血压大鼠(SHR)心室重构中心肌纤维化的病理改变。方法8周龄SHR 40只,随机分为4组,每组10只,并以8周龄SD大鼠10只作为对照组,共5组:正常组、模型组、治疗组(降压脉净颗粒剂 络活喜)、西药对照组(络活喜)、中药对照组(牛黄降压丸 络活喜)。药物:降压脉净颗粒剂(桑寄生、、决明子、丹参、生山楂等组成),溶成药液,含药量1.3 g/mL;络活喜加蒸馏水溶成药液,含药量0.2 g/L;牛黄降压丸加蒸馏水溶成药液,含药量19.5 g/L。3种药物剂量均10 mL/kg,每日灌胃,疗程20周。观察实验动物的心脏重量指数、心肌胶原容积分数(CVF)、血管周围胶原面积(PVCA),Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。电镜观察其病理改变。免疫组织化学法检测心肌组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达水平。结果心脏重量指数、CVF、PVCA:治疗组与模型组比较减少,差异呈显著性(P<0.01)。与西药对照组和中药对照组比较亦有减少;病理学改变:偏光镜下观察Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达中治疗组的表达明显比模型组减少,与西药对照组和中药对照组比较也有减少趋势。结论SHR心脏重量指数及心肌间质及血管周围胶原纤维明显增生,心肌中胶原蛋白含量明显增加的机制成为导致心肌纤维化、心力衰竭的原因;中药降压脉净剂具有抑制自发性高血压大鼠心肌纤维化的作用,在干预和逆转心肌纤维化方面优于单纯西药络活喜对照组,也有优于中药对照组的趋势。