核因子-κB与病理性疼痛关系的研究进展

核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)是一种重要的转录因子,近年来研究表明其不仅在免疫反应、炎症及细胞凋亡中起着重要作用.在病理性疼痛的发生发展过程中亦至关重要.现就NF-κB在病理性疼痛发生发展中作用的研究进展,对其详细的作用机制可能为疼痛性疾病的治疗提供一个良好的前景作一综述.     

肿瘤坏死因子-α、Fas/FasL在急性胰腺炎肝细胞凋亡中的作用

目的 观察大鼠肝枯否细胞(KCs)产生的炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、Fas/FasL和核因子(NF)-κB在重症急性胰腺炎(SAP)肝细胞凋亡中的作用,并探讨其与全身炎症反应综合征(SIRS)之间的关系.方法 将50只SD大鼠随机分成3组:(1)假手术对照(SO)组;(2)SAP组;(3)SAP(枯否细胞抑制)组.SAP模型通过胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导.假手术及造模大鼠均24 h后处死,无菌条件下取肝脏组织,制作石蜡切片,免疫组织化学SP法检测TNF-α、Fas/FasL的表达,原位杂交法检测NF-κB的表达,TUNEL法检测肝细胞凋亡.结果 (1)TNF-α、Fas/FasL和NF-κB在SAP组高表达,阳性率分别为90.0%、85.0%和80.0%,与SO组比较差异均有统计学意义(P<0.05);SAP枯否细胞抑制组它们表达下降,与SAP组比较差异有统计学意义(P<0.05),与SO组比仍然高表达(P<0.05).(2)NF-κB与Fas/FasL及TNF-α的表达均密切相关,相关系数分别为r1=0.78(P<0.05),r2=0.88(P<0.05).(3)肝细胞的凋亡与TNF-α、Fas/FasL和NF-κB的表达呈正相关,相关系数分别为ra=0.72,rb=0.91,rc=0.34,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 在SAP时TNF-α能造成肝细胞凋亡并能引起全身炎症反应,NF-κB在SAP时细胞因子基因表达中起中心作用,Fas/FasL在肝细胞凋亡中起重要作用;枯否细胞在SAP时释放炎症因子造成肝损伤引起肝细胞凋亡,抑制枯否细胞能减轻SAP时肝细胞凋亡,从而降低SAP病死率,提高SAP的治愈率.     

大黄素对大鼠急性胰腺炎的治疗作用

目的 探讨大黄素诱导细胞凋亡对大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的治疗作用.方法 45只SD大鼠分为对照组、胰腺炎组、治疗组,每组15只.观察胰腺组织内腺泡细胞凋亡指数、NF-κB mRNA、Bax mRNA、外周血中中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophii,PMN)凋亡指数及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3、caspase-8)的变化情况.结果 与胰腺炎组比较,治疗组腺泡细胞和PMN凋亡指数及胰腺组织内NF-κB mRNA、Bax mRNA、PMN caspase-3与caspase-8表达均明显增加(F=853.199,327.126,143.586,48.857,231.750,96.552,P＜0.05).治疗组中,胰腺组织病理学评分与胰腺腺泡细胞凋亡指数、PMN凋亡指数均呈负相关(r=-0.96,-0.94,P＜0.05);胰腺腺泡细胞凋亡指数与胰腺组织内NF-κB mRNA、Bax mRNA表达呈正相关(r=0.73,0.76,P＜0.05);胰腺组织内NF-κB mRNA与Bax mRNA表达呈正相关(r=0.94,P＜0.05);PMN凋亡指数与PMN caspase-3、caspase-8表达均呈正相关(r=0.99,0.99,P＜0.05).结论 大黄素能有效治疗AP,其机制是通过Bax途径诱导胰腺腺泡细胞凋亡,并通过caspase途径来诱导外周血中PMN凋亡,从而明显减轻AP病情程度.     

大鼠缺氧再灌注脑损伤时核因子-κB的表达

核因子κB(NF-κB)是一种广泛存在于各种细胞(包括神经元)核内的转录调节因子，在免疫、应激反应、炎症和细胞凋亡等方面具有重要作用。但是NF-κB的活化对神经元具有保护作用还是损伤作用并不十分清楚。本研究拟应用Western印迹分析技术检测缺氧再灌注后大鼠脑皮质内NF-κB的表达，并通过观察其下游靶基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的变化以期阐明NF-κB在缺氧再灌注脑损伤过程中的作用。     

急性胰腺炎患者外周血中性粒细胞NF-κB活性变化及PDTC的抑制作用

目的探讨急性胰腺炎（AP）患者外周血中性粒细胞（PMN）内NF-κB活化在AP中的作用及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对NF-κB的抑制作用。方法选择19例AP患者为研究对象，以16例门诊体检者为对照组。应用凝胶迁移率改变分析法（EMSA）测定PMN内核蛋白NF-κB的活性，记录患者临床化验检查及胰腺CT结果。结果AP患者PMN中NF-κB活性较对照组显著增强（P〈0．01），重症高于轻型急性胰腺炎，且在病程后期出现严重并发症的患者仍维持较高水平。PDTC在体外可降低AP患者PMN内NF-κB活性（P〈0、01），2．0mmol／LPDTC抑制作用强于1．0mmol／LPDTC（P〈0．05）；SAP患者血浆刺激组PMNNF-κB活性较对照组增强（P〈0．05），用PDTC干预后SAP血浆刺激组NF-κB活化程度减弱（P〈0.05）。结论NF-κB异常活化参与急性胰腺炎发生发展，PMN内NF-κB活化可作为早期预测急性胰腺炎严重程度的指标；PTDC对NF-κB有较强的抑制作用。     

七叶皂苷对大鼠重症急性胰腺炎NF-κB表达的影响

目的 观察重症急性胰腺(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺核因子-κB(NF-κB)的活性、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平及七叶皂苷对其的影响.探讨七叶皂苷治疗SAP的作用机制.方法 96只雄性Wistar大鼠,质量250～300 g,随机分为3组(假手术组、SAP组、七叶皂苷治疗组).每组32只.各组分别在术后第3,6和12小时各处死8只大鼠检测胰腺组织NF-κB活性、血清TNF-α水平及胰腺病理评分,各组剩余8只大鼠观察术后24 h死亡率.结果 SAP组与假手术组比较,胰腺组织NF-κB活性增强(p＜0.05),血清TNF-α水平明显升高(P＜0.05),七叶皂苷治疗组胰腺组织NF-κB活性、血清TNF-α水平、胰腺病理损害、24 h大鼠死亡率明显低于SAP组(P均＜0.05).结论 七叶皂苷可以在体内抑制NF-κB在胰腺组织中的活化,减少细胞因子TNF-α过度释放.可能是其治疗SAP的作用机制之一.     

核转录因子-κB及其调控因子在多囊卵巢综合征中的研究进展

多囊卵巢综合征(PCOS)是导致育龄女性生殖功能障碍及代谢异常的常见疾病之一,其中胰岛素抵抗、低度慢性炎症和卵巢颗粒细胞凋亡异常等是PCOS重要的病理生理变化。核转录因子-κB(NF-κB)是免疫调节、应激反应、细胞增殖和细胞分化最重要的核转录因子,在PCOS的发生和发展中起到了重要作用。为了系统地了解NF-κB与PCOS的关系,本文将NF-κB的生物学特性及其与PCOS间的相关性研究进行综述,并讨论针对该因子的相应治疗策略。     

NF-κB在急性胰腺炎病程进展中的作用

细胞因子的级联释放是急性胰腺(acute pancreatitis,AP)病情加重的重要因素,最终导致多器官功能障碍和死亡.核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)作为一种多项性调节作用的核转录因子,能与多种基因启动子部位kB位点特异性结合,引起炎症反应和凋亡等多种病理生理反应.研究发现选用NF-kB抑制剂对其活性进行抑制,能抑制机体的炎症反应,明显改善急性胰腺炎的预后,可以作为一个潜在的新靶点治疗急性胰腺炎.然而,亦有研究发现抑制NF-κB能明显加重急性胰腺炎病情,因此,研究NF-κB在炎症反应中占有重要的研究地位.     

蛋白磷酸酶2A抑制剂通过核因子-KB通路诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡

目的 探讨蛋白磷酸酶2A(PP2A)抑制剂斑蝥素和冈田酸通过激活核因子-κB(NF-κB)通路诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡的作用机制.方法 PP2A抑制剂处理胰腺癌细胞后,噻唑蓝(MTr)检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡水平,Western blot检测NF-κB通路的激活水平.结果 PP2A抑制剂显著抑制胰腺癌细胞活力,呈剂量和时间依赖性,并可诱导细胞凋亡;PP2A抑制剂激活NF-κB通路的上游激酶IKKα,导致IκBα磷酸化并降解,并释放p65入核,从而激活NF-κB通路;阻断NF-κB通路,可削弱PP2A抑制剂的细胞毒性作用.结论 PP2A抑制剂通过NF-κB通路依赖性机制诱导胰腺癌细胞凋亡,有望用于胰腺癌治疗.     

核因子-κB与肝损伤

目的探讨核因子κB(NF-κB)在各种形式肝损伤发生、发展中的作用。方法对近年来有关NF-κB结构、分子生物学特性和功能及其与肝损伤关系方面的文章进行综述。结果NF-κB是一种重要的核转录因子,广泛存在于机体各种细胞中。在各种原因引起肝损伤时它可被诱导活化,活化的NF-κB可通过对细胞因子、黏附因子和活化因子转录活性的调节影响免疫反应、炎症反应及细胞凋亡,从而参与肝损伤。结论NF-κB在肝损伤的发生、发展中起重要作用,将成为肝损伤治疗的新靶点。     

核因子-κB活化受抑对TRAIL诱导前列腺癌细胞株PC-3M凋亡效能的影响

目的 观察二硫代氨基甲酸毗咯烷(PDTC)对核因子(NF)-κB活化的抑制作用,探讨PDTC对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导激素耐受型前列腺癌细胞株PC-3M凋亡的促进作用.方法 根据单用TRAIL(25、50、100 μg/L)或PDTC(25、50、100μmoL/L)或两者合用[25/25、25/50、25/100、50/25、50/50 PDTC(μmoL/L),TRAIL(μg/L)]等不同干预情况将PC-3M细胞分组,以细胞免疫组织化学和凝胶电泳迁移率(EMSA)检测法分析NF-κB核转位的活化情况,并通过MTY和流式细胞分选法研究PDYTC的参与对TRAIL诱导凋亡能力的影响.结果 EMSA和细胞免疫组织化学结果显示TRAIL单独诱导PC-3M细胞凋亡过程中引起NF-κB的显著活化,但是经PDTC预处理的PC-3M细胞中NF-κB的核转位受到抑制.导致其对细胞凋亡的保护作用丧失.检测凋亡显示PDTC作为NF-κB的强抑制物本身并不具有明显的细胞毒性,TRAIL+PDTC作用组的杀伤效应显著增强,远远超过单用TRAIL组对细胞的杀伤率(P<0.01).结论 TRAIL杀伤激素耐受型前列腺癌细胞的作用受到NF-κB活化的影响,抑制NF-κB活化可以显著增强TRAIL的凋亡诱导效用.     

急性胰腺炎患者外周血中性粒细胞NF-кB活性变化及PDTC的抑制作用

目的 探讨急性胰腺炎(AP)患者外周血中性粒细胞(PMN)内NF-кB活化在AP中的作用及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对NF-кB的抑制作用.方法 选择19例AP患者为研究对象,以16例门诊体检者为对照组.应用凝胶迁移率改变分析法(EMSA)测定PMN内核蛋白NF-кB的活性,记录患者临床化验检查及胰腺CT结果.结果 AP患者PMN中NF-кB活性较对照组显著增强(P＜0.01),重症高于轻型急性胰腺炎,且在病程后期出现严重并发症的患者仍维持较高水平.PDTC在体外可降低AP患者PMN内NF-кB活性(P＜0.01),2.0 mmol/L PDTC抑制作用强于1.0 mmol/L PDTC(P＜0.05);SAP患者血浆刺激组PMN NF-кB活性较对照组增强(P＜0.05),用PDTC干预后SAP血浆刺激组NF-кB活化程度减弱 (P＜0.05).结论 NF-кB异常活化参与急性胰腺炎发生发展,PMN内NF-кB活化可作为早期预测急性胰腺炎严重程度的指标;PTDC对NF-кB有较强的抑制作用.     

槲皮素对重症急性胰腺炎相关性肺损伤肺泡中性粒细胞TLR4/NF-κB通路的影响

目的探讨槲皮素(Quercetin)对大鼠重症急性胰腺炎相关性肺损伤(SAP-LI)肺泡中性粒细胞(PMN)TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 48只成年SD大鼠随机分为4组,每组12只,假手术(Sham)组、重症急性胰腺炎(SAP)组、槲皮素低剂量组(50 mg/kg)及槲皮素高剂量组(100 mg/kg)。逆行性胰胆管注射5%牛磺酸钠建立SAP大鼠模型。槲皮素组在胰腺炎模型基础上予槲皮素干预,Sham组、SAP组给予等量生理盐水。计算肺湿/干重比(W/D)和肺通透指数(LPI),经支气管肺泡灌洗分离收集PMN,ELISA检测PMN培养上清液中TNF-α含量,RT-PCR检测PMN TLR4 m RNA表达,Western blotting检测PMN TLR4和NF-κB p65的表达。结果与Sham组比较,其余三组W/D、LPI及TNF-α含量明显升高,TLR4 m RNA及其蛋白和NF-κB p65蛋白表达上调;与SAP组比较,槲皮素处理组W/D、LPI及TNF-α含量降低,TLR4 m RNA及其蛋白和NF-κB p65蛋白表达下调。结论槲皮素减轻SAP引起的肺损伤可能与其抑制PMN TLR4/NF-κB信号通路活化有关。     

BMS-345541通过抑制IκB激酶/核因子-κB信号通路诱导人脑胶质瘤细胞凋亡

目的 观察IκB激酶(IKK)高度选择性抑制剂BMS-345541对胶质瘤细胞凋亡的影响及其机制.方法 不同浓度BMS-345541作用于人脑胶质瘤细胞株U87MG后,采用Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡,荧光素酶核因子-κB(NF-κB)报告基因法检测NF-κB活性,免疫印迹法检测bcl-2、Caspase-3和NF-κB胞核定位.结果 终质量浓度1、10、20 μmol/L BMS-345541作用U87MG细胞24 h后,细胞凋亡率分别为(18.2±2.2)%、(49.3±3.6)%、(73.3±8.9)%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).BMS-345541处理U87MG细胞后,bcl-2蛋白表达减少、Caspase-3被激活;NF-κB转录启动子的活性下降(66.2±5.1)%(P＜0.01),NF-κB p65亚单位核移位被抑制.结论 BMS-345541可通过抑制IKK/NF-κB信号通路诱导人胶质瘤细胞凋亡.     

骨保护素防治骨质疏松症的研究进展

骨保护素(osteoprotegerin, OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)、核因子-κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB, RANK)是调节骨吸收和骨形成的重要的调控因子.骨质疏松症是多种原因使破骨细胞功能活跃,破坏骨的动态平衡造成的.OPG与RANK竞争性结合RANKL,从而抑制破骨细胞的分化、激活,促进其凋亡.应用重组OPG蛋白和OPG基因治疗的方法 是目前防治骨质疏松症的关注热点.笔者针对这方面的研究现状作简要的综述.     

急性胰腺炎外周血中性粒细胞凋亡及XIAP表达的意义

目的 探讨急性胰腺炎(AP)外周血中性粒细胞(PMN)的凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XI-AP)的表达意义.方法 采用流式细胞仪分别测定重急性胰腺炎(SAP)组,轻症急性胰腺炎(MAP)组和正常对照(NC)组外周血PMN的凋亡情况,采用RT-PCR和Western Blotting技术测定各外周血PMN中XIAP mRNA及蛋白的表达,分析PMN凋亡及XIAP表达与疾病严重程度的关系.结果 PMN凋亡SAP组为(2.15±0.40)%,MAP组(4.16±0.14)%,NC组为(4.31±0.12)%,SAP组和MAP组PMN凋亡较NC组明显减少(P<0.05),而SAP组PMN凋亡显著少于MAP组P<0.01).SAP及MAP组XIAP mRNA的表达较NC组增加(P<0.05),而SAP组显著高于MAP组(P<0.01).各组PMN XIAP蛋白水平与其mRNA水平一致.结论 IAP可能参与介导SAP外周血PMN的凋亡延迟,且与疾病的严重程度有关.     

羟乙基淀粉对内毒素感染大鼠肺部毛细血管通透性的影响

目的 观察羟乙基淀粉(HES 200/0.5)对内毒素感染大鼠肺部毛细血管通透性的影响。方法 雄性Wistar大鼠42只随机分为对照组,内毒素组(LPS,6 mg/kg),LPS HES组(HES,3.75、7.5、15、30ml/kg)及HES对照组(30ml/kg)。分别于LPS注入后4 h检测肺组织毛细血管通透性、肺湿干重比、肺组织中性粒细胞(PMN)浸润,2 h检测肺组织核转录因子kappaB(NF-κB)水平。结果3.75 ml/kg和7.5 ml/kg HES显著降低肺毛细血管通透性、湿干重比和PMN浸润(P<0.05),3.75、7.5和15 ml/kgHES显著降低肺NF-κB活性(P<0.05)。结论较低剂量HES具有抑制感染状念下毛细血管漏的作用,这种作用的产生可能与其降低肺组织PMN浸润、抑制核转录因子NF-κB有关。     

NF-κB与缺血/再灌注肠粘膜损伤

核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种多向性核转录调节蛋白,参与多种炎症介质基因的转录和调控,在炎症、免疫反应中发挥重要作用。近年来研究发现肠粘膜缺血/再灌注过程中NF-κB对细胞因子、粘附分子等因子的基因转录调控发挥了重要作用。现就NF-κB活化的分子机制及其与缺血/再灌注肠粘膜损伤关系的研究进展作一综述。     

细胞核因子-κB与大肠癌

目的探讨细胞核因子-κB(NF-κB)与大肠癌发生、转移和治疗的关系. 方法采用文献回顾的方法对NF-κB的结构和分子生物学特性,以及与细胞凋亡、恶性肿瘤、大肠癌的关系进行综述. 结果 NF-κB具有抗凋亡作用,与恶性肿瘤的发生、转移密切相关,并通过对原癌基因(c-myc)、环氧合酶(Cox2)、细胞间粘附分子(ICAM-1)的调控,影响大肠癌的发生、转移.结论 NF-κB对大肠癌的发生、转移具有重要作用,是大肠癌治疗的新靶点.