HIV复制型痘苗病毒载体疫苗免疫原性分析

目的 分析比较HIV复制型痘苗病毒载体疫苗在小鼠和家兔体内的免疫原性。方法 HIV痘苗病毒载体疫苗vTKgpe以肌内、皮下、皮内3种途径接种小鼠，每周采血检测HIV特异性抗体和针对痘苗病毒载体的抗体，4周时取脾细胞用流式细胞仪检测细胞免疫。此外vTKgpe皮内途径接种2只家兔，每周采血检测抗体。结果 肌内和皮下免疫的小鼠在2周时开始出现HIV特异性抗体，4周时开始消失；针对痘苗病毒载体的抗体滴度在4周时急剧升高；血清吸附实验表明痘苗病毒抗体的升高对HIV特异性抗体检测有一定的掩盖。细胞免疫仅在皮内免疫的小鼠中检测到。家兔的HIV特异性抗体在2周时出现，并能维持一段时间。结论 在小鼠体内，肌内和皮下注射2种途径倾向于诱导体液免疫，而皮内接种则以诱导细胞免疫为主。家兔对痘苗病毒的敏感性要高于小鼠。     

DNA疫苗免疫原性的研究策略

DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫，是近年来疫苗研究的热点领域，被称为疫苗史上的第三次革命。但DNA疫苗诱导特异性免疫应答的水平不高，限制了它的广泛应用。本对提高DNA疫苗免疫原性的几种策略进行综述。     

口服免疫机制及口服疫苗的研究进展

口服免疫可诱导机体产生有效的免疫应答和免疫耐受。其通过胃肠粘膜进行抗原递呈 ,较经传统注射途径的免疫效果和依从性好 ,且简易便捷 ,是更为理想的免疫途径。口服疫苗有多种载体系统 ,某些经改造的细菌如沙门氏菌、大肠杆菌、特别是乳酸菌属被认为是有前景的口服疫苗载体 ,因口服后可在肠道寄生繁殖 ,故可大大提高免疫的效率。本文围绕口服免疫主要的机制和口服疫苗的研究进展进行综述。     

增强DNA疫苗免疫原性的研究进展

DNA疫苗是疫苗领域的研究热点,与传统疫苗相比,具有能够同时诱导体液免疫和细胞免疫、安全、廉价等多种优势,但也存在免疫后抗体滴度不高、免疫效果差的问题。本文就目前DNA疫苗的免疫机制研究现状及其优化研究的进展进行了综述。     

基因工程乙型肝炎疫苗免疫原性和免疫效果的评价

80年代第一个基因工程疫苗———乙肝疫苗研制成功 ,以后随着对目的基因选择、抗原表达系统、质量评价等方面的研究进展 ,对其质量问题产生了不同见解。不同乙肝疫苗抗原来源于不同的表达系统 ,糖基化程度和生产工艺有所不同 ,由此引起保护率、抗体水平和免疫持久性的差异如何 ?以及以何种方法评价方能较科学地反映疫苗质量 ,均为乙肝预防工作中亟待解决的重大问题。开展这方面的研究 ,对确定我国乙肝疫苗生产发展的方向 ,即选择、推广何种类型的乙肝疫苗十分重要 ,为制定疫苗更新换代的行政决策提供依据。本文对疫苗免疫效果考核和保护机制…     

DNA疫苗免疫原性的研究策略

DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫,是近年来疫苗研究的热点领域,被称为疫苗史上的第三次革命.但DNA疫苗诱导特异性免疫应答的水平不高,限制了它的广泛应用.本文对提高DNA疫苗免疫原性的几种策略进行综述.     

大肠杆菌不耐热肠毒素LT基因双价植物表达载体的构建

目的：构建可高效表达不耐热肠毒素LT的双价植物表达载体。方法：采用PCR的方法从强致病菌株中K88ac中,分别克隆了LTA和LTB基因,将LTA和LTB基因同时连接到植物表达载体pBI121上。结果：成功构建了带有内质网滞留信号RDEL/KDEL的不耐热肠毒素A、B亚单位基因双价植物表达载体pCAMBIA2300-LTA-LTB。结论：构建的双价植物表达载体pCAMBIA2300-LTA-LTB,为研究LT全毒素在植物中的正确组装及进一步构建带有保护性抗原类全毒素嵌合植物疫苗奠定基础。     

腺病毒重组疫苗载体构建的研究进展

腺病毒(Ad)基因组E_1、E_3、以及E_4区和右侧端插入性末端重复(ITR)之间的区段,均存在外源基因插入位点。本文论述了外源保护性免疫原基因插入Ad基因组上述不同位点构建各类重组疫苗载体的研究进展。     

CVB3腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用的免疫效果

目的 构建重组腺病毒Ad/MDC-VP1,观察Ad/MDC-VP1与NA疫苗联合应用的免疫效果.方法 构建、包装重组腺病毒Ad/MDC-VP1并检测目的 蛋白的表达.BALB/c小鼠随机分为Ad/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VPl+Ad/MDC-VP1和PBS 4组,肌肉注射免疫小鼠.用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清柯萨奇病毒B3(CVB3)VP1 IgG和中和抗体滴度;CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击小鼠后,检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率.结果 成功构建并包装了重组腺病毒Ad/MDC-VP1,检测到目的 蛋白的表达.peDNA3/MDC-VP1+Ad/MDC-VP1组血清CVB3 VP1 IsG滴度、淋巴细胞增殖指数、CTL杀伤活性和对小鼠的保护率明显高于其他各组(P<0.05),血清病毒滴度低于其他各组(P<0.05).结论 Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用能显著提高小鼠细胞和体液免疫应答.     

淋球菌重组与减毒鼠伤寒沙门氏菌活疫苗口服免疫的初步研究

在克隆淋球菌膜抗原CppB基因并在大肠杆菌和减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得高效表达的基础上,用表达CppB-LacZ融合蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌口服免疫Balb/c小鼠。ELISA检测表明被免疫小鼠血清中特异性抗体滴度可达1:160,并诱发了DTH反应,说明产生了特异的免疫反应。重组菌可在肠道中较持久地寄生,对小鼠未见有明显的毒副反应。     

肠产毒性大肠埃希菌定植因子研究进展

肠产毒性大肠埃希菌定植因子为近几年发现的一种重要的细菌致病菌毛,它能使大肠杆菌粘附于宿主肠牯膜而不被肠蠕动和肠分泌液所清除,再通过其分泌肠毒素导致婴幼儿和旅行者腹泻。菌毛亚单位的保守区域、抗原决定簇组成、定植因子质粒与毒力编码基因的联系,对研制广谱重组菌毛疫苗具有重要指导意义。本文综述了近几年来有关定植因子菌毛的研究进展,以及与各类肠毒素编码质粒的相关性和疫苗研究概况。     

Mucosal Immunity and Protection Against HIV/SIV Infection: Strategies and Challenges for Vaccine Design

To date, most HIV vaccine strategies have focused on parenteral immunization and systemic immunity. These approaches have not yielded the efficacious HIV vaccine urgently needed to control the AIDS pandemic. As HIV is primarily mucosally transmitted, efforts are being re-focused on mucosal vaccine strategies, in spite of complexities of immune response induction and evaluation. Here, we outline issues in mucosal vaccine design and illustrate strategies with examples from the recent literature. Development of a successful HIV vaccine will require in-depth understanding of the mucosal immune system, knowledge that ultimately will benefit vaccine design for all mucosally transmitted infectious agents.     

利用转基因植物生产口服疫苗

利用转基因植物生产口服疫苗,以其成本低廉、使用安全可靠、易推广应用已经成为植物疫苗研究中的热点。本文从转基因植物口服疫苗的作用机理、表达效果的验证、以及目前研究进展做一简要概述。     

不同表型的双价痢疾菌苗的滴鼻免疫研究

为了探讨滴鼻免疫不同表型的双价痢疾菌苗的免疫效果 ,应用FSM 2 117(Ipa )及FS 5 40 2 (Ipa+)、FS 5 411(Ipa+)、FS 5 414(Ipa+)、FS 5 416 (Ipa+) 5株菌苗株分别滴鼻免疫小鼠 ,4× 10 7CFU/只 ,间隔 14d ,3次免疫后第 7天收集血清和小肠、鼻咽、肺、阴道冲洗液 ,ELISA法检测其中特异性福氏、宋内LPSIgA和IgG抗体水平 ,发现滴鼻免疫能够诱生血清中的双价IgA、IgG抗体显著升高 ,Ipa+株较Ipa 株升高显著 (P <0 0 1)。同时诱生鼻咽、肺、小肠内特异性抗体升高 ,尤其是生殖道冲冼液内抗体升高极为明显。表明鼻粘膜免疫不仅诱导多个粘膜部位 (特别是生殖道 )的抗体反应 ,且能诱导系统免疫反应 ,是一个安全有效的免疫途径。研究中发现侵袭蛋白表达在鼻粘膜部位能够显著加强系统特异性抗体生成。     

人乳头瘤病毒HPV6b重组减毒沙门菌粘膜免疫的效果测定

为观察人乳头瘤病毒 6b型 (HPV6b )的重组减毒沙门菌载体疫苗粘膜免疫小鼠的免疫效果及探讨研制治疗尖锐湿疣的治疗性粘膜疫苗的机制 ,我们用构建的HPV6b重组减毒沙门菌粘膜免疫BALB/c小鼠 ,检测了阴道冲洗液中特异的SIgA、血清中IgG、T淋巴细胞增殖以及载体疫苗在机体内的稳定性。结果表明 ,粘膜免疫后 ,实验组与对照组相比较 ,阴道冲洗液中抗HPV6bL1的SIgA差异显著 ,实验组血清中抗HPV6bL1IgG水平低 ,T淋巴细胞增殖明显 ,疫苗在小鼠体内持续存在4 0d以上。研究结果提示我们所构建的重组减毒沙门菌粘膜免疫小鼠后 ,阴道粘膜局部能分泌特异的抗人乳头瘤病毒HPV6bSIgA ,也能激发细胞免疫 ,且此疫苗在小鼠体内能稳定存在。     

乙肝疫苗无（低）应答加大剂量再免疫效果分析

目的探讨乙肝疫苗接种后无（低）应答者加大剂量再免疫的效果,以提高乙肝疫苗预防接种的保护率。方法对近3年已完成标准乙肝疫苗免疫接种程序至少一年、复查乙肝病毒标志物均为阴性的健康人群,随机地接受3种再免疫方案,按常规程序（0、1、6个月）予肌肉注射。A组40例：进口重组乙肝疫苗（安在时）,每次剂量40μg;B组40例：安在时,每次剂量20μg;C组40例：国产重组乙肝疫苗,每次剂量20μg。在首针乙肝疫苗接种前及接种后第1、2、7个月（T1、T2、T7）采血检测抗-HBs。结果T1时,进口40μg组、进口20μg组和国产20μg组复种后应答率分别为45．0％（18／40）、37．5％（15／40）和30．0％（12／40）,3组应答率差异无统计学意义（χ^2=1．920,P=0．383）;T2和T7时,3组复种后应答率分别为67．5％（27／40）、47．5％（19／40）、40．0％（16／40）和77．5％（31／40）、55．0％（22／40）、50．0％（20／40）,进口40μg组应答率高于其余两组（χ^2为4．014～6．545之间,P均〈0．05）。T2和T7时,进口40μg组应答率差异无统计学意义（χ^2=1．003,P=0.317）。各组患者复种后均未出现严重副反应。结论对乙肝疫苗无（低）应答者增加疫苗剂量加强免疫是有效的措施,抗-HBs应答率随疫苗剂量增加而提高。进口40μg组加强2针即可,加强3针未能较加强2针明显提高抗-HBs应答率。     

In Hot Pursuit of the First Vaccine Against Respiratory Syncytial Virus

Human respiratory syncytial virus (RSV) is the leading cause of severe lower respiratory tract infection, such as bronchiolitis, bronchitis, or pneumonia, in both infants and the elderly. Despite the global burden of diseases attributable to RSV infection, no clinically approved vaccine is available, and a humanized monoclonal antibody for prophylaxis is not readily affordable in developing countries. There are several hurdles to the successful development of RSV vaccines: immune-vulnerable target populations such as premature infants, pregnant women, and immunocompromised people; safety concerns associated with vaccine-enhanced diseases; repeated infection; and waning memory. To develop successful strategies for the prevention of RSV infection, it is necessary to understand the protective and pathologic roles of host immune responses to RSV infection. In this review, we will summarize the positive and negative relationship between RSV infection and host immunity and discuss strategies for the development of the first successful RSV vaccine.     

Entrapment of LTB protein in alginate nanoparticles protects against Enterotoxigenic Escherichia coli

Vaccine delivery vehicles are just as important in vaccine efficiency. Through the progress in nanotechnology, various nanoparticles have been evaluated as carriers for these substances. Among them, alginate nanoparticles are a good choice because of their biodegradability, biocompatibility, ease of production, etc. In this study, feasibility of alginate nanoparticles (NPs) such as recombinant LTB from Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) carrier was investigated. To do this, the eltb gene was cloned and expressed in E. coli BL21 (DE3) host cells, and a Ni‐NTA column purified the protein. NPs were achieved through ion gelation method in the presence of LTB protein and CaCl₂ as the cross‐Linker and NPs were characterized physicochemically. Balb/C mice groups were immunized with LTB‐entrapped NPs or LTB with adjuvant and immunogenicity was assessed by evaluating IgG titer. Finally, the neutralization of antibodies was evaluated by GM1 binding and loop assays. LTB protein was expressed and efficiently entrapped into the alginate NPs. The size of NPs was less than 50 nm, and entrapment efficiency was 80%. Western blotting showed maintenance of the molecular weight and antigenicity of the released protein from NPs. Administration of LTB‐entrapped NPs stimulated antibody responses in immunized mice. Immunization induced protection against LT toxin of ETEC in ileal loops and inhibits enterotoxin binding to GM1‐gangliosides. Alginate NPs are also appropriate vehicle for antigen delivery purpose. Moreover because of their astonishing properties, they have the potential to serve as an adjuvant.