基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在人前列腺组织及各种类型前列腺细胞中的表达

目的：研究基质金属蛋白酶（MMPs）及其组织抑制因子（TIMPs）在人前列腺组织及各种类型细胞中的表达。方法： 用半定量RT－PCR的方法，对癌变和非癌变部分的前列腺组织、原代培养的平滑肌细胞、成纤维细胞、上皮细胞以及4种前列腺上皮细胞系（BPH－1、LNCaP、DU－145和PC－3）中MMP2、MMP7和MMP9、膜型基质金属蛋白酶1和3（MT1－MMP和MT3－MMP）及其组织抑制因子1和2（TIMP－1和TIMP－2）的mRNA 水平进行了测定。结果：MMP-2主要在前列腺基质细胞中表达；MMP-7和MMP-9则在前列腺上皮细胞中有较高的表达；MT1-MMP、MT3-MMP、TIMP-1和TIMP-2在前列腺基质细胞和上皮细胞中均有表达，但MT1-MMP和MT3-MMP在成纤维细胞中的表达量较高；另外，各种基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在各种前列腺细胞系中也存在差异表达。结论： MMPs和TIMPs在前列腺组织及其各种类型细胞中的差异表达提示：它们可能在前列腺癌的转移中起着不同的作用。     

牙周炎牙龈组织MMP-2、TIMP-1的免疫组化研究

目的　探讨来源于宿主的基质金属蛋白酶MMPs及其抑制因子在牙周炎发病中的作用机制。方法　本研究利用免疫组化方法检测 15例牙周炎患者牙龈组织中和 4例健康牙龈中基质金属蛋白酶 2(MMP 2 )、组织抑制因子 1(TIMP 1)的蛋白表达。结果　 15例成人牙周炎组牙龈组织中MMP 2在上皮内及上皮下的炎性组织中均有阳性表达 ,而且阳性率明显高于正常牙龈 (P <0 .0 5 ) ;TIMP 1在牙周炎以及正常的牙龈组织中表达无明显差异。结论　本研究提示基质金属蛋白酶MMP 2参与牙周组织破坏过程 ,参与牙周炎的病理生理机制     

MMP12与肿瘤侵袭性的研究进展

目的：探讨人巨噬细胞金属弹性蛋白（HME,或MMP12）与恶性肿瘤的浸润、转移的关系,基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）的作用。方法：总结并分析有关MMP12及TIMP的最新文献。结果：MMP12可以分解几乎全部细胞外基质和血管壁成分,但目前MMP12的作用机制还不明确。结论：对MMP12和TIMP进一步研究,有利用肿瘤的靶向治疗。     

细胞外基质因子在兔软骨细胞损伤模型中的表达变化

目的:研究细胞外基质因子在兔关节软骨细胞损伤后不同时间点的表达变化水平。方法:通过机械划伤制备关节软骨细胞损伤模型,观察软骨细胞在划伤后的形态变化。采用实时荧光定量PCR检测软骨细胞在划伤前与划伤后1、3、5 d和7 d共5个时间点的基质金属蛋白酶13(MMP13)及基质金属蛋白酶抑制物1(TIMP1)、透明质酸和Ⅱ型胶原(ColⅡ)基因mRNA表达水平。结果:成功建立了兔关节软骨细胞损伤模型。与划伤前相比,MMP13基因水平在细胞损伤第1天表达明显下降,随后出现升高趋势,第5天达到最高后逐渐下降。TIMP1基因表达量损伤后先上升至第1天然后下降,在第3天降至最低,随后呈现升高趋势。透明质酸和Col-Ⅱ基因水平第1天表达明显降低,随后呈上升趋势,透明质酸mRNA表达量至第5天达到最高,然后逐渐下降。结论:MMP13、TIMP1、透明质酸和Col-Ⅱ基因在细胞损伤后的表达规律相异,为软骨细胞外基质因子表达与软骨细胞之间关系提供实验依据。     

血管内超声技术对易损斑块的诊断价值

易损斑块（vulnerable plaque）是指所有易导致血栓形成并快速进展为栓塞病变的粥样病变,其形成与炎性反应、氧化应激、血脂紊乱、内皮细胞活化和纤溶失衡、基质金属蛋白酶（matrix metal proteinase,MMP）．金属蛋白酶组织抑制因子（tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMP）等作用有关。     

宫颈癌中MMP-2及TIMP-2的表达及其临床意义

目的 :通过检测基质金属蛋白酶 - 2 (MMP - 2 )及基质金属蛋白酶组织抑制物 - 2 (TIMP - 2 )在宫颈癌中的表达 ,探讨其与宫颈癌侵袭转移的关系。方法 :采用免疫组化S -P法检测 5 1例宫颈癌和 16例正常宫颈组织中MMP - 2和TIMP - 2的表达情况。结果 :MMP - 2、TIMP - 2在正常宫颈上皮组织中均无表达 ,在宫颈癌组织中的阳性表达率分别为 74 .5 % (38/ 5 1)、4 7.1% (2 4 / 5 1) ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。MMP - 2、TIMP - 2的表达与组织学类型无关 ,但与临床分期、细胞分化程度、淋巴结转移有关。结论 :MMP - 2、TIMP - 2的表达与宫颈癌的侵袭转移有关 ,MMP - 2、TIMP - 2可作为预测宫颈癌侵袭转移潜能和临床预后的指标。     

滋养层细胞侵入相关基因在先兆子痫胎盘中的表达

探讨与滋养层侵入有关的细胞外基质分子相关基因在先兆子痫胎盘中的表达，采用分别点样有220余种人细胞因子相关基因和人类激素相关基因cDNA片段的两款基因芯片，检测经过严格配伍的先兆子痫和正常胎盘组织的基因表达谱差异。结果显示：钙粘蛋白、胶原、整合素、选择蛋白等18种细胞外基质分子基因的表达在先兆子痫和正常胎盘组织间相差2倍以上，且全部表现为在先兆子痫胎盘中的表达增强。先兆子痫患者的胎盘组织中基质金属蛋白酶(MMP)-10、-13、-15和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-2、TIMP-3、纤溶酶原、纤溶酶原激活物等的表达均较正常者高。提示胎盘中细胞外基质分子及其降解酶基因表达异常可能与先兆子痫的病理发生关系密切。     

风湿性心脏病心房颤动患者心房组织基质金属蛋白酶表达的研究

目的:检测风湿性心脏病心房颤动(房颤)患者心房组织中基质金属蛋白酶（MMP1，MMP9）及其组织抑制因子（TIMP1）表达的变化及血浆MMP1，MMP9、TIMP1水平的变化，并作相关分析。 方法:56例风湿性心脏病二尖瓣病变患者分为3组，窦性心律组、阵发性房颤组和持续性房颤组，于心脏外科手术时取右心耳组织，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测MMP1，MMP9及TIMP1 mRNA的含量，同时取静脉血检测外周血MMP1，MMP9和TIMP1水平。 结果:阵发性房颤组、持续性房颤组MMP9、TIMP1表达显著大于窦性心律组(P<0.05 or P<0.01)，TIMP1/MMP1比值明显升高(P<0.05 or P<0.01)，持续性房颤组TIMP1/MMP1比值明显高于阵发性房颤组(P<0.05 )；阵发性房颤组、持续性房颤组外周血MMP9、TIMP1水平及TIMP1/MMP1明显升高(P<0.05 or P<0.01)，与心肌组织表达水平相一致。相关分析显示，血浆MMP1，MMP9、TIMP1与心肌组织MMP1，MMP9、TIMP1显著正相关（r=0.71, P<0.01），MMP9、TIMP1与房颤时间正相关(r=0.68, P<0.01)。 结论:风湿性心脏病患者心肌组织MMP9、TIMP1表达改变及TIMP1/MMP1比值改变可能是心房纤维化发生的分子机制之一，检测外周血MMP1，MMP9及TIMP1变化可了解其在心肌组织的表达情况。     

基质金属蛋白酶1、3,基质金属蛋白酶组织抑制剂1和miR-29在大鼠肺纤维化中及活性维生素D3处理后的表达与作用

目的:探讨大鼠肺纤维化发生发展中基质金属蛋白酶1(MMP1)、MMP3、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)及miR-29的表达和作用以及活性维生素D3[1,25(OH)_2D_3]处理对这些基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为预防组和治疗组。预防组分为对照组Ⅰ、模型组Ⅰ和给药组Ⅰ,治疗组分为对照组Ⅱ、模型组Ⅱ和给药组Ⅱ。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ经气管注入博莱霉素,对照组Ⅰ/Ⅱ经气管注入生理盐水。预防组和治疗组分别于术后第2和14天腹腔注射给药,给药组给予活性维生素D3,模型组给予活性维生素D3溶剂,对照组给予生理盐水。预防组的各组分别于术后第14、21、28天处死大鼠取材,治疗组的各组分别于术后第21和28天处死大鼠取材。实时定量PCR检测大鼠肺组织中miR-29a及TIMP1 mRNA表达水平,免疫组织化学检测组织中MMP1、MMP3和TIMP1的表达水平。结果:模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中的MMP1、MMP3和TIMP1的表达均明显高于相同时间点对照组Ⅰ/Ⅱ中的表达,而miR-29a的表达明显低于相应的对照组Ⅰ/Ⅱ;给药组Ⅰ/Ⅱ中MMP1、MMP3和TIMP1的表达均低于相应时间点的模型组Ⅰ/Ⅱ的表达,而给药组Ⅰ/Ⅱ中miR-29a的表达则高于模型组Ⅰ/Ⅱ中的表达。结论:MMP1、MMP3、TIMP1和miR-29在大鼠肺纤维化发生发展中具有重要作用,活性维生素D3可以促进miR-29表达,抑制MMP1、MMP3、TIMP1的表达;可能是通过miR-29调节包括MMP1、MMP3、TIMP1在内的多种靶基因来发挥抑制纤维化的作用。     

厄贝沙坦对肾硬化大鼠肾小管间质中MMP-9/TIMP-1表达的影响

为探讨基质金属蛋白酶9（MMP－9）及其抑制剂（TIMP－1）在单侧肾切除后，重复注射阿霉素复制肾小球硬化大鼠肾小管－间质的表达，以及厄贝沙坦对其的影响和可能的保护作用机制。将肾小球硬化大鼠分为厄贝沙坦治疗组和对照组，设假手术组为正常对照。检测厄贝沙坦治疗4周后，肾功能和病理改变，并用免疫组化或原位杂交的方法分别检测肾小球和肾小管－间质中MMP－9／TIMP－1，转化生长因子β1（TGF－β1）的表达。结果表明肾小球硬化组肾小管中MMP－9，TIMP－1，TGF－β1显著增加。厄贝沙坦组中肾小管中上述指标表达下降。提示厄贝沙坦在延缓肾小球硬化同时，在减轻肾小管－间质纤维化方面有一定保护作用。     

乙型肝炎病毒对HepG2细胞侵袭的影响

目的 研究HBV全长对HepG2细胞侵袭相关基因表达及活性的影响,探讨HBV在整体水平对HepG2细胞侵袭的影响.方法 采用定量PCR分析HBV对HepG2细胞MMP2、9和TIMP1-4基因转录的影响;通过明胶酶谱及反相明胶酶谱检测MMP2、MMP9及TIMPs的活性;应用体外侵袭小室法检测细胞的侵袭能力.结果 HBV的复制可以促进HepG2细胞MMP2、MMP9、TIMP1和TIMP3基因的转录,抑制TIMP4基因转录,增强HepG2细胞MMP2 、MMP9的活性并增强细胞中TIMP1、TIMP3功能,HBV稳定复制的细胞具有更强的体外侵袭能力.结论 HBV可影响HepG2细胞MMPs和TIMPs的基因转录、表达及功能,促进HepG2细胞的体外侵袭,这可能与HBV相关的HCC侵袭转移密切相关.     

Specific expression of matrix metalloproteinases 1, 3, 9 and 13 associated with invasiveness of breast cancer cells in vitro

Several matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitors of MMPs (TIMPs) were studied in highly invasive (MDA-MB-231) and slightly invasive (MCF-7, T47D, BT-20) breast cancer cell lines. Investigations were carried out at the protein level and/or at the mRNA level, either in cells cultured as monolayers on plastic, or in cells seeded on a thin layer of Matrigel basement membrane matrix. Analysis of MMP expression by RT-PCR showed expression of MMP-1, MMP-3, and MMP-13 in highly invasive MDA-MB-231 cells, but not in slightly invasive cell lines. The extracellular secretion of MMP-1 and MMP-3 by MDA-MB 231 cells could be also shown by ELISA. TIMP-1 and TIMP-2 mRNAs were found in all cell lines, however, the extracellular secretion of both TIMPs was much higher in MDA-MB-231 cells than in the other cell lines. When the cells were cultured on Matrigel matrix, MMP-9 expression was induced in MDA-MB-231 cells only, as assessed by RT-PCR and zymography experiments. The invasive potential of MDA-MB-231 cells evaluated in vitro through Matrigel was significantly inhibited by the MMP inhibitor BB-2516, by 25% and 50% at the concentrations of 2 × 10⁻⁶M and 10⁻⁵M, respectively. In conclusion, our data show that highly invasive MDA-MB-231 cells but not slightly invasive T47D, MCF-7 and BT-20 cells express MMP-1, MMP-3, MMP-9 and MMP-13. MMP-9 which is specifically up-regulated by cell contact to Matrigel, may play a key role in the invasiveness of MDA-MB-231 cells through basement membranes. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.     

前列腺间质细胞中雌二醇对MMP-2，MMP-9及其组织抑制因子表达的影响

目的： 研究雌二醇(E2)对前列腺间质细胞中基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9）及其组织抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2和雌激素受体α、β（ERα、ERβ）的影响。方法： 实时定量PCR法检测E2在前列腺间质细胞中对MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA水平的影响；半定量RT-PCR法检测E2对ERα、ERβ mRNA水平的影响。酶谱电泳法检测MMP-2、MMP-9的活性。Western blotting检测E2在前列腺间质细胞中对ERα蛋白水平的影响。结果： 前列腺间质细胞中有MMP-2和ERα mRNA的表达，未检测到MMP-9 mRNA；培养液中检测到MMP-2前体（pro-MMP-2），未检测到其活性形式，也未检测到MMP-9前体及其活性形式。用E2处理间质细胞后MMP-2 mRNA水平降低，pro-MMP-2蛋白量减少，雌激素受体抑制剂ICI 182.780可抑制此作用。E2对TIMP-1,2 mRNA表达无显著影响。E2能够增加前列腺间质细胞中ERα mRNA及其蛋白表达的水平。结论： E2能够通过ERα下调前列腺间质细胞中MMP-2的表达。     

胸腺上皮肿瘤组织中基质金属蛋白酶-2活性与Ⅰ型膜型基质金属蛋白酶 mRNA表达的相关性

目的探讨胸腺瘤和胸腺癌中基质金属蛋白酶（MMP）-2、Ⅰ型膜型（MT1）-MMP、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-2mRNA的表达和MMP-2蛋白活性的关系。方法分别用real-time逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR,Taqman法）、明胶酶谱法和Filmin situ gelatin-Zymography（FIZ）对正常的胸腺组织（2例）、胸腺瘤（12例）和胸腺癌（2例）患者的新鲜肿瘤组织中MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2mRNA的表达,pro-MMP-2的活性率及活性蛋白的定位进行测定。结果MMP-2、MT1-MMP及TIMP-2mRNA在Ⅰ期与Ⅱ期和Ⅲ期与Ⅳ期中的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）,在Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期和胸腺癌3组中差异均有统计学意义（P〈0．01）。在AB、B1型（混合型和淋巴细胞为主型）与B2、B3型（皮质型和多角细胞为主型）以及胸腺癌3组中差异均有统计学意义（P〈0．05）。MMP-2的蛋白活性率（MMP-2／pro—MMP-2＋MMP-2）在Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期和胸腺癌各组中差异有统计学意义（P〈0．05）,在AB、B1型与B2、B3型以及胸腺癌各组中的差异均具有统计学意义（P〈0．05）。胸腺瘤各期及各型中MT1-MMP、TIMP-2mRNA与MMP-2蛋白活性表达均呈正相关,且相关程度相似（r=0．7235、r=0．7647、P〈0．005）。MMP-9的蛋白表达在各组间差异均无统计学意义。结论MMP-2、MT1-MMP及TIMP-2的mRNA表达与胸腺瘤临床分期、病理分型相关,MMP-2的活性与MT1-MMP和TIMP-2的表达升高正相关。推测MT1-MMP通过TIMP-2对MMP-2的激活起促进作用。     

MMP-9/TIMP-1表达在糖尿病鼠皮肤伤口愈合过程中的变化及意义初探

目的：观察基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达和MMP-9/TIMP-1比值在糖尿病组和正常组大鼠皮肤伤口愈合过程中不同时点表达的动态变化，探讨其可能的作用机制。 方法:糖尿病大鼠形成6周后行皮肤伤口造模，采用HE染色、Masson染色和免疫组织化学方法评估伤口形成后3、7、14 d伤口组织的再上皮化、炎症细胞浸润、肉芽组织厚度、新生血管形成和胶原纤维密度的情况；通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测术后不同时点MMP-9、TIMP-1在伤口组织中的表达情况。结果:糖尿病大鼠伤口愈合明显迟缓。术后第3 d两组间胶原纤维、肉芽组织、新生血管和再上皮化没有差异，术后第7 d糖尿病组以上指标得分均低于正常组，第14 d这种趋势更加明显；而第3 d至14 d，糖尿病组的单核巨噬细胞浸润得分均低于正常组。术后第3 d两组MMP-9表达均达高峰，第7、14 d呈逐渐下降趋势，糖尿病组MMP-9表达水平在各时点均高于正常组；术后第3 d两组TIMP-1表达均达高峰，第7、14 d呈逐渐下降趋势，糖尿病组TIMP-1表达水平在各时点均低于正常组；正常组MMP-9/TIMP-1蛋白水平比值始终维持在一个动态平衡的稳定水平，而糖尿病组却长期处于高水平状态。结论:异常的胶原产生、新生血管重建、炎症反应、再上皮化、肉芽形成可能是糖尿病鼠创面愈合减慢的组织病理学基础；皮肤组织MMP-9/TIMP-1的平衡性改变可能是这种组织病理学异常的重要原因之一。     

基质金属蛋白酶及其组织型抑制剂活性及表达失衡与高血压性左心室重塑的关系

目的： 探讨慢性压力负荷增高时，大鼠左心室（LV）基质金属蛋白酶（MMPs）/组织型基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）失衡与LV重塑的关系。方法：40只6周龄雄性卒中易感性自发性高血压大鼠（SHR-SPs）作为研究对象，10只同周龄雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠作为对照。6个月后，以Millar压力容积导管评价2组大鼠的在体LV血流动力学，并对2组大鼠的心脏进行组织病理学、明胶酶谱和免疫印迹法分析。结果：反映LV收缩与舒张功能的血流动力学参数在2组间有显著差异（P＜0.05）；SHR-SPs心脏胶原容积分数、血管周胶原面积/管腔面积、心肌横断面积、心室壁动脉中膜面积/管腔面积均增高（P＜0.05）；心肌MMP-2活性、蛋白含量及TIMP-1蛋白含量在SHR-SPs中明显增高（P＜0.05）。结论：慢性压力超负荷能够导致心脏细胞外基质代谢失调及MMPs/TIMPs系统失衡，继而产生心室腔扩张、LV收缩与舒张功能障碍。     

Role of matrix metalloproteinases and their tissue inhibitor of metalloproteinases in myxomatous change of cardiac floppy valves

To clarify the underlying cause of myxomatous changes in cardiac floppy valves, the expression of the matrix metalloproteinases (MMP) and the tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP) was investigated in cardiac valves. Valves were obtained from nine patients with floppy valves, from 13 patients with other valvular disease types, and from four patients with normal valves. Immunohistochemical analyses for MMP-2, MMP-9, TIMP-1, and TIMP-2, and gelatin zymography for MMP-2 and MMP-9 were performed. Compared with the spongiosa of normal valves, the myxomatous area of floppy valves had stronger immunohistochemical reaction to MMP-2 and MMP-9, and weaker reaction to TIMP-2. Activated MMP-2 and MMP-9 were detected in eight out of nine cases of floppy valves. Activated MMP-2 was detected at low levels in two cases of normal valves showing mild expansion of the spongiosa without macroscopic floppiness. The ratio of active/total MMP-2 and MMP-9 increased in floppy valves compared with normal valves. These results suggest that the imbalance between MMP and TIMP and the increased activity of MMP-2 and MMP-9 may correlate with myxomatous changes observed in floppy valves. Valves with a slight myxomatous change and activated MMP-2 may develop into floppy valves with increases in the activity of MMP.     

环孢霉素A诱导大鼠心肌纤维化和对基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响

目的:研究环孢霉素A(CsA)诱导的大鼠心肌损伤及心肌纤维化的程度,检测基质金属蛋白酶(MMP) 2和MMP9及其组织抑制物(TIMP) 2和TIMP1表达的变化,为探寻CsA诱导心肌纤维化的发生机制提供理论依据。方法:64只健康雌性6～8周龄Wistar大鼠随机分为4组:对照组、低剂量CsA组、中剂量CsA组和高剂量CsA组,分别腹腔注射生理盐水、5 mg·kg~(-1)·d~(-1)CsA、12. 5 mg·kg~(-1)·d~(-1)CsA和25 mg·kg~(-1)·d~(-1)CsA,分别在第1、2、3周时处死大鼠。利用HE染色观察心肌组织形态结构,Masson染色观察心肌胶原沉积情况,免疫组织化学和Western blot法检测MMP2、MMP9、TIMP2和TIMP1蛋白的表达情况。结果:HE染色可见,随着CsA作用时间的延长和剂量的增加,心肌组织形态结构损伤严重,逐渐出现心肌灶状坏死及纤维化。Masson染色结果亦可见心肌纤维化程度随着时间和剂量的增加逐渐加重。免疫组织化学及Western blot检测结果显示,在CsA导致大鼠心肌纤维化的过程中,同一时点MMP2和TIMP2随CsA剂量增加表达显著增高(P 0. 05)。第1周MMP2高表达,随着时间的延长表达逐渐减低; TIMP2则随时间延长表达逐渐增高(P 0. 05)。与对照组相比MMP9和TIMP1表达则减低。各用药组MMP9第1周低表达,第2周表达增高,第3周表达减低(P 0. 05);同一时点,CsA对于MMP9表达变化的差异无统计学显著性。TIMP1随CsA剂量增加表达增高(P 0. 05)。结论:CsA可引起大鼠心肌损伤及间质纤维化,随着用药时间的延长和剂量的增加,纤维化程度逐渐加重。CsA诱导的大鼠心肌纤维化与MMPs/TIMPs表达的改变及MMPs/TIMPs的失衡有关。