大鼠骨骼肌细胞葡萄糖—6磷酸酶活性的细胞化学研究

本文用酶细胞化学葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)技术对大鼠骨骼肌细胞进行了超微结构研究,结果证实,骨骼肌细胞内含有G6Pase。G6Pase活性反应产物定位于肌浆网与核被膜内,在肌浆网内,该酶活性反应产物呈异质性分布。根据肌浆网与肌膜系统之间的位置关系,骨骼肌偶联有以下3种类型:(1)终池与横小管之间的偶联,如三联体;(2)周围肌浆网与表面肌膜之间的偶联,即周围偶联;(3)肌膜下肌浆网与肌膜下横小管之间的偶联,即肌膜下偶联。对本实验结果进行了讨论。     

大鼠心肌葡萄糖-6-磷酸酶活性的电镜观察

作者报告电镜下大鼠心肌内葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的分布情况。结果表明,G-6-Pase定位在心肌细胞的肌质网膜、核内外膜、线粒体的内外膜和嵴、闰盘处的肌膜、肌间毛细血管内皮细胞的核膜和内质网膜以及红细胞膜上。在上述的不同部位中,该酶的活性是不同的。     

大鼠下丘脑室旁核视上核的加压素免疫金银染色和酶组织化学研究

采用免疫金银染色法(IGSS)和酶组织化学方法,对大鼠下丘脑室旁核(PVN)和视上核(SON)进行了加压素(VP)免疫细胞化学反应和葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)焦磷酸硫胺索酶(TPPase)和细胞色素氧化酶反应。IGSS法显示PVN和SON核团内均含有丰富的VP阳性细胞,10μm厚的冰冻切片上就能显示出VP阳性纤维。PVN和SON核团内显示很强的G-6-Pase、TPPase和细胞色素氧化酶活性。用这三种酶反应,能清楚地显示出PVN和SON二核团的轮廓形态。文中对以上结果进行了讨论。     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌肝细胞超微结构及葡萄糖—6—磷酸酶细胞化学的观察

二乙基亚硝胺诱发实验性肝癌过程中,用电镜观察肝结节内肝细胞及G-6-Pase的改变,结果显示:(1)肝细胞问的连接较正常为少,部分区域的细胞连接消失,细胞问隙增宽。(2)部分肝细胞核有凹陷,核仁肿大,胞质内线粒体嵴变短而少,粗面内质网膜上核糖体脱落,糖原颗粒减少。(3)少数细胞的细胞核增大,胞质内游离核糖体丰富,各细胞器不发达。(4)诱癌第8周,肝细胞内G-6-Pase呈阳性反应,12周后为阴性。这些特点可认为是肝细胞去分化的主要指示。     

铈捕获法对葡萄糖-6-磷酸酶超微结构定位

以铈代铅作捕获剂、经实质灌注固定、液氮冷冻组织来研究小鼠肝脏葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)。电镜观察见酶反应沉淀物位于内质网的膜上、池内及核膜上,颗粒细微、均匀,电子密度较高,未见非特异性反应产物和酶反应物弥散。反应物积聚量与细胞内酶活性相一致。细胞超微结构保存完好。     

糖尿病新型分子靶点葡萄糖-6-磷酸酶活性的检测及应用

目的:研究利用葡萄糖脱氢酶偶联反应测定葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的活性,并推荐其作为一种常用的实验室检测方法。方法:以胶原酶原位灌注消化的方法分离大鼠肝细胞,用含10?S的1640培养液进行原代培养。待细胞贴壁后分别换用新鲜的含葡萄糖和不同浓度栎精的培养液培养16 h,随后利用葡萄糖脱氢酶偶联反应测定酶的活性。结果:各组G-6-Pase的活性不全相同,其差别具有统计学意义(F=114.423,P<0.05);高糖组与对照组相比较,G-6-Pase的活性明显增加(P<0.05);不同浓度栎精组G-6-Pase的活性下降,均低于高糖组(P<0.05),但其组间差异无统计学意义(P>0.05),没有呈现出剂量依赖性变化。结论:利用葡萄糖脱氢酶偶联反应测定葡萄糖-6-磷酸酶活性,是目前值得推崇的一个检测速度较快、结果较稳定的方法。此外,栎精能够有效逆转高糖诱导的G-6-Pase活性增加,利用它对于G-6-Pase活性的干预作用可能改善糖尿患者的高血糖状态。     

乐肝复方合剂对体外培养大鼠肝细胞的保护作用

[目的]探讨乐肝复方合剂对四氯化碳损伤体外培养大鼠肝细胞的保护作用.[方法]体外培养大鼠肝细胞,用四氯化碳处理制作肝细胞损伤模型,观察乐肝复方合剂对损伤肝细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性及糖原含量的影响.[结果]乐肝复方合剂可显著提高损伤肝细胞内SDH,G-6-Pase活性,提高糖原含量,抑制ACPase活性.[结论]乐肝复方合剂对四氯化碳损伤体外培养大鼠肝细胞具有保护作用.     

悦肝胶囊对原代培养大鼠肝细胞的保护作用

目的:研究悦肝胶囊对四氯化碳(CCl4)损伤体外培养大鼠肝细胞的保护作用.方法:采用CCl4诱导大鼠肝细胞损伤模型,观察悦肝胶囊对肝细胞的琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性和糖原含量的影响.结果:悦肝胶囊能显著提高SDH、G-6-Pase活性及糖原含量(P<0.001),显著抑制ACPase活性(P<0.001).结论:悦肝胶囊对CCl4损伤体外培养大鼠肝细胞具有保护作用.     

南水北调东线工程能否使血吸虫病疫区北移的研究——Ⅱ 山东受水区钉螺生殖腺组织和酶组织化学观察

目的 了解放养在山东济宁的钉螺睾丸卵巢组织化学及酶组织化学变化情况。方法 采用组织化学及酶组织化学方法，检测钉螺生殖腺组织中细胞色素氧化酶(CCO)、乳酸脱氢酶(LDH)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、萄葡糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)和琥珀酸脱氢酶(SDH)。结果 北移钉螺睾丸卵巢的糖原、DNA和组蛋白含量减少；CCO、5-NT、LDH和G-6-Pase活性降低；睾丸内SDH活性增高。结论 北移钉螺睾丸卵巢代谢异常是导致生殖功能减退的重要因素。     

蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg~(2+)-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

目的 探讨醇溶性蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg~(2+)-ATP酶(Mg~(2+)-ATPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的影响.方法 用乙醇溶解蟾蜍分泌物原浆,采用减压蒸馏等方法进一步部分分离纯化,获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物(EET),将其作用于H22荷瘤小鼠模型,计算肿瘤抑制率,应用酶化学染色法观察H22肝癌细胞酶活性的变化.结果 蟾蜍毒素组和氟尿嘧啶组的肿瘤抑制率分别是32.0%和34.4%,与正常对照组比较差异显著(P<0.05),Mg~(2+)-ATPase、G-6-Pase反应颗粒变小,数量减少,密度变低,提示酶活性明显下降.结论 蟾蜍毒素可降低H22荷瘤小鼠肝癌细胞质膜标志酶Mg~(2+)-ATPase及内质网标志酶G-6-Pase的活性,抑制肿瘤细胞的生长.     

乳腺良,恶性病变酶活性的超微结构研究

应用超微结构酶组织化学技术对乳腺良、恶性病变中３种细胞器标志酶进行定位观察。结果表明：乳腺癌组织内葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）活性显著高于正常乳腺组织和良性病变，而碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性则降低；乳腺癌间质中ＡＬＰａｓｅ活性明显增强；电镜显示：Ｇ－６－Ｐａｓｅ分布于癌细胞的内质网和核膜上，ＡＣＰａｓｅ恒定的出现于细胞核内的异染色质和核仁丝上，ＡＬＰａｓｅ分布于正常乳腺组织的肌上皮和腺上皮细胞的胞膜上。本文对上述酶活性变化的临床生物学意义进行了讨论。     

猕猴淋巴结淋巴细胞ATP酶、C-6-P酶超微结构定位

应用电镜酶细胞化学方法对猕猴淋巴结淋巴细胞ATP酶与G-6-P酶定位进行了研究。结果表明:ATP酶反应颗粒主要定位在淋巴细胞膜质膜内侧。在核膜内侧也可见到清晰的酶反应沉淀物。G-6-P酶反应颗粒主要在内质网表面。两种酶定位与人类相似。结果提示:此法酶反应特异性强,敏感性高。可用于判定实验动物免疫淋巴细胞功能状态。     

大鼠心肌细胞的肌浆网与闰盘间偶联的电镜观察

本实验对大鼠心房心肌细胞的肌浆网与閏盘间的关系进行了超微结构观察。结果表明,肌浆网与閏盘的非特化肌膜存在偶联,为区别于一般的周围偶联,而将它们之间的偶联称为閏盘偶联。它具有周围偶联及内部偶联的形态结构特征,即(1)在偶联区域内存在胞浆间隙,宽约11～18nm;(2)在胞浆间隙内有连接突或连足;(3)肌浆网腔内含有电子致密物质。在偶联区域,肌浆网膜不仅与閏盘的非特化肌膜形成偶联,而且与线粒体外膜紧密并置。此外,心肌缝隙连接与肌浆网可形成缝隙连接-肌浆网偶联,其超微结构特点与心肌偶联相同。本文对肌浆网与閏盘的偶联的功能意义进行了讨论。     

心肌钙泵新的调节蛋白——sarcolipin 研究进展

Sarcolipin (SLN) 是新近发现存在于肌浆网中的小分子膜蛋白,分子质量为3 kD,由31 个氨基酸构成,与受磷蛋白(phospholamban, PLB) 属于同一蛋白家族。SLN 可抑制肌浆网钙泵( sarcoplasmic reticulum Ca²⁺ ATPase,SERCA ) 活性,降低其与Ca²⁺ 的亲和力,通过独立或与PLB 协同作用影响SERCA 活性,导致细胞内钙稳态失衡,降低心肌收缩力,从而发展为心衰。     

低频复合生理频率慢性电刺激对肺气肿兔膈肌肌浆网Ca2+-ATP酶活性及Ca2+摄取和释放动力学的影响

目的 研究低频复合生理频率慢性电刺激后肺气肿兔膈肌肌浆网(SR)Ca2 -ATP酶及钙离子摄取和释放动力学的适应性变化.方法 采用木瓜蛋白酶雾化吸入法建立肺气肿模型:测定正常对照组、肺气肿组和肺气肿慢性电刺激(CES)组SR Ca2 -ATP酶的活性及Ca2 的摄取和释放动力学变化.结果 (1)(10 40)Hz慢性电刺激后,膈肌SRCa2 -ATP酶活性增高(P＜0.05).10Hz组Ca2 -ATP酶活性降低(P＜0.05).(2)(10 40)Hz慢性电刺激后,膈肌SRCa2 摄取和释放功能增强(P＜0.05);10Hz组膈肌SRCa2 摄取和释放功能减弱(P＜0.05).结论 不同频率的CES可导致膈肌SRCa2 -ATP酶的活性及Ca2 的摄取和释放动力学产生不同的适应性变化,慢性低频复合生理频率电刺激能增强膈肌SRCa2 -ATP酶活性,提高肺气肿兔膈肌SRCa2 摄取和释放能力,可能是体外膈肌起搏对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者膈肌康复治疗的较好频率模式之一.