环介导等温扩增法诊断初诊肺结核病研究

目的:初步评价环介导等温扩增法(Lamp)检测痰中结核分枝杆菌的准确性,探讨临床诊断初诊肺结核病人的应用价值。方法:选取249例初诊疑似肺结核病人的痰标本,同时进行Lamp、直接涂片抗酸染色法和改良罗氏培养基培养法检测。结果:剔除培养失败和非结核杆菌的标本,共检测了739份痰标本,其中直接涂片抗酸染色法检出阳性标本70份,阳性率9.47%;培养检出阳性标本118份,阳性率15.97%;Lamp检出阳性标本99份,阳性率13.40%。以培养法为标准,涂片法的灵敏度57.63%,特异度99.68%,符合率为94.30%;Lamp的灵敏度77.12%,特异度98.71%,符合率为96.61%。结论:Lamp在检测初诊疑似肺结核病人中有较高的灵敏度和特异性,适用于基层结核病工作中初诊肺结核病人的诊断。     

噬菌体生物扩增法检测痰中结核分枝杆菌的价值

目的评价噬菌体生物扩增法快速检测痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法应用噬菌体生物扩增法快速检测27例痰标本,通过与改良罗氏培养法进行比较,对应用噬菌体生物扩增法检测痰中结核分枝杆菌进行初步的分析和评价。结果对于27例痰标本,噬菌体生物扩增法检测出阳性12例(44.44%),改良罗氏培养法检出阳性9例(33.33%),两种方法均阳性8例(29.63%);噬菌体生物扩增法检测痰中结核分枝杆菌与改良罗氏培养法无显著性差异(2=0.80,p>0.05)。结论噬菌体生物扩增法可简便、快速地检测痰中的结核分枝杆菌,具有很好的临床应用价值。     

噬菌体生物扩增法与常规方法在结核分枝杆菌检测中的比较

目的评价噬菌体生物扩增技术在结核分枝杆菌快速检测中的临床应用价值,并与其他两种常规方法进行比较。方法应用噬菌体生物扩增法（PhaB法）、Bactec 960培养法、涂片法同时对135份临床确诊为结核病（包括肺结核、结核性胸膜炎、结核性脑膜炎）的患者的标本（痰、胸腔积液、肺泡灌洗液、脑脊液）以及排除结核病的患者（21例慢性支气管炎、20例支气管扩张病、18例肺癌、8例肺炎）的痰液共计67份进行检测。结果 135份标本应用噬菌体生物扩增法、Bactec 960培养法与涂片法的阳性率为48.2%、44.4%、28.2%。噬菌体生物扩增法的阳性检出率较高于涂片法,差异有统计学意义,阳性符合率为58.5%（38/65）,阴性符合率为95.7%（67/70）,总体符合率为77.8%（105/135）。噬菌体生物扩增法与Bactec 960培养法比较差异有统计学意义,阳性符合率为78.5%（51/65）,阴性符合率为72.9%（51/70）,总体符合率为75.6%（102/135）。在涂片阴性、Bactec 960培养法检测均为阴性的75例标本中,用噬菌体生物扩增法检测出11例阳性,其检出率为14.7%。67份排除结核病的痰标本应用三种方法的阳性率均为0%。结论噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌在诊断结核病中有较好的灵敏度和特异度,是辅助诊断和鉴别诊断结核病的有效手段。     

应用噬菌体生物扩增技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌

目的探讨噬菌体生物扩增法(PhaB)快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法应用涂片镜检法、L-J罗氏培养法、Bactec-960快速培养法及PhaB法共同检测151例痰标本。结果痰标本四种方法检测结果比较:151份临床确诊的活动性肺结核患者痰标本,涂片镜检、L-J罗氏培养、Bactec-960快速培养和PhaB法检查结果分别是20.5%、38.4%、59.6%和60.9%;比较PhaB与涂片和培养的阳性检测率,Phab检出率远高于涂片法(χ2=51.04,P<0.05),差异有统计学意义,Phab检出率高于罗氏法检出率(χ2=15.31,P<0.05),差异有统计学意义。结论PhaB方法能快速、简便地检测结核分枝杆菌,且检出率较高,可作为结核病诊断的重要方法。     

噬菌体生物扩增法与3D培养检测结核分枝杆菌的对比分析

目的探讨噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法对117份肺结核患者痰和体液标本进行噬菌体生物扩增法检测并与3D培养进行对比分析。结果痰噬菌体生物扩增法阳性率为43.9%,3D培养为27.1%;体液噬菌体生物扩增法阳性率为80.0%,3D培养为0。结论噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌明显优于3D培养。     

3种方法检测肺结核患者痰标本结果分析

目的比较3种检测方法对肺结核患者痰菌检出率,探索噬菌体生物扩增法提高肺结核病患者结核菌阳性检出率的可行性。方法对同1例肺结核患者的痰标本,采用直接厚涂片法、结核分枝杆菌培养法和噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌。结果在150例肺结核患者痰标本中,直接厚涂片法检出菌阳26例（检出率为17．3％）,痰结核分枝杆菌培养阳性33例（检出率为22．0％）,噬菌体生物扩增法阳性85例（检出率为56．7％）,噬菌体扩增法阳性检出率高于直接厚涂片法和分枝杆菌培养法（χ^2=51．8,38．8,P〈0．01）。结论噬菌体生物扩增法可提高肺结核病例的痰菌检出率。     

噬菌体生物扩增法检测痰标本中结核分枝杆菌在涂阴肺结核诊断中的应用价值

目的对噬菌体生物扩增法检测痰标本中的结核分枝杆菌在涂阴肺结核诊断中的应用价值进行评价分析,为今后的临床及检验工作提供可靠的理论依据。方法抽取在2009年1月²013年12月间我院收治的临床确诊涂阴肺结核患者200例,对其痰液标本分别展开噬菌体生物扩增法和罗氏培养法进行结核分枝杆菌检测,并对检测结果进行对比分析。结果经对比发现,噬菌体生物扩增法对结核分枝杆菌的检出率较罗氏培养法检出率显著升高(p<0.05)。结论采取噬菌体生物扩增法检测痰标本中的结核分枝杆菌的临床价值显著,可使肺结核诊断率得到显著提高,降低误诊和漏诊发生率。     

TB-LAMP法检测阳性痰标本再培养增加耐药肺结核发现率

目的 评价结核分枝杆菌环介导等温扩增法(TB-LAMP)在检测肺结核患者痰标本LAMP阳性后再培养及表型药物敏感试验对耐药结核分枝杆菌的检出效果。方法 随机收集2017年5月至2019年2月于遵义医科大学附属医院结核病专科门诊就诊和结核病区住院的疑诊肺结核患者7823例,每例留取4份痰标本,随机分别进行1份痰涂片镜检、2份传统罗氏培养和1份TB-LAMP核酸检测,将TB-LAMP阳性标本进一步行传统罗氏培养及表型药物敏感试验,分析TB-LAMP阳性标本再培养对耐药结核病的诊断价值,提高对耐药结核病的防治意识。采用graphpad prism6.0软件进行分析,χ2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果 所纳入的可疑肺结核患者7823例,TB-LAMP法、传统罗氏培养和涂片镜检的阳性检出率分别为16.6%、7.8%和4.6%,痰TB-LAMP法阳性检出率与痰涂片抗酸染色、传统L-J培养检查相比,差异具有统计学意义(分别为χ2＝593.57,P＜0 .01;χ2＝283.49,P＜0 .01)。TB-LAMP阳性痰标本再培养阳性率为44%(574/1298),其中52.8%(303/574)与传统结核分枝杆菌培养共同阳性,另外47.2%(271/574)为传统结核分枝杆菌培养阴性,而TB-LAMP阳性标本再培养阳性;228株结核分枝杆菌临床分离株进行结核分枝杆菌药物敏感试验,敏感结核分枝杆菌占75%(171/228),耐药结核分枝杆菌25%(57/228),其中RR-/MDR-TB为12.72%(29/228)。结论 TB-LAMP阳性标本再培养可提高RR-/MDR-TB发现率,为耐药结核病的早诊断、早治疗、减少传播提供了检测思路,值得推广应用。     

荧光定量PCR在结核分枝杆菌检测中的应用价值

目的比较荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)与抗酸染色、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,探讨FQ-PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值。方法对311例临床确诊的肺结核病患者和40例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用FQ-PCR法、痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌。结果FQ-PCR、抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的阳性率分别为47.0%(146/311)、28.3%(88/311)、35.4%(110/311),特异性分别为100.0%、100.0%、95.2%,以FQ-PCR检测的阳性率最高。结论FQ-PCR是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。     

糖尿病合并结核感染诊断中结核分枝杆菌检测方法的比较

目的比较糖尿病合并结核感染诊断中四种结核分枝杆菌检测方法,包括金胺O荧光染色涂片法,BacT/ALERT3D快速培养法,噬菌体生物扩增法和荧光定量PCR法。方法收集糖尿病合并结核感染患者的痰标本,分别采用上述四种方法进行结核分枝杆菌检测。结果涂片法、快速培养法、噬菌体法和PCR法的阳性率分别为27.5%,38.3%,36.7%和39.2%。结论在糖尿病合并结核感染诊断中,与传统的涂片法和培养法相比,噬菌体生物扩增法和荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌具有快速、敏感性高、特异性高等特点。     

比较T细胞斑点试验、痰噬菌体联合结核菌素试验对诊断肺结核的价值

目的比较结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、痰噬菌体联合结核菌素试验(PPD)对肺结核疾病的诊断价值。方法选取本院2017年5月-2018年12月在院内已确诊肺结核的患者60例为肺结核组;已确诊非肺结核的就诊者52例为非肺结核组,均行T-SPOT.TB、痰噬菌体和PPD联合检测;比较不同检测方法对诊断肺结核灵敏度与特异度的差异。结果单项检测中,肺结核患者T-SPOT.TB的阳性率最高(86.67%),其次是痰噬菌体、PPD;非肺结核受试者T-SPOT.TB的阳性率最高(36.54%),其次是PPD、痰噬菌体。三者联合检测的肺结核和非肺结核阳性率最高,且与其他任何一项单项检验的阳性率相比差异均有统计学意义(P <0.05)。3种方法结合检测,灵敏度、特异度、阳性检测值、阴性检测值、准确度均高于任何一项单项检验值(P <0.05)。结论 T-SPOT.TB的灵敏度和特异度均优于后2项,痰噬菌体与结核菌素试验的检测准确度无明显差异,因此可结合三者共同对肺结核进行检测,以此提高诊断效果。     

对不同人群采用不同方法肺结核病人检出率的研究

目的 了解我国目前肺结核可疑症状者在全人口中的比例和不同人群不同方法肺结核病人检出率。方法 对无肺结核可疑症状者和有肺结核可疑症状者，分别采用胸透筛选、直接摄片、直接痰菌检查等不同方法对照研究。结果 有肺结核可疑症状者占全人口的1．27％；无症状者采用胸透筛选法检出活动性病人数、菌阳病人数和涂阳病人数分别仅占无症状者人数(受检人数)的0．13％、0．04％和0．03％，有症状者检出活动性病人数、菌阳病人数和涂阳病人数分别占有症状者人数(受检人数)的16．82％、7．98％和6．。76％。有肺结核可疑症状者采用：直接摄片的活动性肺结核病人、菌阳病人和涂阳病人检出率，分别为17．92％、8．37％和6．83％；直接痰培养的菌阳病人检出率为8．95％。直接痰涂片：2个痰标本与3个痰标本的涂阳病人检出率分别为6．17％和7．08％。结论 1．27％的全人口肺结核可疑症状者是评价可疑症状者就诊率的指标；对咳嗽、咳痰≥3周或有咯血的肺结核可疑症状者进行检查是最符合成本效益原则的结核病人发现方法。对有肺结核可疑症状者应当采用直接摄片法和3个痰标本进行病人发现；直接痰培养的菌阳病人检出率最高，有条件的单位可开展痰培养检查。     

多指标联合检测在菌阴肺结核诊断中的价值研究

目的研究痰或肺泡灌洗液荧光定量TB-DNA、结核菌噬菌体检测结核菌及T-SPOT多指标联合检测在菌阴肺结核诊断中价值。方法选取2010年10月~2012年10月在本院诊疗的患者223例,分为初治的菌阴肺结核组108例、初治的菌阳肺结核组55例和非肺结核病组60例。对入选患者进行常规检测,同时进行血T-SPOT、结核菌噬菌体检测结核菌和痰或肺泡的灌洗液TB-DNA;对患者的检测结果记录、分析,研究以上3项检查的单项特异性和敏感性,及3项检测结合的诊断价值。结果 3项检查中每个项目检查的特异性均达到了90%以上,菌阴肺结核组和菌阳肺结核组的阳性人数都远大于非肺结核组的人数,3组比较差异明显;联合检测指标的增加,菌阴肺结核中的阳性检出率也随之增加。有T-SPOT参与的检测其阳性率都高于没有T-SPOT参与的检测,差异有统计学意义(P0.05);联合检查在菌阴肺结核组和非肺结核组同时阳性的检出率差异有统计学意义(P0.05)。结论 T-SPOT的检查、结核菌噬菌体检测结核菌和TB-DNA的检查多个项目指标联合检测比单一的检测更能提高菌阴肺结核的诊断敏感性,其中含有T-SPOT检查参与的结合检查更可以提升菌阴肺结核的检查率。     

结核分枝杆菌L型及其巨球体诊断价值的研究

目的:研究结核分枝杆菌L型及其巨球体在肺结核细菌学诊断上的价值。方法:以非结核患者痰标本作为对照,观察52例菌阴肺结核患者痰培养前后结核分枝杆菌L型及其巨球体的镜下形态和阳性率,并采用免疫组化染色和荧光定量PCR技术(FQ-PCR)对其进行鉴定。部分标本透射电镜观察。结果:患者痰有60%(31/52)检出结核分枝杆菌L型。结核菌L型阳性者中L型巨球体阳性率为55%(17/31),而对照组均阴性。结核菌L型巨球体者免疫组化染色均阳性,FQ-PCR检测阳性率71%(12/17),透射电镜发现缺壁结核菌。结论:结核分枝杆菌L型检测可提高肺结核患者细菌学诊断阳性率;巨球体是分枝杆菌L型重要的存在形式,可作为线索用于菌阴肺结核的辅助诊断。     

荧光定量PCR对血及痰培养物中结核分枝杆菌DNA的检测

目的 评价荧光定量PCR(FQ-PCR)检测血及痰培养物中结核分枝杆菌的临床价值.方法 81例临床诊断为结核病的痰涂片阴性患者中,单纯肺结核40例(肺结核组),合并HIV感染的患者41例(合并感染组).患者的血、痰样本分别进行结核分枝杆菌及其L型培养,采用FQ-PCR技术检测血及痰培养液中结核分枝杆菌DNA.结果 肺结核组结核分枝杆菌痰培养FQ-PCR阳性率为54.1%(20/37);血培养阳性率为27.5%(11/40),血培养FQ-PCR阳性率为22.5%(9/40),血培养及其FQ-PCR总阳性率42.5%(17/40).合并感染组10例痰样本培养后2例FQ-PCR阳性;血培养阳性率为7.3%(3/41),血培养FQ-PCR阳性率为17.1%(7/41).合并感染组血培养物FQ-PCR阳性率(17.1%)与肺结核组(22.5%)相比,差异无统计学意义(P>0.05).两组痰与血培养物FQ-PCR总阳性率分别为65.0%(26/40)和22.0%(9/41),差异有统计学意义(χ2=15.305,P<0.01).结论 痰或血培养物FQ-PCR检测有助于提高结核或结核合并艾滋病患者的诊断,同时显著提高了痰涂片阴性肺结核患者的诊断.     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验在肺结核及肺外结核诊断中的价值

目的探讨结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)在肺结核及肺外结核诊断中的价值。方法 T-SPOT.TB检测55例活动性肺结核患者、30例肺外结核患者、14例肺部病变非肺结核者、9例肺外非结核性疾病者和12例健康体检者外周血结核抗原特异性的分泌IFN-γ的T细胞频率。结果肺结核组T-SPOT.TB阳性率明显高于肺部病变非肺结核组和健康对照组,肺外结核组阳性率明显高于肺部病变非肺结核组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.01)。T-SPOT.TB检测对菌阳肺结核、菌阴肺结核和肺外结核的诊断敏感度分别为88.57%、80.00%和93.33%,诊断特异度为85.71%、85.71%和88.89%,阳性预测值分别为93.94%、88.89%和96.55%,阴性预测值为75.00%、75.00%和80.00%。菌阴肺结核组与菌阳肺结核组之间比较,T-SPOT.TB诊断效能差异无统计学意义(P0.05);肺外结核组与菌阴肺结核和菌阳肺结核之间比较,T-SPOT.TB诊断效能差异均无统计学意义(P0.05)。结论 T-SPOT.TB诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性,在肺外结核和菌阴肺结核的诊断与鉴别诊断方面有重要临床应用价值。     

Ｔ ＳＰＯＴ．ＴＢ、痰涂片和ＴＢ ＤＮＡ 平行检测在结核病中的诊断评价

摘要：目的　评价Ｔ ＳＰＯＴ．ＴＢ、痰涂片及ＴＢ ＤＮＡ３种检测方法在结核病中的诊断价值。方法　选取１０３
例结核病患者,同时选取４５例非结核患者作为对照,应用３种方法平行检测,比较其对结核病的诊断效
果。结果　无论结核总体组、肺结核组, 还是肺外结核组,Ｔ ＳＰＯＴ．ＴＢ 的阳性率和敏感度（８８．３５％、
９１．４３％和８１．８２％）以及ＡＵＣ 均为最高（０．８７５、０．８９０和０．８４２）,痰ＴＢ ＤＮＡ 次之,痰涂片最低;特异
度比较,痰涂片最高（１００％）、Ｔ ＳＰＯＴ．ＴＢ 次之（８６．６７％）、痰ＴＢ ＤＮＡ 最低（７７．７８％）;３ 组中Ｔ
ＳＰＯＴ．ＴＢ与痰ＴＢ ＤＮＡ 阳性率比较,χ
２＝１５．６４６、６．２９５、１０．８８２,犘＝０．０００、０．０１２、０．００１;胸水ＴＢ
ＤＮＡ 的阳性率（９３．９４％）显著高于痰ＴＢ ＤＮＡ 的阳性率（４２．４２％） （χ
２＝２０．１８４,犘＝０．０００）。结论　
Ｔ ＳＰＯＴ．ＴＢ有较好的敏感度和特异度,对结核病的诊断具有较高的价值;胸水ＴＢ ＤＮＡ 检测对于结核性
胸膜炎不失为可选择的诊断方法。
关键词：分枝杆菌,结核;Ｔ 细胞斑点试验;痰涂片;聚合酶链反应;诊断性试验
中图分类号：Ｒ５２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０５ ０４７３ ０４     

γ干扰素释放试验在肺内结核和肺外结核中的诊断价值

目的：探讨IFN-γ释放试验在肺内及肺外结核诊断中的应用价值。方法采用IFN-γ释放试验试剂盒分别检测185例结核病患者（包括119例肺结核和66例肺外结核）、139例其他肺部疾病患者和100例健康对照者结核患病情况,并以病原培养或/和临床诊断为标准,评价IFN-γ法诊断的敏感度和特异性,同时分别与痰菌培养及痰涂片平行检验的结果作比较。结果以临床诊断为准金标准,IFN-γ释放试验检测敏感度为93.51%,特异度为84.52%,检测肺结核和肺外结核的敏感度分别为90.76%和98.49%,两者差异无统计学意义（P〉0.05）;而痰涂片检测肺结核和肺外结核的敏感度分别为11.76%和3.03%;痰培养检测的敏感度也仅为24.37%和3.03%,3种方法对肺结核和肺外结核检测敏感度,差异均有统计学意义（ P均〈0.05）。全部424例标本,经培养阳性有33例,其中鉴定发现2例非结核分枝杆菌感染,均为脓肿分枝杆菌,IFN-γ释放试验检测为阴性,按鉴定确认的31例结核分支杆菌培养阳性结果为金标准,IFN-γ释放试验敏感度为90.32%（95%CI：75.10%~96.65%）。结论IFN-γ释放试验肺内、外结核具有快速方便和较高的敏感度,值得用于临床结核筛查。     

荧光定量PCR技术检测结核杆菌临床应用分析

目的 探讨荧光定量PCR技术在检测结核杆菌的临床应用价值. 方法 将本院临床诊断确诊为肺结核的68例患者为研究对象,采用荧光PCR技术测定两组痰液及外周血中的结核杆菌,以临床诊断结果为金标准,采用x2检验对结果进行分析比较. 结果 68例结核病患者中痰涂片、痰定量PCR、外周血定量PCR检测的阳性率为14.7％、41.2％、44.1％,定量PCR检测的阳性率显著高于痰涂片(P＜0.05).痰涂片阴性的58例患者中痰及外周血定量PCR检测阳性率为31.0％、41.3％.痰及外周血定量PCR配对检测两种标本同时检测的符合率为44.1％. 结论 荧光PCR技术检测结核杆菌的效果要显著优于传统涂片,其可证实、鉴定涂片阳性结果,同时对痰和外周血进行定量PCR检测,可.增强互补作用,提高检测的准确率.     

唐尿病患者医院感染肺结核的早期诊断指标分析

目的 减少肺结核的医院感染,研究有助于糖尿病合并活动型肺结核的早期诊断指标.方法 回顾分析某三甲医院内分泌科10年糖尿病合并活动型和非活动型肺结核316例患者的临床资料.结果 活动型和非活动型肺结核组的平均年龄分别为(55.01±12.77)岁和(61.92±11.18)岁;非活动型肺结核多有肺结核病史(22.6%),明显多于活动型肺结核组患者(13.4%)(P<0.05);活动型和非活动型肺结核患者咳嗽、咳痰症状、痰涂片找分枝杆菌的阳性率分别为48.4%、80.0%,25.2%、10.0%;活动型和非活动型肺结核组的糖化血红蛋白(GHBA1c)、C肽、空腹血糖分别为(10.74±2.95)%、(0.56±0.38)nmol/L、(13.11±5.63)mmol/L、(8.68±2.08)%、(0.66±0.48)nmol/L、(10.33±9.41)mmol/L,上述指标两组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 出现咳嗽、咳痰症状、痰涂片找分枝杆菌、无明显诱因的血糖控制差等指标有助于糖尿病合并活动型肺结核的早期诊断,尽早检查这些指标,及时隔离,可减少肺结核的医院感染.