PWM激活的淋巴细胞亚群的功能研究

应用放射性标记化合物渗入法研讨ＰＷＭ诱导人血淋巴细胞亚群的功能及其调节。实验表明，ＰＷＭ细胞对ＬＰＳ激活的Ｂ细胞转化有促进作用，受４０Ｇｙ辐照后，它的作用显著下降，但仍有一定加强效应。ＰＷＭ细胞对ＰＷＭ激活的淋巴细胞转化的促进作用不明显，对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ激活的细胞无效。用玫瑰花环法分离Ｔ、Ｂ细胞，ＣＤ４、ＣＤ８和Ｂ３株单克隆抗体（ＭｃＡｂ），以亲和层析和Ｐａｎｎｉｎｇ法分离各淋巴细胞亚群，分别研     

正常和恶性淋巴细胞膜的流动性及其对PHA、ConA刺激的反应性

本实验采用疏水性荧光探针DPH(1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene,1,6-二苯基-1,3,5-己三烯)标记小鼠的淋巴细胞膜,根据荧光偏振值的变化比较正常细胞膜和癌变细胞膜流动性及对外界刺激反应性的差别。实验结果表明癌变淋巴细胞膜的流动性明显增高(P<0.001)。用同样浓度的ConA 10mg/L,PHA 40mg/L刺激后,荧光偏振值的变化幅度和方向也不同于正常细胞。本文还对以细胞膜流动性变化作为癌变指标的可能性作了补充说明。     

PWM激活的淋巴细胞亚群的功能研究

用放射性标记化合物掺入法研讨ＰＷＭ诱导人血淋巴细胞亚群的功能及其调节。实验表明，ＰＷＭ细胞对ＬＰＳ活的Ｂ细胞转化有促进作用，受４０Ｇｙ辐照后，它的作用显著下降，但仍有一定加强效应。ＰＷＭ细胞对ＰＷＭ激活的淋巴细胞转化的促进作用不明显，对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ激活的细胞无效。用玫瑰花环法分离Ｔ、Ｂ细胞，用ＣＤ４、ＣＤ３和Ｂ３株单克降抗体（ＭｃＡｂ），以亲和层析和Ｐａｎｎｉｎｇ法分离各淋巴细胞亚群，分别研究ＰＷＭ对各亚群的激活及相互调节作用．结果表明：Ｂ细胞被ＰＷＭ激活强于Ｔ细胞，ＰＷＭ对Ｂ和非ＣＤ４细胞激活作用相当，ＣＤ２细胞次之，ＣＤ４细胞最弱．Ｔ细胞或ＣＤ４细胞与Ｂ细胞均有协同作用，前者作用更大．ＰＷＭ－非ＣＤ４和ＰＷＭ—Ｂ细胞无协同作用，ＣＤ６细胞与Ｂ细胞有抑制作用。     

PHA对LAK细胞诱导激活的研究

淋巴因子激活的杀伤细胞 (L ym phokine- activatedkiller,简称 L AK) ,1980年 Yorn等将人或动物的淋巴细胞与白细胞介素 - 2 (IL- 2 )共同孵育 3～ 4 d后 ,发现孵育后的淋巴细胞能溶解杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无影响 ,具有这种杀伤的现象称为 L AK现象。首先由 Rosenberg[1 ]开展 L AK疗法 ,L AK/ IL- 2疗法对某些肿瘤取得了一定疗效 ,但存在L AK细胞数量不足、活性低等问题。有关的研究证实植物血凝集素 (PHA)和重组白细胞介素 - 2 (r IL- 2 )共同诱导的PHA- L AK细胞 ,具有更高的增殖能力和杀伤活性。本实验通过诱导 PHA…     

正常人淋巴细胞化学发光(Ly—CL)测定的研究

ConA 和 PHA 均能激发 Ly—CL。在同等剂量下,ConA 引起的 Ly—CL 峰值较 PHA 高,峰时较 PHA 短。PHA 激发 Ly—CL 的最佳条件是:PHA200μg/ml,淋巴细胞1×10~6个/ml,Luminol 浓度1×10~(-4)mol/L。随着淋巴细胞在4℃存放时间的延长,LY—CY 峰值下降,峰时延长,均和存放时间呈线性关系(P<0.0005)。     

CaM对PHA促淋巴细胞分裂作用的影响

本文应用MTT微量自动定量比色法分析细胞的存活与增殖状况，观察钙调蛋白（Calmodulin,Cam）对PHA促小鼠脾淋巴细胞分裂作用的影响。结果发现，细胞经培养48h后，PHA加Cam的最大刺激组的光密度（OD）值比末加CAM的PHA组提高了46.8%（OD值分别为0.457和0.311），CAM的最大刺激浓度为30μg/ml。结果表明，CAM参与细胞增殖的调节作用，并能显著提高PHA的有丝分裂原活性的作用。     

复方炎平对淋巴细胞转化的影响

目的;探讨复方炎平对淋巴细胞转化的影响。方法：淋巴细胞转化试验。结果：ＹＰ１００μｇ／ｍｌ可同时促进小鼠脾淋巴细胞及小鼠脾细胞伴刀豆蛋白Ａ增殖,并具有剂量依赖性。结论：ＹＰ可增强小鼠免疫功能。     

Ca^2＋对PHA促淋巴细胞分裂作用的影响

以小鼠脾淋巴细胞为实验材料,采用MTT微量自动比色法判断细胞分裂状况,观察PHA的促淋巴细胞分裂作用时Ca~(2 )的影响。结果发现:加Ca~(2 )的最大刺激组的光密度(OD)值比对照组提高了35.4％,Ca~(2 )的最大刺激浓度为4％葡萄糖酸钙.结果表明Ca~(2 )有增强PHA的有丝分裂原作用,并且存在明显的量—效关系。     

Normal and leukeymic lmphocyte membrane fluidity and response to stimulation with ConA and PHA

In our experiment, lymphocyte membrane was 1abeled by DPH fluorescence probe. The rate of rotation of the probe can be measured from the value of fluorescence polarization (P_DPH). With this method useful information could be provided about membrane fluidity of lymphocytes. It was found that the F value (unit of lipid fluidity of membrane) of leukemic lymphocytes was obviously higher than that of normal ones. Furthermore, the F value of cultured leukemic T_s lymphocytes was the highest. In contrast with normal spleen T-lymphocytes or mixed lymphocytes, the response of malignant lymphocytes to the stimulation with ConA or PHA was reflected in the decrease of P_DPH value or the increase of F value. Unexpectedly, the F value of T-lymphocytes from “615” mouse not injected with tumour cells was also higher than that of the mixed. The possibility of using the membrane fluidity as a diagnostic criterion was also discussed.     

雷公藤甲素对人体外周血淋巴细胞的影响

用健康人外周血淋巴细胞与雷公藤甲素(简称甲素)混合体外培养24 h,然后在光镜下和扫描电镜下观察甲素对淋巴细胞形态的影响。结果 0.5 mg％和 1 mg％甲素组淋巴细胞数分别为4.275×10~5±0.33/ml和2.950×10~5±0.19/ml;显微分光光度计测两组的淋巴细胞 DNA含量,其OD值分别为200.57±68.74和181.99±81.38,较对照组显著降低。培养后的淋巴细胞形态破坏。推测甲素通过干扰淋巴细胞DNA 合成抑制其免疫功能和损害其细胞结构。     

高浓度雌二醇对刀豆蛋白A诱导小鼠急性自身免疫性肝炎的影响

研究高浓度雌激素（EE）对急性自身免疫性肝炎（AIH）的影响,并初步探索其可能的作用机制。     

脐血淋巴细胞生物性状的初步观察

为了开发利用正常胎儿脐血作为淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）免疫治疗的细胞来源。本实验研究了脐血淋巴细胞的增殖能力、ＮＫ活性及细胞表型等。     

人脐血T/NK细胞KIR分子表达的初步探讨

【目的】探讨脐血中T淋巴细胞和自然杀伤 (NK)细胞上杀伤性抑制性受体 (KIR)的表达特性。【方法】采用流式细胞仪检测 2 6份正常分娩新生儿脐血的T/NK细胞表面KIR分子表达 (CD15 8a,CD15 8b和CD94) ,并与正常外周血比较。【结果】脐血中T淋巴细胞和NK细胞均存在KIR分子表达 ;脐血和外周血中T淋巴细胞CD15 8分子表达低于NK细胞 (P<0 0 5 ) ,脐血T淋巴细胞亚群中CD15 8分子表达低于正常外周血 ;CD15 8几乎不表达于CD4 T细胞 ,主要表达于CD8 T细胞 ,且以CD15 8a 为主 ;脐血中NK细胞CD15 8分子表达高于T淋巴细胞 (P <0 0 5 ) ,但明显低于外周血NK细胞KIR表达 (P <0 0 1) ;脐血和外周血CD4 T细胞上CD94 表达无差异 (P >0 0 5 ) ,但脐血CD8 T细胞和NK细胞CD94 表达则明显低于外周血 (P <0 0 1)。【结论】脐血中T淋巴细胞和NK细胞上KIR表达与正常外周血存在明显差异     

植物血凝素激活的LAK细胞激活培养条件与其生物学特性关系的研究

将ＰＨＡ和ｒＩＬ ２合理配伍应用于ＬＡＫ细胞的激活培养中，研究了ＰＨＡ ＬＡＫ细胞的增殖、细胞毒活性及表型。结果表明：培养条件中加入适量ＰＨＡ可促进ＰＨＡ ＬＡＫ的增殖（Ｐ＜０．０５），不影响其细胞毒活性。ＰＨＡ／ｒＩＬ ２共同预刺激组于培养第２ｄ细胞数明显下降（３０％～４０％），但其到达增殖高峰的时间、峰值及扩增倍数与同一培养条件下的ＰＨＡ单独预刺激组相比，差别无显著性（均为Ｐ＞０．０５）；但前者对Ｋ５６２和Ｒａｊｉ的杀伤高峰值大于后者（Ｐ＜０．０１）。各组ＰＨＡ ＬＡＫ中有０．６０～０．７７的细胞为ＣＤ３＋Ｔ细胞，但ＰＨＡ ＬＡＫ／ｒＩＬ ２共同预刺激者的ＣＤ３＋、ＣＤ８＋细胞所占比率较ＰＨＡ单独预刺激者为高（Ｐ＜０．０５）。     

妊娠期肝内胆汁淤积症脐血淋巴细胞凋亡的初步研究

目的 探讨脐血淋巴细胞凋亡在妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)发病中的意义.方法 采用流式细胞技术分析ICP患者和正常妊娠妇女脐血淋巴细胞的凋亡率;通过免疫细胞化学染色技术检测ICP患者和正常妊娠妇女脐血淋巴细胞上凋亡调控基因Fas、FasL、Bcl-2的蛋白表达.结果 ICP患者脐血淋巴细胞凋亡率低于正常妊娠组(P＜0.001),脐血淋巴细胞上Fas、Bcl-2表达水平两组间差异无统计学意义(P＞0.05),而FasL表达水平在ICP组高于正常妊娠组(P＜0.005).结论 ICP患者存在脐血淋巴细胞凋亡率及凋亡调控基因表达的异常,可能致移植物抗宿主反应异常而在ICP的发病中起一定作用.     

熊果酸对活化T细胞功能的影响

目的 研究熊果酸在体外对活化的人T细胞功能的影响,探讨其作为免疫调节药物开发的可能性和提供相关实验数据.方法 无菌采集和分离正常人外周血淋巴细胞,以不同浓度的熊果酸和PHA/PMA刺激T细胞,用MTT法检测细胞的增殖反应,ELISA法检测细胞因子IFN-γ、IL-2、GM-CSF、IL-4的峰值浓度.结果 熊果酸对淋巴细胞的活化和增殖无显著影响(P＞0.05);熊果酸抑制IFN-γ、IL-2、GM-CSF的分泌,并呈剂量依赖性(P＜0.05),而对IL-4的分泌影响较小,无统计学意义(P＞0.05).结论 熊果酸抑制活化的T细胞分泌Th1型细胞因子,抑制T细胞的功能,熊果酸有可能作为治疗某些自身免疫性疾病天然药物成分.     

氧化应激对人淋巴细胞8-羟基-2''-脱氧鸟苷三磷酸酶表达的影响

目的：探讨人外周血淋巴细胞遭受H2O2损伤时，8-羟基-2′-脱氧鸟苷三磷酸酶(8-oxo-dGTPase)表达的变化。方法：体外培养外周血淋巴细胞，然后分为正常对照组、氧化组和抗氧化组，采用逆转录PCR及凝胶成像技术，测定8-oxo-dGTPase的mRNA表达水平。结果：人淋巴细胞经H2O2持续作用，其8-oxo-dGTpase表达的相对水平也明显增加;而经维生素C抗氧化处理后，8-oxo-dGTPase表达的水平与正常对照组相比则无明显改变。结论：随着氧化应激的持续作用，细胞8-oxo-dGTPase的表达也明显增加，提示8-oxo-dGTPase可以作为氧化应激的标记物；而预先给予维生素C处理，可以明显抑制DNA造成的DNA损伤。