液质联用（LC-MS）法检测特拉唑嗪及应用

目的：建立液质联用（LC-MS）法测定人体血浆特拉唑嗪的浓度及应用。方法：岛津LC-MS2010液相色谱-质谱联用仪,色谱柱为Thermo Hypersil-Hypurity C18（150mm×2.1mm,5μm）;柱温：40℃;流动相为20mmmol/L乙酸铵溶液（pH4.3）∶甲醇∶乙腈=65∶20∶15;流速：0.25mL/min。采用电喷雾正离子模式离子化,用于定量分析的离子分别为m/z388（特拉唑嗪）、m/z384（哌唑嗪）。血浆样品采用3mol/L氢氧化钠碱化、二氯甲烷萃取后LC-MS测定。进样体积为5μL,样品室温度为5℃。结果：特拉唑嗪线性范围为0.25～50ng/mL,最小定量浓度为0.25ng/mL,提取回收率均〉70%,方法回收率为96.0%～97.6%,日间、日内RSD均〈15%。方法灵敏、稳定、特异性高,并已成功地应用到人体血浆特拉唑嗪药代动力学的研究。结论：该方法简便、准确、重复性好,可以准确地定量人体血浆特拉唑嗪的浓度,适于特拉唑嗪生物利用度和生物等效性的研究。     

HPLC-MS法同时测定人血浆中氯沙坦及其代谢物EXP3174

目的:建立人血浆中氯沙坦及其代谢物EXP3174同时测定的HPLC-MS方法,并研究健康受试者单剂量口服氯沙坦钾片后氯沙坦及其代谢物EXP3174的药代动力学特征. 方法:血浆样品以乙腈沉淀蛋白后,进行HPLC-MS分析,色谱柱为Lichrospher C18,流动相为甲醇-20 mmol·L-1醋酸铵水溶液(含0.1 %的甲酸)(60:40,V/V),氯沙坦及其代谢物EXP3174的检测离子均为m/z 207.1,传输区电压为250 V.12名男性健康受试者口服100 mg氯沙坦钾片后,测定血浆中氯沙坦及其代谢物EXP3174的浓度,计算主要药动学参数.结果:在1～2000 ng·mL-1范围内,氯沙坦及其代谢物EXP3174两者峰面积与内标峰面积的比值和浓度的线性关系均良好,批内、批间RSD均小于10%.受试者口服100 mg氯沙坦钾片后,氯沙坦的血药浓度达峰时间为(1.6±1.1)h,达峰浓度为(890.2±476.4)ng·mL-1,消除半衰期为(2.7±1.6)h;EXP3174的血药浓度达峰时间为(2.9±1.0)h,达峰浓度为(1233±611.6)ng·mL-1,消除半衰期为(6.4±1.2)h.结论:本试验通过选择相同的碎片离子作为氯沙坦及其代谢物EXP3174的检测离子,提高了灵敏度和准确度;所建立的HPLC-MS分析方法准确、灵敏、方便,可用于氯沙坦及其代谢物的人体药动学研究.     

LC-MS／MS法测定人血浆中氯沙坦及其代谢物E-3174的浓度

目的建立LC-MS／MS法测定人血浆中氯沙坦及其代谢物E-3174血药浓度的方法。方法血浆酸化后用乙醚提取,采用同位素内标（氘3-B3174）进行测定。色谱柱：CAPCELLPACKC18Ⅲ（100mm×2．0mm,5μm）,流动相：0．02％甲酸乙腈-水溶液（53：47,v／v）;等度洗脱;流速0．3mL·min-1;进样体积5μL;电喷雾离子化,正离子MRM扫描。结果氯沙坦和E-3174线性范围均为5—500μg·L-1（r〉0．999）,最低定量限均为5μg·L-1,平均提取回收率均〉50％,批内、批间精密度RSD均〈8％。结论本方法灵敏度高、专一性好、操作简单,适用于氯沙坦的药动学研究。     

UPLC-MS/MS同时测定血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用

目的:建立UPLC-MS/MS法测定人体血浆样品中他莫昔芬及代谢产物的浓度和应用.方法:采用Waters AcQuity型超高效液相色谱联用API4000型三重四级杆质谱仪,样品处理采用固相萃取的方法,采用Thermo hypurity C18( 150 mm×2.1 mm,5 μm)色谱分析柱,流动相为10 mmol/L甲酸胺-乙腈(40:60,V/V),流速为0.3 mL/min,进样体积为10 μL,柱温为30℃,样品室温度为5℃,质谱应用ESI源、正离子模式、多反应监测(MRM)方式检测他莫昔芬及各代谢产物的浓度.结果:他莫昔芬、NDTam和TamNox线性范围为1～400 ng/mL,4OH Tam线性范围为0.4～160 ng/mL,4-OHND-Tam线性范围为2～800 ng/mL,可以满足样本浓度定量检测的需要,方法稳定、特异性高,并成功地应用到用药后他莫昔芬及各代谢产物血浆浓度的检测.结论:该方法简便、准确、重复性好,可以准确地定量人体血浆他莫昔芬和代谢产物的浓度,除了为临床血药浓度监测及他莫昔芬药效学研究提供服务外,也可为遗传药理学科研提供技术方法.     

高效液相色谱法测定人血浆中维生素E的血药浓度

目的建立人血浆中维生素E的HPLC测定方法。方法采用维生素K为内标,用甲醇沉淀蛋白后正己烷提取,色谱柱为SymmetryC18（4.6mm×150mm,5μm）,流动相为四氢呋喃：甲醇（V/V,18∶82）,流速为1.0mL.min-1,柱温40℃,检测波长280nm。结果维生素E在0.625~40mg.L-1范围内线性关系良好,回归方程为y=12.255x-0.6646,r=0.9994,平均绝对回收率74.69%,方法回收率在99%~104%之间。高、中、低3种浓度的日内、日间RSD均小于6%。结论本方法简单、快捷、灵敏、准确,适用于维生素E人体血药浓度的检测。     

UPLC-MS/MS快速测定大鼠血浆中的氯沙坦及其代谢产物

目的 建立快速测定大鼠体内氯沙坦及其代谢产物（E-3174）浓度的UPLC-MS/MS方法。方法 Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪, 色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm ×2.1 mm,1.7 μm）;流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸和0.5%氨水）（60∶40）,流速为0.2 mL·min^-1,柱温30 ℃,内标为地西泮;质谱条件：电喷雾离子化源（ESI）,正离子检测模式;加入200 μL乙腈沉淀蛋白,13 000 r·min^-1离心10 min转移至1.5 mL EP管中取2 μL上样。结果 E-3174的保留时间为1.54 min,线性范围为6.25～800 ng·mL^-1（r=0.999 8）,最低定量限为0.5 ng·mL^-1,回收率为96.6%～98.37%;氯沙坦的保留时间为1.38 min,线性范围为12.5～1 600 ng·mL^-1（r=0.999 6）,最低定量限为1.0 ng·mL^-1,回收率为98.4%～100.6%。两者的日内、日间RSD均〈5%,孵育体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论 该方法操作简便,重复性好,适于快速测定大鼠体内氯沙坦及其代谢产物浓度。     

反相高效液相色谱法测定血浆中甲氨蝶呤的质量浓度

目的建立测定血浆中甲氨蝶呤浓度的反相高效液相色谱法,为临床合理用药提供参考。方法色谱柱采用Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为0.025 mol/L磷酸二氢钠溶液（pH为5.41）-甲醇（76∶24,V/V）,流速1.0 mL/min,检测波长313 nm,柱温35℃,样品经高氯酸沉淀蛋白后直接进样。结果血浆中甲氨蝶呤的质量浓度在0.05～5μg/mL和5～100μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r1=0.999 9,r2=0.999 8,平均回收率分别为98.06%和98.79%,最低定量质量浓度为0.05μg/mL,日内及日间精密度的RSD均小于4%（n=3）。结论所用方法简便快速、准确可靠,灵敏度高,重现性好,线性范围宽,成本低,适于甲氨蝶呤的血药浓度监测。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中盐酸二甲双胍浓度

目的:建立测定人血浆样品中盐酸二甲双胍浓度的定量分析方法.方法:反相高效液相色谱法(RP-HPLC法).色谱柱为Nucleosil 100-5硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.03 mol/L的磷酸二氢铵溶液(pH=7.00)-乙腈(75:25,V/V),检测波长240 nm,柱温30℃,进样量40μL.结果:血浆中盐酸二甲双胍浓度线性范围是25～4 000 ng/mL(r=0.999 9),回收率在94.59%～100.84%之间,日内RSD(n=5)在0.67%～2.35%之间,日间RSD(n=5)在2.77%～4.09%之间,最低检测限是12.5 ng/mL.结论:HPLC法简便、快捷、灵敏、准确,适用于临床药代动力学及药效学的研究.     

RP-HPLC法测定兔血浆中盐酸川芎嗪和阿魏酸

目的建立RP-HPLC法测定兔血浆中盐酸川芎嗪和阿魏酸的方法。方法采用RP-HPLC法,使用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇–0.5%冰乙酸(35∶65),体积流量为1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温30℃,香豆素作内标,采用甲醇沉淀蛋白法处理血浆样品。结果盐酸川芎嗪线性范围为0.072~13.888μg/mL(r=0.999 8),最低检测浓度12 ng/mL,日内、日间精密度试验的RSD值均小于2%;阿魏酸线性范围为0.06~15.36μg/mL(r=0.999 9),最低检测浓度10 ng/mL,日内、日间精密度试验的RSD值均小于3%。结论该分析方法简便、灵敏,可用于同时测定兔血浆中盐酸川芎嗪和阿魏酸。     

高效液相色谱串联质谱法测定人体血浆中阿那曲唑的浓度

目的建立液质联用法来检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。方法血浆样品经MTBE萃取后,选用来曲唑为内标。色谱柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸(60∶40);流速为0.20 mL.min-1;采用ESI+MRM进行离子方式监测;源电压:3.6 kV;源温度:100℃;阿那曲唑和来曲唑的离子选择通道分别为:m/z294.69→225.41,286.25→217.60。结果阿那曲唑的线性范围为0.214~214 ng.mL-1,最低检测浓度为0.214 ng.mL-1,方法回收率在80%~120%,日内、日间RSD均<15%。结论本方法简单、灵敏,可以准确检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。     

健康志愿者氯沙坦钾片的生物等效性研究

目的建立人血浆中氯沙坦及其代谢物氯沙坦羧酸(EXP3174)浓度的测定方法,并评价2种氯沙坦钾片在健康志愿者体内的生物等效性。方法 23例男性健康志愿者随机双周期交叉给药,口服受试制剂和参比制剂50mg,清洗期1周,HPLC-MS/MS法测定血浆中氯沙坦和HPLC-荧光法测定血浆中氯沙坦代谢物EXP3174浓度。所得数据经WinNonlin 6.0软件分析,计算氯沙坦及EXP3174在人体内的药代动力学参数。结果口服受试制剂和参比制剂后,志愿者的氯沙坦和EXP3174主要药代动力学参数如下:氯沙坦Cmax分别为(244.8561±86.9741)ng/mL,(266.8621±115.5986)ng/mL;AUC0-t分别为(451.4±151.8)ng/(h mL)(,459.4±163.7)ng/(h mL);AUC0-∞分别为(469.8±155.1)ng/(h mL)(,477.9±166.2)ng/(h mL);t1/2分别为(1.55±0.32)h,(1.65±0.37)h;Tmax分别为:(1.09±0.62)h,(1.25±0.75)h。EXP3174 Cmax分别为(399.4±100.5)ng/mL,(426.8±132.6)ng/mL;AUC0-t分别为(3231±1064)ng/(h mL),(3152±1058)ng/(h mL);AUC0-∞分别为(3458±1152)ng/(h mL),(3408±1061)ng/(h mL);t1/2分别为(6.86±2.25)h,(5.77±1.47)h;Tmax分别为:(3.48±0.89)h,(3.13±0.69)h。结论氯沙坦钾受试制剂与参比制剂在人体内具有生物等效性。     

HPLC法测定人血浆中瑞格列奈浓度

目的:以往测定人血浆中瑞格列奈多采用LC-MS法和LC-MS/MS法,方法灵敏度高,但是由于试验成本较高无法普及,故研究建立人血浆中瑞格列奈浓度测定的HPLC方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(10mmol/mL,pH4.0)(78:22,V/V);流速1mL/min,检测波长245nm,柱温34℃,进样量20μL。结果:血浆中杂质不干扰样品的测定;瑞格列奈血药浓度在2.0～100ng/mL范围内线性关系良好,定量下限为2.0ng/mL;高、中、低3种浓度的日内、日间RSD均<10%;绝对回收率为83.8%~93.2%,相对回收率92.7%~105.3%。结论:本方法快速、简便、重现性好,可用于瑞格列奈的临床药动学和药效学研究。     

LC-MS/MS快速测定大鼠血浆中HHY-002浓度

目的：建立用于测定治疗慢性心律失常药物HHY-002的大鼠血浆测定法。方法：流动相为乙腈-0．1％甲酸（65：35）,流速0．200mL／min,色谱柱Phenomenex LunaC18柱（150mm×2．00mm,5μm,5micron）,进样量为10μL,柱温35℃,以地西泮为内标。结果：HHY-002在1．98～1013．50ng／mL的范围内呈良好的线性关系（r=0．998）,最低定量限达1．98ng／mL,绝对回收率高于80％,日内和日间误差小于10％,方法回收率大于（81．4±4．5）％,符合生物样品分析要求。结论：建立的LC—MS／MS方法专属性强,灵敏度高,可用于HHY-002的体内定量分析。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量

目的:建立一种同时测定人体血浆中阿魏酸和芍药苷的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,分别以羟甲香豆素和栀子苷为内标,采用正离子方式检测,多反应监测模式扫描,检测离子通道为阿魏酸m/z 195.1→151.2和羟甲香豆素m/z 177.1→161.2、芍药苷m/z 503.1→219.2和栀子苷m/z 411.1→216.1。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.5%冰醋酸-乙腈(82∶18,V/V),流速为0.3 ml/min,柱温为40℃。结果:两种成分均在3 min内完成检测。阿魏酸、芍药苷的质量浓度分别在4.5²50.0、37.5250.0、37.5² 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%2 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%⁹.4%范围内;稳定性RSD<±10%。结论:所建方法分析时间短、专属性好、准确度高,适用于同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量。     

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中吲达帕胺浓度及生物等效性研究

目的:建立一种简单、有效且灵敏的液质联用法(LC-MS/MS)检测人血浆中吲达帕胺浓度。方法:血浆样品经叔丁基甲基醚(tert-ButylMethyl Ether,MTBE)萃取后,选安定作内标。色谱柱为Luna C18柱(150mm×2.0mm,5μm);流动相为10mmol/L甲酸铵(含0.1%甲酸):甲醇=(20∶80,V/V);流速为0.30mL/min;采用ESI+MRM方式监测;源电压:3.5kV;源温度:100℃;吲达帕胺和安定的离子选择通道分别为:m/z 366.2→132.1,285.2→154.1。结果:吲达帕胺线性范围为0.536～45.733ng/mL,最低检测浓度为0.536ng/mL,提取回收率在69%～81%,日内、日间RSD均<15%。由湖南协力药业有限公司生产生产的吲达帕胺缓释片(1.5mg/片)与施维雅(天津)制药有限公司生产的吲达帕胺缓释片(商品名:纳催离,1.5mg/片)经单次及多次给药试验研究,具有生物等效性。结论:本方法简单、灵敏,可准确检测人体血浆中吲达帕胺的浓度。     

HPLC法测定奥沙利铂脂质体中奥沙利铂的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定奥沙利铂脂质体中奥沙利铂含量的方法。方法:色谱柱为Hypersil C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水=5∶95(V/V),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果:奥沙利铂的检测浓度在12.2～122.0μg·mL-1范围内线性关系良好;以峰面积(Y)为对浓度(C)进行回归分析,得回归方程为Y=78 575 C-4 811.8(n=5,r=0.999 9),奥沙利铂的检测浓度在12.2～122.0μg·mL-1范围内线性关系良好;检测限为97.6 ng·mL-1;平均回收率为98.58%,RSD=1.83%。结论:该方法操作简便、灵敏、准确,可用于奥沙利铂脂质体中奥沙利铂的含量测定。     

高效液相色谱-荧光分析法测定血浆中替米沙坦浓度

目的建立高效液相色谱-荧光分析（HPLC—FLD）测定人血浆中替米沙坦质量浓度的方法。方法色谱柱为Agilent HC C18柱（250mm×4．6mm，5μm），柱温30％，流动相为磷酸二氢钾缓冲液（磷酸调节pH值为3．7）-甲醇（29：71），流速1．0mL／min，荧光激发波长为300nm，发射波长为366nm。结果替米沙坦和萘普生（内标）的保留时间分别为5．7min和4．4min；替米沙坦质量浓度范围是2．42．484ng／mL（r=0．9997），最低定量质量浓度为2．42ng／mL。结论该法操作简便、选择性好、灵敏度高，可用于替米沙坦的血药浓度测定和药代动力学研究。