胃癌患者外周血及骨髓微转移检测的临床意义

目的:探讨检测胃癌患者外周血和骨髓CK20 mRNA表达的敏感性、特异性及临床意义.方法:采用RTPCR技术,同时对照检测49例胃癌患者、5例胃良性病变患者及5例健康志愿者骨髓与外周血中的CK20 mRNA表达.结果:49例胃癌患者中,骨髓和外周血CK20阳性表达率分别为49.0%(24/49),32.7%(16/49),二者差异有统计学意义(P＜0.05).其中2例外周血CK20表达阳性,骨髓表达阴性.健康志愿者及良性病变患者外周血及骨髓中未检测到CK20表达.本实验中CK20 mRNA RT-PCR技术的灵敏度为10～-5.胃癌的微转移状况与组织分化程度和肿瘤TNM分期有关.结论:应用RT-PCR法以CK20为标志物检测胃癌微转移细胞特异性高.骨髓检测胃癌微转移较单次采血更敏感,但外周血检测仍能提供一些有价值的资料.     

缺氧诱导因子-1α、VEGF在进展期胃癌中的表达及意义

目的揭示进展期胃癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达规律,分析其与胃癌临床病理特征的关系,以探讨HIF-1α蛋白在胃癌血管形成中的作用.方法应用免疫组化方法检测50例胃癌组织HIF-1α、VEGF蛋白及微血管密度(MVD)的表达.结果胃癌组织HIF-1α蛋白与VEGF阳性表达率分别为68%(34/50)和62%(31/50),MVD平均计数为23.14±11.58;HIF-1α表达与淋巴结转移有关(P＜0.05);VEGF、MVD表达与肿瘤浸润深度(P＜0.05)、淋巴结转移(P＜0.05)和PTNM临床分期(P＜0.05)密切相关;HIF-1α与VEGF表达密切相关(x2=4.96,P＜0.05);HI-1α或VEGF表达阳性的MVD值显著高于阴性组(P＜0.05).结论HIF-1α、VEGF是反映胃癌浸润转移等生物学行为的重要指标,HIF-1α诱导VEGF表达从而促进肿瘤血管生成可能参与胃癌的进展.     

VEGF、p53和MVD在胃癌中的表达及临床意义

目的:检测胃癌组织和血清中VEGF、组织的p53、MVD的表达,并观察其与胃癌生物学行为之间的关系,以及三者的相关性.方法:应用酶联免疫技术(ABC-ELISA方法)检测73例胃癌患者术前血清和20例健康体检者血清中的VEGF表达水平,同时应用免疫组织化学染色方法检测癌组织和癌旁组织中VEGF、P53和CD34的表达.结果:胃癌患者术前血清VEGF表达水平明显高于健康体检者(VEGF:101.8±53.3ng/Lvs 16.1±22.5 ng/L,P＜0.05).胃癌患者术前血清VEGF表达水平随浸润深度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移而增高(P＜0.05),而与年龄、性别及病理类型无关.胃癌组织VEGF的阳性表达率为71.2%,癌旁组织中VEGF 未见阳性表达,P＜0.05;胃癌组织VEGF表达水平与胃癌浸润深度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移有关(P＜0.05),而与年龄、性别及病理类型无关.胃癌患者术前血清VEGF的表达水平与组织VEGF的表达呈正相关(r=0.346,P＜0.01).胃癌组织中p53的阳性表达率明显高于癌旁组织,P＜0.05.p53在胃癌组织中的表达与性别、年龄、病理类型、浸润深度无关(P＞0.05),与淋巴结转移、TNM分期、远处转移有关,P＜0.05.MVD值在胃癌组织中明显高于胃癌癌旁组织,并与性别、年龄、病理类型无关(P＞0.05),与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、无远处转移有关(P＜0.05).胃癌患者术前血清与组织VEGF表达水平分别与p53的表达水平呈正相关(r=0.316,P＜0.01;r=0.290,P＜0.05);胃癌患者术前血清与组织VEGF表达水平分别与MVD的表达水平呈正相关(r=0.434,P＜0.01;r=O.512,P＜0.01);胃癌患者p53与MVD的表达水平呈正相关(r=0.431,P＜0.01).结论:胃癌患者VEGF、p53与MVD胃癌的发生、发展、转移及预后起着重要的作用,有望成为胃癌术前诊断、判断转移危险的新的肿瘤标志物.     

HIF-1α和VEGF在胃癌中的表达及临床意义

背景与目的:低氧是肿瘤中存在的普遍现象,肿瘤的进展与癌组织中缺氧诱导因子1 α(HIF-1 α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达有密切关系,本研究探讨HIF-1 α和VEGF在胃癌浸润、转移过程中的机制及其相互作用.方法:采用免疫组化SP(streptavidin perotridase)法检测85例胃癌组织和85例癌旁正常胃组织(距癌灶5 cm以上)中HIF-1 α和VEGF的表达.结果:(1)癌旁组织中HIF-1 α的表达均为阴性,胃癌组织中的阳性表达率为76.47%(65/85),显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)HIF-1 α在胃癌中表达阳性率与胃癌的临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05),与胃癌细胞分化程度无关(P＞0.05).(3)癌旁组织中VEGF的表达均为阴性,在胃癌组织中的表达阳性率为60.00%(51/85),显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)VEGF在胃癌中表达阳性率与胃癌的临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05),与胃癌细胞分化程度无关(P＞0.05).(5)85例胃癌组织中HIF-1 α蛋白的阳性率为76.47%,VEGF蛋白阳性率为60.00%,其中共同阳性者为45例,HIF-1α阳性而VEGF阴性者为20例,VEGF阳性而HIF-1α阴性者为6例,共同阴性者为14例,经相关性分析发现,两者具有正相关性(r=0.367,P＜0.05).结论:HIF-1 α与VEGF的表达率均随着胃癌浸润深度、淋巴结转移和临床分期的发展而增高,它们共同参与了胃癌的发生、发展,可作为胃癌浸润和转移的重要判定指标.HIF-1 α可能通过上调VEGF的蛋白表达,促进胃癌血管生成而促进胃癌的转移,抑制HIF-1 α的表达可能是治疗胃癌的新手段.     

FAK和VEGF在胃癌中的表达及其相互关系

目的检测粘着斑激酶(FAK)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及其与侵袭和转移的关系,并探讨二者的相关性.方法采用免疫组织化学sABC法,观察86例胃癌及30例非胃癌组织中FAK和VEGF的表达情况.结果FAK和VEGF在胃癌中的阳性率分别为80%和59%.在非胃癌组织中的阳性表达率分别为10%和13%.FAK和VEGF在侵及浆膜层胃癌病例中的表达明显高于未侵及浆膜层者,二者之间有显著差异性(P＜0.05);有淋巴结转移组与无淋巴结转移组比较有明显差异(P＜0.05),FAK与VEGF阳性表达呈正相关(P＜0.01).结论FAK、VEGF在胃癌的侵袭和转移中起重要作用,二者在胃癌中表达升高可以作预测胃癌侵袭和转移的指标.     

乳腺癌骨髓微转移状况与ER PR VEGF 及Cath-D等因子的关系

目的:检测乳腺癌骨髓组织CK19 mRNA的表达,判断骨髓微转移状况,探讨其与各因子的关系.方法:采用RT-PCR法(一步法)检测骨髓组织中CK19 mRNA表达;用免疫组化SP法检测乳腺癌组织中ER、PR、Cath-D、C-erbB-2及VEGF的表达.结果:102例乳腺癌患者骨髓组织CK19 mRNA表达阳性率56.9%.骨髓CK19 mRNA表达随乳腺癌组织中ER及PR蛋白表达增强而降低(P＜0.05,P＜0.01);随Cath-D、VEGF蛋白表达增强而呈增高趋势(P＜0.005,P＜0.05);但与C-erbB-2表达状况无关.结论:乳腺癌骨髓微转移与癌组织中某些生物学因子表达有关;这些因子决定癌细胞的生物学行为.     

乳腺癌患者骨髓微转移与其他预后指标相关性的研究

目的:研究乳腺癌患者骨髓微转移与其他预后指标的相关性.方法:采用RT-PCR法检测了69例乳腺癌患者骨髓中CK19 mRNA的表达,并将骨髓微转移与肿瘤细胞DNA含量、细胞周期分布及增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、HER-2和ER等指标和传统预后指标的相关性进行了研究.结果:RT-PCR技术检测乳腺癌患者骨髓微转移的阳性率为34.8%.骨髓微转移与肿瘤大小、患者年龄、月经状态及激素受体状况等指标无相关性,P0.05.骨髓微转移与腋窝淋巴结状态、HER-2过表达、VEGF水平、S期细胞比值(SPF)以及PCNA有相关性,P<0.05.在淋巴结病理学检查阴性的病例中,有17.6%的病例骨髓微转移检查阳性.结论:乳腺癌患者骨髓微转移与患者的一般临床特点无相关性,但与反映肿瘤细胞增殖、侵袭特性的大部分生物学指标具有相关性.在淋巴结病理学检查阴性的病例中,部分病例骨髓微转移阳性.     

胃癌组织Id-1和VEGF表达及其临床意义的探讨

目的:研究分化抑制因子-1(Id-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理学指标间的关系,探讨其临床病理意义.方法:应用免疫组化SP法检测60例胃癌组织、60例癌旁组织及30例正常胃黏膜中Id-1和VEGF的表达.结果:胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织的Id-1阳性表达率分别为73.3%(44/60)、21.7%(13/60)和6.7%(2/30);VEGF阳性表达率分别为78.3%(47/60)、28.3%(17/60)和13.3%(4/30).在胃癌不同分化程度、TNM分期和有无淋巴结转移,Id-1和VEGF表达有统计学意义,P＜0.05;而与年龄、性别差异无统计学意义,P＞0.05.结论:Id-1和VEGF的表达增多与胃癌的发生发展存在着密切的关系,胃癌组织中Id-1高表达可能是通过VEGF途径来实现对肿瘤血管生成起促进作用.     

PTEN及P53蛋白在胃癌中的异常表达及临床意义

目的:探讨胃癌组织中抑癌基因PTEN及P53蛋白的异常表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测40例胃癌及20例胃炎组织中PTEN及P53的表达.结果:PTEN在胃癌组织中的表达缺失率为58%,明显高于胃炎(5%)中的表达缺失率(P＜0.05),表达缺失率与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05),与分化程度无关(P＞0.05).P53在胃癌组织中的阳性表达率为73%,明显高于胃炎(10%)的阳性表达率( P＜0.05),阳性率与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05),与分化程度无关(P＞0.05).在35例P53表达阳性的胃癌组织中,24例PTEN表达为阴性;在13例P53表达阴性的胃癌组织中,仅3例PTEN表达为阴性(P＜0.05).结论:胃癌组织中P53的表达明显升高,而PTEN的表达明显下降,可能与胃癌的发生发展有关.     

胃癌组织VEGF表达和MVD与临床病理因素相关性分析

目的:观察胃癌组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD),分析两者与胃癌临床病理学指标之间的关系.方法:即用型免疫组化EliVisionTM plus试剂盒检测80例胃癌组织VEGF及Ⅷ因子相关抗原的表达,Ⅷ因子相关抗原用作评估MVD的指标,分析VEGF和MVD与临床病理因素之间的相关性.结果:VEGF主要表达于癌细胞的细胞质中,阳性表达率为71.25％ (57/80),VEGF的阳性表达与胃癌临床分期、TNM分期、是否有淋巴结转移和是否侵及浆膜密切相关,P＜0.05.Ⅷ因子相关抗原表达于肿瘤间质血管内细胞胞质,胃癌组织MVD计数平均值为36.563±3.901.胃癌组织中MVD计数与胃癌是否有淋巴结转移、TNM分期、是否侵及浆膜和肿瘤大小相关,P＜0.05.在57例VEGF阳性表达的胃癌组织中,MVD平均密度(36.83±8.87)高于在23例VEGF阴性表达的胃癌组织中的平均密度(31.08±9.54),差异有统计学意义,P＜0.05.结论:VEGF的表达与胃癌的发生发展有密切关系,共同检测VEGF和MVD在胃癌组织中的表达可以作为判断胃癌患者预后的有效指标.     

早期乳腺癌血清VEGF水平与骨髓微转移的相关性及临床意义

目的 检测早期乳腺癌患者血清中VEGF及骨髓标本中CK19的表达水平,探讨二者的相互关系及临床意义.方法 应用ELISA法分别检测6例乳腺纤维腺瘤及64例乳腺癌患者血清中VEGF的水平,同时抽取相应的骨髓血标本,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测标本中CK-19的表达水平,并进行相关性分析.结果 VEGF在乳腺癌患者血清中的表达水平明显高于乳腺纤维腺瘤患者,二者差异显著(P=0.012);在HER2阳性患者中,血清VEGF水平明显高于HER2阴性患者(P=0.016).CK19在乳腺纤维腺瘤患者骨髓标本中未见表达,在乳腺癌患者骨髓血中,阳性表达24例(37.5%),而骨髓中CK19阳性的乳腺癌患者血清VEGF水平显著高于CK19阴性的患者(110.46±90.65 vs 70.88±77.13,P=0.038),且二者的表达呈正相关.结论 早期乳腺癌患者血清VEGF水平与骨髓微转移密切相关,提示VEGF可能参与了肿瘤细胞的侵袭和播散,可作为早期乳腺癌微转移的血清学指标.     

早期乳腺癌血清VEGF水平与骨髓微转移的相关性及临床意义

目的：检测早期乳腺癌患者血清中VEGF及骨髓标本中CK19的表达水平,探讨二者的相互关系及临床意义。方法：应用ELISA法分别检测6例乳腺纤维腺瘤及64例乳腺癌患者血清中VEGF的水平,同时抽取相应的骨髓血标本,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测标本中CK-19的表达水平,并进行相关性分析。结果：VEGF在乳腺癌患者血清中的表达水平明显高于乳腺纤维腺瘤患者,二者差异显著（P=0.012）;在HER2阳性患者中,血清VEGF水平明显高于HER2阴性患者（P=0.016）。CK19在乳腺纤维腺瘤患者骨髓标本中未见表达,在乳腺癌患者骨髓血中,阳性表达24例（37.5%）,而骨髓中CK19阳性的乳腺癌患者血清VEGF水平显著高于CK19阴性的患者（110.46±90.65 vs 70.88±77.13,P=0.038）,且二者的表达呈正相关。结论：早期乳腺癌患者血清VEGF水平与骨髓微转移密切相关,提示VEGF可能参与了肿瘤细胞的侵袭和播散,可作为早期乳腺癌微转移的血清学指标。     

Clinical significance of micrometastasis in bone marrow of patients with gastric cancer and its relation to angiogenesis

Background. Detection of micrometastasis is an important problem of clinical significance for a better understanding and control of tumor progression, which will improve patients' survival time. Methods. To identify micrometastases in bone marrow, an immunocytochemical assay for epithelial cytokeratin protein was performed in 106 patients with primary gastric cancer. Also, in 40 of the 106 patients, vascular endothelial growth factor (VEGF) expression and intratumoral vessel density were examined by an immunohistochemical staining method. Results. Of the 106 patients, 22 (20.8%) presented with cytokeratin-positive cells in bone marrow at the time of primary surgery. The positive findings were related to depth of invasion, peritoneal dissemination, and liver metastasis. Patients with cytokeratin-positivity in bone marrow had a higher VEGF positive rate (73%; 8/11) than did cytokeratin-negative patients (48%; 14/29). Intratumoral vessel density in VEGF-positive patients was 26.9 ± 10.3, which was significantly higher than that in VEGF-negative patients (13.2 ± 8.7, P < 0.05). Thus, the presence of cytokeratin-positive cells in bone marrow was closely related to angiogenesis in the primary tumor. Conclusions. Cytokeratin staining can be useful for identifying patients at high risk for metastasis. Prophylactic lymph node dissection, adjuvant chemotherapy, and antiangiogenic treatment may be necessary for patients with micrometastasis. Received for publication on Jan. 27, 1999; accepted on Feb. 26, 1999     

胃肠道癌患者外周血和骨髓中微转移检测的意义

目的：探讨胃道肠癌患者外周血和骨髓中微转移的检测及其意义。方法：以CK19作指标，用巢式RT－PCR方法检测75例胃、结肠癌患者术前外周血中癌细胞，同时对其中33例患者骨髓进行检测。结果：75例中，24例（32.0％）外周血中检测出CK19mRNA的表达，其中60例胃癌患者的检出率为30.0%(18/60)，15例结肠癌的检出率为40.0%(6/15)。外周血阳性率随着肿瘤分期的增加而增加。其中33例的骨髓阳性率为48.5%，高于这些患者的血液中阳性率（33.3%)。结论：检测外周血和骨髓中微 转移可提高胃结肠癌患者临床分期的准确性，帮助判断患者的预后。     

乳腺癌患者骨髓GalNAcT mRNA的检测及其临床意义

目的：研究乳腺癌患者骨髓β1，4-N-乙酰半乳糖胺转移酶（GalNAcT）mRNA的表达，探讨其作为乳腺癌骨髓微转移检测指标对临床的应用价值。方法：对40例乳腺癌患者的骨髓及外周血采用巢式RT—PCR方法检测GalNAcT mRNA表达，同时以免疫组化的方法检测骨髓标本中细胞角蛋白（cytokeratin，CK）的表达。结果：40例患者骨髓中GalNAcT mRNA阳性表达17例（42．5％），外周血阳性表达7例（17．5％）；10例血液系统良性疾病患者骨髓和15例健康志愿者外周血中GaINAcT mRNA均为阴性。免疫组化结果显示：40例乳腺癌骨髓中有11例（27．5％）CK阳性，其GalNAcT mRNA都阳性；有6例（15．0％）CK阴性而GalNAcT mRNA阳性。结论：RT—PCR和免疫组化都是检测乳腺癌患者骨髓微转移的可靠的方法，但前者的敏感性高于后者。GalNAcT mRNA可作为一种新的肿瘤标志物来检测乳腺癌患者骨髓微转移。     

胃癌微转移诊断研究进展

胃癌微转移是胃癌复发的关键因素。应用RT PCR等分子生物学方法可有效诊断患者骨髓、淋巴结、腹腔灌洗液和外周血中微转移情况并能评价预后和治疗     

Comparative analysis of micrometastasis to the bone marrow and lymph nodes of node-negative breast cancer patients receiving no adjuvant therapy.

PURPOSE: In node-negative patients, of whom up to 30% will recur within 5 years after diagnosis, markers are still needed that identify patients at high enough risk to warrant further adjuvant treatment. In the present study we analyzed whether a correlation exists between microscopic tumor cell spread to bone marrow and to lymph nodes and attempted to determine which route is clinically more important. PATIENTS AND METHODS: According to a prospective design, bone marrow aspirates and axillary lymph nodes of level I (n = 1,590) from 150 node-negative patients with stage I or II breast cancer were analyzed immunocytochemically with monoclonal anticytokeratin (CK) antibodies. We investigated associations with prognostic factors and the effect of micrometastasis on patients' prognosis. RESULTS: CK-positive cells in bone marrow aspirates were present in 44 (29%) of 150 breast cancer patients, whereas only 13 patients (9%) had such positive findings in lymph nodes; simultaneous microdissemination to bone marrow and lymph nodes was seen in merely two patients. No correlation of bone marrow micrometastases with other risk factors was assessed. Reduced 4-year distant disease-free and overall survival were each associated with a positive bone marrow finding (P =.032 and P =.014, respectively) but not with lymph node micrometastasis. Multivariate analysis revealed an independent prognostic effect of bone marrow micrometastasis on survival, with a hazards ratio of 6.1 (95% confidence interval, 1.2 to 31.3) for cancer-related death (P =.031) in our series. CONCLUSION: Immunocytochemical detection of micrometastatic cells in bone marrow but not in lymph nodes is an independent prognostic risk factor in node-negative breast cancer that may have implications for surgery and stratification into adjuvant therapy trials.     

hMAM mRNA和CK19 mRNA联合检测乳腺癌骨髓微转移

目的：检测乳腺癌患者骨髓中的human mamglobin（hMAM）mRNA和CK19 mRNA表达,探讨乳腺癌患者早期骨髓微转移与临床病理学因素的关系.方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR一步法）法检测骨髓组织中hMAM mRNA和CK19 mRNA的表达.结果：102例乳腺癌患者骨髓hMAM mRNA、CK19 mRNA表达阳性者分别为37.3%和56.9%,均高于良性乳腺疾病患者骨髓组织中的表达（P=0.043,P=0.002）.两者的阳性表达率与肿瘤大小、临床分期和组织学分级呈显著相关,P值分别为0.000、0.001、0.020、0.003、0.031和0.001;与淋巴结转移状况、年龄和月经状况无关,P值分别为0.101、0.255、0.111、0.110、0.492和0.187.结论：乳腺癌微转移与肿瘤大小、临床分期和组织学分级有关,hMAM mRNA和CK19 mRNA均可作为检测乳腺癌骨髓微转移标志,且两者间存在一致性.