氧化修饰LDL对培养人脐静脉内皮细胞DNA合成和胆固醇酯合成的影响

研究氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）对内皮细胞的损伤作用。方法：以胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和胆固醇酯薄层层析法，观察ｏｘＬＤＬ对培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）ＤＮＡ合成和胆固醇酯含量的影响。结果：ｏｘＬＤＬ抑制内皮细胞ＤＮＡ合成，并与浓度及作用时间相关，１００ｍｇ·Ｌ－１的ｏｘＬＤＬ作用２４ｈ的内皮细胞掺入３Ｈ－ＴｄＲ的ｄｐｍ数为不加ＬＤＬ组的４８％（Ｐ＜０．００１），天然ＬＤＬ（ｎＬＤＬ）对ＨＵＶＥＣ掺入３Ｈ－ＴｄＲ也有轻度的抑制作用。ｏｘＬＤＬ降低ＨＵＶＥＣ内胆固醇酯的含量，５０ｍｇ·Ｌ－１ｏｘＬＤＬ孵育的ＨＵＶＥＣ胞内胆固醇酯含量是ｎＬＤＬ组的４２％。扫描电镜发现ｏｘＬＤＬ孵育的ＨＵＶＥＣ形态发生改变，胞间连接减少。结论：ｏｘＬＤＬ对ＨＵＶＥＣ具有细胞毒作用，促发动脉粥样硬化。     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP3及钙调蛋白影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１,４,５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂,采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变,以反映［Ｃａ２＋］ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。结果给予０．１、１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２后５０ｓ胞内钙荧光值分别增加４．７和６．１倍,持续８０～１６０ｓ;以１００ｎｍｏｌ／Ｌｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ预处理细胞,Ｅ２仅使胞内钙荧光值升高１．５倍。加入１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２,ＩＰ３含量在给药后２０～３０ｓ和６０～７０ｓ呈双峰升高。同样剂量的Ｅ２可使ＣａＭ含量增加８５．２％。他莫西芬不能阻断Ｅ２引起的胞内钙荧光值、ＩＰ３及ＣａＭ含量升高的作用,而磷脂酶Ｃ抑制剂使Ｅ２的作用部分或完全抑制。结论Ｅ２作用于胞膜引起胞外钙内流,并通过ＩＰ３导致［Ｃａ２＋］ｉ进一步增加,激活ＣａＭ从而调节细胞功能。     

VIP对体外培养人脐静脉内皮细胞释放ANP,ATⅡ和EDLS的影响

采用放射免疫法（ＲＩＡ）测定了体外原代培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）上清液，证实其中含有一定量的心钠素（ＡＮＰ）、血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）和内源性类洋地黄物质（ＥＤＬＳ），它们从ＨＵＶＥＣ释放到培养上清液中的量受血管活性肠肽（ＶＩＰ）的调节，即ＶＩＰ使培养上清液中具有舒张血管作用的ＡＮＰ含量增加，具有收缩血管作用的ＡＴⅡ和ＥＤＬＳ含量减少。结果说明ＨＵＶＥＣ能释放ＡＮＰ、ＡＴⅡ和ＥＤＬＳ等血管活性物质到胞外，ＶＩＰ具有调节其释放的作用，并对其意义进行了初步探讨。     

氧化高密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性的影响及药物干预

目的：研究氧化高密度脂蛋白（ｏｘＨＤＬ）对人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）活性的影响及丙丁酚、１７－β－雌二醇（Ｅ２）和尼膜地平的干预作用。方法用试剂盒检测ＨＵＶＥＣ培养上清中ＮＯＳ和ＡＣＥ活性。结果ｏｘＨＤＬ对ＨＵＶＥＣ中ＮＯＳ的生成有明显抑制作用,并具有浓度和时间依赖效应。丙丁酚、Ｅ２和尼膜地平可减轻ｏｘＨＤＬ的抑制作用,与ｏｘＨＤＬ组相比,ＮＯ     

17β-雌二醇对脂蛋白诱导内皮细胞产生炎性细胞因子的影响

目的：研究低脂蛋白（ＬＤＬ）和氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）对内皮细胞产生炎性细胞因子白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的影响及１７β－雌二醇对此的作用。方法：经体外培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）为模型。将ＬＤＬ、ｏｘＬＤＬ与ＨＵＶＥＣ孵育,及ＨＵＶＥＣ经他莫昔芬（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）和（或）１７β－雌二醇预处理后,再与ＬＤＬ、ｏｘＬＤＬ孵育,检测培养液中ＩＬ－６和ＴＮＦ活性。     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５￣４００μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ＾２＋］ｉ的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５￣１２４．４）μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ＾２＋］ｉ升高的机制。     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ—２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５～４０μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ２＋］；的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５～１２４．４μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ２＋］１升高的机制。     

RETROGRADE VERSUS ANTEGRADE FLUSH IN CANINE LEFT LUNG PRESERVATION FOR SIX HOURS

ＲＥＴＲＯＧＲＡＤＥＶＥＲＳＵＳＡＮＴＥＧＲＡＤＥＦＬＵＳＨＩＮＣＡＮＩＮＥＬＥＦＴＬＵＮＧＰＲＥＳＥＲＶＡＴＩＯＮＦＯＲＳＩＸＨＯＵＲＳ［ＣｈｅｎＣｈａｎｇｚｈｉ，ＲｅｂｅｒｔＣＧ，ＨｅｒｏｙＢＣＬｅｔａｌ．ＪＨｅａｒｔＬｕｎｇＴｒａｎｓｐｌａｎｔ...     

新生儿窒息时部分生化指标改变的分析

选择新生儿窒息者４１例，与正常新生儿比较，ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＢＵＮ、α－ＨＢＤＨ、ＣＰＫ、ＬＤＨ及ＣＲＥＡ均值均有显著性差异。按窒息时间长短分成三组。对照组与窒息时间小于５分组相比较，ＡＳＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＰＫ、ＬＤＨ及ＣＲＥＡ两组均数间有显著性差异；对照组与窒息时间５－１０分组相比较，ＡＳＴ、ＢＵＮ、α－ＨＢＤＨ、ＣＰＫ、ＬＤＨ及ＣＲＥＡ两组均数间有显著性差异，窒息时间小于５分组与５－１０分组相     

新生儿缺血缺氧性脑病脑脊液谷氨酸和γ氨基丁酸含量与脑损伤的关系

目的探讨谷氨酸（ＧＬＵ）、γ氨基丁酸（ＧＡＢＡ）与脑损伤相关关系。方法测定２０例新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）患儿脑脊液（ＣＳＦ）中（ＧＩＵ）、γ（ＧＡＢＡ）含量及肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性,结合ＣＴ扫描进行分析。结果ＨＩＥ患儿ＣＳＦ中ＧＬＵ及中重度组ＧＡＢＡ含量明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）;ＣＳＦ中ＧＬＵ／ＧＡＢＡ比值病例组高于对照组,且与病情严重程度有关。患儿ＣＳＦ中ＧＬＵ含量增高还与ＬＤＨ、ＣＰＫ活性增高密切相关,（γ分别为０．５９９、０．６１０,Ｐ＜０．０１）,同时还有与血压降低及脑水肿严重程度有关。结论ＣＳＦ中ＧＬＵ含量升高与脑损伤呈平行关系,ＧＩＵ与ＧＡＢＡ平衡失调可能在兴奋毒性激发中起一定作用。     

TRPC通道阻滞剂SKF96365调节人血管内皮细胞内游离钙离子浓度

新生血管形成在肿瘤的形成与转移中起重要作用.通过干扰血管形成来抑制肿瘤已成为临床生物治疗策略\[1-2\],其中血管内皮细胞生长因子(VEGF)单克隆抗体贝伐单抗(bevacizumab,商品名Avastin),已被美国食品药品监督管理局(FDA)批准为大肠癌肝转移的临床治疗一线用药\[3\].在VEGF的胞内信号转导过程中,Ca2 作为第二信使分子,其浓度变化,可以通过下游的信号途径使多种相关酶的活性改变,促进内皮细胞的增殖与分化,调节新生血管形成\[4-5\].为了明确一种新的钙通道蛋白瞬间受体电位通道C亚家族(TRP-canonical, TRPC)是否参与VEGF的调节过程,本研究选用TRPC3、6、7通道的阻滞剂SKF96365观察其对血管内皮细胞内游离钙离子浓度的影响.     

氯化钾除极对分离的豚鼠心室肌细胞胞浆内[Ca^2＋]i的影响

用酶解法分离单个豚鼠心室肌细胞，以荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ标记胸浆内游离钙离子，用激光扫人聚焦显微镜实时测定胞浆内「Ｃａ＾＋」变化。分别观察了在正常台氏液和无钙台氏液中３０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ除极对胞浆内「Ｃａ＾２＋」ｉ的影响。     

新型重组人肿瘤坏死因子对大鼠肝细胞及小鼠肝组织中钙稳度的影响

目的;研究新型重组人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－ＮＣ）对培养大鼠肝细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度（「Ｃａ＾２＋」ｉ）及小鼠肝组织中Ｃａ６２＋含量的影响。方法：以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为Ｃａ＾２＋荧光检测,荧光分光光度法测定培养大鼠肝细胞内「Ｃａ＾２＋」ｉ;原子吸收分光光度法测定小鼠肝组织中Ｃａ＾２＋含量。结果：在加入ｒｈＴＮＦ－ＮＣ ３ｈ后,可剂量依赖性地引起培养大鼠肝细胞内「Ｃａ＾２＋」ｉ显著升高。     

氧化低密度脂蛋白,低氧和5—HT对血管平滑肌细胞5—HT2A受？…

为探讨粥样硬化病变动脉对５－ＨＴ收缩反应增加的机制,观察要样硬化有关因子氧化低密度脂蛋白、低氧、５－ＨＴ对血管平滑肌细胞５－ＨＴ２Ａ受体及其基因表达,以及细胞「Ｃａ＾２＋」ｉ的效应。方法分别将大鼠主动脉平滑肌细胞单独以５０μｇ／ｍｌｏｘＬＤＬ培养８ｈ,２％,低氧处理２４和４８ｈ,１０μｍｏｌ／Ｌ５－ＨＴ处理３０ｍｉｎ,放射配基结合分析测定５－ＨＴ２Ａ受体;ＲＴ－ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测受体     

电针对家兔高血压及心肌细胞游离钙镁浓度的影响

利用AR-CM-COM阳离子测定系统和离子探针Fura-2-AM及Furaptra-A从观察了电针在治疗家兔实验性高血压时心肌细胞内游离钙离子浓度（[Ca2＋]i）和游离镁离子浓度（[Mg2＋]i）的变化情况。静脉滴注去甲肾上腺素（NE）造成家兔实验性高血压,心肌细胞[Ca2＋]。随血压升高而增大,[Mg2＋]i则降低,[Ca2＋]i／[Mg＋]i比值升高;电针两侧“足三里”穴位后治疗组家兔血压明显降低,[Ca2＋]i明显低于高血压组,[Ca2＋]i／[Mg2＋]i比值降低;电针对正常家免心肌细胞[Ca2＋]i和[Mg2＋]i均无明显影响。结果提示心肌细胞内游离Ca2＋、Mg2＋在针刺调整血压的过程中可能发挥一定的作用。     

九节龙皂甙对Hela细胞生长的抑制作用

目的　观察九节龙皂甙 (Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法　九节龙皂甙 6 2 5mg·L-1处理Hela细胞 0～ 72h ,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela细胞凋亡DNA的梯形带 ;应用特异性Ca2 + 荧光探测剂Fluo 3 /AM在LSCM条件下检测不同时期细胞内Ca2 + 分布情况。结果　光镜下体外培养的Hela细胞在九节龙皂甙作用 2 4h开始出现细胞质皱缩和细胞核凝缩等凋亡的形态学特征。 60、72h均检测出DNA梯形带等凋亡的生物化学特征。诱导Hela细胞48、60、72h内Ca2 + 严重超载且维持在较高浓度水平。结论　九节龙皂甙对体外培养的Hela细胞具有明显的抑制作用且诱导Hela细胞凋亡发生 ;细胞凋亡时细胞内 [Ca2 + ]增加且维持在较高水平     

Lipoxin A4 induces apoptosis of renal interstitial fibroblasts via calciumdependent up-regulation of calpain 10 and Smac expressions

INTRODUCTIONR enal interstitial fibrosis is a common pathway ofchronic renal disease and is characterized by in creased numbers of fibroblasts resulting from the prolifer ation of fibroblasts, transformation of tubular epithelialcells into fibroblasts and insufficient rate of apoptosis offibroblasts[1,2]. Apoptosis is one of the important mech anisms of cell clearance under pathophysiological condi tions and a failure in the clearance of renal fibroblastsmay result in fibrob…     

早产儿窒息与红细胞内游离钙关系的临床研究

目的:探讨早产儿窒息与红细胞内游离钙的浓度变化关系。方法:采用Fura-2Am法测定15例早产儿窒息后红细胞游离钙的浓度,并与对照组比较。结果:早产儿窒息后红细胞内游离钙明显提高,与患儿窒息程度相关。结论:临床可早期监测早产儿窒息后红细胞内游离钙浓度,以提高早产儿窒息的诊断准确度,早期干扰,提高窒息后早产儿的生存质量。     

SKF96365和氯化镍对环匹阿尼酸诱导的大鼠PASMC［Ca2＋］i升高的影响

目的：研究SKF96365和氯化镍（NiCl2）对环匹阿尼酸（CPA）诱导的大鼠远端肺动脉平滑肌细胞（PASMC）内游离钙离子浓度（[Ca2＋]i）变化的影响。方法培养大鼠PASMC,运用荧光显微镜和InCyte细胞内钙浓度检测系统观测CPA、SKF96365和NiCl2对PASMC[Ca2＋]i的影响。结果含5μmol／L硝苯地平的无钙Krebs溶液孵育PASMC,10μmol／LCPA使PASMC[Ca2＋]i短暂小幅升高,恢复细胞外Ca2＋至2．5mmol／L后,10μmol／LCPA使PASMC[Ca2＋]i迅速显著升高;50μmol／LSKF96365和500μmol／LNiCl2均能明显抑制10μmol／LCPA引起的PASMC[Ca2＋]i升高,但对高钾（60mmol／LKCl）溶液引起的PASMC[Ca2＋]i升高无影响。结论CPA可致大鼠PASMC[Ca2＋]i升高,且能被SKF96365和NiCl2阻断,提示CPA可能诱发细胞外Ca2＋经钙池操纵性钙通道（SOCC）内流,SKF96365和NiCl2能选择性抑制SOCC活性使经SOCC的Ca2＋内流减少。     

CNTF对AMPA和NMDA引起海马神经元Ca2+浓度升高的作用

①目的探讨睫状神经营养因子(CNTF)对两种谷氨酸(Glu)离子型受体激动剂(α-氨基羧甲基异哑恶唑丙酸,AMPA;N-甲基-D-天冬氨酸,NMDA)激发的海马神经元内游离Ca2+([Ca2+]i)升高的作用.②方法原代培养海马神经元,在有或无CNTF条件下用活细胞内荧光探针Fura-2-AM实时检测AMPA和NMDA引起海马神经元内[Ca2+]i变化的情况.③结果 AMPA和NMDA均可引起细胞内[Ca2+]i升高,并呈量效依赖性;CNTF可快速抑制NMDA引起的海马神经元内[Ca2+]i升高(t=2.97～4.86,P＜0.05),而对AMPA的作用无影响(t=0.22～0.74,P＞0.05).④结论 CNTF可能通过与NMDA型受体相互作用而快速启动Ca2+信号的途径,保护因Glu引起的海马神经元损伤.AMPA型受体可能与CNTF的快速作用无关.