浙江丽水地区β地中海贫血基因突变类型的研究

目的了解浙西南地区β地中海贫血基因突变的类型。方法对经过初筛的患者用反向点杂交法确定基因突变类型。结果在本地区共检出五种基因突变类型，分别为β珠蛋白基因IVS-2nt654（C→T）突变，占40％；CD41-42（-TCT）突变，占36％；CD17（A→T）突变，占16％；TATA hox nt-28（A→G）突变，占4％；CD27-28（＋C）突变，占4％。结论本研究结果对本地区开展β地中海贫血基因分析、婚前指导、遗传咨询和产前诊断具有重要意义。     

浙江丽水地区β地中海贫血基因突变类型的研究

目的了解浙西南地区β地中海贫血基因突变的类型.方法对经过初筛的患者用反向点杂交法确定基因突变类型.结果在本地区共检出五种基因突变类型,分别为β珠蛋白基因IVS-2nt654(C→T)突变,占40%;CD41-42(-TCTT)突变,占36%;CD17(A→T)突变,占16%;TATA box nt-28(A→G)突变,占4%;CD27-28(+C)突变,占4%.结论本研究结果对本地区开展β地中海贫血基因分析、婚前指导、遗传咨询和产前诊断具有重要意义.     

100例β-地中海贫血患者产前基因诊断分析

目的应用基因诊断技术对携带β-地中海贫血基因的夫妇所孕胎儿进行β-地中海贫血产前诊断,避免重型地中海贫血患儿的出生。方法应用聚合酶链技术（PCR）结合反向点杂交技术（RDB）,对羊水样本进行中国人常见的17种β-地中海贫血突变基因的检测。结果在受检的100例羊水样本中,共检出正常基因33例、杂合子49例、纯合子或双重杂合子18例。结论运用RDB-PCR技术对β-地中海贫血进行产前基因诊断,是降低出生缺陷的好办法。     

广西贵港地区β-地中海贫血基因突变类型与分布频率的探讨

目的 了解贵港地区β-地中海贫血的基因型构成情况及其分布,为制定贵港地区β-地中海贫血防治计划,有效降低β-地中海贫血的发病率提供参考.方法 应用双重PCR结合反向斑点杂交技术对贵港地区507例经筛查至少符合HbA2增高、HbF增高或者发现HbE带三项之一的样本进行β-地中海贫血8种常见和9种稀少的突变点进行基因分析.结果 在受检的507例样本中共检出杂合子486例,纯合子11例,双重杂合子10例.检出18种基因组合类型.其中CD41-42、CD17、CD-28、IVS-Ⅱ-654 、CD71-72 、βE是贵港地区最主要的6种β-地中海贫血基因类型,分别占56.02%、20.71%、7.89%、4.14%、2.96%、2.17%.这6种突变点占全部检出突变频率的97.72%.结论 贵港地区β-地中海贫血以中国人发病率高的突变类型为主,发现稀少的突变类型病例.     

重庆地区地中海贫血基因突变类型分析

目的了解重庆地区地中海贫血患者基因突变类型及分布,以指导优生优育。方法采用聚合酶链式反应(PCR)和膜杂交术,进行α-地中海贫血和β-地中海贫血基因检测。结果 2012年9月至2013年9月共检出349例地中海贫血患者,其中α-地中海贫血患者125例,α-地中海贫血患者的基因突变类型以缺失为主,缺失类型主要为东南亚型缺失--SEA/αα(占73.60%)和右侧缺失-3.7/αα(占19.20%)。检出β-地中海贫血患者211例,基因突变热点分别为CD17(A→T)(29.38%)、CD41-42(-TCTT)(28.91%)、IVS-Ⅱ-654(C→T)(27.49%)。α-地中海贫血兼β-地中海贫血13例。结论了解重庆地区地中海贫血基因突变类型及分布可以为该地区地中海贫血的遗传咨询和临床诊疗提供有价值的信息。     

新疆地区16例β-地中海贫血的基因鉴定

本实验应用PCR/ASO技术对新疆地区16例β-地中海贫血症患者进行了基因分析,并将其鉴定为IVS-Ⅱ-654(C→T)基因突变,均为杂合子,其中汉族11例,回族4例,维吾尔族1例。在回族中这种突变类型属首次报道,实验结果对了解这一突变类型在我国的分布特点提供了有意义的资料。     

深圳地区小儿α和β地中海贫血基因类型分析

目的分析深圳地区小儿地中海贫血的基因类型及突变频率,为该疾病基因诊断及遗传咨询提供参考。方法回顾性分析1 206例疑似地中海贫血患儿,采用跨越断裂点PCR(Gap-PCR)检测缺失型α地中海贫血,反向点杂交(RDB)技术检测α和β地中海贫血基因点突变,巢式PCR检测疑似HKαα的样本并用基因测序验证疑似罕见地中海贫血的样本。结果1 206例病例中共检出927例地中海贫血(76.9%),其中489例(40.5%)α地中海贫血,主要以--SEA/αα为主(与75.1%);406例(33.7%)β地中海贫血,主要以IVS-2-654杂合子和CD41-42杂合子为主(分别占35%和32.5%)。检出αβ复合型地中海贫血32例(2.7%)。此外,发现HKαα/ααQS、α-地中海贫血突变基因类型CD61(AAG→TAG)/--SEA、β地中海贫血基因突变类型CD5(CCT→C)各1例。结论深圳地区地中海贫血患儿基因突变类型复杂多样,且存在多例罕见病例。     

百色壮族人群地中海贫血基因突变类型及产前诊断结果临床研究

目的调查分析百色壮族人群地中海贫血的基因携带率、基因突变类型、产前诊断结果等流行病特点,为百色地中海贫血防治措施提供科学依据。方法对2014年3月到2015年9月到我院生殖遗传门诊就诊及百色市12个县、区上送的地中海贫血表型筛查双方阳性的壮族孕妇夫妇4 000例,同时进行α地中海贫血的缺失型与非缺失型及β地中海贫血基因诊断;建议有生育中、重型地中海贫血儿风险的孕妇进行产前诊断。产诊检测结果为中、重型地中海贫血胎儿,进行遗传咨询,提出医学意见,采取干预措施。对所有有生育中、重型地中海贫血儿风险的孕妇进行系统追踪管理,随访至妊娠结局。结果 4 000例孕妇夫妇中确诊为α地中海贫血2 514例,β地中海贫血1 126例,复合型地中海贫血360例,α地中海贫血的发病率为71.85%,β地中海贫血的发病率为37.15%。有生育中、重型地中海贫血儿风险的孕妇961例,占48.05%,进行产前诊断782例,产前诊断率81.37%;本研究共检测出重型地中海贫血胎儿129例,其中产诊检测重型β地中海贫血65例,重型α地中海贫血50例,B超监测发现水肿胎14例。共引产121例,干预率93.8%。结论本地区壮族人群α地中海贫血比β地中海贫血发病率高,胎儿水肿综合征为本地区出生缺陷的首要病种之一。通过结合本地区的实际情况制定大规模人群的地中海贫血筛查、地中海贫血基因诊断、高危地中海贫血儿的产前诊断及重型地中海贫血儿的干预等防治措施,并长期实施,有效地避免重型地中海贫血儿的出生。     

应用反向点杂交检出新疆六种β地中海贫血突变型

应用反向点杂交检出新疆六种β地中海贫血突变型李厚钧，徐湘民，周常文，刘忠英，余伍忠，秦清和β地中海贫血（β地贫）是我国南方常见的遗传性溶血性贫血，大部分系β珠蛋白基因的点突变所致。新疆已有５种见诸文献报道［１］，近来又在乌鲁木齐市检出６种β地贫的基因...     

广东省珠海地区α-和β-地中海贫血基因突变类型研究

目的研究广东省珠海地区地中海贫血的基因突变类型及基因构成比。方法对2008~2010年本院送广州金域医学检验中心基因诊断室的血样检测结果进行分析。结果 2008~2010年本院共送检标本209例,检出地贫表型阳性150例,检出α-地中海贫血基因77例,其最常见的突变类型是--SEA/αα;β-地中海贫血73例,共检出5种β-基因突变类型其最常见的突变类型是CD41-42,其次是IVS-II-654。结论本研究为珠海地区的遗传咨询和制定该地区人群筛查的地贫预防计划提供了有价值的基础资料;由于产前筛查的普及,地贫知识的宣传,地贫基因类型趋向单一化,此次研究检出的β-地贫基因突变类型低于2003年相关文献报道的类型。     

广西壮族人HLA-DQB1等位基因与β地中海贫血的相关性

目的：探讨ＨＬＡ抗原与β地中海贫血（地贫）的相关性。方法：应用聚合酶链反应序列特异引物（ＰＣＲＳＳＰ）方法对６４名随机抽样的，无血缘关系，三代以上均为壮族并三代以上居住在广西，籍贯分布广西各地，均在本实验室经基因诊断证实为β地贫的患者进行ＨＬＡＤＱＢ１基因分型。结果：发现ＨＬＡＤＱＢ１０６０４等位基因在该群体中频率为１２．５％，对照组为１．４％；其相对危险度为９．９，与对照组比较，有非常显著差异（显著性检验χ２＝２０．７８，Ｐ＜０．００５）。结论：提示ＨＬＡＤＱＢ１０６０４等位基因与广西壮族居民β地贫的易感性有关联     

深圳地区12960例地中海贫血筛查受检者的地中海贫血基因型分析

目的 探讨深圳地区地中海贫血基因型特征,及其罕见基因型碱基突变位点.方法 选择2014年5月至2015年10月于广东省深圳市第二人民医院拟行地中海贫血筛查的12 960例受检者为研究对象.研究对象纳入标准:①红细胞平均体积(MCV)＜80 fl的门诊及住院患者;②于本院行产前筛查的孕妇.排除标准:①不愿意参加本试验者;②已被确诊为其他血液系统疾病者.受试者先进行血常规MCV、血红蛋白(Hb)电泳和红细胞脆性检测的地中海贫血筛查试验,对筛查试验阳性(红细胞脆性＜70％)的患者,采用跨越断裂点PCR及反向斑点杂交(RDB)技术进行地中海贫血基因常见缺失型和点突变的基因型检测.对常见基因型检测不能确诊的患者,采用巢式PCR和PCR-直接测序(SBT)技术进行罕见基因型分析.本研究遵循的程序符合深圳市第二人民医院制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象本人的知情同意,与之签署临床研究知情同意书.结果 12 960例受检者中,地中海贫血筛查试验阳性患者为2 194例,通过常见基因型检测,确诊1 019例为地中海贫血,检出率为46.4％.537例α地中海贫血患者中,以东南亚缺失型(--SEA/αα)比例最高,占66.1％(355/537),其次为α地中海贫血2(-α 3.7/αα)占15.6％(84/537),而基因型(αCS α/αCSα、αQS α/αQS α、αWS α/αWSα)和4种HbH病基因型(-α3.7/αQS ααQS、--SEA /αCS αCS、--SEA/αQS αQS、--SEA/αWS αWS)较为少见.α地中海贫血罕见基因型检出率为0.1％(3/2 194),包括2例HKαα/--SEA及1例HKαα/αα.在456例β地中海贫血患者中,β41-42(-TCTT)/β和β654(C＞T) /βA基因型检出率最高,分别为33.8％(154/456)和30.3％(138/456).在26例β复合α地中海贫血患者中,以β复合α地中海贫血1(--SEA/αα)基因型检出率最高(34.6％,9/26).β地中海贫血罕见基因型检出率为0.2％(4/2 194),包括2例β37G＞A),突变点为413 G＞A或405 G＞A,1例β88-93(-AGTG),突变点为557处出现杂合峰,1例β-88(C＞T),突变点为-88 C＞T.结论 深圳地区地中海贫血基因型有独特的分布特征,巢式PCR技术有助于发现HKαα/--SEA及HKαα/αα基因型.采用PCR-SBT技术能鉴定罕见地中海贫血基因型并发现新突变点.本研究结果为在深圳地区开展遗传咨询和产前诊断提供了参考数据.     

广西柳州市常住人口β-地中海贫血的基因型及其分布

目的 了解柳州市常住人口β-地中海贫血基因类型及分布情况.方法 应用聚合酶链反应结合反向点杂交技术(RDB-PCR),对329例经筛查至少符合HbA2增高、HbF增高或Hb电泳分析发现HbE三项之一的样本进行中国人常见的17种地中海贫血突变基因检测.结果 在受检的329例样本中,共检出杂合子310例、纯合子或双重杂合子19例.检出41-42、654、-28、71-72、17、釫、27-28、IVS1-1、43、-29、CD30(A→G)等11种突变类型及22种基因组合类型,以41-42、17、-28、釫、654、71-72杂合突变类型为主,依次占41.03%、30.70%、7.29%、4.86%、4.26%、2.74%.结论 柳州市常住人口β-地中海贫血基因型以中国人发病率高的突变类型为主,发现稀见突变类型病例.突变类型的分布与别的省市小有差异.     

α与β地中海贫血双重杂合子基因诊断

目的：探讨α与β地中海贫血双重杂合子的基因诊断。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和β地中海贫血等位特异寡核苷酸探针／反向点杂交（ＡＳＯ／ＲＤＢ）技术，对在遗传咨询和地中海贫血产前诊断病例中发现的６例疑为α与β地中海贫血双重杂合子个体，分别进行了α地中海贫血基因和β地中海贫血基因分析。结果：该６个病例均属东南亚缺失型α地中海贫血１和β地中海贫血双重杂合子（－－ＳＥＡ／αα，βＴ／βＡ），其中３例为α地中海贫血１和β４１４２（－ＴＣＴＴ），２例为α地中海贫血１和β－２８（Ａ→Ｔ）和１例α地中海贫血１与βＩＶＳⅡ６５４（Ｃ→Ｔ）双重杂合子。结论：α与β地中海贫血双重杂合子的检出对临床准确开展产前诊断有重要意义     

对142例β地中海贫血基因携带者进行缺失型α地中海贫血1基因分析

目的了解广东地区常见的β地中海贫血（地贫）与α地贫１复合存在的发生率。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１４２例经筛查确定为轻型β地贫的成人血样ＤＮＡ进行α地贫１基因检测,阳性者又应用突变引物ＰＣＲ特异扩增或用等位基因特异寡核苷酸探针反向点杂交（ＡＳＯ／ＲＤＢ）技术,确定其β地贫基因突变类型。结果１４２例中有１３例轻型β地贫样本同时合并有α地贫１基因,占总数的９１５％,其β地贫基因的突变类型分别是：ＣＤ４１４２（－ＴＣＴＴ）突变５例,ＩＶＳ２６５４（Ｃ→Ｔ）突变３例,ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）突变２例,ＣＤ７１７２（＋Ａ）、ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）和－２８（Ａ→Ｇ）突变各１例。结论β地贫复合α地贫１的双重杂合子在轻型β地贫个体中的发生率较高,是该地区在地贫的遗传咨询和产前诊断工作中值得重视的一个问题。     

基因突变敏感性分子开关检测β地中海贫血基因突变

目的:采用高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关准确、快速检测β地中海贫血。方法:首先提取正常人血液基因组DNA,根据已知β珠蛋白基因热点突变CD41-42、IVS2-654区域序列,分别设计突变序列扩增引物,利用低保真酶进行引物延伸反应,将其PCR产物克隆到pMD19-T载体,得到β地中海贫血常见的两个突变位点的基因突变克隆:CD41-42、IVS2-654,然后以这两个突变位点为检测靶点,分别设计3′末端与野生型基因位点或突变基因位点配对的引物,硫化磷酸修饰3′末端并偶联高保真DNA聚合酶构成的基因突变敏感性分子开关,对含有相应突变的阳性质粒模板及正常人基因组DNA模板进行引物延伸反应,并通过凝胶成像系统对其进行分析。结果:当引物与模板完全配对时,引物被延伸,有PCR产物;当引物与模板不完全配对时,引物不被延伸,无PCR产物。结论:高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关能准确、快速筛查β地中海贫血CD41-42、IVS2-654突变,提示其在单基因遗传病的诊断中具有广阔的应用前景。     

丝绸之路沿线陕甘新地区β地中海贫血CD17（A→T）的分布特点

目的：探讨β地中海贫血（β地贫）ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）在中国丝绸之路地区的分布特点。方法：应用ＤＮＡ扩增结合等位基因特异的寡核苷酸探针杂交（ＰＣＲ／ＡＳＯ）技术。结果：对该地区的８５例β地贫先证者进行了基因分析,检出２４例ＣＤ１７突变型,其中陕西３例、甘肃２０例、新疆仅１例,以甘肃地区检出率为最高。结论：根据ＣＤ１７在丝绸之路地区的分布特点,结合国内外文献综合分析,推测这种β地贫的突变基因可能起源于甘肃陇西。     

德阳地区地中海贫血基因型分析

目的了解德阳地区地中海贫血(地贫)的基因型检出情况及分布特点。方法对2012年2月至2018年9月该院就诊疑诊为地贫患者2 498例采用聚合酶链反应和反向斑点杂交技术进行地贫基因检测。结果2 498例疑诊患者中检出地贫基因携带者1 537例,检出率为61.53%,共检出41种地贫基因突变类型,其中α地贫756例,占49.19%(756/1 537);前4位α地贫的基因型及构成比分别为--SEA/αα[74.87%(566/756)]、-α3.7/αα[12.70%(96/756)]、--SEA/αα合并-α3.7[3.70%(28/756)]、α4.2/αα[2.65%(20/756)]。β地贫752例,占48.93%(752/1 537)],检出前4位突变基因型及构成比分别是CD41-42[35.37%(266/752)]、IVS-2-654[26.60%(200/752)]、CD17[24.20%(182/752)]、-28[5.98%(45/752)];αβ复合型地贫29例,占1.89%(29/1 537),主要以CD41-42合并--SEA/αα和-α3.7/αα为主。结论德阳地区地贫基因的检出率较高且类型较多,α地贫与β地贫携带率相接近,分布具有区域性特点,可为该地区地贫的诊疗与遗传咨询、产前诊断提供依据。     

轻型β-地中海贫血的β-珠蛋白基因突变检测

目的对深圳地区临床诊断为轻型β-地中海贫血个体的β-珠蛋白基因进行突变分析。方法用PCR法对轻型β-地中海贫血个体的β-珠蛋白基因进行扩增,扩增产物经纯化后测序,确定其基因突变。结果在25例深圳地区轻型β-地中海贫血个体的β-珠蛋白基因所分析的片段中仅发现三种基因突变,它们分别是外显子1上的CD 41/42(-TCTT)突变、启动子中-28(A→G)突变及内含子1上IV S-I-11(A→C)突变。结论在深圳地区轻型β-地中海贫血个体中仅发现两种流行的β-珠蛋白基因突变,同时发现一种新的β-珠蛋白基因突变。